多层螺旋CT联合波形蛋白在腹部去分化脂肪肉瘤中的诊断价值

目的 探讨多层螺旋CT联合波形蛋白(vimentin)在腹部去分化脂肪肉瘤(DDL)中的诊断价值。方法 选取联勤保障部队第九○四医院2017年6月至2022年6月收治的88例疑似DDL患者作为研究对象,均接受多层螺旋CT技术检查,并检测vimentin的表达水平,以病理诊断为金标准,比较多层螺旋CT检查结果与病理诊断的一致性,比较DDL患者与非DDL患者vimentin表达情况,分析多层螺旋CT联合vimentin在去分化脂肪肉瘤中的诊断价值。结果 病理诊断结果显示,88例疑似DDL患者中,共有64例确诊为DDL患者,其余24例均为非DDL患者;多层螺旋CT检查诊断出63例DDL患者,其中,59例DDL与病理诊断一致,20例非DDL与病理诊断一致,经Kappa一致性检验,Kappa=0.746,P<0.01,2种诊断方法的一致性一般。病理诊断为DDL的64例患者中,有59例vimentin表达结果为阳性,5例为阴性;非DDL的24例患者中,6例vimentin表达结果为阳性,18例为阴性。经Kappa一致性检验,Kappa=0.681,P<0.01,2种诊断方法的一致性一般;多层螺旋CT联合vimentin表达检测诊断出63例DDL患者,其中61例DDL与病理诊断一致,22例非DDL与病理诊断一致,经Kappa一致性检验,Kappa=0.866,P<0.01,2种诊断方法的一致性较好;多层螺旋CT、vimentin表达检测及联合诊断的敏感度分别为92.18%,92.18%和95.31%,特异度分别为83.34%,75.00%和91.67%,约登指数分别为0.755,0.671和0.870,联合诊断的价值更高。结论 多层螺旋CT联合vimentin表达检测诊断与病理诊断结果比较一致,可在临床上推广使用。

TARDNA结合蛋白-43和肉瘤融合／脂肪肉瘤转运蛋白与两种神经系统变性疾病关系的研究进展

神经系统变性疾病是一类由神经元变性和继发性脱髓鞘引起的慢性病,近来研究显示TAR DNA结合蛋白-43(TDP-43)和肉瘤融合/脂肪肉瘤转运蛋白(FUS/TLS)与肌萎缩侧索硬化(ALS)和额颞叶痴呆(FTD)有关。与TDP-43和FUS/TLS相关的基因突变可导致其蛋白表达异常,进而引起细胞骨架蛋白降解和RNA代谢障碍。TDP-43和FUS/TLS相关ALS与FTD的病理学表现也具有相似的形式。虽然TDP-43与FUS/TLS之间的相互作用尚不清楚,但可以推测与二者相关的神经系统变性疾病可能具有相同的发病机制。

人骨髓间充质干细胞通过YAP影响人脂肪肉瘤SW872细胞的生物学行为

目的:观察人骨髓间充质干细胞(hMSCs)条件培养基(CM)与人脂肪肉瘤SW872细胞共培养后对肿瘤细胞增殖和迁移能力的影响,探讨hMSCs CM对脂肪肉瘤细胞的作用及可能的作用机制。方法:体外培养hMSCs,采用慢病毒方法分别转染慢病毒空载体shNS(对照组)和慢病毒shRNA Yes相关蛋白(YAP)(shYAP-hMSCs组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组hMSCs中YAP mRNA和蛋白表达水平,提取CM。体外培养SW872细胞,分为对照组(正常培养)、hMSCs CM组和shYAP-hMSCs CM组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,Western blotting法检测各组细胞中YAP、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,shYAP-hMSCs组hMSCs中YAP mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01),表明成功构建了shYAP-hMSCs稳定转染细胞株。CCK-8法,与对照组比较,hMSCs CM组SW872细胞增殖活性升高(P<0.05),shYAP-hMSCs CM组SW872细胞增殖活性降低(P<0.01);流式细胞术,与对照组比较,hMSCs CM组SW872细胞凋亡率无明显变化(P>0.05),shYAP-hMSCs CM组SW872细胞凋亡率升高(P<0.01);细胞划痕实验,与对照组比较,hMSCs CM组SW872细胞划痕愈合率升高(P<0.05),shYAP-hMSCs CM组SW872细胞划痕愈合率降低(P<0.01);Western blotting法,与对照组比较,hMSCs CM组SW872细胞中YAP、MMP-9和cyclin D1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),shYAP-hMSCs组SW872细胞中YAP、MMP-9和cyclin D1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:hMSCs参与调控人脂肪肉瘤SW872细胞增殖和迁移,其机制可能与YAP表达有关。

