对肌肉刺激性试验在病理学方面的探讨

因注射给药可能对注射部位产生刺激性反应,因此肌肉刺激性试验是静脉注射剂和肌肉注射剂药物安全性评价研究中的主要检测项目之一。病理学诊断是评价肌肉刺激性试验结果的重要依据,本文从实际工作中总结了肌肉刺激性试验中一些体会,仅供参考。

银杏达莫注射液肌肉刺激性及血管刺激性的试验研究

目的观察银杏达莫注射液的肌肉刺激性及血管刺激性,为其临床安全应用提供试验依据。方法以家兔为对象,分别采用肌肉刺激性试验及血管刺激性试验观察高剂量(实验中能够实现的最大给药浓度)和低剂量(临床推荐的最大给药浓度)下舒肝宁注射液的肌肉刺激性及血管刺激性。结果低剂量的银杏达莫注射液无明显肌肉刺激性及血管刺激性,但高剂量的银杏达莫注射液有明显的肌肉刺激性及血管刺激性。结论提示银杏达莫注射液在临床推荐剂量和浓度下使用是安全的,但若增加药物剂量或浓度则可能出现注射部位血管和肌肉组织的损伤。

硫酸头孢喹肟注射液肌肉刺激性试验

[目的]观察硫酸头孢喹肟注射液的肌肉刺激性。[方法]采用同体左右侧自身对比法,在家兔左、右腿股四头肌分别注射受试药物和生理盐水对照,于给药后48h和7d分别观察局部刺激反应。[结果]硫酸头孢喹肟注射液刺激性较小,可供肌肉注射。[结论]硫酸头孢喹肟注射液是一种安全的肌肉注射药物。

氟罗沙星葡萄糖注射液血管肌肉刺激性试验

目的:观察氟罗沙星葡萄糖注射液对血管、肌肉的刺激作用。方法:采用静脉注射血管刺激性、肌肉注射刺激性试验。结果:氟罗沙星葡萄糖注射液不引起血管、肌肉刺激性。结论:氟罗沙星葡萄糖注射液是安全的。

明胶海绵复合重组人成骨蛋白-1的骨修复材料免疫原性及肌肉刺激性实验研究

目的考察以明胶海绵为载体的重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)骨修复材料的免疫原性及肌肉刺激性。方法以明胶海绵为载体制备rhOP-1骨修复材料,间接ELISA方法观察该骨修复材料植入小鼠体内的免疫原性反应,病理切片观察其对周围肌肉的影响及形态变化。结果ELISA结果表明,此法制备的以明胶海绵为载体的rhOP-1骨修复材料未引起小鼠的特异性抗体产生。植入部位肌肉虽出现炎细胞浸润现象,但炎症反应呈可逆性,未发现肌肉组织的坏死,且组织钙化现象明显。结论明胶海绵复合rhOP-1的骨修复材料在免疫原性和肌肉刺激性方面安全可靠。

不同溶媒注射用还原型谷胱甘肽的肌肉刺激性实验

目的分别以0.9%氯化钠注射液和注射用水为溶媒,观察3个不同厂家的注射用还原型谷胱甘肽对家兔的肌肉刺激性。方法 3批注射用还原型谷胱甘肽分别用0.9%氯化钠注射液和注射用水配制成大、小浓度(0.3,0.15 g·mL^(-1))的注射液,采用家兔同体左右侧自身对比法、股四头肌注射方式,单次给药,每侧1 mL。于给药后72 h和14 d剖检观察注射局部的刺激反应并进行组织病理学检查。结果给药后72 h,0.9%氯化钠注射液作为溶媒时,受试药品1、受试药品2、受试药品3大剂量组肌肉刺激反应分别为轻度、中度、轻微,病理学检查肌肉组织出现不同程度的出血、炎症细胞浸润和肌纤维变性坏死;小剂量组肌肉刺激反应分别为无、轻微、无,病理学检查未见异常。注射用水作为溶媒时,大剂量组肌肉刺激反应均为重度,病理学检查肌肉组织均出现大量出血及炎症细胞浸润,肌纤维大范围坏死、溶解、变性;小剂量组肌肉刺激反应均为中度,病理学检查肌肉组织均出现中度出血、炎症细胞浸润和肌纤维变性。给药后14 d,家兔注射部位大体观察和病理学结果表明,受试药品2大剂量家兔肌肉有结缔组织增生和白色结节,且用注射用水作为溶媒配制受试药品比0.9%氯化钠注射液作为溶媒导致的不可逆损伤更严重;受试药品1和受试药品3未见异常,对家兔的肌肉刺激性为可逆的。结论注射用还原型谷胱甘肽用0.9%氯化钠注射液做溶媒比注射用水的肌肉刺激反应轻。

