双基因(VP3、IL-18)联合致小鼠骨肉瘤S-180细胞凋亡的效应

目的探讨VP3、IL-18双基因抑制骨肉瘤S-180的联合抑瘤作用。方法将VP3、IL-18基因插入pVAX1表达载体的pCMV启动子之下的EcoRI位点,构建成pVVP3及pVVp3-IL18。将该重组质粒与单独表达凋亡素基因的重组质粒分别注射荷S-180肿瘤细胞的BALB/C小鼠,比较抑瘤趋势和抑瘤率。结果联合应用VP3基因和IL-18基因的重组病毒治疗组的抑瘤率(46.16%)高于单独应用VP3基因组的抑瘤率(19.56%),两组比较有统计学差异(P<0.05)。结论凋亡素基因具有凋亡诱导效应及体内的抑瘤效应。凋亡素基因VP3与IL-18基因有协同抑瘤效应,联合基因治疗骨肉瘤可提高抑瘤效果。

山仙颗粒含药血清诱导S-180肉瘤细胞凋亡及其对bcl-2、Bax基因表达的影响

目的:探讨山仙颗粒(SXG)含药血清诱导体外培养S-180肉瘤细胞的凋亡作用及其对凋亡相关基因bcl-2及Bax表达的影响。方法:以不同浓度的山仙颗粒含药血清作用于体外培养的S-180肉瘤细胞,待24、48、72h后倒置显微镜下观察细胞形态变化并制备细胞涂片,采用TUNEL法检S-180肉瘤细胞凋亡率,免疫细胞化学(SABC)检测S-180肉瘤细胞中凋亡相关基因bcl-2、Bax表达的变化。结果:SXG含药血清可明显诱导S-180肉瘤细胞凋亡,导致其细胞形态改变,并能使bcl-2表达降低(P<0.01)、Bax表达增强(P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。结论:SXG含药血清能有效诱体外培养的S-180肉瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制bcl-2表达,促进Bax表达有关。

SD大鼠山仙颗粒含药血清对S-180肉瘤细胞VEGF的表达及对细胞凋亡影响的实验研究

目的探讨山仙颗粒(SXG)含药血清对S-180肉瘤细胞VEGF表达水平及细胞凋亡的影响。方法将不同浓度的SD大鼠SXG含药血清作用于体外培养的S-180肉瘤细胞,24h、48h、72h后制备细胞涂片,用免疫细胞化学法(SABC)检测不同浓度、不同作用时间的含药血清对S-180肉瘤细胞中VEGF表达的影响,用TUNEL法检测S-180肉瘤细胞凋亡率。结果 SXG含药血清能下调VEGF表达水平、促进S-180肉瘤凋亡,且呈浓度和时间依赖性。结论 SD大鼠SXG含药血清能显著降低S-180肉瘤细胞中VEGF的表达水平,提高S-180肉瘤细胞凋亡率,其临床抑转移、抗肿瘤机制可能与其下调VEGF表达水平及促进细胞凋亡有关。

博尔宁抑制S-180肉瘤细胞增殖抗癌作用机制研究

目的观察博尔宁对S-180肉瘤细胞及其实体瘤的增殖抑制作用,探讨其抗肿瘤效应及与NF-κB的相关性。方法 1体外实验:体外培养S-180肉瘤细胞,分为空白组,博尔宁A组、B组、C组,5-Fu组,联合给药组,分别培养24,48,72 h,MTT法检测细胞体外增殖程度,计算增殖抑制率。2体内实验:将含S-180肉瘤细胞的小鼠乳白色腹水接种于50只雄性裸小鼠右侧腋窝皮下,然后随机将裸小鼠分为5组,空白组给予生理盐水灌胃,5-Fu组给予5-Fu 10μg/m L灌胃,博尔宁A组、B组、C组给予10μg/m L、20μg/m L、40μg/m L博尔宁灌胃。灌胃15 d后取材,计算抑瘤率,RT-PCR法检测瘤组织NF-κp65 RNA的表达情况,考马斯亮兰法检测NF-κB蛋白浓度,凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测NF-κB活性。结果在体外,博尔宁呈浓度依赖性抑制S-180肉瘤细胞增殖,且在处理48 h时作用最佳。在体内,博尔宁各组荷瘤裸鼠的瘤质量呈浓度依赖性下降,差异均有统计学意义(P均<0.05),博尔宁C组与5-Fu组抑瘤率比较差异无统计学意义(P>0.05);各给药组瘤组织NF-κB p65 RNA及蛋白表达水平均明显低于空白组(P均<0.05),并随着博尔宁浓度的增加逐渐降低,各组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论博尔宁可显著抑制S-180肉瘤细胞和实体瘤的增殖,其作用与降低NF-κB的表达、抑制其活性有关。

VP3、IL-18对小鼠体内骨肉瘤S-180细胞的治疗作用

目的:旨在探讨双基因(VP3、IL-18)抑制骨肉瘤S-180的联合抑瘤作用。方法:将VP3、IL-18基因插入pVAX1表达载体的pCMV启动子之下的EcoRⅠ位点,构建成pVVP3及pVVP3IL-18。将该重组质粒与单独表达凋亡素基因的重组质粒分别注射荷S-180肿瘤细胞的BALB/C小鼠,按照质粒与脂质体3:1的比例混合,每3天注射1次,连续注射3次,比较抑瘤趋势和抑瘤率。结果:联合应用VP3基因和IL-18基因的重组病毒治疗组对肿瘤的抑瘤效果明显优于单独应用VP3基因的重组病毒治疗组。结论:凋亡素基因具有凋亡诱导效应及体内的抑瘤效应。凋亡素基因VP3与IL-18基因有协同抑瘤效应,VP3、IL-18联合基因治疗骨肉瘤可显著提高抑瘤效果。

