非诺贝特对衰老大鼠肝脏组织肉毒碱棕榈酰转运酶Ⅰ水平的影响

目的:观察非诺贝特对衰老大鼠肝脏组织肉毒碱棕榈酰转运酶Ⅰ水平的影响,从而探讨衰老过程中出现脂质代谢异常的可能机制及非诺贝特对脂质代谢的调节作用。方法:雄性SD年轻大鼠(4～6周龄)16只和老年大鼠(24个月龄)16只,分别随机分为对照组和非诺贝特组(非诺贝特喂养2周),测定大鼠血清中三酰甘油和总胆固醇水平,采用半定量逆转录聚合酶链反应法检测大鼠肝脏组织肉毒碱棕榈酰转运酶Ⅰ水平。结果:年轻对照组比较,老年对照组的三酰甘油和总胆固醇水平升高,大鼠肝脏组织肉毒碱棕榈酰转运酶Ⅰ水平表达降低。非诺贝特组与老年对照组比较三酰甘油和总胆固醇水平均下降,非诺贝特升高不同年龄组大鼠肝脏组织肉毒碱棕榈酰转运酶Ⅰ水平。结论:衰老过程中大鼠肝脏组织肉毒碱棕榈酰转运酶Ⅰ水平表达减少可能与老年脂质代谢异常有关。

葡萄糖、维生素C浸泡对普安银鲫胚胎发育中乙酰辅酶A羧化酶、脂肪酸合成酶及肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅰ活性的影响

为了探究普安银鲫(Carassius auratus gibelio)胚胎发育中乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)和肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅰ(CPTⅠ)活性变化及葡萄糖、维生素C浸泡对它们的影响,设置不同浓度的葡萄糖溶液和维生素C溶液用于普安银鲫的孵化,葡萄糖浓度分别为0、5、10、15和20 g/L,维生素C浓度分别为0、20、25、30和35 mg/L。记录出膜时间及孵化率,筛选适宜葡萄糖和维生素C浓度。采用无添加(对照组)、最适葡萄糖浓度(葡萄糖组)和最适维生素C浓度(维生素C组)的溶液用于孵化,测定胚胎发育中ACC、FAS和CPTⅠ活性变化特点。结果表明:1)葡萄糖浓度为15 g/L,维生素C浓度为30 mg/L时能获得最短出膜时间和最高的孵化率。2)胚胎发育过程中,FAS、ACC和CPTⅠ比活力和全活力均呈上升趋势。3)葡萄糖组在原肠中期、晶体出现期和出膜前期ACC和FAS比活力和全活力均显著高于对照组(P<0.05),CPTⅠ比活力和全活力在晶体出现期和出膜前期显著高于对照组(P<0.05)。4)维生素C组ACC、FAS全活力在出膜前期均显著高于对照组(P<0.05)。结果提示,15 g/L葡萄糖和30 mg/L维生素C溶液浸泡能促进普安银鲫胚胎发育过程中ACC、FAS和CPTⅠ的合成与分泌而形成新的代谢水平,以维持胚胎中脂质代谢的动态平衡。

兔动脉粥样硬化形成过程中血管平滑肌细胞层肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ mRNA表达下调

目的观察高脂饮食复制兔动脉粥样硬化过程中血管平滑肌组织基因表达的变化,以探讨动脉粥样硬化形成是否伴有血管平滑肌细胞能量代谢基因表达的变化。方法36只新西兰大白兔随机分成对照组和高脂组,在饲养的第8、16和第24周用逆转录聚合酶链反应方法检测血管壁平滑肌细胞层肉碱棕榈酰转移酶ⅠmRNA的表达水平。结果高胆固醇饮食诱导兔形成动脉粥样硬化的过程中,16周和24周组同对照组比较肉碱棕榈酰转移酶ⅠmRNA的表达明显减少,24周同16周比较也明显减少。结论兔动脉粥样硬化形成过程中,随时间延长血管平滑肌细胞层肉碱棕榈酰转移酶ⅠmRNA表达下调。

