白术内酯Ⅲ介导的肌动蛋白相关蛋白2/3抑制肠上皮间质转化以缓解溃疡性结肠炎的研究

目的:探寻白术内酯Ⅲ(AT-Ⅲ)的关键靶点,探究肌动蛋白相关蛋白2/3(Arp2/3)抑制溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:采用有限酶切-质谱法(lip-SMap)筛选大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)特征蛋白,进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,确定AT-Ⅲ的关键靶点。脂多糖(LPS)与IEC-6共孵育模拟UC模型,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;划痕实验测定IEC-6迁移速率;蛋白质印迹法测定上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和Arp2/3含量;分子对接评估AT-Ⅲ与关键靶点的结合能力。结果:基于lip-SMap获得的特征蛋白参与调控磷脂酰肌醇3激酶-丝苏氨酸激酶(PI3K-AKT)信号通路和紧密连接(TJ)信号通路;与对照组比较,LPS组中IL-6和TNF-α释放量升高(均P<0.05),迁移速率变快(P<0.05),E-cadherin和Vimentin的表达都有不同程度的影响(均P<0.05);与LPS组比较,LPS+CK666+AT-Ⅲ组显著降低IL-6和TNF-α含量(均P<0.01),有效逆转LPS诱导的细胞迁移变化及E-cadherin和Vimentin表达(均P<0.05);分子对接显示,Arp2/3与AT-Ⅲ有较好的结合活性。结论:Arp2/3作为AT-Ⅲ的关键靶点,可通过上皮细胞-间充质转化(EMT)缓解LPS诱导的UC。

肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4、环氧合酶2在结直肠癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的 探讨肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)、环氧合酶2(COX2)在结直肠癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法 收集96例结直肠癌患者的病历资料,所有患者均采用免疫组织化学染色法检测ARPC4、COX2表达情况,比较不同临床特征结直肠癌患者结直肠癌组织中ARPC4、COX2阳性表达率,采用回归分析法分析结直肠癌组织中ARPC4与COX2表达的相关性,比较不同ARPC4、COX2表达情况结直肠癌患者的3年生存率。结果 结直肠癌患者中ARPC4阳性表达率为61.46%(59/96),COX2阳性表达率为59.38%(57/96)。有淋巴结转移、低分化、Ⅲ~Ⅳ期结直肠癌患者结直肠癌组织中ARPC4、COX2阳性表达率均高于无淋巴结转移、中高分化、Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结直肠癌组织中ARPC4与COX2的表达呈正相关(r=0.618,P﹤0.05)。ARPC4阳性表达结直肠癌患者的3年生存率低于ARPC4阴性表达患者,COX2阳性表达结直肠癌患者的3年生存率低于COX2阴性表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论结直肠癌组织中ARPC4与COX2的表达呈正相关,其表达与结直肠癌患者的临床特征及预后有关。

CHA_(2)DS_(2)-VASc评分联合D-二聚体/纤维蛋白原比值对急性ST段抬高型心肌梗死相关动脉自发再通的预测价值

目的探讨CHA_(2)DS_(2)-VASc评分联合D-二聚体(D-D)/纤维蛋白原(FIB)比值(DFR)对急性ST段抬高型心肌梗死(ASTEMI)梗死相关动脉自发再通(IRA-SR)的预测价值。方法选取安庆市立医院2021年9月至2023年1月ASTEMI患者108例,入院后均行急诊冠状动脉造影及心肌梗死溶栓治疗试验(TIMI),将TIMI 2~3级纳入SR组(35例),TIMI 0~1级纳入非SR组(73例)。比较两组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、DFR水平、不同CHA_(2)DS_(2)-VASc评分患者DFR水平,分析CHA_(2)DS_(2)-VASc评分与DFR相关性及两者对ASTEMI患者IRA-SR的预测价值。结果两组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分等级存在显著差异(P<0.05);SR组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、D-D、FIB、DFR水平低于非SR组(P<0.05);SR组、非SR组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分1~2分患者D-D、FIB、DFR水平<3~4分患者<4分以上患者(P<0.05);SR组、非SR组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分与DFR均呈正相关(r=0.600、0.790,P均<0.001);CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、DFR预测ASTEMI患者IRA-SR的AUC为0.832(95%CI0.748~0.897)、0.816(95%CI 0.730~0.884);根据2.4 ROC曲线分析中所获取最佳截断值分为高水平与低水平,CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、DFR低水平的ASTEMI患者梗死相关动脉SR可能性高于高水平患者(P<0.05);CHA_(2)DS_(2)-VASc评分联合DFR预测ASTEMI患者IRA-SR的AUC为0.907(95%CI 0.836~0.955),敏感度为71.43%,特异度为95.89%,优于二者单独预测。结论CHA_(2)DS_(2)-VASc评分联合DFR预测ASTEMI患者IRA-SR的价值较为可靠,能为临床制定治疗方案提供指导信息。

