肝动脉桥式置管转流对供肝及胆道组织细胞凋亡的保护作用

目的验证肝动脉桥式置管转流这一方法是否能够减轻肝动脉缺血(hepatic artery ischemia,HAI)引起的肝胆细胞凋亡。方法应用简易犬肝自体原位移植模型,将24只杂交犬随机分为肝动脉缺血组(HAI组,8只)、肝动脉桥式置管转流组(TBB组,8只)及对照组(8只)。在制模后,3组动物均于冷灌注后不同时点切取肝脏、胆道组织,分别用戊二醛及40 g/L多聚甲醛溶液固定,进行电镜观察和TUNEL染色,观察肝胆组织形态学改变及细胞凋亡情况,并计算两组的凋亡指数。结果在冷灌注后2 h,HAI组电镜下出现较明显的肝胆细胞凋亡现象;肝动脉桥式置管转流组肝胆细胞凋亡现象少见;对照组难以找到凋亡肝胆细胞。TUNEL法染色切片显示,冷灌注后3组肝胆组织内均有少量凋亡细胞,其凋亡指数相差不大(P>0.05);随冷灌注后时间的延长,3组凋亡细胞的数量均有所增加,但HAI组凋亡指数的升高更为显著,肝动脉桥式置管转流组次之,对照组变化不大,3组间差别有统计学意义(P<0.01)。结论肝动脉桥式置管转流对肝移植时肝动脉缺血所导致的肝胆细胞凋亡具有显著保护作用,应在继续完善改进的基础上实施于临床。

肝动脉桥式置管转流对供肝及胆道组织细胞凋亡保护作用的实验研究

目的：验证肝动脉桥式置管转流这一方法是否能够减轻HAI引起的肝胆细胞凋亡。方法：应用简易犬肝自体原位移植模型，将24只西安地区杂交犬随机分为肝动脉缺血组(HAI组)(8只)、肝动脉桥式置管转流组(8只)及对照组(8只)。在制模后，三组动物均于冷灌注后不同时点切取肝脏、胆道组织，分别用戊二醛及4％多聚甲醛固定，进行电镜观察和TUNEL染色，观察肝胆组织形态学改变及细胞凋亡的变化情况，并计算两组的凋亡指数。结果：HAI组在冷灌注后2小时，电镜结果显示出现较明显的肝胆细胞凋亡现象。肝动脉桥式置管转流组电镜下肝胆细胞凋亡现象少见。对照组在电镜下难以找到凋亡肝胆细胞。TUNEL法染色切片显示冷灌注后，三组肝胆组织内均有少量凋亡细胞，其凋亡指数相差不大(p<0．05)；随冷灌注后时间的延K，三组凋亡细胞的数量均有所增加，但HAI组凋亡指数的升高较其它两组更为显著，肝动脉桥式置管转流组肝胆细胞凋亡指数介于其他两组之间，三组间差别显著(p<0．01)。结论：肝动脉桥式置管转流对肝移植时肝动脉缺血所导致的肝胆细胞凋亡具有显著保护作用，应在继续完善改进的基础上实施于临床。

门静脉、肝动脉同时灌注对供肝动脉缺血损伤的保护作用

目的探讨肝移植门静脉再灌注过程中肝动脉缺血(hepaticarteryischemia,HAI)损伤的严重性和应用肝动脉桥式置管(hepaticarterybridge-conduit,HABC)技术实现门静脉、肝动脉同时灌注对这一损伤的保护作用。方法32只犬按随机数字表法随机均分为4组:正常对照组、HAI30min组、HAI2h组和HABC组。后三组分别建立犬自体原位肝脏移植模型,HABC组应用HABC技术使肝动脉、门静脉同时再灌注。术后取供肝组织与胆管组织电镜观察肝细胞和胆管上皮细胞病理学改变。分别应用硫代巴比妥酸法检测肝组织中丙二醛(MDA)浓度、黄嘌呤氧化酶法检测过氧化物歧化酶(SOD)活性、酶标记法检测肝细胞线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性。结果HAI30min即可见供肝肝细胞和胆管上皮细胞水肿、线粒体嵴减少,HAI2h其病理改变进一步加重,胆管上皮尤为明显,而HABC组则见肝细胞和胆管上皮细胞比较完整,胆管上皮绒毛丰富。HAI30min组和HAI2h组肝组织中MDA含量增加,分别为(1.652±0.222)nmol/mgprot和(2.379±0.526)nmol/mgprot,而SOD则降低至(11.15±3.9)U/mgprot和(9.47±3.4)U/mgprot,SDH活性则分别降低至0.362±0.019和0.281±0.029,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);而HABC组MDA含量、SOD和SDH活性与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论HABC技术的实施,可为临床肝移植中预防HAI损伤,减少肝移植术后并发症,特别是胆道并发症的发生提供有效的方法。