肉苁蓉的药理作用及其在中枢神经系统疾病中的研究进展

肉苁蓉(Cistanches)是列当科植物肉苁蓉的肉质茎,又名金笋、地精、大芸。肉苁蓉的提取物主要包括肉苁蓉总苷、苯乙醇苷类、环烯醚萜类、挥发性成分、木脂素类、多糖、生物碱等。肉苁蓉的传统中药作用有补肾壮阳、润肠通便、女子不孕、滋补强身等;现代药理作用包括抗氧化、抗凋亡、调控自噬、增强体力和抗疲劳、改善学习认知功能。相关研究表明肉苁蓉对中枢神经系统疾病具有良好的治疗效果。脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)发生常伴随着脑水肿、血脑屏障的破坏、神经炎症、神经元凋亡,肉苁蓉提取物肉苁蓉总苷可抑制神经细胞炎症及凋亡,减少脑梗死面积,对CIRI模型大鼠具有神经保护作用。肉苁蓉通过减少自由基堆积、抑制氧化应激和炎症反应,提高阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)和血管性痴呆(Vascular dementia,Va D)模型大鼠的学习记忆能力。肉苁蓉可以改善帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠运动行为异常,发挥神经保护作用。肉苁蓉能够抑制肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)兴奋性氨基酸的水平,减轻神经毒性作用,改变星形胶质细胞功能,提高神经细胞存活率。目前肉苁蓉对于中枢神经系统疾病的应用越来越广泛,就其药理作用及其在中枢神经系统疾病中的研究进展进行综述,以期为肉苁蓉的开发和利用提供新的思路。

蛀食前后的肉苁蓉及蛀蝇化学成分分析

目的 初步探索肉苁蓉、蛀蝇蛀食后肉苁蓉和蛀蝇三者的成分类别。方法 采用系统鉴别方法,通过相似相溶原理,对实验对象进行不同溶剂的成分提取,再选用各类成分的定性反应及滤纸斑点实验方法进行分析判断,初步推断供试液中可能含有的化学成分。结果 肉苁蓉中可能含多糖、苷类、有机酸、酚类、皂苷、生物碱、黄酮、香豆素、甾体、挥发油等成分,肉苁蓉蛀蝇蛀食后的肉苁蓉原有的酚类、香豆素等部分物质减少或者消失。肉苁蓉蛀蝇可能含有氨基酸、糖类、有机酸、酚类、生物碱、香豆素、甾体、油脂类成分。结论 蛀蝇危害后的肉苁蓉中酚类、香豆素等部分物质减少,尚不能确定肉苁蓉蛀蝇是否能生物萃取肉苁蓉中有效成分。

鹿茸肉苁蓉复方缓解运动小鼠疲劳的功效研究

分析鹿茸肉苁蓉复方缓解运动小鼠疲劳的功效与机理,为提高人的运动耐力及缓解疲劳的深入研究提供理论基础。本试验分为四组,每组各10只小鼠。连续30 d对小鼠经口灌胃后测定小鼠的负重游泳时间、血乳酸、血清尿素氮、肝糖原以及红细胞携氧能力。结果表明,三个给药组小鼠的负重游泳时间均有所延长,说明单独使用马鹿茸、肉苁蓉、黄芪、枸杞能延长小鼠的负重游泳时间,具有缓解疲劳的作用。在试验一组配方的基础上增加当归、玫瑰花、丁香可显著缓解小鼠的疲劳,可能与减少血乳酸、血清尿素氮的堆积以及提高红细胞携氧能力有关。

