肌型肌酸激酶同工酶的简易分离和纯化

肌型肌酸激酶同工酶的简易分离和纯化万士林，张在和，季秀生肌型肌酸激酶同工酶（ＣＫ－ＭＭ）的分离和纯化对ＣＫ同工酶的检测方法的建立有重要意义，但文献报道中ＣＫ－ＭＭ分离纯化所需设备条件较高或时间较长，本文在普通实验条件下建立的ＣＫ－ＭＭ分离纯化方法，分...

人心与人脑肌酸激酶同工酶的分离纯化

肌酸激酶(CK,EC2、7、3、2)是参与机体能量代谢的主要酶之一,其同工酶包括MM、BB、MB及线粒体(Mi-CK)等几种类型。MM主要存在于骨骼肌,BB存在于脑及平滑肌中,MB为心肌梗塞病人血清中出现的异聚体同工酶。

手足口病患儿治疗前后超敏C反应蛋白和肌酸激酶同工酶的变化及临床意义

目的观察手足口病患儿治疗前后超敏C反应蛋白(hs-CRP)的变化并探讨其临床意义。方法分别检测30例健康儿童、89例手足口病患儿治疗前和治疗7d后hs-CRP和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平。结果手足口病患儿组与健康对照组比较,治疗前hs-CRP和CK-MB升高差异有统计学意义(P<0.01)。经综合治疗7d后hs-CRP下降明显,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01),而CK-MB变化无统计学意义。结论 hs-CRP是手足口病敏感而非特异的早期诊断指标,治疗前后检测对比可指导临床疗效判断。

肌钙蛋白T、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶诊断心肌损伤的灵敏度及特异性比较分析

人心肌肌钙蛋白T（cardiac troponin T，cTnT）、肌酸激酶同工酶MB（CK—MB）、肌红蛋白（myoglobin，Mb）是急性心肌梗死早期诊断灵敏度高、特异性强的血清标志物。本组对急性心肌梗死（AMI）、不稳定性心绞痛（UAP）患者和健康人群进行cTnT、Mb和CK—MB的联合检测，对cTnT、Mb和CK—MB在诊断心肌损伤的灵敏度及特异性进行比较分析。

血清肌酸激酶同工酶活性大于肌酸激酶活性常见原因分析

目的探讨肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性大于肌酸激酶(CK)活性的常见原因。方法选取2009年1月至2010年1月住院患者中CK-MB活性大于或等于CK活性,临床已排除心肌梗死的患者26例,CK测定采用速率法,CK-MB测定采用免疫抑制法。结果 26例患者中脑损伤21例(包括急性颅脑损伤、自发性脑出血及头晕待查的患者),肿瘤患者3例,其他不明原因者2例。结论免疫抑制法测定CK-MB是建立在忽略CK-BB基础上的,易受到巨CK或CK-BB异常增高的干扰,这种方法学上的缺陷是造成CK-MB活性大于或等于CK活性的主要原因。可通过琼脂糖电泳法,最终确定有无CK-BB或巨CK的干扰,也可用此法直接测定CK-MB。

胆红素脑病仔鼠血清肌酸激酶及其脑型同工酶的动态变化

目的:探讨胆红素脑病仔鼠血清肌酸激酶(creatinekinase,CK)及其脑型同工酶(creatinekinaseBB,CK-BB)水平的动态变化,为胆红素脑病早期诊断提供客观依据。方法:实验于2003-03/07在佳木斯大学实验动物中心完成,采用生后7日龄Wistar大鼠56只,平均体质量14.5g,雌雄各半。购自佳木斯大学实验动物中心。随机分为对照组和实验组,对照组8只,实验组48只。腹腔注射胆红素200mg/kg方法制备胆红素脑病模型,用酶动力法和琼脂糖凝胶电泳法对实验组和对照组注射胆红素后6,12,24,48,72,96h的血清CK及CK-BB水平进行动态观察。结果:胆红素脑病仔鼠血清中肌酸激酶12～24h明显升高,48h达峰值(52.46±34.76)μkat/L,对照组为(42.69±25.11)μkat/L;胆红素脑病仔鼠血清中CK-BB6h明显升高,48h达峰值(15.56±1.23)μkat/L,对照组为(8.52±0.54)μkat/L;且CK-BB升高的幅度较CK明显。结论:CK-BB可作为胆红素脑病的早期诊断指标,24～48h为取标本的适宜时间。

急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗围术期应用重组人脑利钠肽后脑利钠肽和肌酸激酶同工酶变化及安全性观察

