Wnt抑制因子-1在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因小鼠中的表达变化

目的检测Wnt抑制因子-1(Wif-1)在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型小鼠脊髓内的表达变化,进一步探讨Wif-1在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各54只,分别于鼠龄95d、108d、122d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定、分离脊髓、制备冷冻切片,应用免疫荧光染色技术检测脊髓内Wif-1的分布及变化;部分鼠取出脊髓、匀浆,应用RT-PCR和Western blotting方法观察不同时间点Wif-1 mRNA及其蛋白表达水平变化。结果成年ALS转基因鼠和同窝野生型鼠脊髓的中央管、灰质、白质中均可检测到Wif-1阳性细胞,在灰质内,Wif-1阳性细胞主要分布于脊髓前角;在白质内,神经元的轴突呈阳性反应。与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Wif-1阳性细胞显著增多,Wif-1 mRNA和蛋白表达在95d变化不明显,在108d、122d均有升高,差异具有统计学意义(P<0.05),其中108d升高最明显。结论在ALS转基因鼠发病过程中Wif-1阳性细胞明显增多,Wif-1 mRNA和蛋白表达升高,表明Wif-1与ALS的发生密切相关。

分泌型卷曲相关蛋白4在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化

目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(sFRP4)在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,及sFRP4在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠95d、108d和122d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定,分离脊髓和制备冷冻切片,部分鼠分离脊髓,提取RNA和蛋白。分别应用免疫组织化学染色技术、RT-PCR和Western blotting检测sFRP4 mRNA和蛋白水平在不同时间点的变化情况。结果与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠sFRP4 mRNA和蛋白表达在95d、108d和122d均升高(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,sFRP4阳性细胞主要分布在脊髓灰质前角,白质轴突呈阳性反应,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠sFRP4阳性细胞明显增多。免疫荧光双标结果显示,sFRP4标记的阳性细胞共表达胶质纤维酸性蛋白和β-tubulinⅢ,ALS转基因鼠sFRP4/GFAP双阳性细胞增多。结论在ALS转基因鼠发病脊髓中sFRP4阳性细胞明显增多,sFRP4 mRNA和蛋白表达升高,表明sFRP4与肌萎缩脊髓侧索硬化症的发生密切相关。

Akt在肌萎缩性脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化及意义

目的:探讨Akt在肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)发病中的作用,为临床治疗ALS提供实验依据.方法:选择ALS转基因鼠和野生型鼠各36只,分别在发病早期(95 d)、中期(108 d)和晚期(122 d)处死动物、分离脊髓,应用RT-PCR和免疫印迹检测Akt mRNA和蛋白水平的表达变化,应用免疫组织化学检测Akt阳性细胞的分布特点和表达规律.结果:ALS转基因鼠与野生型鼠相比,发病早期、中期和晚期脊髓组织中Akt mRNA和总蛋白均无明显变化,p-Akt(Thr308)蛋白表达均上调,发病中期和晚期p-Akt(Ser473)蛋白表达均上调.免疫组织化学显色结果显示,ALS转基因鼠和野生型鼠中p-Akt(Ser473)免疫阳性细胞主要分布在脊髓灰质前角.免疫荧光双标结果显示,Akt阳性细胞主要为神经元,少数为星形胶质细胞.结论:ALS转基因鼠脊髓组织中磷酸化Akt表达上调,Akt激活与ALS发病密切相关.

Wnt5a及其受体Fzd2在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠内嗅皮层中的表达变化

探讨Wnt5a及其受体FZd2在95、108d和122d肌萎缩脊髓侧索硬化症（ALs）转基因鼠大脑内嗅皮层中的表达情况。方法：取95、108d和122dALS转基因鼠大脑皮质，应用免疫荧光和RT-PCR技术，检测Wnt5a和Fzd2在大脑内嗅皮层中的表达变化。结果：免疫荧光结果显示，与同窝野生型鼠比较，95、108d和122d龄ALS转基因鼠大脑内嗅皮层中Wnt5a阳性细胞明显增多。免疫荧光双标结果显示，Wnt5a标记的阳性细胞与GFAP和β-tubulinIII共表达，ALS转基因鼠Wnt5a／GFAP双阳性细胞增多。与同窝野生型鼠比较，ALS转基因鼠Wnt5amRNA水平在95、108d和122d均升高。Wnt5a受体Fzd2表达情况与Wnt5a一致。结论：WntSa和Fzd2在ALS转基因鼠内嗅皮层中表达增多，表明Wnt5a及其受体Fzd2升高与肌萎缩脊髓侧索硬化症密切相关。