肉毒碱棕榈酰转移酶-Ⅱ异常与脂代谢相关疾病研究进展

位于细胞线粒体内膜肉毒碱棕榈酰转移酶-Ⅱ(carnitine palmitoyl transferase-Ⅱ, CPT-Ⅱ),是脂肪酸氧化过程中起关键作用的限速酶。CPT-Ⅱ活性直接影响肉毒碱运送长链脂肪酸穿过线粒体内膜,进入基质进行β-氧化与能量产生。近来发现肝细胞CPT-Ⅱ活力低下与肝细胞脂肪堆集、非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)及肝细胞的恶性转化密切相关。本文述评了CPT-Ⅱ与NAFLD等脂代谢相关疾病研究的进展。

肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ的研究进展

肉碱棕榈酰转移酶 (CPT Ⅰ )是脂肪酸氧化过程中的一种限速酶 ,催化脂肪酸转运至线粒体基质进行 β氧化。它位于线粒体外膜 ,通过过氧化物酶体增殖物激活受体、丙二酰辅酶A、磷酸化 脱磷酸化依赖的细胞骨架成分在转录水平、翻译及翻译后水平接受调节 ,由于它在能量代谢中起关键作用 ,CPT

健脾化瘀祛痰法对apoA-Ⅰ/AMPK/CPT1A信号通路介导的脂肪酸β氧化改善血脂异常的调控作用及其机制

目的:探讨健脾化瘀祛痰法对高脂血症大鼠血脂异常的影响,基于载脂蛋白AⅠ(apoA-Ⅰ)/单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)/肉毒碱棕榈酰转移酶ⅠA(CPT1A)信号通路阐明其分子机制。方法:32只大鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组(给予1.575 mg·kg^(-1)·d^(-1)辛伐他汀)和化瘀祛痰方(HYQTP)组(给予13.846 mg·kg^(-1)·d^(-1)化瘀祛痰方药物),每组8只。空白对照组大鼠给予正常饮食,模型组、辛伐他汀组和HYQTP组大鼠给予高脂饲料,建立高脂血症大鼠模型。8周后,辛伐他汀组和HYQTP组大鼠灌胃相应药物;空白对照组和模型组大鼠给予等体积生理盐水。全自动生化分析仪检测各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)水平,HE染色观察各组大鼠肝组织病理形态表现,油红O染色观察各组大鼠肝组织脂质沉积情况,检测各组大鼠肝组织中TG水平,ELISA法检测各组大鼠肝组织中apoA-Ⅰ水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠肝组织中apoA-Ⅰ、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-B1)和CPT1A mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肝组织中高密度脂蛋白受体(SR-B1)、AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)和CPT1A蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血清TC、TG和LDL-c水平升高(P<0.05),HDL-c水平降低(P<0.05);肝组织中TG水平升高(P<0.05);肝细胞出现明显肿胀,体积增大;并且可见明显红色脂滴分布;肝组织中apoA-Ⅰ、SR-B1和CPT1A mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),p-AMPK/AMPK比值降低(P<0.05);与模型组比较,辛伐他汀组和HYQTP组大鼠血清TC、TG和LDL-c水平降低(P<0.05),HDL-c水平升高(P<0.05);肝组织中TG水平降低(P<0.05);肝细胞肿胀明显减轻,脂滴分布明显减少,肝组织中apoA-Ⅰ、SR-B1和CPT1A mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),p-AMPK/AMPK比值升高(P<0.05)。结论:健脾化瘀祛痰法能够改善高脂血症大鼠血脂异常,减轻肝脏损伤及脂质沉积,其作用机制可能与调控apoA-1/AMPK/CPT1A信号通路促进大鼠脂肪酸β氧化有关。

鲈鱼CPTⅠ基因cDNA克隆及表达分析

肉毒碱棕榈酰转移酶(carnitine palmitoyltransferases,CPT,EC.2.3.1.2)在脂肪酸的β-氧化中起重要作用。线粒体内膜外侧的脂酰CoA经CPTⅠ催化与肉毒碱结合形成脂酰肉毒碱而得以穿过线粒体内膜,进入线粒体。在线粒体内膜内侧的CPTⅡ催化下,脂酰肉毒碱上的脂酰基又转移到CoA上,重新形成脂酰CoA,成为β-氧化的底物。利用RT-PCR和SMART RACE的方法从鲈鱼(Lateolabrax japonicus)肝脏中克隆了CPT I全长cDNA。该序列全长3007 bp,5'非翻译区166 bp、3'非翻译区477 bp、开放阅读框2364 bp,编码一个由787个氨基酸组成的蛋白质,分子量为89.60 kDa,等电点为8.85。氨基酸序列分析表明,鲈鱼CPT I具有较高的保守性,与金头鲷(Sparus aurata)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、斑马鱼(Danio rerio)、人(Homo sapiens)、小鼠(Mus musculus)等7个物种的同源性为93%～66%,其中与金头鲷同源性最高,为93%。用RT-PCR分析CPT I基因在10个组织中的表达,结果表明在肌、肾中有较高的表达,心、脑、鳃、肝、肠次之,眼、脂肪、脾表达最低。

