前列腺癌和前列腺增生中α辅肌动蛋白-1的表达及其临床意义

目的探讨α辅肌动蛋白-1(α-actinin-1,ACTN1)在前列腺癌(PCa)和前列腺增生(BPH)中的表达及临床意义。方法收集2007年1月—2014年10月我校附属医院收治的PCa和BPH患者资料,按一定的入组标准筛选,采用免疫组织化学法检测30例PCa组织和30例BPH组织中ACTN1的表达情况,采用蛋白免疫印迹(Westernblot)方法检测其中的18例PCa组织和20例BPH组织中ACTN1的相对表达量。结果免疫组织化学结果显示,ACTN1在PCa和BPH两组中的阳性表达率分别为76.7%和20.0%,差异有统计学意义(P<0.01);Western blot结果显示,ACTN1在PCa组中的相对表达量(0.591±0.182)明显高于BPH组(0.037±0.052),差异有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学结果中,ACTN1在PCa中的表达在不同年龄、血清前列腺特异抗原(PSA)水平、是否有骨转移、是否有淋巴结转移患者之间差异无统计学意义(P>0.05),而在不同Gleason分级、T分期患者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ACTN1在PCa组织中的表达明显高于BPH组织,且在PCa组织中的表达与Gleason分级、T分期之间可能存在关联。

血清长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1水平与钙化性主动脉瓣狭窄病人左心室功能的相关性研究

目的 分析血清长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)表达水平与钙化性主动脉瓣狭窄(CAS)病人左心室收缩及舒张功能的相关性。方法 于2020年1月至2021年12月,选取中国中医科学院广安门医院就诊的CAS病人129例作为CAS组[左心室射血分数(LVEF)≥50%],同期该院健康志愿者130例作为对照组。收集病人人口学资料、超声及实验室生化指标,检测血清lncRNA AFAP1-AS1表达。受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清lncRNA AFAP1-AS1诊断CAS效能。结果 对照组血清lncRNA AFAP1-AS1表达水平(1.15±0.18)低于CAS组(1.58±0.30)(P<0.001)。轻度狭窄者血清lncRNA AFAP1-AS1表达水平(1.37±0.26)低于中、重度狭窄者,而中度狭窄者lncRNA AFAP1-AS1表达水平(1.59±0.30)低于重度狭窄者(1.79±0.34)(P<0.001)。ROC结果显示,血清lncRNA AFAP1-AS1诊断CAS、重度狭窄的曲线下面积分别为0.86[95%CI:(0.82,0.91)]、0.88[95%CI:(0.82,0.94)]。CAS组AVA水平低于对照组(P<0.001),左室舒张末期内径(LVEDD)、左室舒张末期容积(LVEDV)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)、左房前后径(LAD)、主动脉瓣平均压差(PGmean)、主动脉瓣峰值流速(Vmax)水平高于对照组(均P<0.001)。相关性分析显示,血清lncRNA AFAP1-AS1与LVEDD、Vmax、二尖瓣口舒张早期血流速度峰值(E峰)、二尖瓣口舒张晚期血流速度峰值(A峰)、LVEDV、PGmean、LVESD呈正相关(r=0.60、0.66、0.72、0.68、0.56、0.57、0.50,均P<0.001),与LVEF、AVA呈负相关(r=-0.78、-0.62,均P<0.001)。结论 CAS病人血清lncRNA AFAP1-AS1表达水平升高,与CAS病情严重程度以及左心室舒张、收缩功能有关,并可作为无创血清标志物辅助临床诊断CAS。

