肝修复术后感染患者的血液及脓液中分离出同一株嗜水气单胞菌

嗜水气单胞菌属于弧菌科的气单胞菌属。近年来由本属细菌引起的疾病日渐增多,也是引起人类腹泻的常见菌,嗜水气单胞菌因其能产生毒力较强的肠毒素,可以引起人类严重的感染。今我室从1例用修复术后感染引发肝脓肿患者的血液和肝脓液中同时分离出同一株嗜水气单胞菌,现报告如下。 1 材料与方法 1.1 病例简介 患者,男,22岁,未婚。

基于mTOR信号通路研究黄芩苷对对乙酰氨基酚诱导肝损伤后肝修复作用

目的探讨黄芩苷对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的肝损伤后肝再生的作用及机制。方法C57BL/6小鼠随机分成对照组、模型组和黄芩苷(40、80 mg/kg)组,小鼠ip APAP(300 mg/kg)1 h后ig黄芩苷,ip APAP 24 h或48 h后检测血清中天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)活性;通过苏木素-伊红(HE)染色法观察肝脏的病理变化;采用q RT-PCR检测肝脏组织中肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)和表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)mRNA表达;通过BeyoClick^(TM)EdU法检测肝脏组织细胞增殖情况;通过免疫组化染色法观察肝脏组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)阳性细胞数量;通过Western blotting检测肝脏组织中PCNA、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p62、微管相关蛋白1轻链3(microtubuleassociated protein 1 light chain,LC3B)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,pm TOR)和p-S6蛋白的表达。给予mTOR抑制剂雷帕霉素后,观察雷帕霉素对黄芩苷促进肝修复作用的影响。结果黄芩苷可以显著减少APAP诱导的急性肝损伤小鼠的肝坏死面积(P<0.05、0.01),上调肝脏HGF、EGF mRNA表达和PCNA、Cyclin D1、p62、p-S6、p-mTOR蛋白表达(P<0.05、0.01),下调LC3B蛋白表达(P<0.05、0.01),从而激活mTOR信号通路,促进APAP诱导的肝损伤后肝再生。此外,黄芩苷对肝再生的促进作用在给予m TOR抑制剂雷帕霉素后减弱(P<0.05)。结论黄芩苷能够通过激活mTOR信号通路,促进肝细胞增殖,并抑制其介导的自噬,从而促进肝修复。

肝脏巨噬细胞及其在肝损伤和修复中的作用

肝脏巨噬细胞在肝脏损伤和修复过程中具有重要调节作用,根据不同的来源和表型,肝脏巨噬细胞分别具有清除细菌病原体、呈递抗原、促进或者抑制肝脏炎症反应的能力,直接参与肝脏疾病的发生发展和损伤修复。本文就肝脏巨噬细胞的功能及其在肝脏损伤和修复中的调节作用进行综述,并总结治疗肝脏疾病的潜在巨噬细胞靶点。

Neuritin与HSP60在急性肝损伤修复中的表达变化及意义

目的探讨Neuritin与HSP60在肝损伤修复过程中的表达变化以及可能的分子机制,为研究肝损伤修复提供实验基础。方法将48只Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为空白组(n=6)和实验组(n=42),空白组不做任何处理,实验组均行70%肝左叶切除以诱导急性肝损伤,并于术后6、12、24、48 h和3、7、14 d再次切除残余肝左叶,采用免疫印迹技术(Western blot)检测Neuritin与HSP60在相应时间点肝组织中的表达变化差异,行苏木精-伊红染色(HE)观察各时间点肝脏病理学改变,同时于尾缘静脉采血检测ATL和AST水平变化。结果 (1)与空白组相比,实验组于术后6、12、24、48 h血清ALT、AST含量持续增高并于48 h达到高峰,3 d开始降低、7 d几乎接近正常,差异具有统计学意义(P<0.05)。病理学提示:与空白组相比,实验组肝小叶结构排列紊乱,气球样变明显,在术后48 h最为明显;(2)在肝损伤修复的整个过程中,Neuritin与HSP60的表达变化呈现截然相反的差异,Neuritin的表达与肝损伤的加重或修复存在显著的负相关性(P<0.001),并且在肝损伤最重的48 h时其表达量最低;HSP60的表达与肝损伤的加重或修复存在显著的正相关性(P<0.001),并且在肝损伤最重的48 h时其表达量最高。结论 (1)采用单纯性70%肝左叶切除术,成功建立了SD大鼠的肝损伤修复模型,其损伤在术后第48小时最重,该方法造模成功率为100%(42/42),操作简单、实用性强,为研究肝再生、肝损伤、肝移植等提供了一种可靠且简便的动物模型;(2)Neuritin的表达在肝损伤后逐渐降低,并在第48小时达到最低,而HSP60的表达逐渐升高,并在第48小时达到最高;(3)Neuritin与HSP60的表达变化与肝损伤修复过程密切相关(P<0.001),呈现出一定变化规律,两者可能通过某种相互作用而产生相应的生物效应,共同参与并促进了肝损伤的再生修复。

