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小麦胚乳细胞中肌动蛋白纤丝分布格局的荧光显微观察 被引量:1
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作者 张伟成 金仕萍 严文梅 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1995年第5期334-338,共5页
以异硫氰四甲基罗丹明-鬼笔环肽为探针,结合电视显微镜术对呈现原生质胞间运动的小麦(Triticum aestivum L.)胚乳细胞胞质中肌动蛋白纤丝(AFs)的存在与分布格局进行了观察与分析。结果表明,AFs以多种形... 以异硫氰四甲基罗丹明-鬼笔环肽为探针,结合电视显微镜术对呈现原生质胞间运动的小麦(Triticum aestivum L.)胚乳细胞胞质中肌动蛋白纤丝(AFs)的存在与分布格局进行了观察与分析。结果表明,AFs以多种形式在胚乳细胞内呈区域性分布:胞核为AFs网络所包围,AFs成束由核周向四处辐射直抵周质层,大量纤细AFs在胞质皮层内呈无序的密集分布以及腹沟区细胞内AFs梭状体的大量汇集。联系胞质组分在胞间运动中的动态与胞质纤索对CB处理的反应。 展开更多
关键词 肌动蛋白纤丝 胚乳 原生质胞间运动 小麦 分布
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凤眼莲柱头细胞中肌动蛋白纤丝分布形式的荧光显微观察
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作者 张伟成 金仕萍 严文梅 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1993年第6期429-434,共6页
以异硫氰酸荧光素-鬼笔环肽为探针对未经固定的花期凤眼莲(Eichhornia crassipes (Mort)Solms)柱头细胞内肌动蛋白纤丝的存在形式进行荧光显微观察。结果表明,在外延呈指状的柱头乳突细胞中肌动蛋白具有明显的区域性分布特征:在基部呈... 以异硫氰酸荧光素-鬼笔环肽为探针对未经固定的花期凤眼莲(Eichhornia crassipes (Mort)Solms)柱头细胞内肌动蛋白纤丝的存在形式进行荧光显微观察。结果表明,在外延呈指状的柱头乳突细胞中肌动蛋白具有明显的区域性分布特征:在基部呈具强烈荧光的梭状体散在分布;中段富含细胞质,大量粗细不等的肌动蛋白纤丝以大体平行于纵轴的方向构成密集的网络,并渐次集束向顶部延伸;顶端区肌动蛋白纤丝分布稀疏,且常出现弥散状特异荧光。进而发现,周质层中存在着由极细纤丝相互平行或局部相交形成的网络,自基部向顶端呈螺旋状分布。联系柱头细胞中活跃的原生质流动、溶质从细胞基部大量向上运转与在顶端分泌外排以及维持指状细胞周质层的结构完整与稳定,付论了肌动蛋白纤丝分布和存在形式与这些生理活动间的可能联系。 展开更多
关键词 肌动蛋白纤丝 凤眼莲 柱头
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用非固定的荧光探针方法观察紫萼花粉管肌动蛋白纤丝的形式 被引量:5
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作者 朱澂 李春贵 胡适宜 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1991年第1期1-6,共6页
用非固定的、二甲基亚砜作为渗透剂的、异硫氰四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽染色方法,观察了紫萼(Hosta caerulea Tratt.)未萌发的花粉粒及不同生长时期的花粉管中的肌动蛋白纤丝的形式。显示未萌发的花粉粒中具有结晶状的梭状体,为肌动... 用非固定的、二甲基亚砜作为渗透剂的、异硫氰四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽染色方法,观察了紫萼(Hosta caerulea Tratt.)未萌发的花粉粒及不同生长时期的花粉管中的肌动蛋白纤丝的形式。显示未萌发的花粉粒中具有结晶状的梭状体,为肌动蛋白的一种贮藏形式。花粉萌发时,这种梭状体转移到短的花粉管中,逐渐松解、分支和形成肌动蛋白纤丝交错的网络。在花粉管迅速生长和达到一定长度时,肌动蛋白纤丝形成以与花粉管长轴平行的细丝占优势的网络系统,这是在大多数情况中紫萼花粉管典型的肌动蛋白纤丝的形式。在某些条件下,在花粉管接近顶端的前部,肌动蛋白纤丝可集合成长的粗束,这种粗束也常有分支和并合。肌动强白纤丝一直分布到花粉管的末端。讨论了研究肌动蛋白纤丝的非固定方法的重要性和进一步研究花粉管肌动蛋白纤丝值得注意的问题。 展开更多
关键词 肌动蛋白纤丝 F1-Ph 花粉管 紫萼
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黄芪多糖对食管鳞状细胞癌细胞肌动蛋白细胞骨架的影响
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作者 林珏龙 沈志忠 +3 位作者 庄冰蓉 朴中贤 李伟秋 林丽吟 《汕头大学医学院学报》 2021年第4期235-238,共4页
目的:观察黄芪多糖对食管鳞状细胞癌细胞肌动蛋白细胞骨架的影响。方法:利用荧光素异硫氰酸酯标记的鬼笔环肽标记食管鳞状细胞癌KYSE-150的纤丝状肌动蛋白(F-actin),经激光共聚焦显微镜观测黄芪多糖诱导后KYSE-150细胞内F-actin骨架的... 目的:观察黄芪多糖对食管鳞状细胞癌细胞肌动蛋白细胞骨架的影响。方法:利用荧光素异硫氰酸酯标记的鬼笔环肽标记食管鳞状细胞癌KYSE-150的纤丝状肌动蛋白(F-actin),经激光共聚焦显微镜观测黄芪多糖诱导后KYSE-150细胞内F-actin骨架的变化。结果:KYSE-150的细胞膜F-actin骨架呈粗大束状。经黄芪多糖诱导后,细胞膜内层F-actin骨架变得纤细、丰富,大量的F-actin纤维支撑起细胞膜,促使细胞膜形成丰富的微绒毛状结构,增加了细胞膜间的接触面积,细胞间不易相互侵入。结论:黄芪多糖诱导食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞F-actin骨架的重构,有可能促使癌细胞的良性转化。 展开更多