肉苁蓉干膏粉致畸性毒性实验研究

目的通过动物实验观察肉苁蓉干膏粉是否有致畸作用,初步确定不引起致畸作用的NOAEL值,为安全食用和相关产品开发提供参考。方法雌雄SD大鼠按1︰2合笼,查见阴栓当天为妊娠第0天,此后1 d为第1天。完全随机法将交配成功的雌鼠分入阴性对照组、1250 mg/kg、2500 mg/kg、5000 mg/kg、阳性对照组(环磷酰胺,15 mg/kg)5组,每组不少于18只。孕第6~15 d,剂量组以10 ml/kg经口灌胃给予受试物、阴性对照组灌胃给予相同体积蒸馏水、阳性组于孕第12天按2 ml/kg体重腹腔注射环磷酰胺1次。第0、6、9、12、15、20天称量体重,调整灌胃量。妊娠第20天,孕鼠称重后行安乐死,取出子宫,称子宫连胎鼠总重,摘除卵巢称重并计数黄体数,剖开子宫记录总着床数、活胎数、死胎数、吸收胎数,取出活胎仔称重、量体长、逐个检查外观,取下胎盘称重。将1/2活胎鼠放入鲍氏液中固定两周,检查脏器发育情况;其余活胎鼠去内脏,经固定、染色、透明后以检查骨骼发育情况。结果环磷酰胺组孕鼠增重显著低于阴性对照组(P=0.000),死胎发生率显著高于阴性对照组(P=0.000),胎仔平均体重及平均身长均显著低于阴性对照组(P=0.000、0.000),外观畸形、骨骼畸形及内脏畸形窝发生率均显著高于阴性对照组(χ^(2)=38.000、10286、18.000,P=0.000、0.001、0.000),提示试验系统及操作可靠。第0天(χ^(2)=5.664,P=0.227)、6天(F=0.906,P=0.464)、9天(F=1.098,P=0.363)、12天(F=1.081,P=0.371)、15天(F=0.627,P=0.644)孕鼠体重和体重净增重比较,组间差异无统计学意义(χ^(2)=5.790,P=0.215)。各剂量组第20天体重及体重增重与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P=1.000、1.000、1.000,0.670、0.518、0.340)。窝平均活胎数(χ^(2)=1.869,P=0.760)、黄体数(χ^(2)=6.230,P=0.183)、吸收胎发生率(χ^(2)=1.109,P=0.894)组间差异无统计学意义;着床数(χ^(2)=9.964,P=0.041)、胎仔平均体重(χ^(2)=48.968,P=0.000)、胎仔平均身长(χ^(2)=48.264,P=0.000)、死胎发生率(χ^(2)=196.912,P=0.000)组间差异均有统计学意义,但各剂量组着床数、胎仔平均体重、胎仔平均身长、死胎发生率与阴性对照组差异无统计学意义(P=1.000、1.000、0.592,0.553、0.389、0.193,0.928、0.650、0.518,0.758、0.221、0.863)。2500 mg/kg体重组观察到1例短指,剂量组未观察到其它类型外观畸形;阴性对照组、1250 mg/kg、2500 mg/kg和5000 mg/kg体重组胸骨骨化不全发生率分别为15.2%、21.3%、20.0%和25.0%,组间差异无统计学意义(χ^(2)=3.421,P=0.332);剂量组未观察到胎仔内脏发育异常。结论肉苁蓉干膏粉无母体毒性,对SD大鼠胎仔发育无抑制作用,无致畸性毒性作用,不引起致畸作用NOAEL值为5000 mg/kg体重。

肉苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠降血糖作用

目的探讨肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠降血糖的作用及机制。方法富集肉苁蓉和酒苁蓉总多糖、总寡糖和总苷部分,对其含量进行了比较分析。选用db/db小黑鼠为实验动物,给药28 d后,记录小黑鼠体重、进食量、饮水量,检测血糖,采用ELISA检测血清胰岛素(INS)、糖化血红蛋白(HbA1c),肝脏甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),血浆和尿液中尿酸(UA)、肌酐(Cr)以及尿微量白蛋白(mALB)水平;HE染色方法制备胰腺和肾脏组织病理切片;IHC测定肾脏type-Ⅳ collagen蛋白表达水平。结果肉苁蓉多糖部位经过酒蒸后含量下降,肉苁蓉寡糖部位中的甜菜碱经过酒蒸后含量增加,总苷类成分酒蒸后松果菊苷的含量稍有下降,毛蕊花糖苷含量下降,异类叶升麻苷含量上升。与模型组相比,肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位能降低体重、空腹血糖(FBG)、口服葡萄糖耐量(OGTT)、HbA1c、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β)、MDA、LDL-C、UA、Cr以及mALB,INS和HDL-C有上升趋势(P<0.05,P<0.01),且能改善胰腺和肾脏的病理损伤以及type-Ⅳ collagen的表达。结论肉苁蓉和酒苁蓉总苷组降血糖作用较好,酒苁蓉多糖和寡糖也有一定的降血糖作用。