肉毒碱棕榈酰转移酶1c与肿瘤关系研究进展

肉毒碱棕榈酰转移酶1(Carnitine palmitoyltransferase 1,CPT1)是一种脂肪酸β氧化限速酶。CPT1c作为CPT家族最后被发现的成员,其序列包含必要的酶催化活性结构域,但体外没有显示明显的肉毒碱棕榈酰转移酶的活性。功能研究提示CPT1c影响肿瘤的发生发展,其作用与低氧等代谢胁迫下的调控应答有关。本文主要介绍CPT1c的生物学特性及在肿瘤中的作用,探讨其在肿瘤的诊疗方面的应用前景。

脂肪酸代谢酶在坏死型高脂血症性急性胰腺炎大鼠肝脏组织中的表达及意义

目的:动态观察脂肪酸代谢及转移酶(SCD-1、CPT-Ⅰ和CD36)在坏死型高脂血症性急性胰腺炎(HLP)大鼠肝脏组织中的表达并探讨其意义。方法:采用胰管内注射5%牛磺胆酸钠诱导高脂血症大鼠产生坏死型HLP大鼠模型。制模后第6、12、24h分别处死大鼠,每组6只大鼠。对照组仅建立坏死型急性胰腺炎大鼠模型。测定血清淀粉酶和胰腺组织病理学评分观察大鼠胰腺组织炎症程度。RT-PCR检测肝脏组织SCD-1、CPT-Ⅰ和CD36mRNA表达;免疫组化检测肝脏组织SCD-1蛋白表达。结果:HLP组大鼠血清淀粉酶水平低于对照组;病理学评分示HLP组大鼠急性胰腺炎程度加重。RT-PCR和免疫组化分析示HLP组大鼠肝脏组织中SCD-1mRNA和蛋白表达显著低于对照组;RT-PCR检测示HLP组大鼠肝脏组织中CPT-Ⅰ和CD36mRNA表达略高于对照组。结论:HLP大鼠肝脏脂肪酸代谢及转移酶异常表达,加重了肝脏组织细胞内外的脂质代谢紊乱,是加重坏死型急性胰腺炎胰腺组织损伤的重要机制之一。

断乳后饲料构成对大鼠肝脏CPT-ⅠmRNA表达影响

目的研究断乳后饲料构成对大鼠肝脏肉碱棕榈酰转移酶-I(CPT-I)mRNA表达的影响。方法新生Wistar雄性大鼠24 d断乳,按体重随机分为A、B、C、D 4组,分别喂饲高碳水化合物、高蛋白质、高不饱和脂肪酸和高饱和脂肪酸构成饲料3周后,基础饲料喂养2周,A组按体重随机再分为A1、A2 2组。A1组喂饲基础饲料作为对照组,A2和B、C、D 4组给予高脂饲料喂养6周,A2组作为高碳水化合物组。动态检测大鼠的体重、体脂含量、血糖及肝脏肉碱棕榈酰转移酶-I mRNA水平。结果实验末期,C组大鼠体重、体脂含量和血糖均明显低于A2组(P<0.05);B组大鼠体重和体脂含量明显低于A2组(P<0.05),但血糖水平高于A2组;D组大鼠体重明显低于A2组(P<0.05),但血糖和体脂含量与A2组差异无统计学意义(P>0.05)。动态观察表明,C组大鼠CPT-I mRNA水平持续升高,且在实验末期明显高于其他组。结论断乳后进食高不饱和脂肪酸构成饲料可能通过持续增加CPT-I基因表达,抑制大鼠肥胖形成。