双氯芬酸钠注射液的肌肉刺激性试验

考察双氯芬酸钠注射液的肌肉刺激性,为临床安全用药提供参考。采用同体左、右侧自身比对法,对日本大耳白兔进行股四头肌注射给药,经折算,供试品双氯芬酸钠注射液给药剂量为14.39mg/kg,等体积9mg/mL氯化钠注射液用作阴性对照,每天1次,连续3d。自给药起到给药后第19天,观察试验兔的一般状况,进行注射部位解剖及组织病理学检查,综合评价其肌肉刺激性。双氯芬酸钠注射液注射后1周内对股四头肌有较强的刺激性,在给药19d后肌肉损伤可以完全恢复。双氯芬酸钠注射液符合我国《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》中注射剂对于肌肉刺激性的要求,可用于肌内注射。

注射用帕瑞昔布钠肌肉刺激性考察

目的考察注射用帕瑞昔布钠经家兔肌内给药的刺激性,为临床安全用药提供参考。方法采用家兔同体左右侧自身比对法,经股四头肌注射给药,浓度分别为20和5 mg·mL^(-1)。通过一般状况、给药局部肉眼观察、解剖观察及组织病理学检查,综合判断其肌肉刺激性。结果注射用帕瑞昔布钠显示出浓度-肌肉刺激性依赖关系,20 mg·mL^(-1)引起中度刺激且不可逆,5 mg·mL^(-1)引起轻度刺激且可逆。结论注射用帕瑞昔布钠临床使用浓度具有肌肉刺激性风险,在本试验条件下,5 mg·mL^(-1)为肌内注射安全浓度。

加米霉素注射液的溶血性与肌肉刺激性试验研究

研究旨在通过红细胞溶血试验和肌肉刺激性试验评价加米霉素注射液的安全性。采集新西兰兔血制成血细胞悬液,加入不同浓度受试药液温育3 h考察加米霉素注射液的溶血性;选用健康新西兰兔18只随机分为低、中、高剂量组,分别在各剂量组动物左侧股四头肌分别注射0.25、0.50和1.00 mL的加米霉素注射液,另外一侧注射等体积0.9%氯化钠注射液作为阴性对照组,考察加米霉素注射液的肌肉刺激性。结果显示,加入各剂量加米霉素注射液的试管中红细胞于3 h内全部下沉,上清液体澄清,未见溶血反应;各试验组给药后肉眼观察注射部位,均未发现充血、红肿等变化,动物活动正常;解剖观察发现阴性对照组和低剂量组注射部位股四头肌无明显异常,中剂量组出现有轻度充血,高剂量组出现重度充血;肌肉组织病理学检查发现阴性对照组和低剂量组注射部位组织未见明显异常,随着剂量的增加,可发现肌细胞坏死越严重,14 d时均发现不同程度的修复。研究表明,加米霉素注射液无溶血性,低剂量肌肉注射无刺激性,具有良好的安全性。

桉油栓对家兔的肌肉刺激性试验

为评价桉油栓局部用药的安全性,以家兔为受试动物进行肌肉刺激性试验,于一侧后肢股四头肌处以无菌方法注入1ml受试物,以生理盐水为对照,观察注射部位肌肉组织变化并按评分标准进行评价,结果表明,给予受试物的四块股四头肌及给予生理盐水的四块股四头肌均未发现有炎性细胞和组织变性等病理变化。结论:本实验表明桉油栓对肌肉无刺激性,肌肉刺激安全性评价良好。

统一肌肉刺激性试验实验方法的建议

肌肉刺激性试验是以肌内注射类药物为主的新药开发研制和新药申报中重要的安全性评价检查项目之一。我国已有一些实验方法被广泛使用,但内容较简约;日本厚生省于1984年推出较详实的注射用药的局部刺激性试验的实验方法的修改案,也存在不足。结合动物实验和病理学研究的心得,提出统一实验方法的规范化建议,主张以组织病理学诊断作为结果判定的主要依据。

