猪旋毛虫病时间分辨荧光免疫层析试纸条的研制

应用旋毛虫混合排泄分泌蛋白(ES)和家兔IgG分别偶联铕(Eu)纳米颗粒(EuNPs)制备2个荧光探针,即EuNPs-ES探针和EuNPs-Rabbit IgG探针。将小鼠抗猪IgG与山羊抗家兔IgG分别包被于检测线与质控线上,制备时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用15头不同剂量人工感染旋毛虫猪的全血评估研制的试纸条性能。结果显示,用试纸条检测感染200、400、1000、10000条旋毛虫肌幼虫的猪全血样品时,结果均为阳性。而使用集样消化法消化对应的猪膈肌样本时,低剂量(200条)未全部检出。以上结果表明,本研究中建立的时间分辨荧光免疫层析试纸条方法相比于集样消化法具有更高的灵敏度,且操作简便,仅需5~10 min即可出结果,本研究成功建立了一种用于现场快速检测旋毛虫病的方法。

旋毛虫病荧光免疫层析检测试纸条的研制

为研制一种快速诊断旋毛虫病的免疫层析试纸条,以铕纳米颗粒作为捕获探针,共价偶联山羊抗猪Ig G抗体,并将肌幼虫期排泄分泌抗原、兔抗山羊Ig G抗体分别喷涂于检测线和质控线,制备免疫层析试纸条。结果显示:检测感染75、150、1000和50000条肌幼虫的猪血清,试纸条分别可以在感染后第60、45、35和26天检测到旋毛虫抗体阳性,其检测结果与ELISA方法一致。此外,该试纸条检测时间大大缩短,在10 min内即可完成检测。该试纸条与猪蛔虫、华支睾吸虫、猪囊虫感染猪血清均无交叉反应,特异性良好。上述结果表明,成功建立了一种快速、灵敏的旋毛虫病免疫层析诊断试纸条。