血液中细胞质肌动蛋白-1升高在急性脑梗死早期诊断中的价值

目的应用iTRAQ技术,探索急性脑梗死早期血液生物标志物。方法选取2016年7月-2018年7月就诊浙江省舟山医院的急性脑梗死患者40例,按发病时间分为5组:脑梗死1组(发病<2 h)8例,脑梗死2组(发病2~4 h)8例,脑梗死3组(发病4~6 h)8例,脑梗死4组(发病6~24 h)8例,脑梗死5组(发病24~72 h)8例;另选取3组为:短暂脑缺血性发作组(发病<2 h)和急性脑出血组(发病<2 h)各8例,以及健康对照组8例。应用iTRAQ技术,对各组血清进行检测,筛选出临床上有意义的生物标志物。结果①在脑梗死急性期发现多个差异蛋白质,主要参与165种生物学过程、35种细胞组分、38种分子功能。②这些差异蛋白质主要涉及三类生物代谢途径,包括:补体调节途径、血液凝固途径和细胞信号转导通路;细胞组分包括:细胞外空间、血小板a颗粒、脂蛋白复合体、分泌颗粒;分子功能包括:酶活性、离子类等。③脑梗死特有的生物标志物有细胞质肌动蛋白-1、血清淀粉样蛋白P、P因子、C反应蛋白、血清淀粉样蛋白A1、3-磷酸甘油醛脱氢酶,其中细胞质肌动蛋白-1最具意义。结论急性脑梗死2 h内血脑屏障紧密连接损害是一个特征性的变化,这一变化可以有效区分急性脑梗死与短暂脑缺血发作、脑出血。细胞质肌动蛋白-1可能是一种可以用于诊断急性脑梗死的特异性标志物。

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法将人绒毛膜癌细胞JEG-3随机分为空白对照组、空白载体组和LncRNA AFAP1-AS1过表达组。空白对照组细胞未做任何处理,空白载体组细胞转染空白载体,LncRNA AFAP1-AS1过表达组细胞转染LncRNA AFAP1-AS1过表达载体。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,采用细胞计数试剂盒-8实验、Transwell小室实验及流式细胞术检测JEG-3细胞的增殖、迁移和凋亡情况。结果 LncRNA AFAP1-AS1过表达组JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白相对表达量均高于空白对照组和空白载体组(P <0. 05);空白对照组和空白载体组JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA及蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。LncRNA AFAP1-AS1过表达组细胞增殖能力、透过分子筛的细胞数显著低于空白对照组和空白载体组,细胞凋亡率显著高于空白对照组和空白载体组(P <0. 05);空白对照组与空白载体组细胞增殖能力、透过分子筛的细胞数及细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P>0. 05)。结论 LncRNA AFAP1-AS1可上调人绒毛膜癌JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA及蛋白水平,对JEG-3细胞的增殖及迁移有抑制作用,同时可诱导其凋亡。

肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA 1:一种新的致癌长链非编码RNA

肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA 1(AFAP1-AS1)为一个新发现的促癌长链非编码RNA(lnc RNA)。AFAP1-AS1定位于人类4号染色体4p16.1区域,被证实在食管癌、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌、卵巢癌、结直肠癌、胆道癌、胃癌、肝细胞癌、乳腺癌、舌鳞状细胞癌、视网膜母细胞瘤、胶质瘤和骨肉瘤等多种肿瘤组织中表达上调。AFAP1-AS1过表达与肿瘤大小、淋巴转移、远处转移、TNM分期及不良预后等恶性肿瘤临床病理特征密切相关。此外,AFAP1-AS1可通过调控AFAP1和EMT相关基因、Rho/Rac代谢通路、PTEN/p-AKT通路等促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,影响细胞周期进程及抑制细胞凋亡等。

基于生物信息学分析α-肌动蛋白1在胃癌中的表达情况及临床意义

目的分析ACTN1基因在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达差异,探讨其与胃癌免疫浸润水平、预后的相关性及其可能的信号通路及互作蛋白。方法通过TCGA、GEO数据库分析ACTN1在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达差异;通过Kaplan-Meier数据库分析ACTN1与胃癌患者预后的相关性;通过Timer与TISIDB数据库分析ACTN1与胃癌免疫浸润水平的相关性;通过cBio-Portal数据库获取ACTN1在胃癌中的共表达基因,并对ACTN1及共表达基因进行GO及KEGG富集分析;通过String数据库及Cytoscape软件构建蛋白互作网络并筛选Hub基因,分析ACTN1与Hub基因的相关性。结果ACTN1基因在胃癌组织中呈现高表达;ACTN1高表达的胃癌患者总体生存率与低表达患者相比显著降低;胃癌组织中ACTN1表达量与巨噬细胞、中央记忆CD4^(+)T细胞、效应CD4^(+)T细胞、浆细胞样树突状细胞呈正相关,与活化CD4^(+)T细胞呈负相关;GO及KEGG分析显示ACTN1及共表达基因可能通过参与细胞外基质组织、细胞外结构组织、细胞连接组装等生物学过程,并与FN1、FERMT2、ITGB5、FLNA、ITGAV、ITGB1、ILK、ITGA5、PARVA等基因表达密切相关。结论ACTN1基因与胃癌患者的不良预后及肿瘤免疫浸润水平密切相关,可作为一个潜在的用于诊断及预后评估的分子生物学标志物。