基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物研究

目的:建立基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物(Q-marker)研究方法,为其药效物质基础及质量控制研究提供依据。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC)建立10批肉苁蓉指纹图谱。利用H2O2建立细胞氧化损伤模型,以活性氧自由基半数抑制率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶含量为药效指标测定肉苁蓉抗氧化能力。通过主成分分析、皮尔逊相关性分析和偏最小二乘法-回归分析共同构建谱效关系,并对筛选出的活性成分进行药效验证。结果:建立了肉苁蓉的UPLC指纹图谱,共确定了17个共有峰。基于谱效关联分析筛选出9个成分,活性成分验证结果显示京尼平苷酸、8-表马钱子酸、松果菊苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、管花苷A具有抗氧化活性且呈浓度依赖性。结论:基于谱效关系探讨了肉苁蓉的Q-marker,为其药效物质基础及质量标准提升提供参考。

基于HPLC-QQQ-MS技术探讨炮制对肉苁蓉中5个活性成分的含量影响

炮制一般会对中药材的成分及药效产生重要作用,本文为了探讨炮制加工对肉苁蓉成分的影响,建立了同时测定炮制前后肉苁蓉中肉苁蓉苷F、毛蕊花糖苷、毛蕊花糖苷、2′-乙酰基毛蕊花糖苷和松果菊苷的含量的高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法(high-performance liquid chromatography-tandem triple quadrupole mass spectrometry,HPLC-QQQ-MS)的检测方法。采用50%甲醇溶液提取药物粉末,在Agilent Zorbax Eclipse Plus C 18(2.1 mm×150 mm,1.8μm)的色谱柱上,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,选取负离子多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式,以木通苯乙醇苷为内标成分,以进样量1μL,流速0.3 mL/min,柱温35℃,样品管理器温度8℃于HPLC-QQQ-MS进行同一批次炮制前后肉苁蓉中这五种成分的含量测定。结果显示5种成分在各自范围内线性关系良好,相关系数(r)在0.9929~0.9985之间,平均加样回收率在98.15%~100.2%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于4.6%。所建立的研究方法简便准确,可用于肉苁蓉的质量控制,并用于评价炮制对肉苁蓉含量及药效的影响。

肉苁蓉总苷对HepG2肝癌荷瘤小鼠的影响

为研究肉苁蓉在荷瘤小鼠体内抗肿瘤的效应,采用HepG2肝癌细胞建立裸鼠皮下成瘤模型,灌胃不同剂量肉苁蓉总苷(total glycosides,TG)分析其抗肿瘤作用,检测小鼠肝脏和肿瘤病理结构变化、脾脏淋巴细胞增殖能力及肝脏抗氧化指标,并采用代谢组学和16S rDNA测序法分析小鼠肠道内容物代谢物和微生物组成变化。结果发现,TG可以抑制裸鼠体内肿瘤的生长,不影响小鼠的正常生长发育,无任何毒副作用;随着TG剂量的增加,肝脏组织肝细胞结构完整,病理变化程度逐渐减轻,并且肿瘤组织肿瘤细胞分布变得越来越稀疏,空泡变样程度增加,出现坏死状,表明TG在保护肝的同时,还可抑制肿瘤生长;对肝脏组织进行抗氧化指标检测,发现过氧化氢酶和谷丙转氨酶水平升高,谷草转氨酶和碱性磷酸酶水平下降,表明TG可以减轻小鼠肝脏病变程度;淋巴细胞增殖能力与TG剂量呈正相关,表明TG可提高小鼠的免疫能来起到抗肝癌的作用;TG还可通过调节代谢物水平、改善肠道微生物组成,抑制肝癌发展。综上,肉苁蓉TG通过提高机体氧化应激水平、调节免疫能力、改善机体代谢方式和调理肠道微生物平衡以发挥抗肝癌的作用。

