尼古丁上调Cx43致C57BL/6J小鼠肺动脉肌源性异常实验研究

目的探讨缝隙连接蛋白connexin 43(Cx43)在尼古丁致C57BL/6J小鼠肺动脉肌源性异常中的作用机制。方法将C57BL/6J小鼠随机分成4组,每组12只,分别为空白对照组(正常饮水、摄食)、0.003 mg/kg尼古丁组[腹腔注射尼古丁0.003 mg/(kg·d)]、0.03 mg/kg尼古丁组[腹腔注射尼古丁0.03 mg/(kg·d)]和0.3 mg/kg尼古丁组[腹腔注射尼古丁0.3 mg/(kg·d)]。干预时间为24周。利用微血管张力测定检测各组小鼠离体肺动脉对不同浓度梯度氯化钾KCl(20、28、39、55、77和108 mmol/L)和U46619(3×10^(-8)、10^(-7)、3×10^(-7)、10^(-6)、3×10^(-6) mol/L)的收缩反应,以及对不同浓度硝普钠SNP(10^(-8)、3×10^(-8)、10^(-7)、3×10^(-7)、10^(-6) mol/L)和吡那地尔Pina(10^(-8)、3×10^(-8)、10^(-7)、3×10^(-7)、10^(-6) mol/L)的舒张反应。HE特染观察各组小鼠肺动脉重构程度。免疫荧光检测各组小鼠肺动脉Cx43表达水平。RT-PCR和Western blot测定小鼠肺动脉Cx43的mRNA和蛋白表达水平。结果离体血管张力测定结果显示,与空白对照组相比较,分别使用0.003、0.03和0.3 mg/(kg·d)尼古丁干预C57BL/6J小鼠24周后,小鼠离体肺动脉对浓度梯度KCl和U46619的最大收缩反应均呈现不同程度的增强(P<0.05);同时小鼠离体肺动脉对浓度梯度SNP和Pina的最大舒张反应却呈现不同程度的减弱(P<0.05)。0.003、0.03和0.3 mg/(kg·d)尼古丁组肺动脉重构程度呈现浓度依赖性增加,且Cx43的免疫荧光蛋白表达均显著高于空白对照组。RT-PCR和Western blot实验结果显示,0.003、0.03和0.3 mg/kg尼古丁组肺动脉Cx43 mRNA和蛋白表达均显著高于空白对照组(P<0.05)。结论尼古丁可造成C57BL/6J小鼠肺动脉肌源性反应异常,其机制可能与上调Cx43表达有关。