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其相关功能

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其对OSCC细胞生物行为学的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测OSCC患者(55例)癌组织、癌旁正常黏膜组织及人口腔鳞状细胞癌SCC25、人正常口腔角质细胞株(NOK)细胞中lncRNA AFAP1-AS1的表达,分析AFAP1-AS1与OSCC患者病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier生存曲线分析AFAP1-AS1与患者预后的关系。AFAP1-AS1 siRNA转染SCC25细胞,细胞计数(CCK-8)及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭的变化,蛋白质印迹(Western blot)检测侵袭相关蛋白、肌动蛋白纤维相关蛋白1(AFAP1)及Rho GTP酶家族成员蛋白的表达情况,免疫荧光染色检测细胞骨架肌动蛋白微丝结构的变化。结果OSCC组织中AFAP1-AS1的表达高于癌旁正常黏膜组织,SCC25细胞中AFAP1-AS1的表达高于NOK细胞(P<0.001)。AFAP1-AS1的表达与OSCC的分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),AFAP1-AS1高表达患者的生存率低于AFAP1-AS1低表达者(P<0.05)。AFAP1-AS1 siRNA转染后AFAP1-AS1的表达水平下调,SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低,AFAP1、RhoA、Rac2、Rab10、RhoGDI和Pfn1的表达上调,RhoC的表达下调,细胞骨架中应力纤维丝减少,肌动蛋白完整性丢失。结论lncRNA AFAP1-AS1在OSCC组织及SCC25细胞中高表达,与OSCC的发生进展及预后相关。下调AFAP1-AS1能够抑制OSCC的增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过调控肌动蛋白纤维丝的完整性实现的。

LncRNA、AFAP1-AS1表达与重症肌无力发病相关性研究

目的探讨lncRNA肌动蛋白丝相关蛋1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在重症肌无力(MG)患者中的表达水平及其临床意义。方法收集2020年1月至2021年12月期间收治的35例MG患者和35例健康体检者的外周静脉血,提取外周血单个核细胞(PBMCs)中的总RNA,应用RT-PCR方法检测AFAP1 AS1的表达水平,并进一步分析在MG各亚组中AFAP1 AS1的表达水平,并分析AFAP1-AS1与定量MG评分(QMGS)之间的相关性。结果MG患者PBMCs中AFAP1-AS1的表达水平(1.498±1.136)显著高于健康对照组(0.619±0.707),差异有统计学意义(Z=-3.46,P=0.001)。AFAP1-AS1的表达水平在胸腺增生亚组(2.212±0.314)中明显高于胸腺正常组(1.076±0.197),差异有统计学意义(t=3.228,P=0.0028),在性别亚组及早发晚发亚组中差异无统计学意义。且AFAP1-AS1与QMGS评分之间不具有相关性。结论AFAP1-AS1在MG患者的PBMCs中表达水平明显上调,可视为MG新的分子诊断标志物。

长链非编码RNA AFAP1-AS1在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白-1反义RNA1(actin filamentassociated protein 1-antisense RNA1,AFAP1-AS1 RNA1)在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用Real-time PCR方法检测2010年1月至2014年12月宜昌市第二人民医院及三峡大学仁和医院手术切除的274例胃癌组织及相应癌旁正常胃组织中AFAP1-AS1的表达,并分析AFAP1-AS1表达量与临床及病理特征的关系。结果:AFAP1-AS1在胃癌组织比癌旁正常组织显著高表达(P<0.01)。AFAP1-AS1在早期胃癌组织中平均表达量明显低于进展期胃癌(P<0.01)。在不同病理类型胃癌中,AFAP1-AS1的表达量没有差异(P>0.05)。AFAP1-AS1表达量和胃癌淋巴侵袭或远处转移密切相关,在伴有淋巴结侵袭或远处转移的胃癌组织中,AFAP1-AS1明显高表达(P<0.01)。结论:AFAP1-AS1可能是胃癌发生发展的一个重要因素;有望成为新的胃癌预后标志物,用于胃癌的临床诊断和预后判断。

