长链二元酸代谢中肉毒碱脂酰转移酶的作用

肉毒碱脂酰转移酶包括肉毒碱棕榈酰转移酶、肉毒碱乙酰基转移酶和肉毒碱辛酰基转移酶 ,它们对脂肪酸的进一步β 氧化代谢起到了转运的作用。综述近年来对肉毒碱脂酰转移酶族成员酶学特性的研究进展 ,探讨在热带假丝酵母 (Candidatropicalis)

gAd对3T3-L1脂肪细胞肉碱酯酰转移酶-1表达的影响

目的探讨脂联素球状结构域(gAd)对3T3-L1脂肪细胞肉碱酯酰转移酶-1的影响。方法用gAd蛋白干预分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,干预结束后用RT-PCR法检测各组细胞脂肪酸分解途径关键酶肉碱酯酰转移酶-I转录水平的变化,用Western blot法检测各组细胞肉碱酯酰转移酶-1翻译水平的变化。结果与对照组相比,各实验组肉碱酯酰转移酶-1在转录和翻译水平的表达均显著增高(P<0.001),且呈剂量依赖性。结论 gAd蛋白能够激活3T3-L1脂肪细胞内脂肪酸的分解途径,促进脂肪酸氧化。

肉毒碱脂酰转移酶基因沉默对高山被孢霉脂质积累的影响

高山被孢霉是一种工业化生产多不饱和脂肪酸的产油真菌。通过分析高山被孢霉脂肪酸氧化途径中相关基因的转录水平,发现肉毒碱脂酰转移酶(carnitine acyl-transferase,CAT)基因与高山被孢霉脂肪酸氧化紧密相关,进一步利用RNA干扰技术实现在高山被孢霉中CAT基因的沉默,分析发现,在高山被孢霉重组菌中,CAT活性下调了33.3%,总脂肪酸积累量相比野生型菌株提高38.1%,表明通过抑制β氧化途径可以提高高山被孢霉的脂质积累量,这为推动高山被孢霉在脂质生物合成工业化方面的应用奠定了理论基础。

肉毒碱棕榈酰转移酶-Ⅱ异常与脂代谢相关疾病研究进展

位于细胞线粒体内膜肉毒碱棕榈酰转移酶-Ⅱ(carnitine palmitoyl transferase-Ⅱ, CPT-Ⅱ),是脂肪酸氧化过程中起关键作用的限速酶。CPT-Ⅱ活性直接影响肉毒碱运送长链脂肪酸穿过线粒体内膜,进入基质进行β-氧化与能量产生。近来发现肝细胞CPT-Ⅱ活力低下与肝细胞脂肪堆集、非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)及肝细胞的恶性转化密切相关。本文述评了CPT-Ⅱ与NAFLD等脂代谢相关疾病研究的进展。

二脂酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)基因研究进展

二脂酰甘油酰基转移酶2(Acyl CoA:Diacylgycerol Acyltransferase 2,DGAT2)是生物体内的一种非常重要的酶,其主要机制是使二酰甘油加上脂肪酸酰基辅酶A以共价健结合形成三酰甘油。编码该酶的基因有DGAT2和DGAT1。文章综述了DGAT2基因的发现、定位、结构、生物学效应及其遗传多态性与生产性能的关系,并对其应用前景进行了展望。

基于ACOX1-CPT2基因表达变化探讨肉苁蓉苯乙醇苷对高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠肝组织脂质代谢的改善作用

目的:探讨肉苁蓉苯乙醇苷(phenylethanoid glycosides from Cistanche deserticola, PGCD)对高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠肝组织脂质代谢的影响。方法:70只雄性ApoE-/-小鼠随机分为模型组(MOD)、阿伐他汀[20 mg/(kg·d)]+依折麦布[20 mg/(kg·d)]组(A+E)及肉苁蓉苯乙醇苷组[(250、500、1000 mg/(kg·d))](L-PGCD、M-PGCD、H-PGCD),均以高脂饮食(脂肪42%、胆固醇0.15%)饲养,另取14只雄性C57BL/6J小鼠喂食普通饲料作为正常对照组。12周末,检测各组小鼠血浆三酰甘油(TG)含量和谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性。取新鲜肝组织匀浆,ELISA方法检测脂肪酸合成酶(FAS)、长链脂酰辅酶A脱氢酶(LCAD)等脂质代谢相关酶的含量;检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和过氧化脂质(LPO)含量;RT-PCR检测肝组织酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)和肉碱棕榈酰基转移酶2(CPT2)的基因表达。结果:与模型组相比,3个剂量PGCD均明显降低血清和肝脏TG水平,抑制血清ALT、AST的活性,剂量依赖性地减少FAS含量,显著提升LCAD含量和GSH-Px和SOD活性,并降低MDA和LPO含量。RT-PCR实验显示,PGCD显著升高肝组织ACOX1和CPT2 mRNA表达。结论:肉苁蓉苯乙醇苷能够通过调控肝组织ACOX1和CPT2基因表达改善肝组织脂质代谢,降低肝组织的脂质沉积。

