钙蛋白酶介导模拟失重大鼠心肌肌钙蛋白抑制亚基的降解

本文旨在观察尾部悬吊模拟失重大鼠心肌钙蛋白酶(calpain)与钙蛋白酶抑素(calpastatin)表达的变化,以探讨心肌肌钙蛋白抑制亚基(cardiac troponin I,cTnI)降解的可能机制。采用尾部悬吊模拟失重大鼠模型,Western blotting技术观测心肌calpain-1、calpain-2与calpastatin的表达;PD150606抑制calpain活性,分析cTnI降解程度的变化。结果显示:与同步对照组相比,悬吊2周与4周组大鼠心肌calpastatin表达呈显著性降低(P<0.05),calpain-1表达未改变,calpain-2表达略有降低;但是,心肌calpain-1/calpastatin及calpain-2/calpastatin的比值在悬吊2周与4周组明显增高(P<0.05,P<0.01)。悬吊4周组cTnI降解显著高于对照组(P<0.01);然而,用calpain非特异性抑制剂PD150606处理后,对照组及悬吊组cTnI的降解均被显著抑制(P<0.01)。这些结果提示模拟失重大鼠心肌calpain活性增高可能增加cTnI的降解。

肌纤维内肌质网钙漏可能诱发肌钙蛋白抑制亚基降解

本文以肌钙蛋白抑制亚基(troponin I subunit,TnI)作为肌节蛋白降解的分子标记,探讨舒张期肌纤维内Ca2+浓度升高与肌原纤维降解的关系。采用在收缩期增加肌质网(sarcoplasmic reticulum,SR)钙离子释放通道开放机率的caffeine,以及在舒张期引起SR钙离子释放通道钙漏的H2O2,灌流大鼠离体比目鱼肌,以Western blot技术检测TnI表达水平,并比较其降解程度。结果显示,离体比目鱼肌肌条在40min无钙Krebs液灌流期间,静息张力未见明显改变,发展张力缓慢降低,TnI未发生降解。用低浓度caffeine(1与5mmol/L)灌流肌条,静息张力仅在疲劳收缩期间短暂升高,对肌条疲劳程度与疲劳后的恢复速率均无显著性影响,灌流后肌条的TnI未发生降解;高浓度caffeine(10mmol/L)灌流使静息张力持续升高,肌条易发生疲劳,且疲劳收缩后肌条的发展张力不能恢复,TnI发生明显降解。H2O2灌流对肌条疲劳程度没有明显影响,疲劳收缩后发展张力呈迅速恢复后较快下降,静息张力持续增加,且呈浓度依赖性。用1mmol/L H2O2灌流肌条,TnI未发生降解,用5与10mmol/L H2O2灌流肌条时,TnI降解程度随浓度增大而增加。由于肌条静息张力与舒张期间肌纤维内Ca2+浓度密切相关,以上结果提示,舒张期SR钙离子释放通道钙漏增加,可能引起肌纤维TnI降解。

一次法咬合重建对大鼠咬肌组织损伤相关蛋白表达的影响

目的:探讨一次法咬合重建后大鼠咬肌损伤相关结蛋白(desmin)和骨骼肌肌钙蛋白抑制亚基(s Tn I)含量的变化。方法:取8周龄健康雄性SD大鼠60只,随机分为空白对照组(C组)、操作对照组(S组)和一次法咬合重建组(T组)(n=20)。T组采用人工逐次磨除法将各大鼠上颌后牙牙冠磨低约1.2 mm,6周后口外制作咬合板并将其粘固于各大鼠的上颌后牙上;S组麻醉后模拟T组操作过程,无实际操作;C组不作任何处理。咬合重建后3、7、14、28 d处死大鼠(n=5),取其双侧咬肌组织并采用western blot方法检测咬肌细胞内desmin和s Tn I的表达。结果:1 S组与C组相比desmin、s Tn I表达无明显差异(P>0.05);2 T组于咬合重建后3 d时desmin、s Tn I开始降低(P<0.05),7 d时降至最低,14 d后逐渐增加,28 d时恢复正常;28 d时desmin、s Tn I的表达水平与C组、S组相比P>0.05,其他各时间点的desmin、s Tn I表达水平均低于C组和S组(P<0.05)。结论:一次法咬合重建可造成咬肌细胞内desmin和s Tn I发生不同程度的降解,但这种变化是可逆的。

运动性骨骼肌损伤标志的研究进展

尽管血浆肌酸激酶 (CK) ,肌红蛋白 (Mb)和肌球蛋白重链 (MHC)已经被广泛地用来评价运动性骨骼肌损伤 ,但是近来的研究显示所有这些指标都有其局限性。而与血浆CK ,Mb和MHC形成对照 ,血浆骨骼肌肌钙蛋白抑制亚基 (sTnI)