疲劳与束缚应激对大鼠主动脉肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ及5-羟色氨受体的影响

目的 观察疲劳与束缚应激对大鼠主动脉血管内皮功能与肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ（CPT-Ⅰ）、过氧化物酶体增殖物激活受体δ（PPARδ）、5-羟色氨1D（5-HT1D）、5-羟色氨2A（5-HT2A）受体表达的影响.方法 健康雄性Wisar大鼠45只,随机分为对照组、疲劳组和束缚组.观察大鼠一般状况、主动脉内皮细胞形态和结构,检测血中内皮素（ET-1）和一氧化氮（NO）水平,采用实时PCR和Western印迹检测主动脉CPT-Ⅰ、PPARδ和5-HT1D、5-HT2A受体基因和蛋白表达.结果 与对照组比较,疲劳和束缚应激均可导致大鼠主动脉内皮结构损伤,血清ET-1水平升高[（124±18）ng/L比（161±18）ng/L、（154±17）ng/L]（P＜0.01,P＜0.05）,血浆NO水平降低[（63±16）μmol/L比（39±8）μmol/L、（41±7）μmol/L]（P＜0.05）;疲劳应激大鼠主动脉CPT-Ⅰ和PPAR-δmRNA表达下调,分别为[（1.23±0.21）比（0.42±0.05）]、[（1.09±0.10）比（0.25±0.07）]（均P＜0.01）,同时CPT-Ⅰ和PPAR-δm蛋白表达亦下调[（1.32±0.07）比（0.83±0.04）]、[（1.41±0.05）比（0.75±0.06）]（均P＜0.01）;疲劳、束缚应激均可导致主动脉5-HT1D受体mRNA和蛋白表达下调[（1.10±0.15）比（0.46±0.13）、（0.45±0.02）],[（1.19±0.05）比（0.71±0.06）、（0.70±0.05）]（P＜0.01）;同时5-HT2A受体mRNA和蛋白表达上调[（0.99±0.08）比（6.73±0.46）、（7.01±1.56）],[（0.64±0.03）比（0.79±0.05）、（0.82±0.03）]（均P＜0.01）.结论 过度疲劳与情绪抑郁均可损伤血管内皮结构与功能,其中肉碱代谢异常为主的能量变化和5-HT受体调节异常在其中发挥重要作用.

孕鼠补充二十二碳六烯酸对仔鼠肝脏肉碱棕榈酰转移酶-ⅠmRNA表达的影响

目的研究孕鼠补充二十二碳六稀酸(DHA)对仔鼠脂肪代谢及肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)mRNA水平的影响。方法成年SD雌鼠随机分成A、B、C三组,待其妊娠后A组给予基础饲料、B组补充低剂量的DHA(1g/kg bw),C组补充高剂量的DHA(2g/kg bw)。所有雄性仔鼠出生后均由A组母鼠哺乳,断乳后给予基础饲料喂饲至出生后第8周。每组8只,动态观察仔鼠的体重、体脂含量、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)及CPT-ⅠmRNA水平。结果三组仔鼠的出生体重差异无显著性(P>0.05);仔鼠出生后的第8周时,C组的体重显著低于A组(P<0.05),B、C组的体脂含量、TG水平显著低于A组(P<0.05),而C组HDL-C水平显著高于A组(P<0.05),但三组TC水平差异无显著性(P>0.05)。动态观察表明,肝脏CPT-ⅠmRNA水平持续性出现B、C高于A组,C组高于B组。结论孕期补充DHA可能通过持续性上调仔鼠肝脏CPT-Ⅰ基因表达来增强脂肪酸的氧化,降低血脂水平,但孕期摄入过量的DHA可能对子代产生不利影响。