环状RNA circ_0036167与融合肉瘤蛋白结合发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用

[目的]研究环状RNA circ_0036167对心肌成纤维细胞纤维化表型的调控作用及可能机制。[方法]对心衰患者及器官捐献者心肌组织进行Masson三色染色以检测心肌胶原水平。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ_0036167及其宿主MYO9A在心衰心肌中的表达。通过放线菌素D和RNase R处理实验鉴定人心肌细胞AC16中circ_0036167的RNA稳定性。利用重组circ_0036167腺病毒感染C57BL/6小鼠心肌成纤维细胞(mCF),在RNA和蛋白水平检测纤维化相关基因COL1A1、COL3A1和ACTA2的表达。利用EdU染色和Transwell细胞迁移实验鉴定circ_0036167对mCF增殖和迁移能力的影响。基于生物信息学预测和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证circ_0036167与融合肉瘤蛋白(FUS)的结合作用。检测敲低mCF中FUS表达对circ_0036167调控心肌纤维化相关基因表达的影响。[结果]Masson三色染色显示心衰心肌发生明显的纤维化(P<0.001)。RT-qPCR结果显示circ_0036167在心衰心肌中表达显著增加(P<0.05),而宿主基因MYO9A表达无显著差异。放线菌素D和RNase R消化实验证实circ_0036167具有环状RNA典型的RNA稳定性。过表达circ_0036167可显著抑制mCF的增殖、迁移能力和纤维化相关基因的表达。RIP实验证实circ_0036167可与FUS结合。敲低mCF后FUS的表达可促进mCF中纤维化相关蛋白表达(P<0.05或P<0.01),并可减弱circ_0036167对纤维化相关基因表达的抑制作用(P<0.01或P<0.001)。[结论]FUS可介导circ_0036167发挥抑制mCF心肌纤维化表型的作用。

黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤中FUS-CHOP融合基因和MDM_2蛋白的表达及意义

目的探讨FUS-CHOP融合基因与MDM2蛋白在黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤(MRCLs)组织中的表达及意义。方法收集MRCLs标本25例。以非MRCLs的脂肪肉瘤及其它软组织肿瘤共18例作对照组。用嵌套式RT-PCR的方法检测FUS-CHOP融合基因mRNA并经和DNA测序证实,以β-actin基因作为内对照。用免疫组化S-P法检测25例MRCLs中MDM2蛋白表达情况。结果MRCLs组和对照组β-actin阳性率分别为72.0%(18/25)和66.7%(12/18)。25例MRCLs中15例检出型FUS-CHOP融合基因表达,阳性率为(60.0%),去除β-actin阴性病例的阳性率为83.3%(15/18)。对照组18例标本未检出FUS-CHOP融合基因。MRCLs中MDM2蛋白阳性表达率为56.0%(14/25),在圆细胞为主的病例组阳性表达率最高,差异有显著性。FUS-CHOP融合基因与MDM2蛋白表达无相关性。结论(1)MRCLs中FUS-CHOP融合基因与MDM2蛋白的表达无相关性。(2)FUS-CHOP融合基因在MRCLs中呈特异性表达,可作为该肿瘤的特异性标志物用于诊断。(3)MDM2蛋白过表达与MRCLs的进展相关。