中日肌肉刺激性试验的比较研究及探讨

肌肉刺激性试验是以肌内注射类药物为主的新药开发研制和新药申报中重要的安全性评价检查项目之一。我国已有一些试验方法被广泛使用,但内容多属于指导性原则,较简约;日本厚生省于1984年推出了更加详实、完善的注射用药的局部刺激性试验的试验方法的修改案。多年来,随着药物临床前试验的发展,安全评价理念的深入以及动物实验研究的进展,有一些值得参考借鉴之处。结合多年动物实验和病理学研究的心得,本文在全面比较中日在肌肉刺激性试验的异同的基础上,全面遵循局部刺激性试验的指导原则,做了进一步探讨并提出建议性的试验方法,仅供参考。

细化和规范化肌肉刺激性试验方法的建议

目的:通过对化药注射剂、化药-中药注射剂和中药注射剂进行肌肉刺激试验,解读现行肌肉刺激试验指导原则,在细化和完善的试验方法的基础上,进一步规范判定标准。方法:参照《药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》采用家兔股四头肌注射方式,左右侧自体对照,阳性组为0.425%和1.7%(w/v)乙酸溶液,对复方氨林巴比妥注射液、杏芎氯化钠注射液和消癌平注射液进行肌肉刺激试验检查。结果:复方氨林巴比妥注射液观察期内无肌肉刺激;杏芎氯化钠注射液和消癌平注射液自身对照和受试物处肌肉存在淤紫现象,48 h观察现象减轻,96 h刺激现象部分消失;阳性对照组出现不同程度的淤血、肌肉肿胀和硬化,延长至96 h观察刺激现象不消失。结论:2005年版《化学药物肌肉刺激指导原则》和中药、天然药物肌肉刺激指导原则存在差异,建议统一指导原则,细化试验方法,并进一步规范肌肉刺激试验结果的判定标准。

复尔康注射液血管、肌肉刺激性及溶血试验研究

目的观察复尔康注射液给予动物后的血管、肌肉刺激性情况及溶血情况,对复尔康注射液的安全性进行评价。方法分别采用家兔耳缘静脉注射给药、股四头肌肌肉注射给药,取相应组织病理切片检查观察复尔康注射液血管、肌肉刺激性;家兔红细胞悬液中加入复尔康注射液,观察其溶血情况。结果复尔康注射液静脉给药、肌肉注射给药后对血管和肌肉无刺激性,对家兔红细胞体外不溶血。结论复尔康注射液静脉、肌肉注射给药无刺激性,无溶血反应。

注射用还原型谷胱甘肽钠肌肉刺激性考察

目的:考察注射用还原型谷胱甘肽钠的肌肉刺激性,为临床安全用药提供参考。方法:家兔股四头肌肌内注射给药,采用同体左右侧自身比对法,供试品高、低给药浓度分别为150和75 mg·m L-1(体积1 m L),通过一般状况、注射部位、解剖观察及组织病理学检查,综合判断其肌肉刺激性。结果:注射用还原型谷胱甘肽钠表现出浓度-肌肉刺激依赖性,高浓度(150 mg·m L-1)引起中度刺激且不可逆,低浓度(75 mg·m L-1)引起轻度刺激但可逆。结论:注射用还原型谷胱甘肽钠临床常用浓度(150 mg·m L-1)具有肌肉刺激性风险,使用浓度不宜超过75 mg·m L-1。

布舍瑞林注射液过敏性、溶血性及刺激性研究

本研究旨在通过过敏性、体外溶血性及肌肉刺激性评价布舍瑞林注射液的安全性。过敏性试验和溶血性试验中设立阴性和阳性对照,而刺激性试验中采用自身对照。试验过程中,对照系统均成立。Hartley豚鼠隔日腹腔连续3次注射给予布舍瑞林注射液(2μg/只),末次致敏后第14和21天分别静脉注射2倍致敏剂量供试品激发进行主动全身过敏试验,结果为阴性;同样的给药剂量,末次致敏后第10天,皮内注射给予对应的抗体血清,静脉注射激发后未见蓝斑,豚鼠被动皮肤过敏反应结果为阴性。采用2%红细胞悬液进行体外溶血性试验,温育15 min、30 min、45 min、1 h、2 h、3 h各观察1次,布舍瑞林注射液和阴性对照组所有试管未见溶血,终末未见红细胞凝集,而阳性对照组全部溶血。新西兰兔连续肌肉注射给予布舍瑞林注射液(0.5 mL/只),末次给药72 h后,病理组织学检查可见对新西兰兔股四头肌有刺激作用,恢复期结束未见刺激性反应,具有可逆性。研究结果表明,布舍瑞林注射液无过敏性和溶血性,对肌肉有刺激性但停药后可恢复,在应用过程中是安全的。

