血清长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1水平与钙化性主动脉瓣狭窄病人左心室功能的相关性研究

目的 分析血清长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)表达水平与钙化性主动脉瓣狭窄(CAS)病人左心室收缩及舒张功能的相关性。方法 于2020年1月至2021年12月,选取中国中医科学院广安门医院就诊的CAS病人129例作为CAS组[左心室射血分数(LVEF)≥50%],同期该院健康志愿者130例作为对照组。收集病人人口学资料、超声及实验室生化指标,检测血清lncRNA AFAP1-AS1表达。受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清lncRNA AFAP1-AS1诊断CAS效能。结果 对照组血清lncRNA AFAP1-AS1表达水平(1.15±0.18)低于CAS组(1.58±0.30)(P<0.001)。轻度狭窄者血清lncRNA AFAP1-AS1表达水平(1.37±0.26)低于中、重度狭窄者,而中度狭窄者lncRNA AFAP1-AS1表达水平(1.59±0.30)低于重度狭窄者(1.79±0.34)(P<0.001)。ROC结果显示,血清lncRNA AFAP1-AS1诊断CAS、重度狭窄的曲线下面积分别为0.86[95%CI:(0.82,0.91)]、0.88[95%CI:(0.82,0.94)]。CAS组AVA水平低于对照组(P<0.001),左室舒张末期内径(LVEDD)、左室舒张末期容积(LVEDV)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)、左房前后径(LAD)、主动脉瓣平均压差(PGmean)、主动脉瓣峰值流速(Vmax)水平高于对照组(均P<0.001)。相关性分析显示,血清lncRNA AFAP1-AS1与LVEDD、Vmax、二尖瓣口舒张早期血流速度峰值(E峰)、二尖瓣口舒张晚期血流速度峰值(A峰)、LVEDV、PGmean、LVESD呈正相关(r=0.60、0.66、0.72、0.68、0.56、0.57、0.50,均P<0.001),与LVEF、AVA呈负相关(r=-0.78、-0.62,均P<0.001)。结论 CAS病人血清lncRNA AFAP1-AS1表达水平升高,与CAS病情严重程度以及左心室舒张、收缩功能有关,并可作为无创血清标志物辅助临床诊断CAS。

非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA对子宫内膜癌的诊断价值

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA(AFAP1-AS)在子宫内膜癌(EC)中的表达意义,并分析其对EC的诊断价值。方法选取郑州人民医院2017年1月至2022年1月收治的45例确诊的EC患者为研究对象,作为观察组,选择同期确诊为子宫肌瘤并接受子宫切除手术的50例患者为对照组。收集观察组癌组织和对照组正常子宫内膜组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测2组患者组织样本中LncRNAAFAP1-AS表达水平,分析其在不同临床病理特征癌组织中的表达情况,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析LncRNA AFAP1-AS对EC的诊断价值。结果EC患者癌组织中LncRNA AFAP1-AS相对表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(t=37.106,P<0.001)。FIGOⅢ~Ⅳ期、病理Ⅲ级、肌层深浸润均为EC患者LncRNA AFAP1-AS高表达的危险因素(OR=0.172,P=0.044;OR=0.151,P=0.014;OR=0.214,P=0.040)。ROC曲线显示,LncRNA AFAP1-AS对EC具有较高诊断价值,诊断曲线下面积、敏感性、特异性和临界值分别为0.872、75.56%、92.00%、4.065。结论LncRNA AFAP1-AS与EC的发生发展以及临床病理特征具有密切联系,可为EC临床诊断和预后评估提供参考。

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法将人绒毛膜癌细胞JEG-3随机分为空白对照组、空白载体组和LncRNA AFAP1-AS1过表达组。空白对照组细胞未做任何处理,空白载体组细胞转染空白载体,LncRNA AFAP1-AS1过表达组细胞转染LncRNA AFAP1-AS1过表达载体。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,采用细胞计数试剂盒-8实验、Transwell小室实验及流式细胞术检测JEG-3细胞的增殖、迁移和凋亡情况。结果 LncRNA AFAP1-AS1过表达组JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白相对表达量均高于空白对照组和空白载体组(P <0. 05);空白对照组和空白载体组JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA及蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。LncRNA AFAP1-AS1过表达组细胞增殖能力、透过分子筛的细胞数显著低于空白对照组和空白载体组,细胞凋亡率显著高于空白对照组和空白载体组(P <0. 05);空白对照组与空白载体组细胞增殖能力、透过分子筛的细胞数及细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P>0. 05)。结论 LncRNA AFAP1-AS1可上调人绒毛膜癌JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA及蛋白水平,对JEG-3细胞的增殖及迁移有抑制作用,同时可诱导其凋亡。

肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA 1:一种新的致癌长链非编码RNA

肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA 1(AFAP1-AS1)为一个新发现的促癌长链非编码RNA(lnc RNA)。AFAP1-AS1定位于人类4号染色体4p16.1区域,被证实在食管癌、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌、卵巢癌、结直肠癌、胆道癌、胃癌、肝细胞癌、乳腺癌、舌鳞状细胞癌、视网膜母细胞瘤、胶质瘤和骨肉瘤等多种肿瘤组织中表达上调。AFAP1-AS1过表达与肿瘤大小、淋巴转移、远处转移、TNM分期及不良预后等恶性肿瘤临床病理特征密切相关。此外,AFAP1-AS1可通过调控AFAP1和EMT相关基因、Rho/Rac代谢通路、PTEN/p-AKT通路等促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,影响细胞周期进程及抑制细胞凋亡等。

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其相关功能

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其对OSCC细胞生物行为学的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测OSCC患者(55例)癌组织、癌旁正常黏膜组织及人口腔鳞状细胞癌SCC25、人正常口腔角质细胞株(NOK)细胞中lncRNA AFAP1-AS1的表达,分析AFAP1-AS1与OSCC患者病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier生存曲线分析AFAP1-AS1与患者预后的关系。AFAP1-AS1 siRNA转染SCC25细胞,细胞计数(CCK-8)及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭的变化,蛋白质印迹(Western blot)检测侵袭相关蛋白、肌动蛋白纤维相关蛋白1(AFAP1)及Rho GTP酶家族成员蛋白的表达情况,免疫荧光染色检测细胞骨架肌动蛋白微丝结构的变化。结果OSCC组织中AFAP1-AS1的表达高于癌旁正常黏膜组织,SCC25细胞中AFAP1-AS1的表达高于NOK细胞(P<0.001)。AFAP1-AS1的表达与OSCC的分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),AFAP1-AS1高表达患者的生存率低于AFAP1-AS1低表达者(P<0.05)。AFAP1-AS1 siRNA转染后AFAP1-AS1的表达水平下调,SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低,AFAP1、RhoA、Rac2、Rab10、RhoGDI和Pfn1的表达上调,RhoC的表达下调,细胞骨架中应力纤维丝减少,肌动蛋白完整性丢失。结论lncRNA AFAP1-AS1在OSCC组织及SCC25细胞中高表达,与OSCC的发生进展及预后相关。下调AFAP1-AS1能够抑制OSCC的增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过调控肌动蛋白纤维丝的完整性实现的。

白术内酯Ⅲ介导的肌动蛋白相关蛋白2/3抑制肠上皮间质转化以缓解溃疡性结肠炎的研究

目的:探寻白术内酯Ⅲ(AT-Ⅲ)的关键靶点,探究肌动蛋白相关蛋白2/3(Arp2/3)抑制溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:采用有限酶切-质谱法(lip-SMap)筛选大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)特征蛋白,进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,确定AT-Ⅲ的关键靶点。脂多糖(LPS)与IEC-6共孵育模拟UC模型,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;划痕实验测定IEC-6迁移速率;蛋白质印迹法测定上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和Arp2/3含量;分子对接评估AT-Ⅲ与关键靶点的结合能力。结果:基于lip-SMap获得的特征蛋白参与调控磷脂酰肌醇3激酶-丝苏氨酸激酶(PI3K-AKT)信号通路和紧密连接(TJ)信号通路;与对照组比较,LPS组中IL-6和TNF-α释放量升高(均P<0.05),迁移速率变快(P<0.05),E-cadherin和Vimentin的表达都有不同程度的影响(均P<0.05);与LPS组比较,LPS+CK666+AT-Ⅲ组显著降低IL-6和TNF-α含量(均P<0.01),有效逆转LPS诱导的细胞迁移变化及E-cadherin和Vimentin表达(均P<0.05);分子对接显示,Arp2/3与AT-Ⅲ有较好的结合活性。结论:Arp2/3作为AT-Ⅲ的关键靶点,可通过上皮细胞-间充质转化(EMT)缓解LPS诱导的UC。

外科围术期静脉血栓栓塞症经纤维蛋白相关标志物的诊断作用研究

目的 研究外科围术期静脉血栓栓塞症(VTE)经纤维蛋白相关标志物的诊断作用。方法 选择自2020年1月至2021年12月于我院经Gaprini血栓风险评估表评分确定为高危的外科围手术期患者100例作为研究对象。其中深静脉血栓形成44例,肺栓塞56例。另选同期在医院接受体检的健康志愿者50例作为对照组,比较患者各时期D-二聚体(DD)、纤维蛋白单体(FM)及纤维蛋白原降解产物(FDP),各组各时期DD、FM和FDP,不同病情特征患者DD、FM和FDP,分析纤维蛋白相关标志物对外科围术期静脉血栓栓塞症的诊断效能。结果 患者术后第1、3、7 d的DD、FM和FDP水平较术前1 d更低,术后第3、7 d较术后第1 d更低,而术后第7 d较术后第3 d更低(P<0.05)。血栓组术前1 d、术后第1、3、7 d的DD、FM和FDP水平较非血栓组及对照组更高,且非血栓组较对照组更高(P<0.05)。不同的性别、年龄和疾病患者DD、FM和FDP比较差异不显著(P>0.05)。按照ROC曲线结果显示,DD、FM、FDP和Gaprini评分四项联合诊断外科围术期静脉血栓栓塞症的AUC是0.916,敏感度为95.28%,较单独检测的诊断价值较高。结论 外科围术期VTE患者经纤维蛋白相关标志物的诊断价值较高,作用较好,值得在临床上进行科学的推广和应用。