葡萄糖转运蛋白-1通过Wnt/β-catenin通路促进骨肉瘤MG63细胞迁移

目的:探讨葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,Glut-1)通过Wnt/β-catenin通路促进骨肉瘤细胞MG63的迁移及其机制。方法:构建针对Glut-1基因的RNA干扰重组腺病毒(Ad-Glut-si RNA)及含对照序列的重组腺病毒(Ad-GFP),感染MG63细胞沉默Glut-1基因表达;通过Transwell小室法检测Blank组、Ad-AFP组、Ad-Glut-si RNA组、GSK-3抑制剂AZD2858组细胞的迁移能力;应用免疫荧光实验检测各组细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达变化以及β-连环蛋白(β-catenin)的进核情况,通过Western blotting实验检测各组细胞的MMP-2、MMP-9表达变化以及Blank组、Ad-AFP组、Ad-Glut-si RNA组细胞FZD7、β-catenin、Dsh蛋白表达变化。结果:沉默Glut-1基因后,MG63细胞迁移能力明显下降(P<0.05);再给于AZD2858处理后,细胞的迁移能力恢复(P<0.05)。与Blank组和Ad-GFP组细胞相比,Ad-Glut-si RNA组MG63细胞E-cadherin表达显著升高(P<0.05),vimentin、MMP-2、MMP-9以及FZD7、β-catenin、Dsh蛋白表达显著降低(均P<0.05);与Ad-Glut-si RNA组相比,AZD2858组细胞E-cadherin表达显著降低(P<0.05),vimentin、MMP-2和MMP-9表达显著升高(P<0.05)。结论:Glut-1基因高表达与骨肉瘤MG63细胞侵袭转移具有密切联系,其可能机制在于Glut-1高表达后激活Wnt/β-catenin通路使EMT相关蛋白Ecadherin表达降低、vimentin以及MMP-2、MMP-9含量上升,从而促进MG63细胞的转移。

脂肪肉瘤c-myc和p53基因蛋白的表达及意义

背景与目的:原癌基因c-myc和抑癌基因p53与脂肪肉瘤的关系的研究较少,脂肪肉瘤中是否存在p53基因突变文献报道不一,本文拟探讨脂肪肉瘤中c-myc、p53基因蛋白表达的水平及意义,以期为本组肿瘤发生发展及病理诊断、鉴别诊断提供一定的分子生物学资料。方法:采用链菌素抗生物素-生物素(labelledstreptavidin-biotin,LSAB)免疫组化法、聚合酶链反应-单链构象多态性分析(Singlestrandconformationpolymorphismanalysisofpolymerasechainreactionproducts,PCR-SSCP)及DNA序列分析方法。结果:c-myc和p53蛋白在脂肪肉瘤表达阳性率分别为38.09%(16/42)和48.08%(25/52)。不同类型脂肪肉瘤,分化良好者阳性率均明显低于分化较差者。脂肪肉瘤中c-myc和p53蛋白表达呈正相关。c-myc和p53蛋白表达在原发者和复发者之间的差异均无统计学意义。p53第6、7、8外显子PCR-SSCP分析,2例多形性脂肪肉瘤出现异常泳动带。DNA序列分析证实1例第8外显子第268位编码区出现错义突变(AAC→ATC),另1例第6外显子第221位编码区出现可疑杂合性同义突变(GAG→GAA)。结论:c-myc和p53蛋白与脂肪肉瘤的形成及分化和恶性程度有关,它们可作为判断脂肪肉瘤分化程度及恶性程度参考指标之一,但与肿瘤复发无关。在脂肪肉瘤发生发展中两者可能起协同作?

粘液样脂肪肉瘤TLS/FUS-CHOP融合基因的检测

目的:探讨在粘液样脂肪肉瘤石蜡包埋组织中检测TLS/FUS-CHOP特异性融合基因的可行性及TLS/FUS-CHOP融合基因表达在粘液样脂肪肉瘤诊断中的价值。方法:收集粘液样脂肪肉瘤石蜡包埋组织标本6例,以粘液样脂肪瘤、脂肪母细胞瘤、粘液瘤、骨外粘液样软骨肉瘤、粘液纤维肉瘤作为阴性对照,茁-肌动蛋白和茁2-微球蛋白作为内对照,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和巢式PCR检测TLS/FUS-CHOP融合基因的表达。结果:6例粘液样脂肪肉瘤中4例检出茁-肌动蛋白mRNA表达,5例检出茁2-微球蛋白mRNA表达,其中3例检出II型TLS/FUS-CHOP融合基因mRNA表达。对照组均未检出TLS/FUS-CHOP融合基因的表达。结论:运用RT-PCR方法检测石蜡包埋组织中TLS/FUS-CHOP融合基因mRNA的表达可行,有助于粘液样脂肪肉瘤的诊断和鉴别诊断。

脂肪肉瘤组织中p16、p53蛋白的表达及意义

目的观察脂肪肉瘤组织中p16、p53蛋白的表达并探讨其意义。方法脂肪肉瘤患者32例,行脂肪肉瘤根治性切除术30例,脂肪肉瘤姑息性减瘤术2例。术中取其脂肪肉瘤组织及正常脂肪组织各32例,采用免疫组化SP法检测其p16、p53蛋白。结果脂肪肉瘤、正常脂肪组织中p16蛋白阳性表达率分别为62.50%和100%,p53阳性率分别为68.75%和0,脂肪肉瘤与正常脂肪组织相比,P均<0.05。随脂肪肉瘤病理分型升高,p16表达下降而p53表达升高,p16与p53蛋白表达呈负相关(r=-1,P均<0.05)。结论脂肪肉瘤组织中p16蛋白呈低表达,p53蛋白呈高表达,二者表达呈负相关关系,共同参与了脂肪肉瘤的发生、发展。