关键词 黄芪多糖 食管鳞状细胞癌 纤丝肌动蛋白
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清肠栓对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜纤丝状肌动蛋白的影响 被引量:4
5
作者 卢璐 谢建群 +1 位作者 袁建业 裘世轲 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2012年第11期485-488,共4页
[目的]探讨复方中药清肠栓对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜纤丝状肌动(F-actin)蛋白的修复作用。[方法]清洁级雄性SD大鼠36只,随机分为正常组,模型组,柳氮磺胺吡啶(SASP)组,清肠栓高、中、低剂量组,每组6只。选用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导... [目的]探讨复方中药清肠栓对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜纤丝状肌动(F-actin)蛋白的修复作用。[方法]清洁级雄性SD大鼠36只,随机分为正常组,模型组,柳氮磺胺吡啶(SASP)组,清肠栓高、中、低剂量组,每组6只。选用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的UC大鼠模型,采用免疫荧光的方法观察各组大鼠结肠黏膜F-actin蛋白的表达,并运用图像分析软件进行平均光密度测定,观察清肠栓对UC大鼠结肠屏障的修复作用。[结果]UC发病对结肠黏膜细胞骨架系统严重损害,模型组大鼠结肠黏膜F-actin蛋白几乎完全被破坏,荧光染色暗淡。图像分析测其平均光密度较正常组明显降低(P<0.01)。清肠栓能不同程度减轻UC黏膜的破坏,改善F-actin蛋白的分布,并使其表达升高(P<0.01)。[结论]清肠栓能有效地调节肠黏膜屏障功能,有效抑制UC大鼠结肠通透性的升高,改善肠黏膜屏障功能,促进溃疡愈合。 展开更多
关键词 清肠栓 结肠炎 溃疡性 纤丝肌动蛋白
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腺病毒介导的shRNA下调PTEN表达对活化肝星状细胞骨架蛋白F-actin的影响 被引量:5
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作者 郝礼森 宋小杰 +5 位作者 章广玲 王静 刘博 张朋垒 张明婷 靳丽敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期557-561,566,共6页
目的:探讨腺病毒介导的shRNA下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)基因表达对体外培养的活化肝星状细胞(HSC)纤丝状肌动蛋白(F-actin)的影响。方法:体外培养大鼠活化HSC(HSCT6),将携带靶向PTEN的RNA干扰序列[短发夹RNA(shR... 目的:探讨腺病毒介导的shRNA下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)基因表达对体外培养的活化肝星状细胞(HSC)纤丝状肌动蛋白(F-actin)的影响。方法:体外培养大鼠活化HSC(HSCT6),将携带靶向PTEN的RNA干扰序列[短发夹RNA(shRNA)]并表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒AdshRNA/PTEN及仅表达GFP的对照空病毒Ad-GFP转染HSC,实时荧光定量PCR及Western blotting实验检测HSC的PTEN mRNA及蛋白表达;利用激光扫描共聚焦显微镜检测HSC的形态、F-actin的分布及荧光强度、伪足以及应力纤维的变化,并采用钙荧光探针Rhod-2/AM负载检测HSC内Ca^(2+)浓度的变化。实验分为对照(control)组(在腺病毒转染步骤以DMEM代替腺病毒液)、Ad-GFP组(转染表达GFP的空病毒Ad-GFP)和Ad-shRNA/PTEN组(转染重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN)。结果:靶向PTEN的shRNA成功转染体外活化HSC,显著下调HSC的PTEN mRNA及蛋白表达(P<0.05);PTEN表达下调使活化HSC呈星形向四周伸展,F-actin排列紧密规则,数量增多,伪足充分向外伸展,应力纤维丝增长增粗;Ad-shRNA/PTEN组F-actin的荧光强度较control组及Ad-GFP组显著增强(P<0.05),而control组与Ad-GFP组间差异无统计学显著性;Ad-shRNA/PTEN组HSC内Ca^(2+)浓度较control组及Ad-GFP组明显升高(P<0.05),而control组与Ad-GFP组间差异无统计学显著性。结论:PTEN表达下调使体外活化肝星状细胞骨架蛋白F-actin的形成及细胞骨架的重构增强,并增加了HSC内的Ca^2浓度。 展开更多
关键词 PTEN RNA干扰 肝星状细胞 细胞骨架 纤丝肌动蛋白
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合成红藻氨酸对星形胶质细胞微丝表达及缝隙连接的影响 被引量:1