长链非编码RNA AFAP1-AS1在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在口腔鳞癌及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法:利用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测75例口腔鳞癌组织及其配对癌旁正常组织中lncRNA AFAP1-AS1的表达情况,并分析其与口腔鳞癌临床病理学特征之间的联系;应用小干扰RNA(siRNA)干扰lncRNA AFAP1-AS1表达,CCK-8实验检测lncRNA AFAP1-AS1对口腔鳞癌细胞株Tca8113细胞增殖能力的影响。结果:RT-qPCR检测结果显示lncRNA AFAP1-AS1在癌组织中的相对表达水平是癌旁组织的5.16倍,差异有统计学意义(P<0.01)。lncRNA AFAP1-AS1的表达与临床分期、分化程度及淋巴结转移显著相关(P<0.05)。CCK-8实验结果显示,转染48h、72h实验组A450值较对照组显著降低(P<0.01),表明siRNA沉默AFAP1-AS1表达后,抑制了Tca8113细胞的增殖。结论:lncRNA AFAP1-AS1在口腔鳞癌中的表达上调可能与口腔鳞癌的发生发展有关。

AFAP1-AS1靶向调控微小RNA-139-5p及对胰腺癌细胞迁移侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA 1(AFAP1-AS1)对胰腺癌细胞增殖和侵袭迁移的影响。方法使用GEPIA分析来自TCGA数据库和GTEx项目中胰腺癌和正常组织的AFAP1-AS1水平,Kaplan-Meier Plotter数据库分析AFAP1-AS1与胰腺癌患者临床预后的关系。采用实时定量PCR(qPCR)检测人胰腺导管细胞(hTERT-HPNE)和胰腺癌细胞(AsPC-1、PANC-1、CFPAC-1、BxPC-3和SW1990)的AFAP1-AS1水平,脂质体介导AFAP1-AS1特异性小干扰RNA(si-AFAP1-AS1)转染SW1990细胞(si-AFAP1-AS1组)并设转染阴性对照无关序列的si-NC组和仅经脂质体处理而未行转染的对照组;MTT比色法、划痕实验和Transwell小室实验检测SW1990细胞增殖、迁移和侵袭情况,双荧光素酶报告基因实验验证AFAP1-AS1与微小RNA-139-5p(miR-139-5p)的靶向关系。结果胰腺癌组织的AFAP1-AS1水平高于正常组织(P<0.05);Kaplan-Meier Plotter数据库分析结果显示,AFAP1-AS1水平与胰腺癌的总生存期无关(HR=1.53,95%CI:0.98~2.39,P=0.057),而与无复发生存期有关(HR=10.08,95%CI:1.35~75.19,P=0.006),其中AFAP1-AS1高水平者的复发风险升高。胰腺癌细胞的AFAP1-AS1水平均高于hTERT-HPNE细胞(P<0.05),选取AFAP1-AS1水平最高的SW1990细胞进行后续的干扰实验。与对照组和si-NC组相比,si-AFAP1-AS1组SW1990细胞的增殖活性在处理72 h后降低而miR-139-5p水平升高(P<0.05);si-AFAP1-AS1组的穿膜细胞数和划痕愈合率分别为(61.818±5.036)个和(21.542±2.310)%,低于对照组的(182.851±11.027)个和(81.849±4.473)%及si-NC组的(190.352±11.228)个和(78.764±3.291)%,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组和si-NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。野生型AFAP1-AS1序列和miR-139-5p模拟物共转染细胞较突变型AFAP1-AS1和miR-139-5p模拟物共转染的荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论胰腺癌组织和细胞中AFAP1-AS1高表达且可能通过靶向miR-139-5p来促进胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,进而加速癌症进程,AFAP1-AS1/miR-139-5p轴有望成为胰腺癌诊治的潜在靶点。