白术-肉苁蓉治疗便秘的网络药理学分析及试验验证

旨在通过网络药理学和动物试验探究白术-肉苁蓉治疗便秘的效果和机制。通过TCMSP数据库获得白术-肉苁蓉成分及对应的靶点蛋白,借助GeneCards、OMIM等数据库得到便秘相关靶点。将基因整理导入UniProt数据库后利用Venny2.1.0、Cytoscape3.7.2和STRING绘制韦恩图及蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并使用CentiScaPe 2.2插件进行分析。再通过DAVID数据库进行生物信息学GO分析及KEGG信号通路富集分析。通过AutodockTools和PyMOL等软件对部分核心靶点与潜在靶点较多的成分进行分子对接验证。将40只小鼠随机分为空白组(6只)和盐酸洛哌丁胺组(34只),分别用蒸馏水和10.0 mg·kg^(-1)盐酸洛哌丁胺灌胃。造模成功后,将30只便秘小鼠均分为模型组、阳性对照组和高、中、低剂量药物组。空白组和模型组蒸馏水灌胃,阳性对照组10.0 mg·kg^(-1)枸橼酸莫沙必利灌胃,高、中、低剂量药物组分别灌胃4.8、2.4、1.2 g·kg^(-1)的白术-肉苁蓉混悬液治疗,每日1次,持续7 d。7 d后进行排便和小肠运动试验。结果发现,PTGS 2为连接度最高的靶点基因,共筛选出AKT1、TNF和IL-6等19个白术-肉苁蓉治疗便秘的核心靶点,KEGG富集分析表明,脂质和动脉粥样硬化及乙型肝炎等通路较为关键。分子对接结果显示,白术-肉苁蓉潜在靶点较多的成分与便秘核心靶点结合较好。动物试验表明,与模型组比较,中、高剂量药物组首粒黑便时间显著缩短,小肠推进率显著增高。综上,白术-肉苁蓉可改善慢传输型便秘,多种活性成分可能通过PTGS2、AKT1、TNF和IL-6等关键靶点,调节多条信号通路治疗便秘。

肉苁蓉对帕金森病的治疗及相关机制

列当科植物肉苁蓉中的多种活性物质对中老年人群中的神经退行性疾病帕金森病有一定治疗作用。本综述探讨肉苁蓉通过调节肠道菌群、抑制线粒体自噬及氧化损伤、抑制神经炎症及多巴胺能神经元凋亡等机制发挥对帕金森病的治疗作用。

肉苁蓉总苷对睡眠剥夺模型大鼠学习认知和突触可塑性的影响

目的:探究肉苁蓉总苷是否通过调控突触可塑性进而改善睡眠剥夺模型大鼠学习认知功能。方法:50只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组(Control)、平台对照组(PC)、模型组(Model)、肉苁蓉总苷组(GCs)、艾司唑仑组(Est)。通过改良多平台水环境法制备大鼠睡眠剥夺模型,使用Morris水迷宫、旷场实验分别检测大鼠空间认知功能和情绪变化,尼氏染色观察大鼠海马CA1区神经细胞形态、数量的改变,Western blot和RT-PCR分别检测突触素(SYN)、突触后膜致密物质95(PSD-95)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达水平。结果:Morris水迷宫结果表明,与Control组比较,Model组大鼠学习认知能力明显下降(P<0.05),GCs治疗后大鼠的学习记忆功能得到改善(P<0.05);旷场实验结果显示,与Control组相比,Model组大鼠的运动路程和站立次数显著增加(P<0.05),静止时间明显缩短(P<0.05),焦虑情绪增加。给予GCs治疗后,运动路程和站立次数减少(P<0.05),静止时间增加(P<0.05),焦虑情绪得到改善。Western blot和RT-PCR结果表明,Model组大鼠BDNF、SYN和PSD-95蛋白和基因表达水平均明显下降(P<0.05);给予GCs治疗后,可以显著上调BDNF、SYN和PSD-95的表达量(P<0.05)。结论:肉苁蓉总苷可能通过调控突触相关标志物的表达影响突触可塑性,进而改善睡眠剥夺模型大鼠学习认知功能。