人重组caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞靶向促凋亡作用

目的:探讨Her2靶向重组的caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用。方法:将抗Her2单链抗体基因e23sFv与绿脓杆菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和活性caspase-6基因连接,构建成Immunocasp-6(e23sFv-PEⅡ-casp-6)基因,将其克隆入真核表达载体pCMV中,转染SOSP-9607细胞,间接免疫荧光法检测目的基因表达和细胞形态学变化,通过AnnexinV染色、流式细胞术、MTT法检测来观察其促肿瘤细胞凋亡的作用。结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测出caspase-6的表达,SOSP-9607细胞出现明显的核浓缩、碎裂;电镜观察到细胞质浓缩,胞内空泡,核染色质浓集等典型的凋亡特征;MTT法检测发现细胞的增殖明显被抑制;AnnexinV染色流式细胞术检测可见明显的凋亡细胞,凋亡率为31.4%,较对照组细胞(凋亡率为6.0%)有非常显著的增加(P<0.01)。结论:重组Immunocasp-6基因可以在转染的SOSP-9607细胞中表达,并诱导细胞发生凋亡。

重组抗HER2融合蛋白基因ScFv/tBid对骨肉瘤E10细胞的促凋亡作用

目的:构建抗HER2重组融合蛋白基因ScFv/tBid,并探讨其对骨肉瘤E10细胞的促调亡作用。方法:通过间接免疫荧光染色、流式细胞仪(FCM)检测E10细胞膜表面HER2的表达。将抗HER2单链抗体基因e23sFv与铜绿假单胞菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和tBid基因连接,构建抗HER2重组融合蛋白基因ScFv/tBid,将其克隆入真核表达载体pCMV中构建重组pCMV-ScFv/tBid载体,转染骨肉瘤E10细胞。间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,Annexin V染色流式细胞术及TUNEL法检测E10细胞的凋亡情况。结果:流式细胞仪检测到E10细胞膜表面有HER2的表达。成功构建重组融合蛋白基因质粒pCMV-ScFv/tBid。重组质粒转染E10细胞后,间接免疫荧光双标记染色检测到E10细胞中tBid的过表达;细胞色素C在细胞质中出现;细胞出现明显的固缩、核浓缩等形态特征。Annexin V染色后流式细胞仪检测可见实验组细胞凋亡率较对照组明显升高(16.1% vs 4.5%);TUNEL染色显示,E10细胞出现典型的凋亡特征。结论:重组抗HER2融合蛋白基因ScFv/tBid可以在转染的骨肉瘤E10细胞中表达,并诱导骨肉瘤细胞发生凋亡。

黏液性脂肪肉瘤中TLS-CHOP融合基因原位杂交检测研究

脂肪肉瘤是软组织中常见的恶性肿瘤，占软组织肉瘤的9．8％～16．0％，是软组织肿瘤中发病率较高的恶性肿瘤。瘤组织由分化各个阶段的不同异型程度的脂肪母细胞及原始间叶细胞组成。2002年版世界卫生组织（WHO）软组织肿瘤组织学分类中，根据组织学形态以及肿瘤的免疫组织化学、细胞和分子遗传学特征进行分型，将脂肪肉瘤分为3个亚型：即分化良好型和非典型性脂肪肉瘤、

三氧化二砷诱导尤文肉瘤细胞凋亡及对EWS-FLi1融合蛋白的影响

目的:探讨三氧化二砷(Arsenictrioxide,As2O3)诱导尤文肉瘤细胞凋亡及对融合蛋白EWS-FLi1表达的影响。方法:应用噻唑蓝(MTT)法、形态学观察、原位末端标记法(TUNEL)、流式细胞术(FCM)观察As2O3对体外生长的尤文肉瘤RD-ES细胞系生物行为的影响;应用半定量RT-PCR测定应用As2O3前后c-myc基因mRNA水平的变化;应用免疫细胞化学及固定化蛋白印迹法(Westernblot)观察用药前后EWS-FLi1融合蛋白表达水平的变化。结果:As2O3对体外生长的RD-ES细胞系具有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡。c-myc基因mRNA表达水平和EWS-FLi1融合蛋白表达量随As2O3作用时间延长逐渐降低。结论:常规治疗浓度的As2O3对体外生长的尤文肉瘤细胞具有明显的杀伤作用,其作用机制与改变线粒体膜通透性和抑制EWS-Fli1融合蛋白、降低c-myc基因表达有关。