下调肌动蛋白相关蛋白2/3复合体5对肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖、侵袭和转移能力的影响

背景与目的:肌动蛋白相关蛋白2/3复合体5(actin related protein 2/3 complex subunit5,ARPC5)参与肌动蛋白的组装,影响细胞的运动能力,在形成癌细胞侵袭性伪足的过程中起到重要作用。本研究通过基因沉默手段,探讨下调ARPC5基因表达对肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖、侵袭和转移能力的影响。方法:应用阳离子脂质体转染法构建ARPC5基因沉默(si-ARPC5)的SK-MES-1肺鳞癌细胞株,qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)鉴定转染效率和表达情况。实验设置si-ARPC5实验组、空白对照组(mock组)及阴性对照组(NC组)。采用细胞技术试剂盒(cell couiting kit-8,CCK-8)法测定si-ARPC5对SK-MES-1细胞的增殖的影响;划痕修复实验测定si-ARPC5对SK-MES-1细胞迁移能力的影响;Transwell小室体外侵袭实验测定siARPC5对SK-MES-1细胞的侵袭能力的影响。结果:转染si-ARPC5后的SK-MES-1细胞在mRNA和蛋白水平上均下调ARPC5的表达。与mock组及NC组比较,si-ARPC5实验组SK-MES-1细胞增殖能力明显下降(t=7.993,t=8.681,P<0.05)。si-ARPC5实验组划痕修复率(43.32±0.23)%,而mock组和NC组划痕修复率分别为(73.11±0.43)%和(76.58±0.88)%,差异有统计学意义(t=7.348,t=10.614,P<0.05)。si-ARPC5组的SK-MES-1细胞穿膜数为(27±6)个,mock组为(101±11)个,NC组为(92±9)个。si-ARPC5组穿膜细胞数明显少于其他2组,差异有统计学意义(t=10.229,t=8.391,P<0.05)。结论:下调ARPC5基因的表达能够显著抑制肺鳞癌细胞株SK-MES-1的增殖、侵袭和转移能力。

肌动蛋白相关蛋白2/3复合体的结构、功能与调节

微丝参与了细胞形态维持及细胞运动等多种重要的细胞过程。微丝由肌动蛋白单体组装而成 ,肌动蛋白相关蛋白 2 / 3(Arp2 /Arp3,Arp2 / 3)复合体在微丝形成过程中起重要作用。Arp2 / 3复合体由 7个亚单位组成 ,在细胞内受到多种核化促进因子的调节 ,并与这些因子协同作用来调节肌动蛋白的核化。Arp2 / 3复合体结构、功能及调节的研究对于阐明微丝形成机制及细胞骨架与某些信号分子的关系有重要意义。

肌动蛋白相关蛋白2/3复合体在肿瘤中的研究进展

肌动蛋白相关蛋白2/3(actin related protein 2/3,ARP2/3)复合体参与肌动蛋白的核聚与解聚,影响细胞运动能力,在形成细胞骨架和癌细胞侵袭性伪足等过程中起着重要作用。最近的研究发现ARP2/3复合体在多种肿瘤中表达异常,并与肿瘤的发展、侵袭、转移、预后密切相关。