明睛颗粒联合雷珠单抗对湿性年龄相关性黄斑变性纤维血管膜纤维化相关蛋白表达的影响

[目的]观察明睛颗粒联合雷珠单抗玻璃体腔注射对实验性湿性年龄相关性黄斑变性(nAMD)纤维血管膜以及纤维化相关蛋白表达的影响,阐释明睛颗粒治疗nAMD的作用机制,为临床上中药联合抗血管内皮生长因子(VEGF)药物治疗提供理论依据。[方法]应用两阶段激光光凝的方法建立实验性nAMD纤维血管膜模型,将造模成功后的BN大鼠随机分为3组:模型组、抗VEGF组、明睛颗粒(MJKL)+抗VEGF组。模型组:予蒸馏水灌胃;抗VEGF组:予玻璃体腔注射雷珠单抗注射液;MJKL+抗VEGF组:予玻璃体腔注射雷珠单抗注射液,同时予明睛颗粒灌胃。10只BN大鼠不造模,常规饲养作为正常对照组。造模40 d后,采用眼底照相(FP)、眼底血管荧光造影(FFA)、光学相干断层扫描(OCT)、视网膜色素上皮(RPE)-脉络膜-巩膜铺片观察眼底病变形态、病变渗出面积及MD值;组织病理学观察视网膜结构的改变,免疫荧光法检测Collagen-1,Fibronectin,α-SMA,TGF-β1的表达及分布,qRT-PCR法检测Collagen-1mRNA,FibronectinmRNA,α-SMAmRNA和TGF-β1 mRNA的相对表达量。[结果]两阶段激光造模后40d建立纤维血管膜模型;抗VEGF组在病变渗出面积、光密度值(MD)值、病变高度均较模型组显著降低(P<0.05),病变面积及视网膜结构损伤程度显著降低;而MJKL+抗VEGF组较抗VEGF组在病变渗出的MD值、病变高度更加降低(P<0.05),病变面积及视网膜结构损伤程度也明显降低。Collagen-1,Fibronectin,α-SMA,TGF-β1的荧光强度中模型组均较正常组明显升高(P<0.05),抗VEGF组均较模型组明显降低(P<0.05);MJKL+抗VEGF组中Collagen-1,Fibronectin,TGF-β1的荧光强度较抗VEGF组明显降低(P<0.05)。Collagen-1mRNA,FibronectinmRNA,α-SMAmRNA和TGF-β1 mRNA的相对表达量中,模型组均较正常组明显升高(P<0.05),抗VEGF组均较模型组明显降低(P<0.05),MJKL+抗VEGF组均较抗VEGF组明显降低(P<0.05)。[结论]明睛颗粒联合抗VEGF药物可以通过降低Collagen-1,Fibronectin,α-SMA,TGF-β1蛋白的表达,从而较单一应用抗VEGF药物可以更好地抑制实验性nAMD纤维血管膜的生长。