肝圆韧带修复肝门部胆管狭窄治疗肝胆管结石

目的探讨利用肝圆韧带修复肝门部胆管狭窄治疗肝胆管结石的临床价值。方法选择50例肝胆管结石患者按随机数字表法随机分为两组:观察组25例利用肝圆韧带修复肝门部胆管狭窄;对照组25例采取局部肝段或肝叶切除。统计分析两组患者术中出血量、手术时间、术后胆漏及残石率、术后肝功能恢复情况。结果观察组患者术中出血量、手术时间明显少于对照组(P<0.05),术后肝功能受损程度及恢复时间明显优于对照组(P<0.05),术后胆漏及残石率差异无统计学意义(P>0.05),治疗效果良好。结论利用肝圆韧带修复肝门部胆管狭窄治疗未合并肝脏病理性改变的肝胆管结石,术中出血量少,手术时间短,取材方便,操作简便,符合胆道生理,效果良好,值得临床推广应用。

肝损伤修复信号通路及中药的肝损伤保护作用研究最新进展

肝损伤是各种生物、化学及物理因素引起的肝组织病理性损伤,肝损伤的修复是肝脏研究的重点,其机制涉及许多信号通路、细胞因子及转录因子。该文系统总结了近年来国内外关于肝损伤修复的信号通路最新研究进展,包括NF/κB通路、Hh通路、STAT3通路、JAK/STAT通路、PI3K/Akt通路、Nrf2/ARE通路及TGF-β/Smad通路等;同时,从中药活性成分、提取物或有效部位、中成药、复方汤剂等视角归纳了中药的肝损伤保护作用最新进展,以期为中药保肝药物研发及临床应用提供一定参考。

异甘草酸镁通过ERK通路影响大鼠肝细胞修复的研究

目的:探讨异甘草酸镁促进急性肝损伤大鼠肝细胞修复的作用,揭示其具体的分子机制。方法:36只Wistar雌性大鼠随机选取24只,按2mL/kg体重给予15%CCl4花生油溶液灌胃,1次/日,共3天,构建急性肝损伤大鼠模型。然后进行实验分组,正常组为正常大鼠(12只),不做特殊处理;模型组为急性肝损伤大鼠(12只),给予0.9%氯化钠注射液干预;治疗组(12只)为急性肝损伤大鼠,按30mL/kg腹腔注射异甘草酸镁注射液,1次/日,连续治疗两周。两周后用ELISA法检测各组大鼠外周血中ALT、AST和IL-6水平,肝组织HE染色并镜下观察各组肝组织形态学变化,免疫组化技术检测ERK及p-ERK蛋白水平,并对结果进行分析。结果:正常组肝细胞形态正常,肝板排列规则。模型组肝细胞均普遍肿胀,可见胞浆脂肪变性及肝细胞坏死。治疗组局部肝板排列欠规则,可见少量单核和淋巴细胞浸润,但整体细胞形态基本恢复。与正常组比较,模型组大鼠外周血ALT、AST和IL-6的水平及肝组织ERK和p-ERK的表达增高(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠外周血ALT、AST和IL-6的水平及肝组织ERK和p-ERK的表达均下降(P<0.05)。结论:异甘草酸镁可以促进急性肝损伤大鼠肝细胞修复,其发挥作用可能与异甘草酸镁抑制ERK及p-ERK表达有关。