GLP-1RAs通过调控LINC01180/miR-30b/CPT1A通路改善脂毒性氧化应激

目的探讨胰高血糖素样肽-1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonists,GLP-1RAs)改善胰岛细胞脂毒性氧化应激,分析其机制是否与调控LINC01180/miR-30b/CPT1A通路表达有关。方法通过基因芯片和生物信息学分析方法预测LINC01180可能调控microRNA及相关蛋白。在体内和体外建模,分为对照组、高脂组、GLP-1RAs组。检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)活性。苏木精-伊红染色及免疫组化Reg3r分析。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测LINC01180、miR-30b和CPT1A表达量。Western blot法检测CPT1A的蛋白表达水平。通过瞬时转染技术分别抑制和过表达LINC01180,RT-qPCR检测转染后miR-30b和CPT1A表达水平。结果生物信息学分析结果表明,LINC01180/miR-30b/CPT1A形成ceRNA调控网络。GLP-1RAs模型中脂毒性氧化应激明显改善,LINC01180表达量下降,miR-30b和CPT1A表达量上升。转染LINC01180表达显著影响miR-30b和CPT1A的表达量。结论GLP-1RAs通过下调LINC01180的表达,上调miR-30b和CPT1A表达,改善脂毒性氧化应激。

乙酰辅酶A酰基转移酶1基因研究进展

乙酰辅酶A酰基转移酶1(ACAA1)基因编码硫解酶家族的酶,属于酰基辅酶A代谢酶超家族中的硫解酶家族。ACAA1分布在过氧化物酶体中,通过催化β-氧化途径的最后一步参与脂肪酸的延伸和降解,是细胞脂代谢过程中一个重要调控基因。本文综述了ACAA1基因的结构、表达、分子机制及其所参与的相关代谢反应。

三子养亲汤对正常高值血压痰湿壅盛证大鼠PPARα/CPT-1通路的影响

目的:基于过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα)/肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1)通路探究三子养亲汤对正常高值血压痰湿壅盛证大鼠脂质代谢的影响。方法:将50只Wistar大鼠随机分成空白组10只及造模组40只,空白组给予维持饲料,造模组采用高脂饲料饲养+高盐(6%盐水)灌胃方式制备正常高值血压痰湿壅盛证大鼠模型,造模8周,模型构建成功后将40只大鼠随机分为模型组及三子养亲汤低、中、高剂量组,每组各10只。其后,空白组给予生理盐水灌胃,造模组继续给予高脂饲料加6%盐水灌胃,同时三子养亲汤各组给予相应浓度水煎液灌胃。灌胃8周后,检测各组大鼠体质量、血压、血脂四项及肝脏生化指标,观察肝脏病理形态及脂质沉积情况,检测大鼠肝脏中PPARα、CPT-1、酰基辅酶A氧化酶(ACOX1)基因和蛋白的表达。结果:与模型组比较,三子养亲汤高剂量组体质量、血压及血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶均显著下降(P<0.05或P<0.01)。空白组大鼠肝细胞排列整齐,细胞核形态完整,无红色脂质沉积;模型组大鼠肝细胞排列不整齐,出现细胞核消失的现象,肝细胞内出现部分脂质沉积;三子养亲汤高剂量组肝细胞排列规则、细胞核完整,有较少红色脂质沉积;三子养亲汤中、低剂量组细胞核较完整,肝细胞排列较整齐,有少量红色脂质沉积。与模型组比较,三子养亲汤高剂量组PPARα、CPT-1、ACOX1蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),中剂量组ACOX1蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,三子养亲汤高剂量组PPARα、CPT-1、ACOX1mRNA水平升高(P<0.05或P<0.01),三子养亲汤低、中剂量组ACOX1mRNA水平升高(P<0.01)。结论:三子养亲汤可改善正常高值血压痰湿壅盛证大鼠体质量、血压、血脂及肝脏生化指标等。其机制可能与三子养亲汤调控PPARα/CPT-1信号通路,促进脂肪酸氧化分解,进而调控肝脏脂质代谢相关。