血清胶质纤维酸性蛋白、甲基化CpG结合蛋白2对脑胶质瘤的诊断价值及其与病理特征的相关性分析

目的探讨血清胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)对脑胶质瘤的诊断价值及其与病理特征的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2024年1月南京医科大学附属脑科医院(南京脑科医院)收治的80例脑胶质瘤患者,将其作为胶质瘤组,选取本院同期收治的80例非胶质瘤颅内良性肿瘤患者作为对照组。应用双抗体夹心法检测两组患者血清GFAP表达水平,应用荧光定量聚合酶链反应法检测肿瘤组织MeCP2表达水平。比较脑胶质瘤患者与对照组的GFAP、MeCP2表达水平,并建立ROC曲线分析GFAP、MeCP2对脑胶质瘤的诊断价值。分析不同病理特征脑胶质瘤患者GFAP、MeCP2表达水平,并采用Spearman相关性分析GFAP、MeCP2与脑胶质瘤病理特征的相关性。结果胶质瘤组患者GFAP、MeCP2表达水平分别为(81.74±7.47)ng/L、2.31±0.31,均高于对照组[(5.35±1.32)ng/L、0.72±0.16],差异均有统计学意义(P<0.05)。绘制ROC曲线结果显示,GFAP、MeCP2、两者联合诊断脑胶质瘤的曲线下面积(AUC)分别为0.721、0.698、0.897。GFAP、MeCP2两者联合对脑胶质瘤的诊断AUC高于两者单一诊断。病理分级Ⅳ级、远处转移患者GFAP水平均高于其他分级、未远处转移,差异均有统计学意义(P<0.05)。病理分级Ⅳ级、肿瘤大小≥3 cm、远处转移患者MeCP2水平均高于其他分级、肿瘤大小<3 cm、未远处转移患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果表明,GFAP与脑胶质瘤不同病理分级、远处转移均呈正相关(r=0.579、0.378,P<0.05);MeCP2与脑胶质瘤不同病理分级、远处转移、脑胶质瘤肿瘤大小均呈正相关(r=0.657、0.457、0.384,P<0.05)。结论胶质纤维酸性蛋白、甲基化CpG结合蛋白2对于脑胶质瘤均具有重要诊断参考价值,两者联合诊断敏感度、特异度更高,且两者与脑胶质瘤的病理分级、肿瘤大小、远处转移情况密切相关。

凝集素途径激活与原发性膜性肾病外周血栓发生及纤维蛋白原相关抗原沉积的关系

目的探究原发性膜性肾病(PMN)患者肾活检组织补体凝集素途径激活与血栓栓塞发生和纤维蛋白原相关抗原(FRA)沉积的相关性。方法将2014年8月至2023年9月中日友好医院住院期间发生血栓栓塞的10例PMN患者纳入血栓组(病例组),按照病例组的年龄和临床表现,选择同期与之匹配的无血栓的PMN住院患者纳入无血栓组(对照组)。应用免疫组化对两组患者的肾活检组织进行补体凝集素途径(MBL)检测,采用单因素分析及多因素logistic回归模型,分析凝集素途径激活与血栓栓塞事件的相关性;应用免疫荧光检测肾活检组织中FRA沉积,分析PMN患者肾活检组织凝集素途径激活与FRA沉积的相关性。结果血栓组MBL沉积水平显著高于无血栓组(P=0.024),多因素logistic回归分析显示MBL沉积是血栓发生的危险因素(OR=6.888,P=0.027);MBL阳性组患者肾脏FRA沉积显著高于MBL阴性组(P=0.030)。结论在PMN中,凝集素途径补体活化是外周血栓栓塞事件发生的危险因素;凝集素途径的激活与肾小球FRA的沉积相关。

不同剂量的地龙提取物对肺纤维化小鼠肺组织波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白表达水平及纤维化程度的影响

目的探讨不同剂量的地龙提取物对肺纤维化小鼠肺组织波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白表达水平及纤维化程度的影响。方法将90只C57雄性小鼠分为空白组、模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组18只。除空白组外,其余4组通过腹腔注射百草枯建立肺纤维化模型。建模后1周,分别给予高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠灌服80 mg/(kg·d)、40 mg/(kg·d)、20 mg/(kg·d)的地龙提取物,给予空白组和模型组灌服等量的生理盐水,干预14 d。于建模后第14天、第21天和第28天,检测各组小鼠肺组织波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平;建模后第21天,采用HE染色法和Masson染色法分别观察小鼠肺组织纤维化及胶原沉积情况。结果建模后第14天、第21天及第28天,模型组小鼠肺组织的波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平均高于空白组(均P<0.05);建模后第21天、第28天,高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠肺组织的波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平均低于模型组(均P<0.05);建模后第28天,高剂量组小鼠肺组织的波形蛋白表达水平低于低剂量组,且α-平滑肌肌动蛋白表达水平均低于中剂量组与低剂量组(均P<0.05)。HE染色和Masson染色结果显示,模型组小鼠肺组织结构异常,正常肺泡结构消失,肺泡壁明显增厚,成纤维细胞增生明显,肺泡间隔和间质均可见到大量蓝色沉淀;相较于模型组,高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠肺部纤维化程度及胶原纤维沉淀程度明显减轻,肺泡结构相对完整,且高剂量组改善更明显。结论地龙提取物能有效抑制肺纤维化小鼠肺组织中波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的表达,减少肺组织胶原沉积,延缓肺纤维化的进程,且高剂量[80 mg/(kg·d)]地龙提取物的改善效果更明显。

肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1在胃癌中异常表达的意义及相关功能

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1（AFAP1-AS1）在胃癌中的表达及其临床意义,并在胃癌细胞株中验证其细胞学功能.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测我院60例胃癌患者的癌及对应癌旁组织中AFAP1-AS1的水平,分析AFAP1-AS1的表达与临床病理特征的关系;进一步使用RT-qPCR检测5个不同的胃癌细胞株中AFAP1-AS1的表达水平.对于高表达AFAP1-AS1的细胞株使用慢病毒载体下调基础表达.进而检测下调AFAP1-AS1后对细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响.结果 胃癌组织中AFAP1-AS1的相对表达量△Ct水平显著高于癌旁组织水平（6.349±1.966比3.065±1.015,P＜0.01）,且其表达与组织学分级、TNM分期、淋巴结转移水平有关（P＜0.05）;胃癌细胞株MGC-803及SGC-7901高表达（2.239±0.020及2.488±0.021）,有效干扰AFAP1-AS1的表达后可以显著抑制MGC-803及SGC-7901细胞的增殖、侵袭能力并促进凋亡（P＜0.01）.结论 AFAP1-AS1在胃癌组织中高表达.沉默AFAP1-AS1后可以显著抑制胃癌细胞的增殖、侵袭能力并促进凋亡。

肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1靶向微小RNA-545-3p调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭和转移的分子机制研究

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1?反义RNA1 (AFAP1?AS1)通过靶向微小RNA?545?3p(miR?545?3p)调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭和转移的机制.方法 收集2017年3月至2018年5月在本院行手术切除的口腔鳞癌患者组织30例,同时收集相应癌旁正常组织,实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测口腔鳞癌组织及癌旁正常组织中AFAP1?AS1和miR?545?3p表达;以口腔鳞癌SCC15细胞为研究对象,荧光素酶报告基因实验检测miR?545?3p对AFAP1?AS1活性的影响;构建AFAP1?AS1抑制表达和miR?545?3p过表达的人口腔鳞癌SCC15细胞, CCK?8实验、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果 与癌旁正常组织比较,口腔鳞癌组织中AFAP1?AS1表达升高(5.5±1.79比1.00±0.16,P<0.01),miR?545?3p表达降低(0.35±0.07比1.00±0.11,P<0. 05);双荧光素酶报告基因检测结果显示AFAP1?AS1可靶向负调控miR?545?3p表达;敲减AFAP1?AS1能明显抑制SCC15细胞增殖、迁移和侵袭能力,促进miR?545?3p的表达;过表达miR?545?3p后,明显抑制SCC15细胞增殖、迁移和侵袭能力;同时敲减AFAP1?AS1和抑制miR?545?3p表达,SCC15细胞增殖、迁移和侵袭能力明显增强.结论 lncRNA AFAP1?AS1在口腔鳞癌中高表达,通过靶向抑制miR?545?3p可调控口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力.

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA(lncRNA AFAP1-AS)在子宫内膜癌中的表达并分析其临床意义。方法收集2017年2月—2019年10月该院收集的子宫内膜癌患者112例为观察组,在子宫切除术中采集子宫内膜癌变组织样品,另因阴道异常出血而进行宫腔镜刮宫活检或因子宫肌瘤需要摘除子宫的同期患者50例为对照组,术中收集正常子宫内膜组织样品,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测lncRNA AFAP1-AS表达情况,分析lncRNA AFAP1-AS表达水平与子宫内膜癌患者临床病理特征及预后的关系。结果观察组lncRNA AFAP1-AS在子宫内膜组织中的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);lncRNA AFAP1-AS在子宫内膜癌患者子宫内膜组织中表达与患者的年龄、淋巴结转移、合并高血压疾病及合并糖尿病无相关性(P>0.05),与FIGO分期、病理分级及肌层浸润有相关性(P<0.05);lncRNA AFAP1-AS高表达组5年存活率为41.94%,显著低于低表达组存活率(71.67%),差异有统计学意义(χ^(2)=10.41,P<0.05);多因素分析显示,lncRNA AFAP1-AS表达和手术分期是影响子宫内膜癌患者预后的独立危险因素(HR=2.569,95%CI:1.727~3.812;HR=2.628,95%CI:1.386~4.983,均P<0.05)。结论 lncRNA AFAP1-AS与子宫内膜癌的发生、发展及预后密切相关,可以作为临床诊断和预后判断的一个重要参考指标。