管花肉苁蓉提取物的工艺优化及其活性评价

该研究旨在利用响应面法优化管花肉苁蓉活性成分的提取工艺,并进一步对其抗氧化与美白活性进行研究。通过超声-微波法提取管花肉苁蓉中活性成分,以提取物中松果菊苷为指标成分,结合Box-Behnken响应面法优化提取工艺,得到提取物后通过测试DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除能力、总还原力对其进行体外抗氧化活性评价;通过CCK-8法、流式法检测小鼠黑色素瘤细胞(B16细胞)相关指标并评价其体外美白活性。结果表明,最优提取工艺条件为料液比1:16(g:mL),乙醇体积分数70%,超声功率160 W,超声时间6 min,该条件下提取物中松果菊苷含量为8.09%;管花肉苁蓉提取物在2 mg/mL下自由基清除能力与抗坏血酸相当,有较好的总还原能力;当管花肉苁蓉提取物质量浓度为50 mg/mL时,B16细胞内黑色素含量降至58.12%,酪氨酸活性的抑制率达到32.10%,当提取物质量浓度为100 mg/mL时,黑素小体转运量降至12.77%,能显著抑制酪氨酸酶活性、黑色素的生成及黑素小体转运。管花肉苁蓉提取物表现出显著的体外抗氧化能力以及较好的美白效果,作为天然抗氧化、美白原料具有潜在开发价值。

基于UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS和网络药理学探讨肉苁蓉水提物治疗糖尿病肾病的作用机制

探究肉苁蓉水提物(the aqueous extract of Cistanche tubulosa,AECT)化学成分和AECT治疗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的作用机制。利用UPLC-MS/MS对化合物进行分析鉴定;借助PubChem、GeneCards、OMIM、DAVID等数据库预测有效成分防治DN的作用靶点及通路,对核心基因进行GO、KEGG富集分析,并使用Cytoscape软件构建“成分-靶点-通路”可视化网络图。MTT法测定AECT的抗DN活性;生化试剂盒检测过氧化指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxide,GSH-Px)含量水平;ELISA法检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)水平;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率;Western blot检测相关蛋白的表达。从AECT中共鉴定出84个化学成分,并推测出15个化合物可能的裂解途径;筛选出AECT治疗DN的70个潜在靶点和多个信号通路。体外实验发现AECT能够增加高糖高脂环境中的HK-2细胞存活率抑制细胞凋亡;并上调SOD活性和GSH-Px含量,抑制炎症因子IL-1β、TNF-α和TGF-β表达水平;Western blot结果证明AECT影响PI3K-AKT信号通路。本研究初步探明了AECT中的主要有效成分及其治疗DN的潜在靶点与作用机制,为AECT治疗DN后续的深入研究提供思路。

茉莉酸甲酯对鲜切荒漠肉苁蓉贮藏品质的影响

为了探究茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对鲜切荒漠肉苁蓉贮藏品质的影响,该研究采用100、150、200μmol/L的MeJA浸泡鲜切荒漠肉苁蓉,测定贮藏过程中硬度、失重率、可溶性固形物(total soluble solids,TSS)、菌落总数、色泽、褐变度、总酚含量、多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)、过氧化物酶(peroxidase,POD)以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的变化。结果表明,贮藏至14 d时,与对照组相比,200μmol/L MeJA处理的鲜切荒漠肉苁蓉MDA、PPO和POD活性分别降低了21.32%、23.62%、24.08%,总酚含量增加了33.68%,使鲜切荒漠肉苁蓉具有更高的抗氧化能力,显著延缓了鲜切荒漠肉苁蓉贮藏过程中的褐变程度;减缓了鲜切荒漠肉苁蓉贮藏过程中颜色变化及质量的下降,菌落总数降低了23.88%,硬度和TSS含量分别提高了17.89%和40.22%,较好地维持了鲜切荒漠肉苁蓉的贮藏品质。该研究为鲜切荒漠肉苁蓉贮藏保鲜技术的研发和延长保质期提供了理论支持。

肉苁蓉总苷对Aβ_(1-42)寡聚体诱导的HT22细胞突触可塑性的影响

目的:探究肉苁蓉总苷(GCs)对Aβ_(1-42)寡聚体诱导小鼠海马神经元细胞系(HT22)细胞构建的阿尔茨海默病(AD)细胞模型突触可塑性的影响。方法:将HT22细胞分为对照组、模型组、空白大鼠血清组和GCs给药组。分别给予相应处理后记录各组细胞形态、活力以及突触相关mRNA和蛋白的表达水平情况。结果:与对照组相比,模型组细胞突触长度明显缩短、胞体较小、形态较差、凋亡细胞增多,细胞活力有所下降,脑源性神经营养因子(BDNF)、突触后致密蛋白(PSD-95)和N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的mRNA水平明显下降(P<0.05),PSD-95和NMDAR1的蛋白表达水平均显著下降(P<0.05);与模型组和空白大鼠血清组相比,GCs给药组的细胞突触长度、密度和细胞活力(P<0.05)均有所恢复,凋亡细胞的数量减少,BDNF、突触素(SYN)、PSD-95和NMDAR1的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),NMDAR1和PSD-95蛋白的表达水平明显提高(P<0.05)。结论:GCs含药血清可明显提高AD细胞模型的突触可塑性,改善AD模型细胞病理进程。