铜死亡相关基因LIPT1对中国肝癌分期Ⅰa期肝细胞癌术后复发的预测价值

目的探讨铜死亡相关基因脂酰转移酶1(lipoyltransferase 1,LIPT1)在中国肝癌分期Ⅰa期肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其意义,并构建LIPT1相关列线图预测Ⅰa期HCC患者术后复发风险。方法收集在河北医科大学第四医院接受根治性手术的Ⅰa期HCC患者(139例)的临床资料,采用免疫组织化学检测肿瘤组织中LIPT1的表达状态。使用Kaplan-Meier法进行生存分析,Cox比例风险模型评估无病生存时间(disease-free survival,DFS)的影响因素。基于多因素Cox回归分析结果建立Ⅰa期HCC患者无病生存率预测模型,并通过校准曲线和时间依赖曲线下面积对模型进行验证。结果139例Ⅰa期HCC患者1年、3年和5年的疾病无进展生存率分别为76.3%、56.1%和46.5%。LIPT1高表达患者89例,LIPT1低表达患者50例。多因素Cox回归分析显示,LIPT1表达量(HR=1.093,95%CI:1.001~1.193)和糖尿病病史(HR=2.172,95%CI:1.126~4.191)是影响Ⅰa期HCC患者DFS的独立危险因素。基于这些指标构建的DFS预测模型显示出良好的一致性。列线图在训练集中1年、3年和5年的时间依赖曲线下面积分别为0.785、0.780和0.766,在验证集中为0.712、0.794和0.716,均高于肿瘤直径。结论LIPT1可以作为预测Ⅰa期HCC患者术后复发时间的有效标志物。相比于传统指标肿瘤直径,所建立的列线图在预测Ⅰa期HCC患者DFS方面具有更高的效能,为早期肝癌术后监测和个体化治疗提供了新的方向。

人参皂苷Rg1通过调节脂肪代谢改善非酒精性脂肪肝病大鼠的肝功能

目的:研究人参皂苷Rg1对高脂饮食(HFD)诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠肝脏β-氧化的作用。方法:60只SD大鼠随机分为对照组(CON)、HFD组、人参皂苷Rg1低、中、高剂量干预组(LDG、MDG及HDG)及阳性药物熊去氧胆酸钠治疗组(PDT)。HFD 8周后成功复制NAFLD模型,之后用相应药物治疗,治疗4周和8周后分别处死大鼠各半,收集肝脏做切片HE染色,同时检测其肝功能和血脂指标,RT-PCR及Western blotting测定肝脏脂酰Co A合成酶1(Co ASH1)、肉毒碱脂酰转移酶I(CATI)及脂酰Co A氧化酶1(ACOX1)mRNA和蛋白的表达。结果:治疗4周后,肝脏HE染色除HDG组有改善外,PDT组、LDG组及MDG组的脂肪肝浸润现象没有改善;治疗8周后,PDT组与LDG组仍有少量脂肪颗粒聚集,而MDG组和HDG组则看不到脂滴浸润现象;治疗4周后,PDT组、LDG组、MDG组及HDG组与HFD组相比,肝功能指标AST、ALT、AKP以及血脂指标TC、TG、LDLC明显降低(P<0.05),治疗8周后进一步降低;治疗4周后,4个治疗组HDL-C均明显升高,8周后几乎恢复到CON组的水平;治疗4周后4个治疗组肝脏组织的Co ASH1、CACTI及ACOX1表达均有显著升高(P<0.05),治疗8周后改善更为明显,同时MDG组与HDG组表达要高于PDT组(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1可通过调节大鼠β-氧化相关的酶改善脂肪代谢对NAFLD大鼠的肝损伤,从而发挥治疗作用。