脂滴包被蛋白基因反义RNA对人脂肪肉瘤细胞SW872增殖活性的影响

目的观察脂滴包被蛋白(perilipin)基因反义RNA对人脂肪肉瘤细胞SW872增殖能力的影响。方法将含perilipin基因反义cDNA序列的pcDNA3.1-perilipin(-)质粒及pcDNA3.1空载体质粒转染入人脂肪肉瘤SW872细胞,分别命名为SW872-A组和SW872-E组;未转染的瘤细胞为空白对照(SW872-wt组)。用逆转录聚合酶链反应法和链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物免疫组织化学方法检测perilipin反义基因及perilipin蛋白表达。用噻唑蓝还原法检测SW872细胞增殖活性;用流式细胞术检测细胞凋亡和增殖周期分布。将转基因SW872脂肪肉瘤细胞接种于balb/c裸鼠后肢皮下,4周后观察成瘤情况。结果 SW872-E组和SW872-wt组细胞perilipin mRNA表达明显高于SW872-A组;SW872-A组perilipin阳性细胞数较另2组明显减少。SW872-A组细胞在第1～6天增殖能力逐渐增加,与SW872-E组和SW872-wt组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。SW872-A组S期和G_2/M期细胞比例明显大于SW872-E组和SW872-wt组[(39±4)%比(19±5)%、(20±3)%,(40±4)%比(20±3)%、(21±3)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。SW872-A组裸鼠皮下移植瘤的成瘤时间明显短于SW872-E组和SW872-wt组[(5.3±2.6)d比(10.3±2.2)、(11.2±2.7)d];接种后28 d,SW872-A组瘤体重量明显大于SW872-E组和SW872-wt组[(3.87±0.46)g比(1.62±0.73)、(1.83±0.24)g],差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 perilipin基因反义RNA可抑制SW872脂肪肉瘤细胞中脂滴包被蛋白的表达,促进裸鼠体内肿瘤生长。

HER2靶向重组截短型Bid片段融合蛋白对骨肉瘤细胞的促凋亡作用

目的:观察人上皮细胞生长因子受体2(HER2)靶向重组的活性截短型Bid(tBid)融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用。方法:将抗HER2单链抗体基因e23sFv、与绿脓杆菌外毒素(PE)的转膜结构域基因(PEII)和tbid基因连接,构建成immuno-tbid(e23sFv-PEII-tbid)基因,将其克隆入真核表达载体pCMV中,转染SOSP-9607细胞,间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,通过AnnexinⅤ染色、流式细胞仪检测观察其促凋亡作用。结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测出tB id的表达,SOSP-9607细胞出现明显的固缩,核浓缩等凋亡特征。AnnexinⅤ染色、流式细胞仪检测可见明显的凋亡细胞,凋亡率为42%,对照组细胞仅6%,表明细胞膜表面有磷脂酰丝氨酸外翻,提示重组immuno-tbid基因表达后有促凋亡作用。结论:重组immuno-tbid基因可在转染的SOSP-9607细胞中表达,并诱导其细胞凋亡。

线粒体融合蛋白基因对人成骨肉瘤MG-63细胞的促凋亡作用研究

骨肉瘤（osteosarcoma）是起源于间叶组织最常见的恶性肿瘤,好发于青少年,恶性程度高,易于复发和肺部转移,预后差[1].骨肉瘤的治疗以扩大或根治性截肢术,辅以化疗的综合治疗为主要治疗方法,但由于骨肉瘤的多重耐药性制约了它的化疗效果和远期预后[2].因此有必要寻找新的治疗方法.