基于网络药理学和动物实验探讨管花肉苁蓉苯乙醇苷对糖尿病肾病的作用

目的 基于网络药理学和动物实验探讨肉苁蓉苯乙醇苷(CPhGs)对糖尿病肾病(DKD)的作用。方法 UHPLC-QE-MS法分析CPhGs化学成分,TCMSP、Swiss Target Prediction数据库筛选核心成分,OMIM、GeneCards数据库获取DKD相关靶点,获得共同靶标后使用STRING网站构建蛋白互作网络,DAVID数据库进行GO、KEGG通路分析,Cytoscape软件构建“CPhGs核心成分-靶点-通路”网络。随机选取10只大鼠作为正常组,其余大鼠用高糖高脂饲料喂养及单次腹腔注射STZ建立DKD模型,分为模型组、达格列净(1 mg/kg)组和CPhGs高、中、低剂量(500、250、125 mg/kg)组,每组10只,药物干预6周,观察一般情况,每周称定体质量并检测血糖;末次给药后收集24 h尿液,检测24 h尿蛋白总量(24-UTP);腹主动脉取血并处死,分离血清,检测尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平,HE染色及Masson染色观察肾组织病理变化,ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测肾组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS3蛋白表达。结果 UHPLC-QE-MS技术共检测得到699种成分,经筛选后获得CPhGs核心成分16种,相关靶点323个,CPhGs与DKD共有靶点99个,关键靶点为STAT3、SRC、EGFR等。KEGG通路分析筛选了151条信号通路,显示IL-17信号通路、PI3K/Akt信号通路、TNF信号通路等可能在CPhGs治疗DKD的过程中发挥关键作用。CPhGs能增加DKD大鼠体质量(P<0.01),减少饮水量(P<0.01),调节糖脂代谢,降低24-UTP、BUN水平(P<0.01),改善肾脏组织病理损伤,降低肾组织p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达(P<0.01),提高SOCS3蛋白表达(P<0.01)。结论 CPhGs通过多成分、多靶点、多途径干预DKD,可能通过抑制DKD大鼠肾脏JAK2/STAT3信号通路来发挥作用。

肉苁蓉的主要化学成分及生物活性研究进展

肉苁蓉始载于《神农本草经》,是一味补益药,具有补肾壮阳,益精血,润肠通便的作用。主要化学成分有苯乙醇苷类、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷类、多糖类、核苷、氨基酸及含氮类化合物、单萜类及有机酸类成分,具有补肾、保护肝脏、润肠通便、抑制细胞增殖等多种生物活性。就肉苁蓉的主要化学成分及生物活性等方面的研究进展进行综述,为新药研发提供参考。

肉苁蓉复方咀嚼片制备工艺及质量控制的研究

目的研究肉苁蓉复方咀嚼片的制备工艺及质量控制方法。方法基于中医理论对肉苁蓉、黄精和党参进行配伍,将其药材提取物与若干辅料等量递加混合,再加入硬脂酸镁,混合后过80目筛3次,每次混合时间超过5 min,压片制成肉苁蓉复方咀嚼片;以外观、硬度和口感等为指标进行工艺初步筛选,用正交实验法优选最佳处方;对用最佳处方制得的咀嚼片进行质量评价,用HPLC法测定有效成分的含量;通过研究肉苁蓉复方咀嚼片低、中、高剂量对小鼠体质量、力竭游泳时间及疲劳代谢产物等的影响来验证该咀嚼片在缓解体力疲劳方面的功效。结果3批工艺验证结果显示,用最佳处方制得的咀嚼片口感细腻、酸甜适宜,片质量为0.5 g·片^(−1),硬度>8 kg·mm^(−2)、脆碎度<1%;每片含松果菊苷>0.025 g,松果菊苷>0.003 g。0.25、0.50、1.50 g·kg^(−1)·d^(−1)剂量的肉苁蓉复方咀嚼片均能显著延长小鼠力竭游泳时间,降低尿素氮和乳酸的含量,增加肝糖原、肌糖原的含量,差异有统计学意义(P<0.01)。结论优选了肉苁蓉复方咀嚼片的处方工艺。用最优处方制备的肉苁蓉复方咀嚼片的外观性状、口感、硬度及脆碎度等均达到预期要求。肉苁蓉复方咀嚼片对体力疲劳有缓解作用。