银杏内酯B对胆固醇和载脂蛋白E4损伤海马神经元胆固醇代谢的影响

目的探讨银杏内酯B对高胆固醇和载脂蛋白E4(ApoE4)损伤海马神经元胆固醇代谢的影响。方法应用40μg/ml胆固醇和30μg/mlApoE4联合处理海马神经元,模拟高胆固醇细胞损伤模型。银杏内酯B对此模型进行干预后,经实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别测定低密度脂蛋白受体蛋白(LRP)1mRNA、三磷酸腺苷结合盒转子A(ABCA)mRNA和内质网乙酰胆固醇酰基转移酶(ACAT)mRNA的表达,采用蛋白印迹法分别检测LRP1、ABCA1和ACAT1蛋白的表达。结果模型组上调LRP1mRNA表达,对ABCA1和ACAT1mRNA的表达有上调趋势,但是与对照组相比无显著差异。银杏内酯B可以有效上调ACAT1mRNA的表达,与模型组相比差异显著。上述因子蛋白的表达与mRNA表达趋势相一致,而且模型组与各组相比均有显著差异。结论胆固醇和ApoE4联合作用影响神经元胆固醇的摄入、细胞内胆固醇转化和胆固醇的排出。银杏内酯B对高胆固醇环境下神经元胆固醇代谢有一定的调节作用。

藏猪和杜洛克猪SCD、CPT1B基因表达差异及其与IMF含量相关性分析

为了揭示脂肪型的藏猪和瘦肉型的杜洛克猪肌内脂肪(IMF)沉积相关基因的表达差异,试验采用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测了两猪种背最长肌中硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)基因、肉碱脂酰转移酶Ⅰ(CPT1B)基因在180日龄的表达差异,分析其表达与IMF含量的相关性。结果表明:180日龄藏猪SCD mRNA表达量极显著高于杜洛克猪(P<0.01),而藏猪CPT1B mRNA表达量显著高于杜洛克猪(P<0.05)。相关性分析结果显示,SCD、CPT1B mRNA表达量均与IMF含量呈正相关。

人参皂苷Rg1对非酒精性脂肪肝病大鼠脂肪酸β-氧化的改善作用研究

目的研究人参皂苷Rg1对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠β-氧化的作用。方法将120只SD大鼠分为对照组(CON组)、模型组(HFD组)及人参皂苷Rg1低、中、高剂量组(GLD、GMD、GHD组)和熊去氧胆酸钠治疗组(PDT组),每组20只,分别于治疗4、8周后处死大鼠各半,肝脏切片HE染色,检测肝功能、血脂、肝脏脂酰CoA合成酶1(CoASH1)、脂酰肉毒碱转移酶I(CATI)及酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)mRNA和蛋白表达。结果治疗4周后,肝脏HE染色GHD组有改善,PDT、GLD、GHD组未见改善;8周后,PDT组与GLD组仍有少量脂肪颗粒聚集,GMD组和GHD组看不到任何脂滴浸润;治疗4周后,PDT、GLD、GMD、GHD组与HFD组相比,天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显降低(P<0.05),8周后进一步降低;治疗4周后,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)4个组均升高,8周后几乎恢复到对照组的水平;治疗4周后肝脏组织CoASH1、CACTI及ACOX1表达4个组均显著升高(P<0.05),治疗8周后改善更为明显。结论人参皂苷Rg1可通过调节大鼠β-氧化来改善脂代谢及肝功能。

干扰肥胖小鼠心肌组织中CPT1b的表达对活性氧簇代谢的影响

目的 研究干扰肥胖小鼠心肌CPT1b的表达对心肌活性氧簇（ROS）的影响.方法 4周龄的雄性C57小鼠,随机分为三组,分别为正常对照组（N-mock）、肥胖对照组（O-mock）及肥胖干预组（O-CPT1b）,对肥胖组小鼠进行高脂饮食造肥胖模型.6周龄时,向干预组小鼠心肌注射靶向CPT1b（O-CPT1b）或靶向无关基因（N-mock、O-mock）的重组慢病毒.继续喂养10周后,取小鼠心肌,Western blot检测CPT1b的蛋白表达量;行油红O染色检测心肌组织中性脂质含量;使用冷冻切片染色法及流式细胞术检测心肌细胞中ROS.结果 RT-PCR和Western blot结果显示,携带CPT1b基因的短发夹RNA显著下调了O-CPT1b小鼠心肌组织中CPT1b的表达;肥胖引起心肌组织内中性脂质蓄积增多,下调CPT1b的表达增加了心肌内中性脂质的含量;高脂饮食还导致心肌ROS的含量显著增加,而下调CPT1b的表达可以改善甚至逆转这一进程.结论 CPT1b在肥胖小鼠心肌的ROS生成增多中起重要作用,下调小鼠心肌组织的CPT1b表达或许会通过减轻心肌氧化应激而改善肥胖性心脏重构.