束缚应激对大鼠血脂及肝脏PPARα、L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达的影响

目的观察束缚应激后大鼠血脂和肝脏过氧化酶体增殖物激活型受体(PPARα)、肝型肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(L-CPT-Ⅰ)mRNA和蛋白的变化,初步探讨应激与血脂的关系。方法健康雄性Wistar大鼠,分为正常对照组(C)、束缚1周组(R1)、束缚2周组(R2)和束缚4周组(R4),每组8只。全自动生化仪测定血脂水平,铜显色法测定血清中游离脂肪酸(FFA)水平。分别用RT-PCR和Western Blot方法检测肝脏PPARα及其靶基因L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达水平。结果束缚应激组皮质醇和去甲基肾上腺素水平均明显高于对照组(P<0.01)。R1、R2、R4组大鼠血清FFA分别为(836.33±90.32)、(795.01±62.12)、(829.56±72.64)μmol/L,均明显高于C组〔(620.83±52.21)μmol/L,P<0.01〕。同样,R1、R2、R4组大鼠血清TG和HDL-C均明显高于C组(P<0.05,P<0.01)。与C组相比,R1、R2、R4组大鼠肝脏中PPARα和L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达均增加(P<0.01)。各应激组间这些指标变化差异均无显著性(P>0.05)。结论束缚应激后大鼠血清FFA、TG和HDL-C水平升高,这可能与其肝脏PPARα及L-CPT-Ⅰ表达增加有关。

决明子蒽醌苷对非酒精性脂肪肝病大鼠脂酸β氧化相关酶蛋白表达的影响

目的:探讨决明子蒽醌苷对非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠脂酸β氧化途径关键酶过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶1(peroxidase acyl coenzyme A oxidase 1,ACOX1)和肉毒碱棕榈酰转移酶I(carnitine palmitoyl transferase 1A,CPT1A)表达的影响。方法:将60只SD大鼠适应性喂养10天后,随机分为正常组、模型组、阳性药物(多烯磷脂酰胆碱)组及决明子蒽醌苷低、中、高剂量组,每组10只,高脂高糖饮食8周成功构建NAFLD模型,给予相应治疗8周后处死大鼠,收集大鼠血清和肝脏,检测大鼠血脂、肝功能、肝脏病理学以及肝脏组织中ACOX1和CPT1A的mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠肝功能指标谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、血脂指标甘油三酯(triglyceride,TG)和胆固醇(total cholesterol,TC)均升高(P<0.05);与模型组比较,决明子蒽醌苷3个剂量组和阳性药物组肝功能及血脂指标均降低(P<0.05),高剂量组低于阳性药物组(P<0.05)。HE染色正常组大鼠肝脏细胞大小均一,分布均匀,模型组出现明显的脂肪空泡和炎症反应,决明子蒽醌苷3个剂量组和阳性药物组均可以减少肝脏脂肪浸润。与正常组比较,ACOX1和CPT1A、模型组及决明子蒽醌苷3个剂量组和阳性药物组均降低(P<0.05);与模型组比较,决明子蒽醌苷3个剂量组和阳性药物组ACOX1和CPT1A均升高(P<0.05),高剂量组高于阳性药物组(P<0.05)。结论:决明子蒽醌苷可以通过增加脂酸β氧化途径关键酶ACOX1和CPT1A mRNA以及蛋白表达水平,促进肝脏脂肪颗粒排出,最终改善肝功能。

肉毒碱棕榈酰转移酶1对肿瘤发生与免疫系统调控研究进展

肉毒碱棕榈酰转移酶1 (carnitine palmitoyltransferase 1, CPT1)是存在于线粒体外膜上的脂肪酸β-氧化限速酶,与机体代谢性疾病和肿瘤之间有着密切的联系。研究表明, CPT1多种亚型在癌细胞中异常表达,在肿瘤代谢应激中起着重要调控作用。随着肿瘤免疫治疗的发展,其在免疫细胞及器官中发挥的作用也引起了人们的关注。本文旨在阐述CPT1的生物学功能、不同亚型在肿瘤代谢和免疫调控中的作用及其抑制剂的研究进展,为肿瘤治疗提供新的思路。

不同方式运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪沉积的影响及AMPK-ACC途径在调节脂肪酸氧化中的作用

