肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4、环氧合酶2在结直肠癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的 探讨肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)、环氧合酶2(COX2)在结直肠癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法 收集96例结直肠癌患者的病历资料,所有患者均采用免疫组织化学染色法检测ARPC4、COX2表达情况,比较不同临床特征结直肠癌患者结直肠癌组织中ARPC4、COX2阳性表达率,采用回归分析法分析结直肠癌组织中ARPC4与COX2表达的相关性,比较不同ARPC4、COX2表达情况结直肠癌患者的3年生存率。结果 结直肠癌患者中ARPC4阳性表达率为61.46%(59/96),COX2阳性表达率为59.38%(57/96)。有淋巴结转移、低分化、Ⅲ~Ⅳ期结直肠癌患者结直肠癌组织中ARPC4、COX2阳性表达率均高于无淋巴结转移、中高分化、Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结直肠癌组织中ARPC4与COX2的表达呈正相关(r=0.618,P﹤0.05)。ARPC4阳性表达结直肠癌患者的3年生存率低于ARPC4阴性表达患者,COX2阳性表达结直肠癌患者的3年生存率低于COX2阴性表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论结直肠癌组织中ARPC4与COX2的表达呈正相关,其表达与结直肠癌患者的临床特征及预后有关。

下调肌动蛋白相关蛋白2/3复合体5对肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖、侵袭和转移能力的影响

背景与目的:肌动蛋白相关蛋白2/3复合体5(actin related protein 2/3 complex subunit5,ARPC5)参与肌动蛋白的组装,影响细胞的运动能力,在形成癌细胞侵袭性伪足的过程中起到重要作用。本研究通过基因沉默手段,探讨下调ARPC5基因表达对肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖、侵袭和转移能力的影响。方法:应用阳离子脂质体转染法构建ARPC5基因沉默(si-ARPC5)的SK-MES-1肺鳞癌细胞株,qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)鉴定转染效率和表达情况。实验设置si-ARPC5实验组、空白对照组(mock组)及阴性对照组(NC组)。采用细胞技术试剂盒(cell couiting kit-8,CCK-8)法测定si-ARPC5对SK-MES-1细胞的增殖的影响;划痕修复实验测定si-ARPC5对SK-MES-1细胞迁移能力的影响;Transwell小室体外侵袭实验测定siARPC5对SK-MES-1细胞的侵袭能力的影响。结果:转染si-ARPC5后的SK-MES-1细胞在mRNA和蛋白水平上均下调ARPC5的表达。与mock组及NC组比较,si-ARPC5实验组SK-MES-1细胞增殖能力明显下降(t=7.993,t=8.681,P<0.05)。si-ARPC5实验组划痕修复率(43.32±0.23)%,而mock组和NC组划痕修复率分别为(73.11±0.43)%和(76.58±0.88)%,差异有统计学意义(t=7.348,t=10.614,P<0.05)。si-ARPC5组的SK-MES-1细胞穿膜数为(27±6)个,mock组为(101±11)个,NC组为(92±9)个。si-ARPC5组穿膜细胞数明显少于其他2组,差异有统计学意义(t=10.229,t=8.391,P<0.05)。结论:下调ARPC5基因的表达能够显著抑制肺鳞癌细胞株SK-MES-1的增殖、侵袭和转移能力。

细胞肌动蛋白聚合信号调控研究进展

细胞肌动蛋白聚合和解聚过程与细胞功能密切相关,在聚合和解聚过程中受多种信号调控和影响。介绍肌动蛋白聚合的一般概念、聚合的过程以及信号调控因子、调控机制及过程,以便深入理解肌动蛋白聚合的机制,为干预肌动蛋白聚合发现潜在的靶点,以抑制肌动蛋白的装配、削弱肿瘤细胞的迁移等运动,最终达到抑制癌细胞转移的目的。