非诺贝特对肝脏和肌肉肉毒碱脂酰转移酶1基因表达及胰岛素敏感性的影响

目的探讨非诺贝特对肝脏、肌肉肉毒碱脂酰转移酶1表达及胰岛素敏感性的影响。方法将8周龄雄性sD大鼠分为3组：正常饲养组（NC，10只）、高脂饲养组（HF，10只）、高脂饲养＋非诺贝特组（FF，12只）。FF组在高脂饲养的基础上给予非诺贝特50mg·kg^-1·d^-1剂量进行灌胃。饲养20周时测定血清、肝脏及肌肉组织中甘油三酯（TG）含量，3组均行正常血糖高胰岛素钳夹试验，并用实时聚合酶链反应方法分析肝脏和肌肉组织中肉毒碱脂酰转移酶1（CPT-1）mRNA表达的变化。结果高脂饲养20周时，与NC组比较，HF组血清TG增加45．0％（P〈0．01），肝脏和肌肉TG含量增加2．14倍和10．64倍（P〈0．01）；正常血糖高胰岛素钳夹试验表明，HF组葡萄糖的输注率（GIR）下降61％（P〈0．01），存在明显的胰岛素抵抗；肝脏CPT-1mRNA表达无明显变化（P〉0．05）、肌肉组织CPT-1mRNA表达减少71％（P〈0．01）。非诺贝特干预后血TG、肝脏TG、肌肉TG较HF组分别下降70％、81％及82％，GIR增加2．52倍，肝脏、肌肉CPT-1mRNA表达较高脂组分别增加1倍、1．05倍。结论非诺贝特通过上调肝脏、肌肉CPT-1mRNA表达促进脂肪酸氧化，在改善高脂饲养SO大鼠胰岛素敏感性中起重要作用。

葱白提取物对非酒精性脂肪肝模型大鼠ACCase和CPT-1表达的影响

目的:探讨葱白提取物治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)可能的作用机制。方法:60只大鼠分为正常组、模型组、低剂量葱白组、中剂量葱白组、高剂量葱白组、易善复组,每组10只。采用高脂饮食造模,造模10周后经组织病理学鉴定模型制备成功后给予不同剂量药物干预4周。光镜下观察肝组织HE染色组织结构;检测血浆黏度、全血黏度及血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平及肝组织游离脂肪酸(FFA)的含量;Realtime PCR检测大鼠肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1)mRNA的表达情况。结果:模型组大鼠肝脏出现明显脂肪变性,舌像评分、肝指数、血浆黏度和全血黏度以及血清AST、ALT、TC、TG水平明显升高(P<0.05),ACCase mRNA表达升高(P<0.05),CPT-1 mRNA的表达下降(P<0.05);低、中、高剂量葱白组及易善复组肝脂肪变性减轻,舌像评分、肝指数、血浆黏度和全血黏度以及血清AST、ALT、TC、TG水平降低(P<0.05),以高剂量葱白组和易善复组下降明显,高剂量葱白组和易善复组差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:葱白提取物治疗NAFLD有效,其机制与促进CPT-1表达及降低ACCase表达有关。

脂肪酸代谢酶在坏死型高脂血症性急性胰腺炎大鼠肝脏组织中的表达及意义

目的:动态观察脂肪酸代谢及转移酶(SCD-1、CPT-Ⅰ和CD36)在坏死型高脂血症性急性胰腺炎(HLP)大鼠肝脏组织中的表达并探讨其意义。方法:采用胰管内注射5%牛磺胆酸钠诱导高脂血症大鼠产生坏死型HLP大鼠模型。制模后第6、12、24h分别处死大鼠,每组6只大鼠。对照组仅建立坏死型急性胰腺炎大鼠模型。测定血清淀粉酶和胰腺组织病理学评分观察大鼠胰腺组织炎症程度。RT-PCR检测肝脏组织SCD-1、CPT-Ⅰ和CD36mRNA表达;免疫组化检测肝脏组织SCD-1蛋白表达。结果:HLP组大鼠血清淀粉酶水平低于对照组;病理学评分示HLP组大鼠急性胰腺炎程度加重。RT-PCR和免疫组化分析示HLP组大鼠肝脏组织中SCD-1mRNA和蛋白表达显著低于对照组;RT-PCR检测示HLP组大鼠肝脏组织中CPT-Ⅰ和CD36mRNA表达略高于对照组。结论:HLP大鼠肝脏脂肪酸代谢及转移酶异常表达,加重了肝脏组织细胞内外的脂质代谢紊乱,是加重坏死型急性胰腺炎胰腺组织损伤的重要机制之一。