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

适配器相关蛋白复合物1亚基Mu2在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨适配器相关蛋白复合物1亚基Mu2(AP1M2)表达与结肠癌患者临床病理特征的相关性。方法收集2017年1-12月连云港市第二人民医院行根治性手术治疗的97例结肠恶性肿瘤患者的癌组织及癌旁组织。收集患者临床病理特征资料,采用免疫组化法检测结肠癌组织与癌旁组织中AP1M2蛋白的表达水平,采用酶联免疫吸附测定法检测AP1M2在血清中表达情况。分析AP1M2蛋白表达与结肠恶性肿瘤患者临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法分析结肠癌患者术后5年生存情况的影响因素;采用生物信息学分析AP1M2涉及的蛋白及相关通路情况。结果免疫组化分析发现,AP1M2在结肠癌组织中的表达高于癌旁组织;在97对标本中,结肠癌组织AP1M2高表达73例,癌旁组织AP1M2高表达43例,差异有统计学意义(P=0.004)。酶联免疫吸附测定法检测发现,结肠癌患者癌组织血清中AP1M2表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P=0.02)。肿瘤直径>5 cm、N_(1)~N_(2)分期(有淋巴结转移)、T分期的T_(3)~T_(4)期、术后5年复发患者AP1M2高表达比率分别高于肿瘤直径≤5 cm、N_(0)分期(无淋巴结转移)、T分期的T_(1)~T_(2)期、术后5年无复发患者,差异有统计学意义(P<0.05)。术后随访5年,24例AP1M2低表达患者术后5年死亡5例,而73例AP1M2高表达患者术后5年死亡24例,差异有统计学意义(P=0.005)。Cox分析显示,AP1M2是结肠癌患者术后死亡的危险因素。生物学分析显示,AP1M2与肿瘤代谢及黏附相关。结论AP1M2表达水平在结肠癌组织中及血清中上调,这与肿瘤临床分期、淋巴结转移情况相关,与结肠癌患者预后也相关。AP1M2可作为结肠癌预后的潜在预测指标。

肌动蛋白存在于金黄地鼠(Mesocricetus auratus)联会复合体中

以金黄地鼠精母细胞为材料，以抗肌动蛋白抗体为探针，应用免疫荧光和免疫胶体金技术对ＳＣ有无肌动蛋白的问题进行了研究。免疫荧光结果表明：经抗肌动蛋白抗体标记后，减数分裂粗线期标本中ＳＣ发出特异性荧光，说明肌动蛋白存在于ＳＣ中。免疫电镜结果表明：实验组ＳＣ的胶体金颗粒密度远高于对照组的金颗粒密度，说明ＳＣ含有肌动蛋白。观察到，常染色体ＳＣ和性染色体ＳＣ以及偶线期和粗线期ＳＣ中都含有肌动蛋白，肌动蛋白分布于ＳＣ的端部和侧生组分上，代表肌动蛋白的胶体金颗粒在ＳＣ上往往成簇存在。对ＳＣ含有肌动蛋白的意义进行了讨论。

血清血管紧张素2和生长刺激表达基因2蛋白及末端脑利钠肽前体表达水平与扩张型心肌病患者预后的相关性分析

目的探究血清血管紧张素2(Ang2)、生长刺激表达基因2蛋白(ST2)及末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)表达水平与扩张型心肌病(DCM)患者预后的相关性。方法选取2015年3月至2019年3月于本院接受治疗的90例DCM患者作为研究组,另选取同期40名健康体检者作为对照组,比较两组Ang2、ST2、NT-proBNP表达水平。对研究组随访15个月,按照随访结果分为死亡组(n=13)、再入院组(n=28)和无再发事件组(n=49),比较3组Ang2、ST2、NT-proBNP表达水平,评估Ang2、ST2、NT-proBNP水平对DCM患者预后评估的灵敏度、特异度和一致性。采用ROC分析3种因子对DCM患者预后的临床意义。结果研究组血清Ang2、ST2、NT-proBNP水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组、再入院组血清Ang2、ST2、NT-proBNP水平均高于无再发事件组,且死亡组高于再入院组,差异有统计学意义(P<0.05)。Ang2评估预后一致性为0.86,灵敏度为90.24%,特异度为81.63%;ST2评估预后一致性为0.81,灵敏度为82.93%,特异度为79.59%;NT-proBNP评估预后一致性为0.84,灵敏度为87.80%,特异度为81.63%。血清Ang2、ST2、NT-proBNP均对扩张型心肌病患者预后具有较好的预测价值(P<0.05)。结论血清Ang2、ST2、NT-proBNP表达水平与DCM患者的预后密切相关,在心脏事件再发的评估中具有较高的临床价值,值得临床推广应用。