成年肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓增殖细胞的分化

目的探讨成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内增殖细胞的类型及分化情况。方法对ALS转基因鼠发病期进行BrdU标记,分别于不同时间点取材,冷冻切片,应用免疫荧光双标及三标染色技术检测ALS转基因鼠病变进展过程中脊髓内增殖细胞的分化情况。结果成年ALS转基因鼠发病期脊髓的中央管、灰质、白质均未检测到BrdU/DCX双标记阳性细胞和BrdU/NeuN双标记阳性细胞。灰质、白质和中央管周围检测到大量NG2阳性细胞,阳性细胞数量随病变进展逐渐减少,NG2阳性细胞多呈BrdU阳性表达;可检测到少量BrdU/A2B5双标记阳性细胞;ALS转基因鼠发病期脊髓BrdU/GFAP双标记阳性细胞较多,部分双阳性细胞呈Nestin阳性,而野生型鼠脊髓内未检测到BrdU/GFAP双标记阳性细胞。结论神经退行性病变激活ALS转基因鼠脊髓内源性增殖细胞向神经胶质细胞方向分化,未检测到向神经元方向分化,内源性增殖细胞尚不能有效地促进退行性病变的修复。

成年肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓细胞增殖的研究

目的观察成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内源性细胞的增殖和存活情况。方法对ALS转基因鼠进行BrdU注射,分别于不同时间点取材,冷冻切片,应用免疫荧光染色技术检测脊髓内细胞的增殖、分布和存活情况。结果成年ALS鼠脊髓的中央管、灰质、白质均可检测到BrdU阳性细胞,经常可检测到形状相似、成对出现的细胞。在灰质内,BrdU阳性细胞主要分布于脊髓前角。在白质内,BrdU阳性细胞散在分布。前角ALS鼠脊髓内BrdU阳性细胞数量较野生型鼠多。BrdU末次注射后1d、14d均可检测到BrdU阳性细胞,但细胞数量逐渐减少,28d ALS鼠脊髓内仍可检测到少量BrdU阳性细胞,主要分布于中央管部位。增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞的分布和变化规律与BrdU阳性细胞一致。在95d龄ALS鼠(BrdU末次注射1d后),脊髓中Nestin阳性细胞较野生型鼠多,多数Nestin阳性细胞分布于脊髓前角,某些细胞呈BrdU/Nestin双标阳性。在BrdU注射后14d、28d脊髓中,未检测到BrdU/Nestin双标阳性细胞。结论神经退行性病变可激活ALS转基因鼠脊髓的细胞增殖,且细胞存活可达28d。

Neurogenin 1在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化

目的：研究neurogenin 1 （Ngn1）转录因子在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症（ALS）转基因模型鼠脊髓内的表达变化,探讨其在ALS转基因鼠发病中的作用.方法：选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各18只,分别于95、108 d和122 d取材,部分鼠经4％多聚甲醛心灌注固定,分离脊髓、制备冷冻切片;部分鼠分离脊髓、提取蛋白和RNA,分别应用免疫荧光显色、免疫印迹和RT-PCR检测Ngnl蛋白及mRNA在ALS转基因鼠发病中的变化.结果：与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Ngnl mRNA和蛋白表达在95、108 d和122 d均降低.免疫荧光实验结果显示,Ngnl阳性细胞主要分布在脊髓灰质前角,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Ngnl阳性细胞光密度值明显减小.结论：在ALS转基因鼠发病脊髓中Ngnl阳性细胞光密度值明显减少,mRNA和蛋白表达降低,表明Ngnl与ALS的发生密切相关.

应用胚胎干细胞移植治疗老年重症肌萎缩脊髓侧索硬化症的护理

肌萎缩性脊髓侧索硬化症是一个渐进和致命的神经退行性疾病。临床表现为四肢肌肉逐渐萎缩、无力,直至瘫痪。晚期患者容易发生呼吸衰竭和吞咽困难,最终因肺部感染,病情迅速恶化,全身肌肉极度萎缩,痛苦而终。目前,该病国际上尚无有效的治疗方法,以对症治疗为主。