IL-1通过PKC/MAPK激活蛋白激酶通路上调泡沫细胞ACAT-1的表达及活性

目的研究白细胞介素1(IL-1)是否通过蛋白激酶C/丝裂原激活蛋白激酶(PKC/MAPK)信号通路上调泡沫细胞中脂酰CoA胆固醇酯酰转移酶-1(ACAT-1)的表达及活性。方法复苏并培养人单核细胞白血病细胞系/THP-1细胞,与200 nmol/L乙酸肉豆蔻佛波酯(PMA)共孵育48 h,再与氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)共孵育24 h,油红O染色观察胞质内脂质沉积;分别以非放射性酶法和Western blot检测细胞中PKC和MAPK活性;加入PKC和MAPK抑制剂后,以Western blot及液相闪烁计数法检测ACAT-1的蛋白表达及酶活性。结果与PMA共孵育48 h后,THP-1细胞逐渐伸出突起,由圆形、悬浮式生长转变为多角形、梭形,呈阿米巴样贴壁生长;经Ox-LDL诱导24 h后,油红O染色胞质内可见大量吞噬的脂质小滴。与泡沫细胞组相比,泡沫细胞加IL-1组PKC活性、MAPK活性、ACAT-1蛋白表达及活性增加(P<0.05);ACAT-1蛋白表达由4.92±0.11增至5.95±0.12(P<0.05);PKC抑制剂和MAPK抑制剂能显著抑制IL-1上调ACAT-1表达(P<0.05)及活性(P<0.05)的作用。结论 IL-1上调泡沫细胞ACAT-1表达及活性,其作用是通过PKC/MAPK信号通路途径实现的。

腺苷酸激活蛋白激酶磷酸化障碍导致烧伤后骨骼肌脂质沉积的实验研究

目的探讨影响腺苷酸激活蛋白激酶(AMP activated protein kinase,AMPK)/乙酰辅酶a羧化酶(acetyl Co A carboxylase,ACC)信号通路导致烧伤后骨骼肌脂质沉积(intramyocellular lipids,IMCLs)的分子机制。方法采用30%体表面积Ⅲ度烧伤小鼠模型,将54只BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组、AMPK激活剂(acadesine,AICAR)组、烧伤组、烧伤+AICAR组,同位素标记法检测各组小鼠腓肠肌中肉碱脂酰转移酶-1(carnitine palmitoyl transferase-1,CPT1)活性变化,Western blot检测各组小鼠腓肠肌中AMPK-α、p-AMPK-α、ACC及p-ACC表达水平,通过油红O染色和甘油三酯(triglyceride,TG)测定法评估各组小鼠腓肠肌IMCLs情况。结果烧伤后小鼠腓肠肌中ACC表达量较伤前显著升高(P<0.05),而AMPK-α、p-AMPK-α、p-ACC以及CPT1活性均显著降低(P<0.05)。在AICAR作用下,正常小鼠腓肠肌中p-AMPK-α表达显著升高[(1.16±0.08)vs(2.38±0.22),P<0.05],p-ACC表达显著升高[(1.74±0.10)vs(3.72±0.18),P<0.05],CPT1活性显著升高[(2.95±0.39)nmol/(min·mg)vs(6.35±0.68)nmol/(min·mg),P<0.05],TG含量显著降低[(3.88±0.40)mmol/g vs(2.89±0.54)mmol/g,P<0.05]。烧伤+AICAR组小鼠腓肠肌中p-AMPK-α、p-ACC、CPT1活性及甘油三酯含量较烧伤组无显著差异(P>0.05)。正常对照组和AICAR组正常小鼠腓肠肌组织切片油红O染色未见明显脂质沉积,而烧伤组和烧伤+AICAR组烧伤小鼠腓肠肌组织切片油红O染色均显示有大量脂质沉积,两组间并无显著差异(P>0.05)。结论骨骼肌中AMPK磷酸化障碍是烧伤后IMCLs的重要分子机制之一。