AFAP1-AS1与恶性肿瘤发生发展关系的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)在多种恶性肿瘤类型中异常表达,在癌症诊断和预后方面有积极的意义。肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)是lncRNA的一种,研究表明其与多种类型的恶性肿瘤相关。深入了解AFAP1-AS1在肿瘤中的作用可以为恶性肿瘤的早期筛查、诊断及治疗提供理论指导。

干扰长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制人鼻咽癌HNE2细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的研究

目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA-NC)与lncRNA AFAP1-AS1干扰组(sh-AFAP1-AS1),通过试剂盒转入对应目的片段,进行RT-PCR验证;结晶紫染色法检测细胞增殖,FCM检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平,免疫组织化学法检测VEGF表达TUNEL检测肿瘤组凋亡,将转染sh-AFAP1-AS1成功的HNE2细胞及其阴性对照细胞悬浮液分别于右腋下静脉注入裸鼠体内,以成瘤直径超过5 mm为抑制成功。2周后比较2组裸鼠肿瘤重量、AFAP1-AS1表达量、肿瘤组织细胞凋亡、VEGF表达变化。结果:sh-AFAP1-AS1细胞AFAP1-AS1表达水平和细胞增殖率低于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞凋亡率高于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞的侵袭率低于Control组(P<0.05),sh-AFAP1-AS1细胞中VEGF和MMP-9蛋白表达水平较Control组显著降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤质量、AFAP1-AS1表达量均较Control组降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤组织的细胞凋亡率高于Control组(P<0.05),肿瘤组织中VEGF表达量低于Control组(P<0.05)。结论:AFAP1-AS1可能通过调控癌细胞增殖、转移及侵袭相关蛋白表达参与NPC HNE2细胞的增殖、侵袭及转移过程。

AFAP1-AS1对结肠癌细胞增殖、凋亡和PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨长非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA 1(AFAP1-AS1)对结肠癌细胞增殖、凋亡和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法采用实时定量PCR(qPCR)检测本院手术切除的30例结肠癌组织相对于癌旁组织及结肠癌细胞(SW620、HT-29、HCT116、Caco-2和SW480)相对于人正常结肠上皮细胞NCM460的AFAP1-AS1水平。脂质体介导AFAP1-AS1特异性干扰RNA(siRNA)转染SW480细胞(si-AFAP1-AS1组)并设转染无关siRNA的SW480细胞为si-NC组和未行转染的SW480细胞为对照组,qPCR、MTT比色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测AFAP1-AS1水平、增殖活力和凋亡率,qPCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3、p-PI3K和p-Akt水平。结果结肠癌组织的AFAP1-AS1水平为2.669±0.171,高于对应癌旁组织的1.381±0.085(P<0.05)。结肠癌细胞的AFAP1-AS1水平均高于NCM460细胞(P<0.05),选取AFAP1-AS1水平最高的SW480细胞进行后续功能实验。si-AFAP1-AS1组SW480细胞的AFAP1-AS1水平和增殖活力均低于si-NC组和对照组(P<0.05)。si-AFAP1-AS1组SW480细胞的凋亡率为(19.486±0.674)%,高于对照组的(10.671±1.025)%和si-NC组的(10.224±0.683)%(P<0.05)。与对照组和si-NC组相比,si-AFAP1-AS1组的p-Akt、p-PI3K和Bcl-2水平降低,而Bax和caspase-3水平升高(P<0.05)。对照组和si-NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论结肠癌中高表达的AFAP1-AS1可能通过激活PI3K/Akt通路来促进结肠癌细胞增殖并抑制凋亡,发挥促癌功效,AFAP1-AS1有可能成为结肠癌治疗的新靶点。