CHA_(2)DS_(2)-VASc评分联合D-二聚体/纤维蛋白原比值对急性ST段抬高型心肌梗死相关动脉自发再通的预测价值

目的探讨CHA_(2)DS_(2)-VASc评分联合D-二聚体(D-D)/纤维蛋白原(FIB)比值(DFR)对急性ST段抬高型心肌梗死(ASTEMI)梗死相关动脉自发再通(IRA-SR)的预测价值。方法选取安庆市立医院2021年9月至2023年1月ASTEMI患者108例,入院后均行急诊冠状动脉造影及心肌梗死溶栓治疗试验(TIMI),将TIMI 2~3级纳入SR组(35例),TIMI 0~1级纳入非SR组(73例)。比较两组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、DFR水平、不同CHA_(2)DS_(2)-VASc评分患者DFR水平,分析CHA_(2)DS_(2)-VASc评分与DFR相关性及两者对ASTEMI患者IRA-SR的预测价值。结果两组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分等级存在显著差异(P<0.05);SR组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、D-D、FIB、DFR水平低于非SR组(P<0.05);SR组、非SR组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分1~2分患者D-D、FIB、DFR水平<3~4分患者<4分以上患者(P<0.05);SR组、非SR组CHA_(2)DS_(2)-VASc评分与DFR均呈正相关(r=0.600、0.790,P均<0.001);CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、DFR预测ASTEMI患者IRA-SR的AUC为0.832(95%CI0.748~0.897)、0.816(95%CI 0.730~0.884);根据2.4 ROC曲线分析中所获取最佳截断值分为高水平与低水平,CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、DFR低水平的ASTEMI患者梗死相关动脉SR可能性高于高水平患者(P<0.05);CHA_(2)DS_(2)-VASc评分联合DFR预测ASTEMI患者IRA-SR的AUC为0.907(95%CI 0.836~0.955),敏感度为71.43%,特异度为95.89%,优于二者单独预测。结论CHA_(2)DS_(2)-VASc评分联合DFR预测ASTEMI患者IRA-SR的价值较为可靠,能为临床制定治疗方案提供指导信息。

抑制Yes相关蛋白通过抑制上皮间质转化减轻CCl_(4)诱导的小鼠肝纤维化

目的探索Yes相关蛋白(YAP)可否通过调控上皮间质转化影响肝纤维化的发生发展。方法将8周龄C57BL/6小鼠18只随机分为对照组、肝纤维化模型组和YAP抑制剂维替泊芬干预组,6只/组。肝纤维化模型采用四氯化碳(CCl_(4))溶液腹腔注射8周造模;维替泊芬干预组在CCl_(4)基础上第7~9周采用维替泊芬腹腔注射干预。HE染色、Masson染色、肝脏生化学检测观察小鼠肝脏纤维化程度;转录组、蛋白组学测序及联合生信分析探明肝纤维化过程中上皮间质转化通路是否受YAP调控;免疫组化染色和Western blotting检测YAP及上皮间质转化关键基因E-cadherin、N-cadherin、Twist等表达变化。采集健康体检、慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化患者血清各60例,酶联免疫吸附法检测其中YAP、N-cadherin、Vimentin、Twist血清表达水平。C57BL/6小鼠24只随机分为对照组、肝纤维化模型组、Twist抑制剂干预组和Twist抑制剂与YAP激动剂共同干预组,6只/组。HE染色、Masson染色、网状纤维染色观察小鼠肝脏纤维化程度,Western blotting检测各组α-SMA、YAP和Twist表达变化。结果小鼠肝组织病理学结果提示肝纤维化小鼠与对照组相比肝小叶结构破坏、假小叶形成,维替泊芬干预组纤维间隔变性,部分小叶结构恢复。随肝纤维化发生,血浆ALT、AST水平显著升高(P<0.01),维替泊芬干预组肝功能改善(P<0.01)。采用肝组织转录组、蛋白组测序及联合分析找到在肝纤维化形成和维替泊芬干预过程中同时在mRNA和蛋白水平差异表达的基因,发现了N-cadherin和Twist在3组间差异具有统计学意义(P<0.05),并进行PPI分析显示YAP与E-cadherin、N-cadherin存在关联。免疫组化和Western blotting结果提示N-cadherin、Twist、Vimentin随肝纤维化形成升高,E-cadherin在肝纤维化组织中表达下降(P<0.01)。抑制YAP可下调肝组织N-cadherin、Twist蛋白表达(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者血清YAP、N-cadherin、Vimentin和Twist水平均随肝炎及肝硬化发生升高,在APRI>0.5或FIB-4>1.45患者中显著升高(P<0.01)。血清YAP在健康对照、肝炎、肝硬化患者中平均水平分别为4.09、5.69和5.36 ng/mL(P<0.01),其与N-cadherin、Vimentin、Twist水平均呈显著正相关,相关系数分别为0.626、0.435、0.526。采用Harmine抑制小鼠肝组织Twist表达,并在Harmine基础上予以YAP激动剂XMU-MP-1干预,肝组织病理学结果提示抑制Twist使肝纤维化小鼠肝组织炎症及纤维化程度减轻,同时激活YAP表达可再次加重胶原纤维沉积。Western blotting检测结果提示Harmine下调肝纤维化小鼠肝组织中α-SMA、YAP及Twist蛋白表达,同时激活YAP使肝组织α-SMA和YAP表达升高(P=0.079,P<0.05)。结论上皮间质转化是肝纤维化发生的重要机制之一,抑制YAP可通过减少上皮间质转化发生减轻肝纤维化。