Wnt2/β-catenin通路在C57BL/6小鼠肝再生修复中的变化

目的探讨Wnt2/β-catenin通路在C57BL/6小鼠肝再生修复中的变化特征。方法将C57BL/6雄鼠随机分为假手术组(Sham组)、术后1 d组、术后2 d组、术后4 d组、术后6 d组、术后8 d组,手术组小鼠行部分肝切除术(PHx),分别切除肝左叶和中叶。于术后第1、2、4、6、8天收集血浆和肝脏组织,丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)生化分析试剂盒检测血浆ALT和AST活力;免疫组化检测各组Ki67阳性细胞数目;免疫荧光检测HNF4-α和Ki67双阳性细胞数、LYVE1和Ki67双阳性细胞数及β-catenin入核细胞数;Western blot检测各组Wnt2蛋白的表达,分析其在肝再生过程中表达的时间特征。结果PHx后第6天肝质量、肝质量/体质量达到高峰,接近Sham组水平。PHx后第1天肝损伤严重,第4天即可恢复正常。PHx后第2天主要是肝细胞增殖,第4、6天主要是肝窦内皮细胞增殖,同时Wnt2/β-catenin通路被激活。结论肝脏有强大的再生修复功能,与肝实质细胞和肝窦内皮细胞的快速增殖密切相关,Wnt2/β-catenin通路在小鼠肝脏再生修复中被激活。

环状RNA的生物学功能及其在肝损伤与肝再生修复中作用的研究进展

环状RNA(circRNA)是一类新型的内源性非编码RNA,其生物学特性包括表达广泛性、进化保守性、较高稳定性和时空特异性。circRNA具有与RNA结合蛋白相互作用、miRNA海绵作用、参与蛋白质翻译及调控相关基因表达等生物学功能。研究发现,circRNA的差异性表达与肝脏脂肪变性、肝损伤后纤维化、慢性肝炎、肝脏缺血再灌注损伤均有密切关系,同时还参与了肝损伤后肝再生修复的过程。深入了解circRNA在肝损伤肝再生修复过程中的作用,可为肝脏疾病提供治疗靶点,进一步提高肝脏疾病的治疗效果。

肝衰竭血浆透析滤过治疗患者的强化营养支持

目的探索对肝衰竭血浆透析滤过治疗患者的强化营养支持干预效果。方法选取接受血浆透析滤过治疗肝衰竭患者120例,按照住院时间分组,2022年3-10月60例纳入对照组,给予常规营养干预;2022年11月至2023年6月60例纳入干预组,在对照组基础上给予夜间加餐等综合强化营养干预;评价两组患者营养改善情况。结果干预组56例、对照组58例完成研究,干预后干预组白蛋白、前白蛋白水平,皇家自由医院-营养优先排序工具评分、NSR-2002评分显著优于对照组(均P<0.05);Child-Pugh评分显著低于对照组(P<0.05),两组上臂肌围、三头肌皮褶厚度、BMI均较干预前有所改善。结论强化营养支持可以改善肝衰竭血浆透析滤过治疗患者营养状况,延缓疾病进展。