lncRNA AFAP1-AS在子宫内膜癌中的表达及意义

目的研究长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA(lncRNA AFAP1-AS)在子宫内膜癌中的表达并分析其临床意义。方法收集2011年2月至2013年10月子宫内膜癌患者112例(观察组),在子宫切除术中采集子宫内膜癌变组织样品,另因阴道异常出血而进行宫腔镜刮宫活检或因子宫肌瘤需要摘除子宫的同期患者50例(对照组),术中收集正常子宫内膜组织样品,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测lncRNA AFAP1-AS表达情况,分析lncRNA AFAP1-AS表达水平与子宫内膜癌患者临床病理特征及预后的关系。结果观察组lncRNA AFAP1-AS在子宫内膜组织中的表达明显高于对照组(P<0.05);lncRNA AFAP1-AS在子宫内膜癌患者子宫内膜组织中表达与患者的年龄、淋巴结转移、合并高血压以及合并糖尿病无关(P>0.05),与FIGO分期、病理分级、肌层浸润有关(P<0.05);lncRNA AFAP1-AS高表达组5年存活率为41.94%,显著低于低表达组存活率(71.67%),差异有统计学意义(χ2=10.41,P<0.05);多因素分析显示,lncRNA AFAP1-AS表达和手术分期是影响子宫内膜癌患者预后的独立危险因素(HR=2.569,95%CI为1.727~3.812;HR=2.628,95%CI为1.386~4.983,P均<0.05)。结论lncRNA AFAP1-AS与子宫内膜癌的发生发展以及预后密切相关,可以作为临床诊断及预后判断的重要参考指标。

lncRNA AFAP1-AS1在视网膜母细胞瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在视网膜母细胞瘤(RB)组织中表达的临床意义及相关机制。方法:收集2015年12月至2019年12月于本院行眼球摘除术的RB患儿36例,取患儿RB组织以及癌旁组织作为研究样本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测组织中AFAP1-AS1表达情况。体外培养人视网膜母细胞瘤株HXO-RB44,分为对照组(不进行转染)、si-NC组(转染siRNA-NC)和si-AFAP1-AS1组(转染siRNA-AFAP1-AS1),qRT-PCR法检测HXO-RB44细胞中AFAP1-AS1表达情况,Transwell法检测HXO-RB44细胞迁移、侵袭情况,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测HXO-RB44细胞中肌动蛋白纤维相关蛋白1(AFAP1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达水平。结果:与癌旁组织相比,RB组织中AFAP1-AS1表达水平显著升高(P<0.05);RB组织中AFAP1-AS1表达水平与视神经是否浸润、分化程度、有无淋巴结转移有关(P<0.05)。对照组、si-NC组HXO-RB44细胞迁移细胞数、侵袭细胞数及细胞中AFAP1-AS1表达水平、AFAP1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与si-NC组相比,si-AFAP1-AS1组HXO-RB44细胞迁移细胞数、侵袭细胞数及细胞中AFAP1-AS1表达水平、AFAP1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:AFAP1-AS1在RB组织中高表达,与视神经浸润、分化程度、淋巴结转移相关,抑制其表达可降低AFAP1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平,进而抑制RB细胞HXO-RB44的迁移、侵袭过程,可为减少RB细胞转移提供治疗靶点。

肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1在胃癌中异常表达的意义及相关功能

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1（AFAP1-AS1）在胃癌中的表达及其临床意义,并在胃癌细胞株中验证其细胞学功能.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测我院60例胃癌患者的癌及对应癌旁组织中AFAP1-AS1的水平,分析AFAP1-AS1的表达与临床病理特征的关系;进一步使用RT-qPCR检测5个不同的胃癌细胞株中AFAP1-AS1的表达水平.对于高表达AFAP1-AS1的细胞株使用慢病毒载体下调基础表达.进而检测下调AFAP1-AS1后对细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响.结果 胃癌组织中AFAP1-AS1的相对表达量△Ct水平显著高于癌旁组织水平（6.349±1.966比3.065±1.015,P＜0.01）,且其表达与组织学分级、TNM分期、淋巴结转移水平有关（P＜0.05）;胃癌细胞株MGC-803及SGC-7901高表达（2.239±0.020及2.488±0.021）,有效干扰AFAP1-AS1的表达后可以显著抑制MGC-803及SGC-7901细胞的增殖、侵袭能力并促进凋亡（P＜0.01）.结论 AFAP1-AS1在胃癌组织中高表达.沉默AFAP1-AS1后可以显著抑制胃癌细胞的增殖、侵袭能力并促进凋亡。

肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1靶向微小RNA-545-3p调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭和转移的分子机制研究

