肌动蛋白结合蛋白2在人表皮生长因子受体2阳性型和三阴性乳腺癌患者中的表达及临床意义

目的探讨肌动蛋白结合蛋白2(TAGLN2)在人表皮生长因子受体2(HER2)阳性型和三阴性乳腺癌患者中的表达及临床意义。方法通过cBioPortal网站选取国际乳腺癌协会的分子分类数据库(METABRIC)中1904例浸润性乳腺癌患者的TAGLN2 mRNA表达数据和临床资料,以TAGLN2 mRNA表达值为标记,采用Kaplan-Meier法分析并计算TAGLN2 mRNA的cut-off值,根据该值将患者分为TAGLN2 mRNA高表达和TAGLN2mRNA低表达。比较不同受体表达状态乳腺癌患者TAGLN2 mRNA表达情况,比较HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者的临床特征,比较不同TAGLN2 mRNA表达情况乳腺癌患者的生存情况,采用单因素和多因素Cox回归分析HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者预后的影响因素。结果乳腺癌患者中TAGLN2 mRNA表达情况可能与雌激素受体(ER)表达、孕激素受体(PR)表达、HER2表达、HER2阳性(ER和PR阴性)、三阴性有关(P﹤0.01)。HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者确诊年龄、肿瘤直径、肿瘤分期比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同组织学分级三阴性乳腺癌患者TAGLN2 mRNA表达情况比较,差异有统计学意义(P﹤0.01)。HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者的生存情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);TAGLN2 mRNA低表达和TAGLN2 mRNA高表达HER2阳性型乳腺癌患者的生存情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);TAGLN2 mRNA低表达和TAGLN2mRNA高表达三阴性乳腺癌患者的生存情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。多因素Cox回归分析显示,淋巴结转移情况是HER2阳性型乳腺癌患者预后的独立影响因素(P﹤0.01),确诊年龄和淋巴结转移情况均是三阴性乳腺癌患者预后的独立影响因素(P﹤0.01)。单因素分析显示,TAGLN2 mRNA表达情况不是HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者预后的影响因素(P﹥0.05)。结论TAGLN2 mRNA表达情况不影响HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者预后,可能不是这两种类型乳腺癌患者潜在的预后标志物。

Circ_0072088通过靶向miR-223-3p/PFN2轴促进乳腺癌细胞的生长

目的探究环状RNA(circular RNA,circRNA)0072088在乳腺癌(breast cancer,BC)细胞中的生物学功能及其作用机制。方法在公共基因芯片数据库Gene Expression Omnibus(GEO)中下载GSE101123数据集,通过GEO2R分析得到差异基因。通过实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测BC细胞中circ_0072088的表达水平。采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)、划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测circ_0072088对BC细胞增殖、迁移和侵袭的作用。通过CircInteractome和TargetScan数据库预测circ_0072088与微小RNA223-3p(micro RNA-223-3p,miR-223-3p)、miR-223-3p与肌动蛋白结合蛋白profilin 2(PFN2)之间的靶向关系,并通过双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)实验验证circ_0072088、miR-223-3p与PFN2之间的靶向关系。结果circ_0072088在BC细胞系中的表达均显著上调。过表达circ_0072088促进BC细胞的增殖、侵袭和迁移,而上调miR-223-3p可削弱此作用。miR-223-3p是circ_0072088的下游靶点,可以被circ_0072088吸附;PFN2是miR-223-3p的靶基因,可以被circ_0072088间接正向调控。结论circ_0072088通过调节miR-223-3p/PFN2轴促进BC细胞的增殖和转移。

lncRNA SLC16A1-AS1调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA溶质载体家族16成员1反义RNA 1(lncRNA SLC16A1-AS1)调节微小RNA-532-3p(miR-532-3p)/肌动蛋白结合蛋白2(TAGLN2)信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测胶质瘤细胞中lncRNA SLC16A1-AS1表达水平,筛选最佳干预细胞系;通过荧光原位杂交实验、下拉实验、双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SLC16A1-AS1、TAGLN2与miR-532-3p的靶向调控关系。①将U251细胞分为小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、si-SLC16A1-AS1组、si-SLC16A1-AS1+NC inhibitor组、si-SLC16A1-AS1+miR-532-3p inhibitor组、miR-NC组、miR-532-3p mimics组、miR-532-3p mimics+pcDNA组、miR-532-3p mimics+TAGLN2组:检测U251细胞的增殖、迁移和侵袭变化;Western blot检测TAGLN2、E-钙黏附蛋白、波形蛋白表达水平。②小鼠体内肿瘤形成实验:验证lncRNA SLC16A1-AS1对胶质瘤生长的影响。结果lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平升高(P<0.05);U251细胞FISH实验、下拉实验、双荧光素酶基因实验证实lncRNA SLC16A1-AS1,TAGLN2与miR-532-3p存在靶向调控关系;抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p可显著抑制U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(P<0.05);抑制miR-532-3p表达或过表达TAGLN2可逆转抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p对U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化的抑制作用(P<0.05)。小鼠体内实验显示,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可显著抑制移植瘤的生长(P<0.05)。结论lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平上调,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可通过调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路,进而抑制胶质瘤的恶性进展。