目的:研究有氧运动、抗阻运动、有氧联合抗阻运动3种不同方式运动对胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌游离脂肪酸(FFA)及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、肉毒碱棕榈酰基转移酶(CPT1)活性水平的影响,为探讨不同方式运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪沉积的效果及AMPK-ACC途径在骨骼肌中调节脂肪酸氧化的作用。方法:高糖高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型之后改为普食饲养,并随机分为高脂改善食对照组(C组)、有氧运动组(E组)、抗阻运动组(R组)、有氧+抗阻联合运动组(RE组),运动干预结束后检测股四头肌FFA、AMPK、ACC、CPT1酶活性水平。结果:(1)13周高糖高脂饮食造模后,与P组相比,造模组C组口服葡萄糖耐量、胰岛素耐量在30 min、60 min、曲线下面积AUC均有极显著性差异(P<0.01),造模组C组大鼠FBG无显著性差异(P>0.05);造模组C组FINS、ISI、HOMA-IR较P组均有极显著性差异(P<0.01)。(2)与C组相比,E组、R组、RE组血清FFA无显著差异(P>0.05);股四头肌FFA均显著降低(P<0.01),但各运动组间无显著差异(P>0.05)。(3)与C组相比,E组、R组、RE组AMPK酶活性均显著升高(P<0.01),RE组AMPK酶活性较E组、R组均显著升高(P<0.01);与C组相比,E组、RE组ACC酶活性有降低趋势,而R组则升高,但均无显著性差异(P>0.05),各运动组之间ACC酶活性也未见差异(P>0.05);各运动组CPT1酶活性较C组均显著升高(P<0.01),RE组CPT1酶活性较E组、R组均显著升高(P<0.01)。结论:(1)13周高糖高脂饮食干预成功造成胰岛素抵抗大鼠模型。(2)8周期不同运动均能显著降低IR大鼠骨骼肌脂肪沉积,其机制可能与运动显著上调IR大鼠骨骼肌AMPK、CPT1酶活性水平,增强脂肪氧化利用,改善胰岛素抵抗有关;联合有氧与抗阻运动较单一运动对脂肪氧化效果更为显著。(3)8周期不同方式运动干预未观察到IR大鼠ACC、CPT1的同步变化。IR大鼠骨骼肌脂肪酸氧化的调节可能独立于AMPK/ACC途径,ACC酶活性的调节对于降低脂肪含量是否重要,尚需进一步研究。

柚皮苷调节NAFLD小鼠脂代谢紊乱机制研究

目的探讨柚皮苷(nar)对高脂饮食(HFD)诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肝组织脂代谢紊乱的影响。方法将24只C57BL/6J小鼠随机分为对照组(n=8)、高脂饮食组(HFD组,n=8)和柚皮苷干预组(HFD/Nar干预组,n=8)。采用转录组测序寻找药物干预差异基因富集通路,采用qPCR和Western Blot法检测肝组织脂代谢相关基因及其蛋白表达。结果与对照组比,模型组小鼠体质量增加了57.8%(P<0.01),而经柚皮苷干预后,小鼠体质量较模型组降低了13.5%(P<0.01);模型组小鼠肝组织TG和TC水平分别为(3.5±0.4)mmol/g protein和(3.1±0.5)mmol/g protein,均显著高于对照组[分别为(1.0±0.3)mmol/g protein和(0.8±0.1)mmol/g protein,P<0.01],而HFD/Nar干预组肝组织TG和TC较模型组显著下降[分别为(2.1±0.4)mmol/g protein和(1.11±0.3)mmol/g protein,P<0.05];转录组测序KEGG富集分析显示柚皮苷对与脂代谢通路相关的9条通路有显著影响,表现为柚皮苷干预可显著下调肝组织固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、过氧化物酶体增殖激活受体(PPAR-γ)、CD36和肝型脂肪酸结合蛋白1(FABP1)表达(P<0.05),而上调PPAR-α和重组肉毒碱棕榈酰转移酶1a(CPT-1A)表达(P<0.05)。结论柚皮苷可明显改善NAFLD小鼠肝内脂质沉积,可能影响了有关基因表达而减少了脂质摄取、合成,加快脂肪酸氧化有关。