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1?反义RNA1 (AFAP1?AS1)通过靶向微小RNA?545?3p(miR?545?3p)调控口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭和转移的机制.方法 收集2017年3月至2018年5月在本院行手术切除的口腔鳞癌患者组织30例,同时收集相应癌旁正常组织,实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测口腔鳞癌组织及癌旁正常组织中AFAP1?AS1和miR?545?3p表达;以口腔鳞癌SCC15细胞为研究对象,荧光素酶报告基因实验检测miR?545?3p对AFAP1?AS1活性的影响;构建AFAP1?AS1抑制表达和miR?545?3p过表达的人口腔鳞癌SCC15细胞, CCK?8实验、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果 与癌旁正常组织比较,口腔鳞癌组织中AFAP1?AS1表达升高(5.5±1.79比1.00±0.16,P<0.01),miR?545?3p表达降低(0.35±0.07比1.00±0.11,P<0. 05);双荧光素酶报告基因检测结果显示AFAP1?AS1可靶向负调控miR?545?3p表达;敲减AFAP1?AS1能明显抑制SCC15细胞增殖、迁移和侵袭能力,促进miR?545?3p的表达;过表达miR?545?3p后,明显抑制SCC15细胞增殖、迁移和侵袭能力;同时敲减AFAP1?AS1和抑制miR?545?3p表达,SCC15细胞增殖、迁移和侵袭能力明显增强.结论 lncRNA AFAP1?AS1在口腔鳞癌中高表达,通过靶向抑制miR?545?3p可调控口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力.

外泌体PFN1促进胃癌细胞增殖和迁移的机制研究

目的探讨肿瘤细胞外泌体肌动蛋白调节蛋白-1(PFN1)对胃癌细胞增殖、迁移的影响及其作用机制。方法使用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测正常胃上皮细胞和胃癌细胞中PFN1 mRNA和蛋白表达水平。采用CCK8实验、细胞克隆实验、划痕实验和Transwell实验评估PFN1对胃癌细胞活力以及增殖、迁移及侵袭能力的影响。采用流式细胞术检测PFN1对胃癌细胞凋亡的影响。结果PFN1在胃癌组织和胃癌细胞中表达量异常升高(P<0.001)。过表达PFN1的胃癌细胞活力增加,增殖、迁移和侵袭能力显著增强,过表达PFN1还可以使胃癌细胞凋亡减少(P均<0.001)。此外,胃癌细胞外泌体中的PFN1可以促进巨噬细胞的M2极化,并进一步增强胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的能力(P均<0.001)。结论过表达PFN1可以促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制凋亡。而胃癌细胞外泌体中的PFN1可以通过刺激巨噬细胞M2极化进一步促进胃癌的发生发展。

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA(lncRNA AFAP1-AS)在子宫内膜癌中的表达并分析其临床意义。方法收集2017年2月—2019年10月该院收集的子宫内膜癌患者112例为观察组,在子宫切除术中采集子宫内膜癌变组织样品,另因阴道异常出血而进行宫腔镜刮宫活检或因子宫肌瘤需要摘除子宫的同期患者50例为对照组,术中收集正常子宫内膜组织样品,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测lncRNA AFAP1-AS表达情况,分析lncRNA AFAP1-AS表达水平与子宫内膜癌患者临床病理特征及预后的关系。结果观察组lncRNA AFAP1-AS在子宫内膜组织中的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);lncRNA AFAP1-AS在子宫内膜癌患者子宫内膜组织中表达与患者的年龄、淋巴结转移、合并高血压疾病及合并糖尿病无相关性(P>0.05),与FIGO分期、病理分级及肌层浸润有相关性(P<0.05);lncRNA AFAP1-AS高表达组5年存活率为41.94%,显著低于低表达组存活率(71.67%),差异有统计学意义(χ^(2)=10.41,P<0.05);多因素分析显示,lncRNA AFAP1-AS表达和手术分期是影响子宫内膜癌患者预后的独立危险因素(HR=2.569,95%CI:1.727~3.812;HR=2.628,95%CI:1.386~4.983,均P<0.05)。结论 lncRNA AFAP1-AS与子宫内膜癌的发生、发展及预后密切相关,可以作为临床诊断和预后判断的一个重要参考指标。