中药肉苁蓉治疗帕金森病的药理机制研究进展

帕金森病(PD)是一类属于锥体外系的神经系统退行性疾患,对人们日常生活造成极大影响,以中脑黑质致密区多巴胺神经元丢失和神经元胞质内出现嗜酸性包涵体为病理特征。肉苁蓉作为治疗帕金森病常用中药,具有补肾阳、益精血、润肠通便之功效。该药药理作用十分广泛,查阅相关文献,发现肉苁蓉可通过多靶点、多途径治疗帕金森病,能有效延缓病情进展。肉苁蓉中含有多种有效成分,主要包括毛蕊花糖苷、松果菊苷、槲皮素、花生四烯酸、β-谷固醇、去水杨酸、丁香二酚、紫杉醇等,发挥抗氧化应激、调节神经炎症、调控细胞自噬、抑制神经细胞凋亡及调节肠道菌群等作用,且治疗帕金森病疗效显著。该文总结了肉苁蓉中有效成分治疗帕金森病的药理机制,为肉苁蓉治疗帕金森病的未来研究方向提供参考。

肉苁蓉苷A通过JNK/MAPK通路抑制破骨细胞活性

背景:研究证实肉苁蓉苷A具有抗炎、抗氧化和抗骨质疏松的作用,但其对破骨细胞分化和功能的影响及潜在的机制尚缺少研究。目的:探讨肉苁蓉苷A对核因子κB受体活化因子配体诱导的体外破骨细胞分化和骨吸收功能的影响及作用机制。方法:提取与培养4-6周龄C57BL/6小鼠股骨和胫骨中的骨髓巨噬细胞,采用CCK-8毒性实验检验不同浓度的肉苁蓉苷A(5,10,20,40,80,160μmol/L)对骨髓巨噬细胞的毒性,抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察不同浓度的肉苁蓉苷A干预破骨细胞的分化情况,确定药物的有效干预浓度。将实验分为阳性对照组、肉苁蓉苷A低、中、高剂量组(40,80,160μmol/L),细胞贴壁后各组均加入50 ng/mL的核因子κB受体活化因子配体诱导破骨细胞分化,肉苁蓉苷A低、中、高剂量组分别加入相应剂量的肉苁蓉苷A进行干预。采用肌动蛋白环鬼笔环肽染色和DAPI染色检测肉苁蓉苷A对破骨细胞形成的影响;骨磨片甲苯胺蓝染色观察肉苁蓉苷A对破骨细胞骨吸收功能的影响;Western blot检测JNK/MAPK通路上下游蛋白的表达情况;RT-qPCR检测抗酒石酸酸性磷酸酶、DC-STAMP、Nfatc-1、Ctsk和c-Fos等破骨细胞分化和骨吸收功能相关基因的表达情况。结果与结论:①抗酒石酸酸性磷酸酶染色、肌动蛋白环染色和骨陷窝甲苯胺蓝染色结果表明,与阳性对照组相比,肉苁蓉苷A对核因子κB受体活化因子配体诱导的体外破骨细胞的分化和骨吸收功能具有呈剂量依赖性的显著抑制作用;②RT-qPCR结果表明,与阳性对照组相比,肉苁蓉苷A高剂量组和低剂量组的抗酒石酸酸性磷酸酶、DC-STAMP、Nfatc-1、Ctsk和c-Fos等的mRNA表达量均显著降低,且肉苁蓉苷A高剂量组的降低效果更加显著;③Western blot结果显示,高剂量肉苁蓉苷A干预10,20,30和60 min时显著抑制p-JNK蛋白的表达;与阳性对照组相比,肉苁蓉苷A低、中、高剂量组显著抑制Nfatc1和c-Fos蛋白的表达,且呈剂量依赖性;④结果说明,肉苁蓉苷A能够通过降低p-JNK蛋白水平,抑制MAPK通路的激活和破骨细胞关键基因的表达,进而抑制破骨细胞的形成和骨吸收功能。