皮动蛋白及微丝相关蛋白2/3复合物介导的细胞运动的分子机制

皮动蛋白(cortactin)是一种含有特殊重复序列结构域的微丝肌动蛋白结合蛋白,它直接参与了细胞皮层(cortex)微丝细胞骨架的组建。它又是细胞内Src类酪氨酸蛋白激酶的主要底物之一,代表了一类高度保守的胞内皮层信号蛋白质家族。近几年来,对于细胞运动分子机制的研究取得很大进展,利用组织培养细胞进行的体外实验证明,皮动蛋白能够活化微丝相关蛋白2/3复合物(actinrelatedprotein2/3complex,Arp2/3complex),调控皮层微丝细胞骨架的组装,在细胞运动过程中具有重要作用。

主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子链相关蛋白A-自然杀伤细胞2族成员D通路及其在头颈部鳞状细胞癌中的研究进展

主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子链相关蛋白A(MICA)作为自然杀伤细胞2族成员D(NKG2D)的配体,与其特异性结合,活化以自然杀伤细胞为主的免疫效应细胞,发挥免疫监视作用。本文就近5年来有关MICA-NKG2D通路的表达、调控及其在头颈部鳞状细胞癌中的研究进展作一综述。

脂蛋白相关磷脂酶A2、D-二聚体联合检测诊断缺血性脑卒中的临床应用价值分析

目的 分析脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)、 D-二聚体(D-D)联合检测诊断缺血性脑卒中的临床应用价值。方法 选取72例缺血性脑卒中患者作为观察组,72例健康者作为对照组,比较两组的Lp-PLA2、 D-D水平;绘制ROC曲线分析Lp-PLA2、 D-D及二者联合对缺血性脑卒中的诊断效能。结果 观察组的Lp-PLA2、 D-D水平均高于对照组(P<0.05)。ROC曲线显示,Lp-PLA2、 D-D及二者联合诊断缺血性脑卒中的曲线下面积分别为0.824、 0.795、 0.939,联合检测的诊断效能最高。结论 Lp-PLA2、 D-D联合检测可提高缺血性脑卒中的诊断灵敏度、特异性,应用价值较高。

骨形态发生蛋白2介导同型半胱氨酸促进血管钙化

背景:高同型半胱氨酸血症与血管钙化之间存在一定的内部联系。但是,目前有关高同型半胱氨酸血症促进血管钙化的发病机制还不清楚。目的:探讨骨形态发生蛋白2在高同型半胱氨酸血症诱导血管钙化中的作用。方法:人颈动脉蜡块标本根据有无钙化斑块分为钙化组(n=29)与非钙化组(n=13)。16只ApoE-/-小鼠随机分为对照组和高同型半胱氨酸血症组,每组8只。骨形态发生蛋白2转染大鼠胸大动脉平滑肌A7r5细胞,然后应用梯度浓度同型半胱氨酸(50,100,200,400μmol/L)干预A7r5细胞。茜素红染色和苏木精-伊红染色法检测钙化反应,免疫荧光法检测骨形态发生蛋白2与Runt相关转录因子2相互作用关系,免疫组化法和Western blot检测骨形态发生蛋白2、Runt相关转录因子2、α-平滑肌肌动蛋白的表达。结果与结论:①人体颈动脉组织染色显示,与非钙化组比较,钙化组炎性细胞增多,钙化阳性率增加(P<0.05);与非钙化组比较,钙化组骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2表达量均上调,α-平滑肌肌动蛋白表达量下降(P均<0.05);②小鼠动脉标本染色显示,高同型半胱氨酸血症组钙化面积阳性率高于对照组(P<0.05);高同型半胱氨酸血症组血清同型半胱氨酸水平明显高于对照组(P<0.05);与对照组比较,高同型半胱氨酸血症组骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2表达量均上调,α-平滑肌肌动蛋白表达量下降(P均<0.05);③A7r5细胞培养分析,随着同型半胱氨酸浓度梯度增加,A7r5细胞钙化程度、骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2的蛋白表达增加(P<0.05),α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达降低(P<0.05);④过表达骨形态发生蛋白2的A7r5细胞培养分析,骨形态发生蛋白2过表达组较相对应的对照组、β-甘油磷酸钠组和同型半胱氨酸组钙化程度增加;Runt相关转录因子2表达上调(P<0.05),α-平滑肌肌动蛋白表达下调(P<0.05);⑤同型半胱氨酸钙化培养基培养的骨形态发生蛋白2过表达A7r5细胞中骨形态发生蛋白2表达量增加,且Runt相关转录因子2表达量随骨形态发生蛋白2表达量增加而增加;⑥结果表明,骨形态发生蛋白2是高同型半胱氨酸血症调控平滑肌细胞表型转化导致血管钙化的关键靶基因。靶向调控骨形态发生蛋白2可降低高同型半胱氨酸诱导的血管钙化。