目的观察急性心肌梗死（AMI）患者经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术中及术后静脉应用重组人脑利钠肽（rhBNP）48h后帆浆脑利钠肽（BNP）和肌酸激酶同工酶（CK—MB）的变化及rhBNP的安全性。方法选择70例AMI患者，随机分为rhBNP治疗组（A组）和牛理盐水对照组（B组）。两组患者均行直接PCI术，A组：PCI术中及术后静脉应用rhBNP，先按1．5μg/kg负荷剂量静脉推注（〉3min），后按0．01μg·kg^-1·min“静脉滴注，持续48h;B组：PCI术中及术后应用牛理盐水静脉滴注同期对照。同时观察静脉应用过程中患者有无血压下降、头痛、腹部不适、恶心呕吐等。两组在PCI术前、术后检测血浆BNP及CK—MB浓度。结果（1）B组血浆BNP浓度高峰在PCI术后24h出现。在PCI术后156h两组血浆BNP浓度[B组（137±24）ng／L，A组（115±35）ng／L]差异有统计学意义（P=0．023）。（2）A组术后60h CK—MB较B组明显降低（P〈0．0S）。（3）相关分析显示，BNP与性别（r=0．303，P=0．024）、年龄（r=0．522，P〈0．001）呈正相关，与体质量（r=-0．504，P〈0．001）、左心室射血分数（LVEF）（r=-0．317，P=0．032）呈负相关。（4）A组在应用rhBNP中出现不良反应14例，B绀为16例，差异无统计学意义（P=0．784）。结论AMI患者PCI同术期应用rhBNP安全可行；应用rhBNP可能减轻心肌损伤；血浆BNP浓度女性较男性高，与年龄旱正相关，与体质量、LVEF旱负相关。

脑型肌酸激酶同工酶测定在非心源性疾病的应用

目的探讨脑型肌酸激酶同工酶(CK-BB)在肿瘤、自身免疫性疾病的筛查以及器官损伤定位中的意义。方法免疫抑制法检测血清标本心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)活性,计算二者比值。随机选取CK-MB/CK>50%的非心源性疾病的血清标本90份及30份对照血清,用CK同工酶琼脂糖凝胶电泳进行分离、鉴定。结果血清CK-MB假性增高的标本多见于肿瘤、自身免疫病,经电泳分离及可见光扫描后,肿瘤和自身免疫性疾病组的CK-BB含量明显高于对照组,差别具有统计学意义(P<0.01),血清CK-BB增高情况与其在组织器官中的分布相符。结论血清CK-BB的检测在肿瘤、自身免疫性疾病的辅助诊断以及器官损伤定位中具有重要意义。

血清肌酸激酶同工酶MB假性升高的前列腺癌1例

肌酸激酶（ creatine kinase ， CK ）及其同工酶MB （CK-MB）常用于检测急性心肌损伤，CK-MB的假性升高会给临床工作带来一定困扰，现通过总结1例因CK-MB假性升高继而筛查出恶性肿瘤的患者资料，探讨其常见原因。

病毒性脑炎患儿血清肌酸激酶及脑型同工酶的动态观察及临床意义

目的探讨肌酸激酶(CK)及脑型同工酶(CK-BB)在病毒性脑炎(VE)患儿中的变化及临床意义。方法对2002年1月～2004年6月19例重症VE患儿,17例轻症VE患儿,在入院后第1d、第3d、7d分别取血,用磷酸肌酸激酶法和电泳法测定血清中总CK及CK-BB。结果重症患儿血清CK、CK-BB与对照组和轻症组比较,暴发型与重型比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01);重症组其水平以入院第1d最高,与第3d、7d比较差异有显著性意义(P<0.01或0.05);重症患儿第3d与第7d比较差异亦有非常显著性意义(P<0.01)。结论血清CK、CK-BB水平及动态变化与VE脑损伤密切相关,脑损伤程度越重,其水平越高。

纳洛酮对急性心肌梗死再灌注后梗死面积和肌酸激酶同工酶活性的影响

目的:通过制造大鼠急性心肌梗死再灌注损伤模型,探讨纳络酮对大鼠急性心肌梗死再灌注损伤的保护作用。方法:实验于2003-05/10在兰州医学院解剖教研室实验室完成。成年SD大鼠30只随机分为手术对照组、单纯缺血再灌注组、缺血加纳络酮组,每组10只。用戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,从根部结扎左冠状动脉前降支制备心肌缺血-再灌注模型。单纯缺血再灌注组在结扎左冠状动脉前降支心肌缺血30min后,剪断结扎线恢复心肌再灌注4.5h。缺血加纳洛酮组在术前10min及结扎后0.5h,4h,静脉注射纳洛酮0.517mg/kg。其余两组注射同体积的生理盐水。处死大鼠后迅速摘取心脏;;经处理后氯化三苯基四氮唑法染色和数码照相计算机图象分析系统计算心肌梗死面积;;测定血清中肌酸激酶同工酶含量。结果:30只大鼠全部进入结果分析。缺血加纳洛酮组与单纯缺血再灌注组比较;;心肌梗死面积明显缩小犤(37.53±5.77)%;;(26.73±3.67)%;;P<0.01犦;;血清中肌酸激酶同工酶活性明显降低犤(210.59±17.87)kat/L;;(153.12±22.16)kat/L;;P<0.01犦。结论:纳洛酮可明显缩小缺血再灌注心梗面积;;降低血清肌酸激酶同工酶含量;;改善心功能。