皮层肌动蛋白结合蛋白Cortactin研究进展

皮层肌动蛋白结合蛋白Cortactin参与细胞的多种细胞活动,其中包括细胞的板状伪足突起形成、突触形成、囊泡运输、胞吐、胞吞、细胞间黏附、侵袭性、细胞迁移、运动以及细胞分裂等作用,上诉细胞过程都是通过调控各微丝的聚合而发挥相应作用,Cortactin在皮层微丝肌动蛋白的组装上发挥着不可替代的作用。Cortactin是酪氨酸激酶Scr主要底物,酪氨酸磷酸化对Cortactin功能起调节作用。Cortactin在细胞活动中的作用,表明Cortactin不仅在癌细胞运动及侵袭上发挥重要作用,在炎性反应及人体气道分泌和收缩机制上也有着重要作用。所以对Cortactin在微丝肌动蛋白的组装及磷酸化等的研究,将阐明Cortactin具体作用的机制。

肌动蛋白相关蛋白2/3复合体在慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能中的作用

目的探讨肌动蛋白相关蛋白(Arp)2/3复合体在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)小鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬功能中的作用.方法40只小鼠按随机数字表法分为健康对照组、健康Arp2/3复合体抑制剂(CK666)组、慢阻肺组及慢阻肺CK666组各10只,慢阻肺组和慢阻肺CK666组采用香烟烟雾暴露法建立慢阻肺模型,其对照组无烟雾暴露.造模90d后,取各组小鼠肺组织分离AM.流式细胞术测AM吞噬异硫氰酸荧光素标记的大肠杆菌(FITC-E.coli)的能力,以平均荧光强度(MFI)和吞噬FITC-E.coli阳性细胞百分比(吞噬%)表示;蛋白印迹法测AM的Arp2和F-肌动蛋白表达;激光共聚焦显微镜测AM的Arp2、F-肌动蛋白、吞噬的FITC-E.coli平均吸光度及Arp2和F-肌动蛋白的共定位;扫描电镜观察AM吞噬时的形态.结果慢阻肺组AM的MFI和吞噬%均显著低于健康对照组[(4702±243)比(8684±234)和(32.21±1.66)%比(65.88±1.77)%,均P<0.01];慢阻肺CK666组[(3597±307)、(22.09±1.89)%]、健康CK666组[(7446±236)、(50.09±1.64)%]均显著低于各自的对照组(均P<0.01).慢阻肺组AM的Arp2和F-肌动蛋白相对表达量均显著低于健康对照组(0.508±0.025比0.813±0.040和0.462±0.029比0.720±0.039,均P<0.01);慢阻肺CK666组(0.265±0.014)、健康CK666组(0.637±0.032)F-肌动蛋白均显著低于各自对照组(均P<0.01).慢阻肺组AM的Arp2蛋白、F-肌动蛋白、FITC-E.coli平均吸光度均显著低于健康对照组(34.43±0.56比142.83±1.90、61.59±0.70比145.93±3.05、41.49±0.33比189.17±2.60,均P<0.01);慢阻肺CK666组(37.73±1.04、28.84±2.95)和健康CK666组(137.07±1.35、157.46±1.00)F-肌动蛋白、FITC-E.coli平均吸光度均显著低于各自对照组(均P<0.01).慢阻肺组孟德斯共定位系数(MOC)显著低于健康对照组(0.395±0.014比0.880±0.002,P<0.01),慢阻肺CK666组(0.297±0.006)、健康CK666组(0.737±0.031)均显著低于各自对照组(均P<0.01).健康对照组AM伸出密集且长的丝状伪足,细胞表面突起、皱褶多;健康CK666组AM丝状伪足伸出减少且较短,表面突起、皱褶减少;慢阻肺组和慢阻CK666组AM丝状伪足伸出短小或缺失,表面突起、皱褶明显减少.基础状态和CK666干预后,AM的Arp2、F-肌动蛋白相对表达量及其MOC与MFI之间呈正相关.结论Arp2/3复合体活性下降致慢阻肺小鼠AM吞噬功能低下,且慢阻肺小鼠AM对Arp2/3复合体抑制剂更敏感.