尤文肉瘤EWS-FLI1融合蛋白B淋巴细胞表位的预测及鉴定

目的:预测及鉴定尤文肉瘤EWS-FLI1融合蛋白的B淋巴细胞表位。方法:采用综合法预测EWS-FLI1蛋白的二级结构及B淋巴细胞表位,运用标准Fmoc方案合成预测的表位肽,HPLC和MS进行表位肽的纯度分析及分子量鉴定,ELISA法检测表位肽的抗原性,并测定表位肽特异性免疫血清效价,Western blot鉴定免疫血清与EWS-FLI1蛋白亲合力。结果:通过综合法预测得到3个高分值的B淋巴细胞表位,HPLC分析合成的表位肽纯度>85%,MS鉴定表位肽的分子量无误,ELISA法检测证实3个B淋巴细胞表位肽均可获得强的抗原抗体反应,其中表位肽P2的抗原性最强,在1∶40时A450=2.46,达到最高,1∶10 240稀释后抗原抗体反应仍呈阳性;用这3个B淋巴细胞表位肽免疫新西兰兔也能获得理想的抗体效价,其中表位肽P2获得的抗体效价最高,1∶512 000稀释时A450=1.11;Western blot鉴定表位肽P1、P2免疫血清能够结合EWS-FLI1蛋白。结论:尤文肉瘤EWS-FLI1蛋白的B淋巴细胞表位肽P1、P2具有潜在的抗原性和免疫原性。

黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤中FUS-CHOP mRNA和MDM_2、p53蛋白的表达

目的探讨FUS-CHOP mRNA及MDM2、p53蛋白在黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤(MRCLs)组织中的表达。方法收集经甲醛固定、石蜡包埋的MRCLs组织标本25例。以非MRCLs的脂肪肉瘤及其他软组织肉瘤共18例作对照组。用嵌套式RT-PCR的方法检测FUS-CHOP融合基因mRNA并做DNA测序证实,以β-actin基因作为内对照。用免疫组化SP法检测25例MRCLs中MDM2、p53蛋白表达情况。结果MRCLs组和阴性对照组β-actin阳性率分别为72%(18/25)和66.7%(12/18)。25例MRCLs中15例检出Ⅱ型FUS-CHOP融合基因表达,去除β-actin阴性病例后阳性率为83.3%(14/18)。对照组18例标本均未检出FUS-CHOP融合基因。MRCLs中MDM2、p53蛋白阳性表达率分别为56%(14/25)和44%(11/25),以圆细胞为主的病例组阳性表达率最高,差异有统计学意义。FUS-CHOP融合基因与MDM2及p53蛋白表达无相关性;而MDM2与p53蛋白表达呈正相关,有统计学意义。结论(1)FUS-CHOP融合基因是MRCLs的特异性分子遗传标志物,可用于该肿瘤的诊断与鉴别诊断。(2)MRCLs中MDM2、p53蛋白表达与其预后相关。(3)MRCLs中FUS-CHOP融合基因与MDM2、p53蛋白的表达无相关性。

粘液样/圆细胞型脂肪肉瘤石蜡包埋组织中FUS-CHOP融合基因的检测

目的:探讨逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法用于检测甲醛固定、石蜡包埋组织中FUS-CHOP融合基因的可行性及其对粘液样/圆细胞型脂肪肉瘤诊断的价值。方法:收集粘液样/圆细胞型脂肪肉瘤石蜡包埋组织标本25例,以其它类型脂肪肉瘤(包括分化良好型、去分化型、多形型),滑膜肉瘤,低度恶性纤维肉瘤,恶性纤维组织细胞瘤,粘液脂肪瘤,脂肪母细胞瘤,神经鞘瘤伴粘液变性和粘液软骨肉瘤作为阴性对照,共18例。所有标本均经过甲醛固定、石蜡包埋。用嵌套式RT-PCR的方法检测FUS-CHOP融合基因mRNA并经测序证实,以β-actin基因作为内对照检测mRNA质量。结果:43例标本中,30例可检出β-actin,阳性率为69.8%,其中粘液样/圆细胞型脂肪肉瘤标本β-actin阳性18例(72%),对照组β-actin阳性12例(66.7%)。25例粘液/圆细胞型脂肪肉瘤中15例检出Ⅱ型FUS-CHOP融合基因表达,阳性率60%(15/25),去除β-actin阴性病例的阳性率为77.8%(14/18)。其中1例β-actin阴性表达而检出FUS-CHOP融合基因。对照组18例标本均未检出FUS-CHOP融合基因。结论:FUS-CHOP融合基因在粘液样/圆细胞型脂肪肉中呈特异性表达,可作为该肿瘤的特异性标志物用于诊断。嵌套式RT-PCR的方法可用于甲醛固定、石蜡包埋组织中FUS-CHOP mRNA的检测。