肌酸激酶亚型的电泳分离和荧光扫描法

为了建立用琼脂糖电泳法同时测定肌酸激酶ＭＢ同工酶及ＣＫ－ＭＭ、ＣＫ－ＭＢ亚型的方法，使用不连续缓冲体系，在稳流、低压条件下电泳３０分钟将两种亚型分离，荧光扫描。结果ＣＫ－ＭＭ在８５３～１４Ｕ／Ｌ，ＣＫ－ＭＢ在１５２～２．４Ｕ／Ｌ之间结果无明显差异，ＣＫ－ＭＭ和ＣＫ－ＭＢ亚型最低检出限分别为１２Ｕ／Ｌ和２．１Ｕ／Ｌ。一份血清标本在同一块凝胶上点７个样，连续做两次，ＣＫ－ＭＭ亚型及ＣＫ－ＭＢ亚型和同工酶具有好的重复性。已经检测了数百名心梗病人和骨骼肌疾病的病人，证明该法快速、简单、灵敏，重复性好，适用于医院常规实验室。

肌酸激酶同工酶的提取纯化和重组

目的对肌酸激酶（ＣＫ）同工酶进行纯化和重组。方法酶的制备和分子重组技术。结果纯化及重组后的ＣＫ－ＭＭ、ＣＫ－ＭＢ、ＣＲ－ＢＢ比活性分别为９３００００，６９２０００，４８１０００Ｕ·ｇ－１（３７℃）；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，ＣＫ－ＭＭ、ＣＫ－ＭＢ均呈现单带，而ＣＫ－ＢＢ为双带。

兔脑损伤后微循环的改变和肌酸激酶同工酶的表达

目的:观察兔脑损伤后肌酸激酶同工酶(CK-MB)表达的改变及其意义。方法:取成年灰色家兔采用自由落体法制成兔脑损伤动物模型,分别于伤后不同时段抽取动物静脉血和枕大池CSF,分析CK-MB的表达情况;而后将动物断头处死,取受伤区域脑组织进行脑组织含水量的测定;切片镜下观察组织的微观改变。结果:伤后6、24、72和168h实验组动物血清及CSF中CK-MB明显高于对照组(P<0.05或<0.01)。实验组动物伤后3、6、24和72h可见损伤区神经细胞水肿明显,微血管密度降低,微血管内微血栓形成,168h水肿的神经细胞和微血管形态基本恢复正常。结论:脑损伤后血和CSF中CK-MB的表达上调,其表达和脑损伤相关联,提示CK-MB可能参与了脑水肿的调控过程,CK-MB测定可能成为判断病人脑损伤的程度和预后的方法。

不育症患者精子肌酸激酶活性及其同工酶测定(英文)