大鲵皮肤cDNA文库构建及Arpc5l基因cDNA序列和组织表达分析

以健康大鲵背部皮肤为材料,采用Smart技术构建大鲵皮肤cDNA文库,经检测文库容量为1.50×106cfu,文库重组率为98%,插入片段平均长度约为1 kb.通过对大鲵皮肤cDNA文库的随机筛选,分离获得了大鲵肌动蛋白相关2/3复合物亚基-5样蛋白(Arp2/3 complex subunit 5-like,Arpc5l)基因cDNA序列.生物信息学分析表明,大鲵Arpc5l基因全长cDNA为699 bp,包含459 bp的开放阅读框,分子量为17 154.36,等电点(pI)为5.43;该基因编码的Arpc5l蛋白分别在7-29 AA处和44-66 AA处具有跨膜结构域及多种二级结构,且三级结构与Arp2/3 complex家族成员相似.实时定量PCR结果表明,该基因在大鲵皮肤、肌肉、肠、肝、脾、肺、胃以及肾等组织中广泛表达,且在肾、肠、肌肉中的表达量极显著高于其它组织(P<0.01).进化分析结果表明,大鲵Arpc5l氨基酸序列和小鼠(77%)等陆生动物同源性最高,和爪蟾同源性为73%,大鲵处于水生到陆生之间的过渡类型,且与陆生动物的亲缘关系更近.

潮湿环境下大鼠脾组织差异蛋白组学研究

目的:通过比较正常及潮湿环境下大鼠脾组织蛋白质谱,筛选和鉴定与湿邪有关的疾病特异性蛋白,探寻湿邪致病的生物标志物。方法:选取SD大鼠20只随机分为对照组、外湿组,每组10只。造模成功后无菌摘除脾脏,取出脾组织10mg/只,进行双向电泳实验、双向凝胶电泳图象分析,肽质量指纹图谱与电喷雾串联质谱鉴定蛋白质,分析差异蛋白质意义。结果:通过比较正常及潮湿环境下大鼠脾组织差异蛋白质,发现3个有意义的蛋白质:表达上调的有2个:载脂蛋白A-I、肌动蛋白相关蛋白2/3复合物亚基5;表达下调的有1个:结合珠蛋白。结论:正常及潮湿环境下大鼠脾组织蛋白质存在差异表达,这些差异蛋白质可能是与湿邪致病相关的疾病特异性蛋白。

老年非小细胞肺癌组织ARPC2表达及与预后关系

肌动蛋白相关蛋白2/3复合物(actin-related protein 2/3 complex, ARPC)参与肌动蛋白核聚和解聚,ARPC可以影响细胞运动能力,肌动蛋白是运动细胞伪足的重要组成部分[1]。ARPC可促进肿瘤细胞侵袭和迁移[2]。ARPC由7个亚基组成:ARP2、ARP3、ARPC1、ARPC2、ARPC3、ARPC4、ARPC5,其中ARPC2和ARPC4形成的C型结构是ARPC的中心[3]。

ARPC5在非小细胞肺癌细胞和组织中的表达及预后意义

目的肌动蛋白相关蛋白2/3复合物5(ARPC5)参与癌细胞侵袭性伪足的形成,促进癌细胞的侵袭和转移。本研究旨在探讨肌动蛋白相关蛋白2/3复合物5(ARPC5)在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞和组织中的表达特征及其与预后的相关性。方法 RT-PCR法及Western blot法检测ARPC5 m RNA及蛋白在肺癌细胞系A549、SK-MES-1、H460、95D及人正常支气管上皮细胞系HBE中的表达。免疫组化SP法检测ARPC5在133例NSCLC和25例癌旁正常组织中的表达情况,应用Kaplan-Meier曲线和Cox风险回归模型分析其与预后之间的关系。结果 ARPC5在NSCLC细胞系的m RNA及蛋白两个水平上的表达均高于正常支气管上皮细胞系。在133例NSCLC组织标本中,ARPC5阳性表达率67.7%,而在22例癌旁正常肺组织中不表达。ARPC5蛋白的表达与TNM分期和淋巴结转移密切相关(<0.01)。单因素生存分析显示ARPC5阴性表达患者5年生存率为57.8%,而阳性患2者为37.5%,差异有统计学意义(χ=8.634,<0.05);但多因素生存分析并未提示其为独立的预后指标。结论ARPC5是一种潜在的癌基因,可能参与肿瘤的转移,其表达影响患者预后但还不能成为判断肺癌预后独立指标。