理气化痰祛瘀方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织PPAR和CPT-I表达的影响

目的:观察理气化痰祛瘀方对(non-alaholic steatohepatitis)NASH大鼠肝组织PPARα、γ和CPT-I表达影响,探讨理气化痰祛瘀方抗NASH的可能作用机制。方法:采用单纯高脂饮食复制NASH大鼠模型,用不同剂量理气化痰祛瘀方防治,以吡格列酮为对照,观察其对NASH大鼠肝组织中PPARα、γ和CPT-I表达的影响;并同时观察各组大鼠肝组织的病理改变。结果:模型组大鼠出现了严重脂肪变和不同程度炎症细胞浸润、肝细胞坏死、汇管区渗出。理气化痰祛瘀方组大鼠肝组织炎症活动程度较模型大鼠显著降低,肝组织PPARα和CPT-ImRNA的表达明显增强,而PPARγ蛋白和mRNA表达明显下降。结论:理气化痰祛瘀方能明显增强NASH大鼠肝组织PPARα和CPT-I的基因表达,抑制肝组织PPARγ蛋白和基因表达,可能是理气化痰祛瘀方防治NASH的主要作用机制之一。

大强度间歇运动对高脂喂养大鼠代谢表征和骨骼肌脂代谢基因表达的影响

研究目的:探讨大强度间歇运动对高脂诱导大鼠肥胖症的预防作用及骨骼肌脂代谢调控机制,为肥胖症的预防提供理论和实践依据。研究方法:37只雄性SD大鼠分为对照安静组(CS组)、高脂安静组(HS组)、高脂持续运动组(HE组)和高脂间歇运动组(HI组)。HE组和HI组分别进行低强度持续运动和大强度间歇运动训练,每周5天,共10周。定期测量摄食量和体重,采用全自动生化分析技术检测血脂、血糖含量,Elisa试剂盒检测血清胰岛素含量,H&E染色法观察脂肪细胞大小,Real-time PCR技术检测骨骼肌脂代谢调控基因Rev-erbα、SCD1、CPT1和FAT/CD36mRNA相对表达量,Western blot技术检测各调控基因的蛋白表达量。结果:HS组体重、血脂和血糖、脂肪细胞大小显著增加,QUICKI指数下降。HI组体重、血脂、血糖和脂肪细胞大小明显降低,QUICKI指数升高;且效果明显优于低强度持续运动方式。HS组FAT/CD36和SCD1mRNA与蛋白表达量明显高于CS组;HI组Reverbα、FAT/CD36和CPT1mRNA表达量显著高于HS组;HE组与HS组无统计学差异。结论:高脂饮食诱导大鼠代谢表征和骨骼肌脂代谢异常。分子生物学机制分析表明,大强度间歇运动促进脂肪酸跨膜转运、胞内合成和参与β氧化,有效预防高脂饮食诱导的代谢表征异常和骨骼肌脂质代谢紊乱,其效果明显优于低强度持续运动方式。大强度间歇运动刺激Rev-erbα表达上调,增加对脂代谢调节因子的调控,可能是维持骨骼肌脂质稳态适应的新机制。

芦丁通过调控TG代谢途径抑制肝细胞脂肪变性的作用机制研究

目的通过体外建立油酸(Oleic acid,OA)诱导的脂肪变性肝细胞Hep G2模型探索芦丁预防脂肪聚积的分子机制。方法利用乳酸脱氢酶(LDH)释放评价芦丁对Hep G2细胞毒性的影响;用0.5 mmol/L OA诱导人肝细胞株Hep G2建立体外脂肪聚积细胞模型,并通过油红O染色观察和甘油三酯(TG)含量判定细胞模型是否建立成功;分别采用实时荧光定量PCR技术及Western Blot技术在转录水平及翻译水平检测相关蛋白的表达差异。结果芦丁和油酸不会导致Hep G2细胞中LDH激增,但油酸会造成细胞内TG聚积。而芦丁能有效抑制OA诱导的Hep G2细胞中TG的聚积,以及二脂酰甘油酰基转移酶(Diacylgycerola cyltransferase,DGAT)的转录(P<0.05),同时激活过氧化物酶体增殖物激活受体α(Peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPAR-α)的转录(P<0.05)及翻译(且与芦丁浓度计量相关),进而促进其靶基因肉毒碱棕榈酰转移酶(Carnitine palmitoyltransferase,CPT)的转录。结论芦丁能够激活脂肪变性肝细胞Hep G2中PPAR-α的转录和翻译,进而促进其靶基因CPT的转录,加剧了脂肪酸的降解代谢,与此同时对DGAT转录的抑制阻止了TG的合成。该结果进一步阐明了芦丁防治非酒精性脂肪性肝病的作用机制,为芦丁的临床使用提供了理论依据和实验基础。