肌动蛋白相关蛋白(ARP2/3)在神经树突棘可塑性中的研究进展

研究突触后结构——树突棘改变,是对学习记忆的重要的热点。F-actin经调节可以结合和/或解聚的动态特点是树突棘运动、生长和塑性的基础。在分枝状微丝形成过程中,肌动蛋白相关蛋白2/3(Actin-related protein2/3,ARP2/3)复合体起着重要的作用。细胞内的多种核化促进因子可以调节ARP2/3的活性。Arp2/3复合体结构、功能及调节的研究对于阐明微丝骨架形成机制,特别是树突棘的可塑性有重要意义。

着丝粒蛋白Fta2磷酸化对减数分裂的影响

在减数分裂过程中,黏连蛋白(cohesin)在着丝粒区域定位出现缺陷时会导致一系列疾病的产生。黏连蛋白的正确定位离不开装载复合体Mis4-Ssl3的参与,现已知黏连蛋白在装载复合体的帮助下完成装载过程,但是其如何在着丝粒区域定位仍不清楚。基于已有研究报道黏连蛋白在着丝粒的定位由着丝粒蛋白的磷酸化介导,本研究从Sim4着丝粒蛋白复合体组分Fta2蛋白着手,通过生物信息学手段寻找潜在的磷酸化位点,在裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中构建了fta2-9A和fta2-9D突变体,并通过噻苯咪唑(thiabendazole,TBZ)敏感度测试和荧光显微定位对其表型进行检测。结果显示,Fta2蛋白的磷酸化对有丝分裂没有影响,但对减数分裂染色体分离存在影响。本研究表明Fta2的磷酸化对减数分裂非常重要,很可能与减数分裂特有的黏连蛋白定位有关。

高糖环境下Ndufa4线粒体复合体相关蛋白2(Ndufa4l2)对小鼠视网膜感光细胞661W的影响

目的探讨高糖环境下Ndufa4线粒体复合体相关蛋白2(Ndufa4l2)对视网膜感光细胞661W功能的影响及其相关机制。方法体内实验选取C57BL/6J小鼠12只,采用随机数字表法分为糖尿病组和正常组,每组各6只,糖尿病组小鼠采用腹腔注射链脲佐菌素造模,正常组小鼠腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液。采用免疫组织化学法检测Ndufa4l2蛋白在正常组和糖尿病组小鼠视网膜中的表达情况。体外实验将661W细胞随机分组为对照组(细胞采用正常培养基培养24 h)、高糖组(细胞采用含葡萄糖浓度为50 mmol·L^(-1)高糖培养基培养24 h)、si-NC组(细胞转染si-NC无序序列后,采用正常培养基培养24 h)、si-NC+HG组(细胞转染si-NC无序序列后,采用含50 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养24 h)和si-Ndufa4l2+HG组(细胞转染si-Ndufa4l2特异敲低序列后,采用含50 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养24 h);采用qRT-PCR和Western blot检测对照组和高糖组细胞中Ndufa4l2的表达情况。CCK-8法检测si-Ndufa4l2对661W细胞活性的影响,采用活性氧(ROS)试剂盒检测si-Ndufa4l2对661W细胞中ROS水平的影响,采用乳酸检测试剂盒检测si-Ndufa4l2对661W细胞中乳酸水平的影响。结果体内实验结果表明,与正常组小鼠相比,糖尿病组小鼠视网膜中Ndufa4l2蛋白表达降低。体外实验结果显示,对照组和高糖组661W细胞中Ndufa4l2 mRNA相对表达量分别为1.001±0.069和0.356±0.071,Ndufa4l2蛋白相对表达量分别为1.000±0.078和0.795±0.070,与对照组相比,高糖组661W细胞中的Ndufa4l2 mRNA和蛋白达表水平均下降(均为P<0.05)。CCK-8法检测发现,si-Ndufa4l2+HG组661W的细胞活力低于si-NC+HG组(P<0.001)。ROS检测结果表明,si-Ndufa4l2+HG组661W细胞的荧光亮度高于si-NC+HG组。细胞上清乳酸检测结果显示,si-NC组、si-NC+HG组和si-Ndufa4l2+HG组细胞上清中乳酸含量分别为(10.470±0.140)mmol·L^(-1)、(7.480±0.270)mmol·L^(-1)和(6.080±0.240)mmol·L^(-1),si-Ndufa4l2+HG组与si-NC+HG组相比,细胞上清中乳酸含量进一步降低(P<0.001)。结论线粒体Ndufa4l2蛋白在高糖条件下低表达,Ndufa4l2水平下降会通过氧化磷酸化途径损伤细胞的代谢功能从而进一步抑制661W的细胞活力。