2-(α-羟基戊基)苯甲酸钾冻干粉注射液的血管及肌肉刺激、溶血、过敏试验研究

目的观察Ⅰ类抗脑缺血候选药物2-(α-羟基戊基)苯甲酸钾(dl-PHPB)冻干粉注射液的血管、肌肉刺激性和是否具有溶血、凝聚及过敏作用。方法Beagle犬静脉滴注dl-PHPB 1.2,3.6,10.8 g/L及氯化钠注射液对照组,给药30 d,每天1次,停药后观察3周;家兔耳缘静脉及股四头肌注射dl-PHPB 1 mg/kg和2 mg/kg,给药7 d,每天1次,停药后观察2周;进行病理检查。不同浓度的dl-PHPB在5 mL兔红细胞氯化钠注射液中放置4 h,观察溶血及凝聚作用。豚鼠静脉注射dl-PHPB 3,30 mg/k g,隔日1次,共5次,末次致敏后14 d激发1次,激发剂量为致敏剂量的3倍,观察其过敏反应。结果dl-PHPB冻干粉注射液在兔及beagle犬的血管内皮及兔肌肉组织未见明显的损伤和刺激作用;对兔红细胞没有致溶血和凝聚作用,豚鼠未出现过敏反应。结论dl-PHPB冻干粉注射液对用药血管、肌肉无刺激性反应,无红细胞溶血、凝聚现象及过敏反应。上述研究结果为dl-PHPB的临床安全合理应用提供了参考。

日本血吸虫双价DNA疫苗肌肉刺激和全身过敏试验

目的观察日本血吸虫双价DNA疫苗对家兔肌肉注射所产生的刺激反应和豚鼠的全身过敏反应,评价其安全性。方法家兔4只,雌雄各半,采用自身对照,左侧股四头肌注射日本血吸虫双价DNA疫苗,右侧注射生理盐水,观察注射部位肌肉的刺激反应,并进行病理组织学检查;豚鼠24只,随机分为4组,日本血吸虫双价DNA疫苗组(致敏剂量0.5mg/只,激发剂量1mg/只)、空白质粒对照组(致敏剂量0.5mg/只,激发剂量1mg/只)、生理盐水对照组和10%人血白蛋白阳性对照组,进行全身过敏试验。结果日本血吸虫双价DNA疫苗对家兔肌肉局部刺激仅见注射部位轻度充血,未发现肌肉组织的变性和坏死;对豚鼠无过敏反应发生,10%人血白蛋白阳性对照组出现明显的过敏反应。结论日本血吸虫双价DNA疫苗对家兔肌肉无刺激作用,对豚鼠也无过敏反应,预期临床应用安全。

酸性恩诺沙星注射液的制备及质量检查

为降低恩诺沙星注射液的刺激性和提高恩诺沙星注射液的稳定性,本试验选用乳酸作为助溶剂,制备含量为10%的酸性恩诺沙星注射液,并对其性状、含量、稳定性、热源和肌肉刺激性行初步研究。结果表明:该恩诺沙星注射液为无色至淡黄色的澄明液体,pH值在5.0~6.0,药物含量在(100.11±0.23)~(102.42±0.26)mg/mL,符合注射剂含量要求;该制剂室温及低温条件下性质稳定,但对强光敏感,建议避光室温储存;热源和激性试验结果显示该制剂无热源、家兔肌肉注射刺激不明显,符合注射剂质量要求。

青银注射液安全性试验研究

目的:评价青银注射液的安全性。方法:采用静脉注射血管刺激性、肌肉注射刺激性、过敏试验和溶血试验。结果:青银注射液注射不引起血管和肌肉刺激性,亦不引起过敏和溶血。结论:青银注射液临床静脉注射给药安全。