血清纤维凝胶蛋白3和分泌型卷曲相关蛋白5水平在主动脉夹层动脉瘤中的临床意义

目的检测血清纤维凝胶蛋白3(Ficolin-3)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平在主动脉夹层动脉瘤(ADA)中的临床意义。方法回顾性选取2015年1月至2020年5月在四川绵阳四○四医院心脏大血管外科进行主动脉手术的112例ADA患者(Stanford A型)为ADA组,根据术后3年预后情况分为死亡组30例和存活组82例,选取同期健康体检者112例为对照组。比较各组患者血清Ficolin-3、SFRP5水平,分析ADA患者术后死亡的危险因素;ROC曲线评估血清Ficolin-3、SFRP5预测术后死亡的效能;Kaplan-Meier绘制生存曲线分析血清Ficolin-3、SFRP5不同水平与术后3年累积生存率关系。结果ADA组血清Ficolin-3、SFRP5水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。死亡组术前、术后血清Ficolin-3、SFRP5水平均低于存活组,差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线分析显示,血清Ficolin-3、SFRP5预测ADA患者术后死亡的最佳截断值分别为18.69μg/L、24.96 ng/L,曲线下面积(AUC)分别为0.870、0.861;Ficolin-3联合SFRP5预测ADA患者术后死亡的AUC为0.931,二者联合预测的AUC显著大于单独预测(P=0.029、P=0.021)。Kaplan-Meier生存分析发现,血清Ficolin-3>18.69μg/L患者3年累积生存率明显高于Ficolin-3≤18.69μg/L患者(83.58%vs 57.78%,log rankχ^(2)=10.691,P=0.001);血清SFRP5>24.96 ng/L患者3年累积生存率明显高于SFRP5≤24.96 ng/L患者(81.69%vs 58.54%,log rankχ^(2)=9.022,P=0.003)。回归分析显示,Ficolin-3水平(HR=1.847,95%CI:1.334~2.557,P=0.000)、SFRP5水平(HR=2.109,95%CI:1.441~3.085,P=0.000)、高血压(HR=1.452,95%CI:1.084~1.944,P=0.012)是影响ADA患者术后死亡的危险因素。结论Stanford A型ADA患者Ficolin-3、SFRP5水平较低,且与术后远期预后相关,二者联合检测对死亡有一定的预测效能。

低密度脂蛋白受体相关蛋白5对糖尿病合并心肌梗死患者心肌纤维化的影响

目的:探讨血清低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)对2型糖尿病(T2DM)合并急性心肌梗死(AMI)患者心肌纤维化(MF)的影响。方法:选取四川省盐亭县人民医院2021年3月至2023年11月收治的142例AMI患者,其中45例合并T2DM的患者为T2DM+AMI组,97例未合并T2DM的患者为AMI组。比较2组一般资料、LRP5表达水平、心功能指标和MF指标;采用Pearson相关分析T2DM+AMI组患者LRP5表达水平与心功能和MF指标的相关性;采用单因素有序logistic回归分析T2DM+AMI组患者LRP5表达水平对MF指标的影响。结果:T2DM+AMI组多支血管病变比例、Killip分级Ⅲ~Ⅳ级患者比例高于AMI组(P<0.05);T2DM+AMI组左室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)、心输出量(CO),二尖瓣口舒张早期和晚期血流速度峰值的比值(E/A)低于AMI组(P<0.05);T2DM+AMI组透明质酸(HA)、Ⅰ型前胶原(PCⅠ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达水平高于AMI组(P<0.05);相关分析显示,T2DM+AMI患者LRP5表达水平与LVEF、SV、CO、E/A呈负相关(r=-0.275、-0.211、-0.242、-0.234,P均<0.05),与HA、PCⅠ、PCⅢ、TGF-β1、MMP-2呈正相关(r=0.316、0.332、0.354、0.395、0.366,P均<0.05);单因素有序logistic回归分析结果显示LRP5是T2DM+AMI患者HA(OR=1.291)、PCⅠ(OR=1.273)、PCⅢ(OR=1.682)、TGF-β1(OR=1.935)、MMP-2(OR=1.643)表达水平增加的危险因素(P<0.05)。结论:T2DM合并AMI患者心功能恶化与MF程度比单纯AMI患者更加严重,LRP5表达水平增加是T2DM合并AMI患者发生MF的危险因素。

急性冠脉综合征患者血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白5水平与冠状动脉病变程度及心肌纤维化蛋白指标的相关性研究