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作者 张洁 许华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期937-941,共5页
目的:研究合成红藻氨酸(synthetic kainic acid,SKA)对星形胶质细胞(astrocytes,AST)细胞骨架微丝表达及缝隙连接的影响。方法:取1日龄Wistar乳鼠大脑,差速贴壁法去除成纤维细胞,并利用振荡分离法去除少突胶质细胞,获得高纯度的AST细胞... 目的:研究合成红藻氨酸(synthetic kainic acid,SKA)对星形胶质细胞(astrocytes,AST)细胞骨架微丝表达及缝隙连接的影响。方法:取1日龄Wistar乳鼠大脑,差速贴壁法去除成纤维细胞,并利用振荡分离法去除少突胶质细胞,获得高纯度的AST细胞。将SKA和其它干涉剂与AST细胞共培养24 h后,用激光扫描共聚焦显微镜观察SKA对骨架蛋白中纤丝状肌动蛋白(F-actin)形态学及表达量的影响,并观察缝隙连接通道阻滞剂1-庚醇(1-heptanol,1-Hep)对SKA作用的影响。结果:和对照组相比,KCl组和KCl+SKA组的荧光强度均明显增强(P<0.01),后者更明显(P<0.01);镜下这2组的F-actin细丝状物较对照组明显增多、增粗、密集,KCl+SKA组更甚。1-Hep可明显降低KCl和SKA所致的F-actin表达,镜下所有1-Hep组可见细胞内部分丝状断裂,有些呈横切状。结论:SKA诱发癫痫的机制可能与其诱发AST细胞中F-actin的增多有关,细胞间缝隙连接可能参与了SKA诱发癫痫的过程。 展开更多
关键词 合成红藻氨酸 星形胶质细胞 纤丝肌动蛋白 缝隙连接 1-庚醇
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晚期糖基化终产物通过调控F-actin/YAP抑制小鼠胚胎成骨细胞成骨分化
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作者 吴培连 胡赟 +1 位作者 刘东蓉 郑雷蕾 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期490-496,共7页
目的考察晚期糖基化终产物(AGE)对小鼠胚胎成骨细胞系MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响及其作用机制。方法用不同质量浓度(100、200、300 mg/L)AGE作用于MC3T3-E1细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用碱性... 目的考察晚期糖基化终产物(AGE)对小鼠胚胎成骨细胞系MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响及其作用机制。方法用不同质量浓度(100、200、300 mg/L)AGE作用于MC3T3-E1细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用碱性磷酸酶(ALP)染色检测细胞成骨能力,采用qPCR检测成骨相关基因(骨钙素、ALP和Runx2)及Yes相关蛋白(YAP)和β-联蛋白的mRNA表达,采用蛋白质印迹法检测YAP和β-联蛋白的蛋白质表达,采用免疫荧光法观察YAP和β-联蛋白的细胞核内含量及细胞骨架蛋白纤丝状肌动蛋白(F-actin)的表达。结果MC3T3-E1细胞在200、300 mg/L AGE处理后增殖活性降低、凋亡率增加(P均<0.05),100 mg/L AGE对细胞增殖和凋亡无明显影响,故选取100 mg/L AGE进行实验。在成骨诱导培养条件下,与对照组相比,MC3T3-E1细胞经100 mg/L AGE处理后ALP染色较浅,骨钙素、ALP和Runx2的mRNA表达均较低(P均<0.05)。在常规培养条件下,与对照组相比,MC3T3-E1细胞经100 mg/L AGE处理后F-actin形态和分布发生明显改变;YAP的mRNA和蛋白质表达均无明显变化,但其细胞核内含量减少;β-联蛋白的mRNA和蛋白质表达均降低(P均<0.05),但其细胞核内含量无明显变化。结论AGE能抑制MC3T3-E1细胞的增殖活性,诱导细胞凋亡,降低成骨分化能力,F-actin、YAP和β-联蛋白参与其调控过程。 展开更多
关键词 晚期糖基化终产物 MC3T3-E1细胞 成骨分化 纤丝肌动蛋白 Yes相关蛋白 β-联蛋白
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Human cytomegalovirus induces alteration of β-actin mRNA and microfilaments in human embryo fibroblast cells 被引量:2
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作者 林茂芳 魏国庆 +1 位作者 黄河 蔡真 《Journal of Zhejiang University Science》 CSCD 2004年第6期733-737,共5页
