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肉食兽类细小病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR方法的建立与应用
被引量:
2
1
作者
康洪涛
赵建军
+7 位作者
柴秀丽
胡博
张海玲
张蕾
白雪
邵西群
闫喜军
吴威
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期843-849,共7页
为建立检测肉食兽类细小病毒荧光定量PCR方法和探索细小病毒基因组拷贝数与病毒含量之间的相关性,在肉食兽类细小病毒VP2基因区分别设计了1对保守引物和1条TaqMan-MGB标记的水解探针,通过对貉细小病毒(RDPV)LN10-1株VP2基因上的长度为9...
为建立检测肉食兽类细小病毒荧光定量PCR方法和探索细小病毒基因组拷贝数与病毒含量之间的相关性,在肉食兽类细小病毒VP2基因区分别设计了1对保守引物和1条TaqMan-MGB标记的水解探针,通过对貉细小病毒(RDPV)LN10-1株VP2基因上的长度为92bp的保守片段进行PCR扩增,构建标准重组质粒,由已知浓度的重组质粒通过荧光定量PCR体系建立标准曲线,建立了检测肉食兽类细小病毒基因组拷贝数的荧光定量PCR方法。结果显示,该检测方法在3.50×102~3.50×107 copies/μL范围内与Cp值呈良好的线性关系(R2可达0.999),最低检测浓度为35.0copies/μL。通过标准曲线得出RDPVLN10-1株样品的目标片段拷贝数,将拷贝数值与TCID50值进行相关性分析;分析结果显示,基因组拷贝数值与病毒TCID50值之间存在极显著的正相关关系(P<0.01),血凝效价与病毒TCID50值存在显著的正相关关系(P<0.05)。结果表明,与用血凝效价测定病毒含量的方法相比,用本试验建立的荧光定量PCR技术测得的病毒拷贝数值更能准确地代表活病毒的含量。
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关键词
肉食兽类细小病毒
荧光定量PCR
TCID50
血凝效价
相关性分析
原文传递
题名
肉食兽类细小病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR方法的建立与应用
被引量:
2
1
作者
康洪涛
赵建军
柴秀丽
胡博
张海玲
张蕾
白雪
邵西群
闫喜军
吴威
机构
中国农业科学院特产研究所经济动物疫病研究室
吉林特研生物技术有限责任公司
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期843-849,共7页
基金
科技部星火计划重点项目(2010GA660009)
吉林省科技发展计划青年科研基金项目(20130522089JH)
文摘
为建立检测肉食兽类细小病毒荧光定量PCR方法和探索细小病毒基因组拷贝数与病毒含量之间的相关性,在肉食兽类细小病毒VP2基因区分别设计了1对保守引物和1条TaqMan-MGB标记的水解探针,通过对貉细小病毒(RDPV)LN10-1株VP2基因上的长度为92bp的保守片段进行PCR扩增,构建标准重组质粒,由已知浓度的重组质粒通过荧光定量PCR体系建立标准曲线,建立了检测肉食兽类细小病毒基因组拷贝数的荧光定量PCR方法。结果显示,该检测方法在3.50×102~3.50×107 copies/μL范围内与Cp值呈良好的线性关系(R2可达0.999),最低检测浓度为35.0copies/μL。通过标准曲线得出RDPVLN10-1株样品的目标片段拷贝数,将拷贝数值与TCID50值进行相关性分析;分析结果显示,基因组拷贝数值与病毒TCID50值之间存在极显著的正相关关系(P<0.01),血凝效价与病毒TCID50值存在显著的正相关关系(P<0.05)。结果表明,与用血凝效价测定病毒含量的方法相比,用本试验建立的荧光定量PCR技术测得的病毒拷贝数值更能准确地代表活病毒的含量。
关键词
肉食兽类细小病毒
荧光定量PCR
TCID50
血凝效价
相关性分析
Keywords
carnivore parvovirus
real-time PCR
TCID50
hemagglutination titer
correlation analysis
分类号
S852.659.2 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肉食兽类细小病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR方法的建立与应用
康洪涛
赵建军
柴秀丽
胡博
张海玲
张蕾
白雪
邵西群
闫喜军
吴威
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
原文传递
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