星形胶质细胞在肌萎缩脊髓侧索硬化症发病中作用的研究进展

肌萎缩脊髓侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis,ALS）是中枢神经系统（central nervous system,CNS）运动神经元（motor neuron,MN）退化所致的一种慢性神经退行性疾病,其显著特征表现为选择性MN死亡,临床表现为进行性全身肌肉无力、萎缩,最终导致瘫痪甚至死亡[1-4]。目前其病因和发病机制尚不清楚,缺乏有效地治疗方法。研究表明,

Wnt11及其受体Fzd5在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓内的表达变化

目的检测Wnt11及其受体Fzd5在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,探讨Wnt11及其受体Fzd5在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠龄95 d、108d、122 d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定、分离脊髓、冰冻切片,应用免疫荧光技术,检测脊髓中Wnt11及其受体Fzd5的表达变化;部分鼠取出脊髓、匀浆,应用RT-PCR技术检测不同时间点Wnt11及其受体Fzd5 mRNA的表达变化。结果免疫荧光结果显示,与同窝野生型鼠比较,95 d、108 d和122 d龄ALS转基因鼠脊髓中Wnt11阳性细胞明显增多。免疫荧光双标结果显示,Wnt11标记的阳性细胞与GFAP和β-tubulinⅢ共表达,ALS转基因鼠Wnt11/GFAP双阳性细胞增多。与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Wnt11 mRNA水平在95 d、108 d和122 d均升高。Wnt11受体Fzd5表达情况与Wnt11一致。结论 Wnt11和Fzd5在ALS转基因鼠脊髓中表达增多,表明Wnt11及其受体Fzd5表达升高与肌萎缩脊髓侧索硬化症密切相关。

肌萎缩脊髓侧索硬化症患者焦虑抑郁症状治疗进展

肌萎缩脊髓侧索硬化症（Amyotrophic lateral sclerosis，ALS）是侵犯脊髓前角细胞、脑干后角运动神经元、皮质锥体细胞及锥体束，具有上、下运动神经元并存损害的神经系统变性疾病。患者多数表现为进行性四肢乏力（如握力下降、步履蹒跚，占80％）及延髓功能障碍（如构音困难、吞咽困难，占20％），在疾病诊断后平均3年内死于呼吸衰竭[1]，因此又以“浙冻症”之名为社会大众所关注。除了躯体活动受限，前额叶认知功能损害也很明显，半数左右患者存在额叶执行功能受损[2]。

p27在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化

目的：通过观察细胞周期蛋白激酶抑制因子p27在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症（ALS）转基因鼠脊髓中的表达变化,探讨p27在ALS转基因鼠发病机制中的作用及其意义.方法：选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠,分别于95 d、108 d和122 d取材,分离脊髓,分别应用免疫荧光、免疫荧光双标记和免疫印迹,观察p27的分布和表达变化.结果：与同窝野生型鼠比较,p27蛋白在ALS转基因鼠发病早期（95 d）、中期（108 d）、晚期（122 d）均显著降低.免疫荧光实验结果显示,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠脊髓中p27阳性细胞数量减少,阳性细胞主要为p27/oligo-2双阳性细胞和p27/β-tubulinⅢ双阳性细胞,p27/GFAP双阳性细胞数量较少.结论：在ALS转基因鼠脊髓中p27阳性细胞数量减少,蛋白表达降低,表明p27与ALS的发病密切相关.

裴正学教授治疗肌萎缩性脊髓侧索硬化症1例报告

裴正学教授全国名老中医，甘肃省名老中医。擅长治疗各种疑难杂症。本人有幸师从于裴教授，现将其治疗肌萎缩性脊髓侧索硬化症一例报告如下。

肌萎缩脊髓侧索硬化症病人沟通障碍及辅助交流方式的研究进展

介绍了肌萎缩脊髓侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis, ALS)的流行病学、ALS的病理改变对沟通交流的影响、ALS病人沟通交流障碍的临床表现以及近年来辅助ALS病人沟通交流的手段及方法,并探讨了各种方法的优势与不足,旨在加强ALS病人与外界的交流沟通,及时有效地了解ALS病人的需求,减轻ALS病人及其照顾者的精神及心理负担。

间充质干细胞治疗肌萎缩性脊髓侧索硬化症:治疗潜能及机制

肌萎缩性脊髓侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种影响神经肌肉系统的神经退行性疾病,主要临床表现为运动神经元功能紊乱、进行性瘫痪和死亡。尽管已经使用了一些方法治疗ALS,但是很少成功。间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)长期以来被认为是再生细胞治疗的有效工具,很容易从健康捐赠者和患者组织中获得,并且不存在伦理学争议。MSC具有分化为多种细胞类型的能力,并具有免疫调节、组织修复、释放营养因子、分泌外泌体和有效的归巢等潜能,能够成为克服治疗难题的有前途的工具。本文将就MSCs在ALS患者中的治疗潜能及作用机制进行综述。