背景:作为胞浆中的一种生化标志物,人精子中肌酸激酶活性增高与精浆残余量和异常功能精子比例二者有关。它即是成熟精子的标志,又与受精能力相关。目的:观察精子肌酸激酶活性及精子M-肌酸激酶、B-肌酸激酶同工酶的相对含量在健康生育男性和精子健康男性精子中的差异,评价其在男性精子健康临床诊断中的意义。设计:病例-对照观察。单位:四川省计划生育科学研究所生化室。对象:于1999-01/2000-10选择四川省计划生育科学研究所专科门诊收治男性精子健康患者94例,已排除女方不孕原因和无精子症,平均年龄31岁。精子计数>2×1010L-1的精子健康男性80例,为精子正常组,精子计数<2×1010L-1的精子健康男性患者14例,为少精组。同期精液常规检查完全健康且已有后代的健康男性供精者27例,为健康对照组。方法:所有对象禁欲3～5d,用手淫法采集精液,经37℃液化后进行精液常规检查。酶动力学分光光度法测定精子肌酸激酶总活性,琼脂糖电泳凝胶光密度扫描测定肌酸激酶的同工酶相对含量。主要观察指标:精子计数,精子存活率,运动精子百分比,精子肌酸激酶总活性和M-肌酸激酶及B-肌酸激酶同工酶的相对含量。结果:纳入患者94例和健康对照者27例,均进入结果分析。①少精组的精子计数,精子存活率和运动精子百分比(Ⅱ+Ⅲ,WHO分类法)均显著低于健康对照组,精子正常组除精子计数外,其他指标也显著低于健康对照组[健康对照组、精子正常组、少精组精子计数分别为(6.05±0.81)×1010L-1,(7.76±1.37)×1010L-1,(1.46±0.19)×1010L-1,P<0.01;健康对照组、精子正常组、少精组精子存活率分别为85.1%,56.8%,58.2%,P<0.01;健康对照组、精子正常组、少精组运动精子百分比(Ⅱ+Ⅲ)分别为62.9%,34.6%,29.5%,P<0.01]。②少精组肌酸激酶活性显著高于健康对照组(少精组、健康对照组每1×108精子中肌酸激酶活性分别为(9.000±6.117),(1.933±0.943)kat,P<0.05),精子正常组每1×108精子中肌酸激酶活性为(2.800±0.862)kat,虽略高于健康对照组,但两者比较差异无显著性(P>0.05)。③精子正常组和少精组M-肌酸激酶同工酶含量都显著减少(健康对照组、精子正常组、少精组分别为30.5%,19.0%,18.0%,P<0.05),提示两组患者的精子分化程度与健康对照组精子分化程度可能有明显不同。结论:精子肌酸激酶活性测定对少精子症的诊断和病因分析具有一定的意义。精子M-肌酸激酶同工酶相对含量在不同精子健康男性群体中的分布规律及其在男性精子健康诊断中的作用有待更深入的研究。

免疫抑制法检测血清肌酸激酶同工酶活性高于肌酸激酶总活性的原因探讨

目的探讨肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性高于肌酸激酶(CK)总活性的原因。方法用免疫抑制法测定出现CK-MB活性高于总活性的20例患者血清、20例心肌梗死患者血清、20例健康体检者血清。对这三组标本同时用免疫抑制法测CK-MB、酶法测总CK;用电泳法分离各个组分,由扫描仪对各条酶谱进行扫描。结果CK-MB活性高于总活性的患者血清中在CK-MM、CK-MB中间多出一条区带,为巨CK;或在CK-MM后面靠阴极端出现一条CK-MT区带。结论对于CK-MB活性高于CK总活性的患者血清,建议用其他方法进行复查,避免假阳性对实验结果的影响。

感染性腹泻儿童血清肌酸激酶同工酶CK—MB分析

近来我科室在利用免疫抑制法检测感染性腹泻儿童血清中的肌酸激酶同工酶MB（CK—MB）活性时，发现一部分患儿血清中CK—MB活性异常增高，有的CK—MB活性甚至高于CK总活性，而肌酸激酶（CK）的活性正常或仅轻度增高。为此我们收集住院46例感染性腹泻儿童的血清标本，进行CK、CK—MB活性和CK同工酶分离检测，并与正常对照组进行比较，现报告如下：

肌酸激酶同工酶检测在急性心肌梗死中的临床价值

目的 探讨肌酸激酶（CK）MB和MM同工酶（CK-MB和CK-MM）亚型在急性心肌梗死（AMI）患者中的变化规律与其预后的关系，评价CK同工酶的亚型检测在AMI心肌早期再灌注、梗死延迟或再梗死诊断中的临床价值。方法 采用琼脂糖凝胶电泳系统将血清CK同工酶亚型分离为CK-MM3、CK-MM2、CK-MM1、CK-MB2和CK-MB1，并分析比较21例AMI患者血清CK同工酶亚型在发病后0～6小时、24小时和72小时的动态变化。结果 AMI患者血清CK-MB和CK-MM在发病后6h开始升高，其中以CK-MB2和CK-MM3升高为主，MB2／MB1〉1．36，MM3／MM1〉0．7；12-24小时达峰值，CK-MB／CK〉30％。15例早期再灌注的AMI患者血清CK、CK-MB和CK-MM在72小时下降至正常，但6例无早期再灌注患者仍处于较高水平，其中MB2／MB1〉1．29，MM3／MM1〉0．65。结论 CK同工酶的亚型检测能反映AMI患者心肌组织损伤的动态过程，可作为一项较灵敏的生化指标，有助于诊断AMI心肌早期再灌注、梗死延迟或再梗死。

免疫抑制法测定血清肌酸激酶同工酶

国内外已建立多种测定心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)的方法,但均不便于常规开展。我们用美国贝克曼公司生产的试剂盒测定血清CK-MB活性,15 min可获结果。