背景急性冠脉综合征(ACS)是威胁人类健康的常见心血管疾病,严重的冠状动脉病变及心肌纤维化影响患者预后。应用无创血清学指标评估冠状动脉病变程度和心肌纤维化有助于ACS患者早期危险分层及治疗管理。目的探讨ACS患者血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白5(CTRP5)水平与冠状动脉病变程度、心肌纤维化相关蛋白指标的关系,为临床判断冠状动脉病变程度和心肌纤维化提供指导。方法选取2021年2月—2022年2月在衡水市人民医院心血管内科住院阻塞性狭窄的ACS患者184例,另选取同期行冠状动脉造影未见明显阻塞性狭窄的100例ACS患者作为对照。收集患者一般资料,行多普勒超声心动图检查,测定血清CTRP5、Ⅰ型前胶原(PCⅠ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)。将阻塞性狭窄的ACS患者按照临床诊断标准分为不稳定型心绞痛(UA)组(n=67)、ST段抬高型心肌梗死(STEMI)组(n=57)和非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)组(n=61);根据冠状动脉造影病变支数分为单支病变组(n=42)、双支病变组(n=69)和三支病变组(n=73)。根据SYNTAXⅡ评分标准分为低危组(n=77)、中危组(n=73)和高危组(n=34)。根据PCⅠ中位数分为低PCⅠ水平组(n=95)和高PCⅠ水平组(n=89),依据PCⅢ中位数分为低PCⅢ水平组(n=93)、高PCⅢ水平组(n=91)。采用多因素Logistic回归分析探究冠状动脉病变程度的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CTRP5对冠状动脉病变程度的诊断价值。结果ACS患者白细胞计数、中性粒细胞计数、中性粒细胞/淋巴细胞比值、空腹血糖(FBG)、超敏肌钙蛋白I、血清CTRP5、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、PCⅠ、PCⅢ水平高于对照患者(P<0.05)。NSTEMI组、STEMI组患者血清CTRP5、hs-CRP高于UA组(P<0.05)。三支病变组患者血清CTRP5、PCⅠ、PCⅢ、hs-CRP水平高于单支病变组、双支病变组(P<0.05)。高危组患者血清CTRP5、PCⅠ、PCⅢ、hs-CRP水平高于低危组、中危组(P<0.05)。高PCⅠ水平组血清CTRP、hs-CRP水平高于低PCⅠ水平组(P<0.05)。高PCⅢ水平组血清CTRP、hs-CRP水平高于低PCⅢ水平组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,FBG、hs-CRP和CTRP5升高是冠状动脉多支病变的危险因素(P<0.05)。血清CTRP5、hs-CRP、FBG预测冠状动脉多支病变的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.736(95%CI=0.678~0.794)、0.687(95%CI=0.625~0.748)、0.649(95%CI=0.585~0.713)。结论血清CTRP5水平对ACS患者冠状动脉病变程度具有较好的预测价值,且CTRP5水平升高与心肌纤维化的发生可能存在关联。

非酒精性脂肪性肝病合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21和分泌型卷曲相关蛋白5水平变化及其临床意义探讨

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21(FGF21)和分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平变化及其临床意义。方法2020年5月~2023年3月我院诊治的NAFLD患者101例【单纯性脂肪肝(NAFL)64例、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)25例和肝硬化(LC)12例】和NAFLD合并T2DM患者81例(NAFL 58例、NASH 16例和LC 7例),检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用ELISA法检测血清FGF21和SFRP5水平。结果NAFLD合并T2DM患者FBG、血清FINS、HOMA-IR和血清FGF21水平分别为(8.7±1.4)mmol/L、(28.9±5.8)μIU/mL、(11.1±2.7)和(304.8±36.0)pg/mL,均显著高于NAFLD患者【分别为(5.5±1.2)mmol/L、(20.8±4.1)μIU/mL、(5.1±1.5)和(267.6±34.5)pg/mL,P<0.05】,而血清SFRP5水平为(6.8±1.2)pg/mL,显著低于NAFLD患者【(10.3±2.2)pg/mL,P<0.05】;NAFLD合并T2DM患者血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平分别为(6.7±1.0)mmol/L、(3.7±0.6)mmol/L、(1.3±0.2)mmol/L和(3.4±0.8)mmol/L,与NAFLD患者【分别为(6.2±0.9)mmol/L、(4.1±0.5)mmol/L、(1.3±0.3)mmol/L和(3.2±0.7)mmol/L】比,差异无统计学意义(P>0.05);T2DM合并NAFL、合并NASH和合并肝硬化患者血清SFRP5水平分别为(7.8±1.1)pg/mL、(6.4±0.8)pg/mL和(5.1±0.7)pg/mL,显著低于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(11.9±2.1)pg/mL、(9.8±1.6)pg/mL和(8.4±1.1)pg/mL,P<0.05】,而血清FGF21水平分别为(295.6±31.2)pg/mL、(316.8±32.9)pg/mL和(353.6±36.7)pg/mL,显著高于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(255.1±32.5)pg/mL、(279.5±33.4)pg/mL和(309.7±35.8)pg/mL,P<0.05】。结论NAFLD合并T2DM患者血清FGF21水平显著升高,而血清SFRP5水平显著降低,可应用于对病情严重程度的评估,值得深入研究。