周围神经损伤后肌萎缩性脊髓侧索硬化症信号通路的变化

目的:探讨肌萎缩性脊髓侧索硬化症信号通路在周围神经损伤后的变化。方法:将30只SD大鼠随机分为4个实验组和1个对照组,实验组制作坐骨神经夹伤模型,并于伤后0、1、4、7、14天取材。使用深度测序结合生物信息学的方法分析坐骨神经组织损伤后肌萎缩性脊髓侧索硬化症信号通路的变化。结果:肌萎缩性脊髓侧索硬化症信号通路在大鼠坐骨神经损伤后显著性趋势随损伤时间而上调,其关键基因的表达量在坐骨神经损伤后不同时间点呈现显著性差异。结论:肌萎缩性脊髓侧索硬化症信号通路参与周围神经的损伤和再生,提示神经损伤再生与神经退行性疾病密切相关。

肌萎缩性脊髓侧索硬化症与铜锌超氧化物歧化酶之间关系的研究概况

肌萎缩性脊髓侧索硬化症 ( amyotrophic lateral sclerosis,AL S)是一种致命的神经退化性疾病 ,在 AL S所有的病例中有 5 %～ 10 %是家族性 AL S( FAL S) ,它是一种常染色体显性遗传病 ,与 2 1号染色体上的 SOD- 1基因 (编码铜锌超氧化物歧化酶 <Cu/Zn- SOD>)的突变有关 ,但突变的 Cu/Zn- SOD酶功能障碍并不能直接损伤神经元而导致 AL S的发生。因为正常野生型 Cu/Zn- SOD对 AL S发病前后的治疗无效。因此可以认为可能是 Cu/Zn- SOD突变后导致机体内一系列的生理和病理变化而引发 AL

肌萎缩性脊髓侧索硬化症患者的福音

据美国BIOCOMPARE科技新闻网（2006／8／2）报道，加州大学圣地亚哥分校医学院神经学研究中心的研究人员，及Isis制药公司合作设计并且在动物模型中，测试一种治疗渐冻人也就是所谓的肌萎缩性脊髓侧索硬化症（AKS）的分子疗法。

肌萎缩性脊髓侧索硬化症治疗新药NurOwn被FDA指定为罕见病用药

2011年2月，BrainStorm公司研制的肌萎缩性脊髓侧索硬化症（ALS）治疗新药NurOwn被FDA指定为罕见病治疗药。

肌萎缩性脊髓侧索硬化症细胞模型中mRAGE和esRAGE选择性剪接变化研究

目的探讨肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)细胞模型中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)两种亚型mRAGE和esRAGE选择性剪接变化。方法选取鼠运动元样细胞系NSC-34细胞为研究对象,以SH-SY5Y细胞c DNA为模板,构建铜/锌超氧化物歧化酶(SOD1)突变载体。将NSC-34细胞分为:空质粒组、正常SOD1蛋白表达质粒组、G93A质粒组,分别将空质粒、正常SOD1蛋白表达质粒、SOD1突变蛋白表达质粒(G93A质粒组)转染入细胞,另以正常NSC-34细胞组作为对照,不转染。转染后48 h,观察各组细胞形态学变化,采用实时聚合酶链式反应(RT-PCR)检测SOD1、mRAGE、esRAGE表达情况。结果 G93A质粒组与正常NSC-34细胞组细胞形态学比较,细胞胞体变圆,轴突变短且突起减少,空质粒组、正常SOD1蛋白表达质粒组与正常NSC-34细胞组比较无明显变化;qRT-PCR结果显示,正常SOD1蛋白表达质粒组、G93A质粒组细胞中SOD1为阳性表达,空质粒组及正常NSC-34细胞组SOD1为阴性表达,提示成功构建ALS细胞模型;与正常SOD1蛋白表达质粒组比较,G93A质粒组细胞中mRAGE表达明显增加(P<0.05),esRAGE表达明显降低(P<0.05)。结论在ALS病理过程中,胶质细胞中RAGE的选择性剪接调控异常改变,导致mRAGE亚型增加,esRAGE亚型减少。