马尾藻岩藻聚糖对小鼠肉瘤细胞S-180的影响

以不同分子质量组分的马尾藻岩藻聚糖（SF）为研究对象,体外培养小鼠肉瘤细胞S-180,做抗肿瘤活性试验。采用MTT法测定不同铺板数量和不同浓度SF作用下的细胞生长曲线,确定细胞的铺板数量和SF对肿瘤细胞增殖抑制作用的有效浓度范围;测定不同组分SF在不同浓度、时间条件下对该细胞的增殖抑制率及对肿瘤细胞的IC50值。在倒置显微镜下观察SF2-R对细胞形态的影响。试验结果显示,当细胞铺板数量为5×103个/mL时,由细胞数量反映的OD值与时间的线性相关性良好;当SF的质量浓度设定在1~25 mg/mL范围时,细胞增殖抑制作用与SF浓度线性相关性良好;8种分子质量组分的SF对肿瘤细胞均有抑制作用,其中SF2-R对细胞的抑制作用最强。SF2-R对S-180肿瘤细胞的IC50为7.88 mg/mL,低于其他组分对肿瘤的IC50。倒置显微镜观察结果是：随着SF浓度的增加,细胞凋亡加重。

开口箭皂苷对S-180肉瘤细胞荷瘤小鼠NF-κB mRNA的影响及其机制研究

目的观察开口箭皂苷对S-180肉瘤细胞荷瘤小鼠NF-κB mRNA的影响,证实开口箭对实体瘤的抑制作用,探讨其分子机制。方法计算四噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度的开口箭皂苷对S-180肉瘤细胞体外培养下抑制率,并进行电镜形态观察。同时建立S-180肉瘤荷瘤小鼠模型,给予不同浓度的开口箭皂苷进行干预,以5-氟尿嘧啶(5-Fu)为阳性对照,观察细胞形态,用凝胶电泳迁移率实验(EMSA)技术检测NF-κB的变化;实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR)检测各组NF-κB mRNA。结果开口箭皂苷呈浓度依赖性抑制S-180肉瘤细胞增殖,以48h作用最佳。开口箭各组荷瘤裸鼠的瘤质量呈浓度依赖性下降,差异均有统计学意义(均P<0.05),各给药组瘤组织NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平均明显低于空白组(均P<0.05),并随着开口箭皂苷浓度的增加逐渐降低,各组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论开口箭皂苷明显抑制S-180肉瘤细胞体外增值,具有抑制实体肉瘤作用,降低NF-κB mRNA是其分子机制之一。

利用电磁脉冲提高抗癌药物治疗肿瘤细胞疗效的实验研究

本文采用一种新的方法—电穿孔结合化学药物进行肿瘤治疗的电化学疗法。电穿孔由于能使细胞膜出现瞬时微孔,从而能大大提高癌细胞对药物的吸收率、促进了药物等大分子进入细胞。这里利用电穿孔现象结合抗癌药物治疗昆明小鼠身上的S-180肉瘤,从实验数据可看出,这种方法取得了很好的效果。这种癌症治疗新技术具有易于控制、便于操作等优点,特别适用浅表肿瘤的治疗,为临床治疗肿瘤提供了一条新的途径。

茯苓素诱生肿瘤坏死因子（TNF）的作用

本文报道茯苓素在小鼠体内、外诱生肿瘤坏死因子的作用。实验表明：茯苓素小鼠体内、外能明显增强经ＢＣＧ预先激活的巨噬细胞产生ＴＮＦ的能力，且有显著的剂量依赖性关系。茯苓素在体内对小鼠移植性肿瘤Ｓ－１８０细胞有明显的抑制生长作用，其作用强弱与ＴＮＦ的水平呈正相关。诱生出的ＴＮＦ可通过抗体中和实验得到确证。

瞬态电磁脉冲加速肿瘤消亡的实验研究

当一定强度的瞬态电磁脉冲作用于细胞时 ,在细胞膜上将形成瞬时微孔 ,可促进药物等大分子进入细胞内。本研究利用电穿孔现象结合抗癌药物治疗在昆明小鼠上接种和生长的 S- 180肉瘤 ,发现这种方法可以明显地抑制肿瘤细胞的生长。这种癌症治疗技术具有操作简单、容易控制、毒副作用小等优点 ,特别适用于浅表肿瘤的治疗。

中国蛤蜊精对小鼠体内外抗肿瘤作用的研究

目的研究中国蛤蜊精(每100g中,含多糖19.01g、牛磺酸1.25g、胆碱0.65g)的体内外抗肿瘤作用。方法建立小鼠S-180肉瘤模型,用中国蛤蜊精悬液连续灌胃32d,观察并分析其对荷瘤小鼠瘤质量、胸腺指数、脾指数的影响;采用MTT法测定中国蛤蜊精体外对小鼠S-180肉瘤细胞的抑制作用。结果中国蛤蜊精[(0.5,3.0,4.80 g/(kg·d))]可以显著抑制小鼠S-180肉瘤细胞的体内增殖,抑瘤率依次为44.29%、48.23%、61.94%;中国蛤蜊精[3.0,4.80 g/(kg·d)]可以明显提高小鼠的脾脏指数,并与其浓度呈正相关。中国蛤蜊精(4,8,12mg/ml)体外对小鼠S-180肉瘤细胞的增殖抑制率分别是49.67%、56.66%、12.91%,且8mg/ml的抑制率与5-FU无显著性差异。结论中国蛤蜊精在小鼠体内和体外具有显著抑制小鼠S-180肉瘤细胞的作用。