粒细胞集落刺激因子防治小鼠CCl_4所致肝损伤的作用

目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG- CSF)对CCl_4所致小鼠肝损伤的保护和治疗作用以及探讨rhG-CSF动员的外周血干细胞在受损肝组织内定植的能力方法:清洁级BALB/c小鼠,ip 400mL/LCCl_4,2mL/kg,每周2次,诱导肝损伤,sc rhG-CSF 200μg/kg进行预防和治疗.观察各实验组小鼠的生存率、肝组织病理变化、肝功能等指标.分别用免疫组化及流式细胞术观察肝组织中Thy-1和CD34阳性细胞变化,用Y染色体原位杂交法观察rhG-CSF动员的♂小鼠外周血干细胞在肝受损伤的♀小鼠肝脏内的定居能力.结果:rhG-CSF预防组小鼠的生存率、肝组织病理改变、肝功能的酶学指标均好于模型组(P<0.05).治疗后30d,rhG-CSF治疗组小鼠血清中肝功能酶学指标ALT和AST与对照组相比分别有显著性意义(1033.5±350.1nkat/L vs 1983.7±616.8nkat/L,P<0.01;1817.0±483.4 nkat/L vs 3017.3±811.2nkat/L,P<0.05),治疗后8d、15d rhG-CSF组肝脏组织中Thy-1^+和CD34^+细胞明显多于对照组(P<0.05).接受♂小鼠外周血干细胞移植的♀小鼠肝组织可见Y染色体阳性的细胞,主要位于汇管区与中央静脉周围,少数位于脾脏.结论:rhG-CSF预防和治疗均能促进CCl_4所致的小鼠肝损伤修复,提高生存率.

干细胞与肝脏功能重建的研究现状与展望

肝细胞再生或替代是以肝细胞变性、坏死和慢性肝纤维化、肝硬化为代表的肝病治疗的根本出路.肝细胞本身有较强的再生修复能力,在残存肝细胞功能正常时可以快速分裂增生并修复损伤,但这一机制对临床常见的肝损伤修复难以达到理想目标.现有研究显示肝组织中存在干细胞并参与了肝细胞再生和肝损伤的修复,骨髓、胚胎等多种来源的干细胞也具有向肝细胞分化的潜能,这些结果显示了从干细胞的角度探讨肝细胞再生机制及再生肝脏功能的可行性和重要性.干细胞的研究将对肝脏的发育与再生、肝脏疾病的细胞治疗和人工肝组织工程等技术的发展起推动作用,最终将为临床肝病治疗提供全新的措施.本文对肝细胞和不同来源干细胞与肝细胞再生的关系作简要综述和分析.

大鼠肝再生增强因子的基因克隆

目的克隆大鼠肝再生增强因子 (ALR)编码序列 ,并在原核细胞表达。方法按文献报道大鼠肝再生增强因子核苷酸序列合成引物 ,从2周龄大鼠肝组织提取RNA ,利用RT_PCR扩增大鼠肝再生增强因子基因编码区 ;将PCR扩增片断亚克隆到pBV221质粒 ,构建原核表达重组载体 ,导入到大肠杆菌后热诱导表达目的蛋白。结果从大鼠肝脏的RNA中扩增到长约400bp的ALRcDNA编码区基因 ,序列分析表明与文献报道一致 ;重组克隆经热诱导表达出分子量约15kD大小的蛋白质 ,与预期值一致。结论从2周龄大鼠肝组织中成功克隆肝再生增强因子基因 。

美洲大蠊提取物黏糖氨酸对肝纤维化模型大鼠的影响及机制

背景:慢性肝病肝纤维化是可逆转的。有研究表明,美洲大蠊提取物具有一定的抗纤维化作用,其对实验性肝纤维化大鼠起保护作用。目的:观察美洲大蠊提取物黏糖氨酸治疗大鼠肝纤维化效果,初步探讨黏糖氨酸抗肝纤维化的作用机制。方法:采用猪血清诱导免疫性肝纤维化模型大鼠,同时采用0.5,0.25,0.10 g/kg的黏糖氨酸灌胃治疗,放射免疫法检测肝纤4项;免疫组织化学检测肝组织转化生长因子β1、组织金属蛋白酶抑制物蛋白表达强度和阳性细胞率;检测不同浓度的黏糖氨酸与转化生长因子β1、组织金属蛋白酶抑制物相关性。结果与结论:(1)美洲大蠊提取物黏糖氨酸能降低层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原和透明质酸酶水平(P<0.01),降低转化生长因子β1和组织金属蛋白酶抑制物1在肝组织的表达(P<0.01);(2)黏糖氨酸浓度与转化生长因子β1和组织金属蛋白酶抑制物1的蛋白表达呈明显的负相关(|r|>0.9);(3)结果证实,美洲大蠊提取物黏糖氨酸可逆转肝纤维化的改变,其作用机制与黏糖氨酸抑制转化生长因子β1和组织金属蛋白酶抑制物1的表达有关。