Objective: To investigate the infection of human embryo fibroblast cell line HF cells by CMV as well as the effects of CMV on β-actin mRNA and microfilaments. Methods: HF cells shape was observed after the infection ... Objective: To investigate the infection of human embryo fibroblast cell line HF cells by CMV as well as the effects of CMV on β-actin mRNA and microfilaments. Methods: HF cells shape was observed after the infection of CMV.RT-PCR assay was used to detect the mRNA expression of CMV immediate early (IE) gene, β-actin and GAPDH genes of HF cells infected by CMV. CMV particles and cell microfilaments were detected with electron microscope. Results: Shape of HF cell changed after the infection by CMV. HF cells infected by CMV could express IE mRNA and the expression of β-actin mRNA decreased in a time-and titer-dependent manner compared with the uninfected HF cells whose expression of GAPDH mRNA did not change much. CMV particles were found with electron microscope in the cells. Microfilaments were ruptured and shortened after the infection of CMV. Conclusion: CMV can not only infect human embryo fibroblast cells line HF cells and replicate in the cells, but can also affect the expression of β-actin mRNA and the microfilaments. 展开更多
关键词 CYTOMEGALOVIRUS Human embryo fibroblast cells INFECTION Β-ACTIN MICROFILAMENT
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In situ Localization and Isolation of Actin Filaments from Pollen Tubes of Amaryllis vittata Ait
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作者 蔡雪 董云洲 《Developmental and Reproductive Biology》 1994年第2期64-69,T001,T002,共8页
Actin filaments (AFs) in un-fixed pollen tubes of Amaryllis vittata Ait were visualized after TRITC-phalloidin staining with DMSO as a permeabilising agent. Typically, strands or hundles of microfilaments (Mfs) were d... Actin filaments (AFs) in un-fixed pollen tubes of Amaryllis vittata Ait were visualized after TRITC-phalloidin staining with DMSO as a permeabilising agent. Typically, strands or hundles of microfilaments (Mfs) were distributed in the extreme tip as well as pollen tubes in a form of network.Fluorescent granules or circles of various sizes were frequently found that continued with the filamentous structures. In addition, a more brightly stained structure, possibly Mf organizing center, was observed. Treatment of pollen tubes with cytochalasin D(CD)for increasing time intervals (5-40 minutes) caused gradual reduction of strands until flurescent granules filled up the pollen tubes. Mcanwhile, cytoplasmie streaming was inhibited completely. Though closely associated with vegetative nuclei (VN) and generative cells (GC), AFs were not found in the cytoplasm of GC.Mg++concentration greatly affected the isolated Mfs. 展开更多
关键词 Actin filament Pollen tube TRITC-phalloidin Cytochalasin D ISOLATION Mg ̄(++) Amaryllis vittata Ait.
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