糖尿病足患者脂蛋白相关磷脂酶A2 D-二聚体及纤维蛋白原水平分析

目的探讨糖尿病足患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)、D-二聚体(D-D)和纤维蛋白原(FIB)水平变化及临床意义。方法 240例2型糖尿病(T2DM)患者分为糖尿病无并发症组(100例)、糖尿病足组(100例)及糖尿病足合并冠心病组(40例),同期选择30例健康者纳入健康对照组,分别进行相关指标检测,并进行比较。结果糖尿病无并发症组的LP-PLA2、DD水平明显高于健康对照组(P<0.05);LP-PLA2水平和D-D水平在糖尿病无并发症组、糖尿病足组及糖尿病足合并冠心病组中逐步升高,差异均有统计学意义(P<0.05);糖尿病足组和糖尿病足合并冠心病组的FIB水平明显高于糖尿病无并发症组(P<0.05)。结论糖尿病足患者存在明显血管壁炎症和凝血、纤溶异常。

2型糖尿病分泌型卷曲相关蛋白5与体脂参数、糖脂代谢、胰岛素抵抗及炎性反应的相关性

目的探讨分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)与2型糖尿病(DM)患者体脂参数、糖脂代谢、胰岛素抵抗及炎性反应的关系。方法选取2013年5月—2015年4月新疆医科大学第五附属医院内分泌科诊断2型DM患者90例(糖尿病组),根据体质量指数(BMI)是否≥25 kg/m^2将糖尿病组患者分为体质量正常亚组(41例)和超体质量亚组(49例)。同时选取糖耐量试验(OGTT)正常者90例(健康对照组)。检测各组SFRP5、体脂参数、糖脂代谢、胰岛素抵抗及炎性反应指标的水平并进行相关性分析。结果糖尿病组患者的FPG、2 hPG、HbA_(1c)、FINS、HOMA-IR、TG、IL-6水平均高于健康对照组(P<0.05),而HDL-C、SFRP5水平均低于健康对照组(P<0.05)。体质量正常亚组患者的FINS、HOMA-IR、TG、IL-6水平低于超体质量亚组患者(P<0.05),而HDL-C、SFRP5水平高于超体质量亚组(P<0.05)。SFRP5水平与FINS、HOMA-IR、TG、IL-6均呈负相关关系(r=-0.392、-0.517、-0.350、-0.420,P<0.05)。结论 2型糖尿病患者的SFRP5水平低于正常人群,且与FINS、HOMA-IR、TG、IL-6呈负相关关系。

急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2、超敏C反应蛋白及D-二聚体水平

目的:检测分析急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及D-二聚体(D-Dimer)水平变化及临床意义。方法:急性脑梗死患者105例(急性脑梗死组),同期体检健康人群100例(健康对照组)。平行检测两组血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer含量,比较不同组及不同程度脑梗患者上述指标水平的差异。结果:急性梗死组血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer含量明显高于健康对照组(P<0.01),且各指标水平变化呈显著正相关(r分别为0.323,0.599,0.283,P均<0.01)。重度梗死组血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer水平明显高于轻度和中度梗死组(P<0.05)。血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer含量与急性脑梗死患者病情严重程度均呈高度正相关(r分别为0.721,0.623,0.718,P均<0.01)。结论:检测急性脑梗死患者血清Lp-PLA2、hs-CRP及D-Dimer水平,对临床诊断有一定参考价值。