肝损伤的干细胞治疗

肝脏疾病是威胁人类健康的重大疾病，晚期可能导致肝坏死及肝硬化甚至肝癌。对于晚期肝病目前有效的治疗是肝移植，但由于肝源的短缺，费用昂贵，使其临床应用受到限制［1］。近年来，干细胞再生医学受到关注，越来越多的研究证明干细胞能够分化为成熟的肝细胞，并在肝损伤修复中发挥重要作用［2-4］。包括胚胎干细胞（embryonic stem cells，ESC）、肝干细胞（hepatic stem cell，HSC）和骨髓干细胞（BMSC）等。与肝移植相比，干细胞更易获得，能够在体外扩增保存，移植简便，并可以自体获得以避免免疫排斥。本文将讨论作为肝再生可能的干细胞来源及其临床应用前景。

芒果苷对大鼠酒精性肝炎的保护作用研究

研究芒果苷(MFN)对大鼠酒精性肝炎(AH)的保护作用及其作用机制。将实验大鼠随机分为正常组、模型组、水飞蓟宾组(SYN,20 mg/kg)和MFN高、低剂量组(100、50 mg/kg),采用灌胃给予40%酒精(10 m L/kg)建立AH大鼠模型,同时给予药物治疗。4周后,检测血清中ALT、AST、TBIL、DBIL和IBIL的浓度,肝组织中TNF-α和IL-6的水平以及NF-κB mRNA的表达,并观察肝组织HE和油红O染色情况。结果表明,模型组大鼠血清中ALT、AST、TBIL、DBIL和IBIL的浓度明显升高(P<0.01),肝组织中TNF-α和IL-6含量以及NF-κB mRNA表达水平亦明显升高(P<0.01),同时肝脏出现大量空泡病变、肝细胞肿胀、脂肪变性、炎性细胞浸润等现象。MFN高、低剂量组对上述指标异常均有明显的改善作用(P<0.01,P<0.05),肝细胞病变程度明显减轻,并且具有剂量依赖性。因此,MFN具有良好的抗AH的作用,其作用机制可能与促进肝细胞修复,调节肝细胞炎症因子TNF-α、IL-6水平和NF-κB的mRNA表达有关。

肝圆韧带在肝外胆管缺损中的应用价值

目的对肝圆韧带在肝外胆管缺损修复中的临床应用价值进行评价分析,为今后的临床诊治工作提供可靠的参考依据。方法肝外胆管缺损患者56例分成对照组和观察组,对照组进行自体静脉移植术,观察组进行带蒂肝圆韧带修复术,观察2组治疗效果。结果观察组患者术后治疗满意度较对照组高(P<0.05),胆漏等并发症的发生率较对照组低(P<0.05),术后随访复发率低于对照组(P<0.05)。结论对肝外胆管缺损患者行肝圆韧带修复术效果好,术后并发症发生率、复发率低,患者满意度高。

肝源性肝干细胞

肝干细胞是指能够参与肝细胞再生和损伤修复的同时具有干细胞特质的细胞的总称。当肝脏或肝功能受到严重损伤,肝干细胞被激活并增殖,分化为肝实质细胞和胆管上皮细胞,使得肝功能得以重建。根据起源不同,肝干细胞可分为肝源性肝干细胞和非肝源性肝干细胞。肝干细胞是具有重要临床价值的细胞,在自我更新、高度增殖和多向分化潜能方面都具有巨大的潜能。近年有实验表明,肝干细胞亦可能是肝肿瘤细胞的起源,它与肝肿瘤的发生发展密切相关,提示肝干细胞的研究对于了解肝损伤修复机理,肝肿瘤的发生发展机制具有重要意义。本文对肝干细胞的分类、来源及特性,肝干细胞的表面标志的主要差别,肝干细胞的活化、分离和培养,肝干细胞分化增殖的调节,肝干细胞与原发性肝癌的关系以及肝干细胞的发展前景的相关研究进展作一阐述。