科研规划,概念引领“针灸药”——一项变不可能为可能的科学成果

笔者曾在中国针灸学会实验针灸分会(南宁)学术年会(2012年8月16日)作题为《“针灸药”——关于针灸学转型研究的议论》的交流讲演,其中指出,“针灸药”仅是一个猜想。这个猜想,也是梦想。我的针灸梦是要以药的形态证明,针灸作用是有物质基础的,经得起科学质疑的。上海市针灸经络研究所杨永清团队,经十几载不懈努力,终于在基于针刺有效性的靶标发现方面取得里程碑式的突破。反映此成果的论文《Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance》(哮喘治疗新靶标肌动蛋白结合蛋白2发现和功能学研究),于2018年2月7日,在国际著名期刊《Science Translational Medicine》(科学·转化医学)作为封面文章发表[1]。

miR-3607-3p介导PFN2表达抑制宫颈癌细胞的恶性生物学行为

目的探讨miR-3607-3p对宫颈癌细胞的恶性表型的作用及相关作用机制。方法OncoLnc生物信息学网站分析miR-3607-3p的表达与宫颈癌患者预后的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人正常宫颈上皮细胞(H8)和宫颈癌细胞系(Hela、HCC94、SiHa、C33A)中miR-3607-3p的表达情况。SiHa细胞体外转染阴性对照核苷酸序列为阴性对照(NC)组,转染miR-3607-3p模拟序列为miR-3607-3p组。qRT-PCR检测转染后的SiHa细胞中miR-3607-3p表达变化。采用CCK-8法和划痕实验检测转染前后SiHa细胞的恶性生物学行为变化。qRT-PCR和Western blot检测转染前后肌动蛋白结合蛋白2(PFN2)基因表达变化,双荧光素酶报告基因实验检测miR-3607-3p与PFN2的靶向关系。结果miR-3607-3p表达水平高的宫颈癌患者生存期显著长于miR-3607-3p低表达患者(P<0.01)。与H8细胞相比,miR-3607-3p在人宫颈癌细胞系中异常低表达(P<0.05),其中SiHa细胞系中表达最低(P<0.01)。NC组和miR-3607-3p组miR-3607-3p表达分别为(1.04±0.31)和(9.28±1.76),转染miR-3607-3p模拟序列后SiHa细胞miR-3607-3p表达水平明显高于NC组(P<0.01),增殖活性和划痕愈合率明显低于NC组(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-3607-3p直接靶向结合PFN2(P<0.01)。qRT-PCR和Western blot结果显示,miR-3607-3p组的PFN2 mRNA和蛋白表达均低于NC组,增殖蛋白CDK3、CDK2表达低于NC组,上皮表型相关蛋白Claudin-1、ZO-1表达高于NC组(均P<0.01)。结论miR-3607-3p与宫颈癌患者的生存期相关,上调miR-3607-3p表达可抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖和迁移,其机制可能与靶向抑制PFN2有关。

非小细胞肺癌中PFN2的表达及其与铂类化疗敏感性的关系

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中肌动蛋白结合蛋白2(PFN2)的表达及其与铂类化疗敏感性的关系。方法:选取2014年4月至2017年3月在本院肿瘤科经气管镜或肺穿刺活检病理组织学诊断确诊的NSCLC患者128例作为研究对象,均接受铂类化疗药物治疗,收集患者手术过程中切除的癌组织及癌旁正常组织,免疫组化法检测癌组织及癌旁组织中PFN2的表达情况;分析PFN2阴阳性表达与临床病理特征的相关性;卡方检验分析PFN2阴、阳性表达与铂类化疗客观有效率的关系;Kaplan-Meier法分析PFN2与NSCLC患者3年生存期的关系;多因素COX回归模型分析影响患者预后的因素。结果:NSCLC腺癌、鳞癌组织中PFN2阳性率明显高于癌旁正常组织(85.9%vs 12.5%、89.8%vs 10.8%,均P<0.05)。NSCLC癌组织中PFN2表达与肿瘤远处转移、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。PFN2阴性表达患者治疗有效率高于PFN2阳性表达患者(62.00%vs 21.79%,P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示,PFN2阳性表达患者3年生存率低于PFN2阴性表达患者(48.72%vs 72.00%,Log-rankχ^(2)=9.548,P<0.005)。多因素COX分析显示,PFN2阳性的HR为0.759(95%CI为0.608~0.947)是影响NSCLC患者预后良的危险因素(P<0.05)。结论:PFN2在NSCLC患者癌组织中PFN2阳性率较高,与肿瘤远处转移、TNM分期、淋巴结转移及铂类化疗客观有效率密切相关。