肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活体荧光成像检测

目的建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型。方法重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧光信号阳性裸鼠观察肿瘤组织生长情况。免疫荧光检测肿瘤组织中HBsAg表达。结果对裸鼠肝原位移植瘤应用活体荧光系统成像,在肿瘤细胞注射部位检测到荧光信号,解剖动物后可在肝脏组织中观察到异质细胞团块。免疫荧光证实移植瘤中有HBsAg表达。结论肝脏原位移植瘤裸鼠模型建立成功,为抗肝癌药物的研发提供了工具。

原位肝移植术后早期高BNP的影响因素及Nomogram模型的构建

分析原位肝移植术后早期高BNP的危险因素,并构建Nomogram模型。回顾性收集山东第一医科大学第一附属医院2019年11月至2023年7月136例原位肝移植受者的临床资料。根据受者术后3d内BNP峰值水平分为低BNP组(A组,n=77)和高BNP组(B组,≥400 pg/mL,n=59)。采用Logistic回归分析筛选肝移植术后高BNP的危险因素。使用R软件建立列线图预测模型,并计算一致性指数(Cindex),绘制ROC曲线以及绘制校准曲线。结果显示,手术时间、术中输红细胞量、术前BNP、术后3 d内NTproBNP升高是肝移植术后早期高BNP的独立危险因素。根据独立危险因素构建Nomogram模型,经一致性检验模型预测能力强(C-index=0.900,SD=0.010,Z=8.020,P<0.05)。ROC曲线下面积(AUC)为0.900,灵敏度为82.4%,特异度为90.9%。校准曲线显示,模型预测准确性较好。基于手术时间、术中输红细胞量、术前BNP、术后3 d内NTproBNP构建的预测原位肝移植术后早期高BNP的Nomogram模型,可提高预测原位肝移植术后早期高BNP的准确性。

神经母细胞瘤肝及肾上腺移植模型比较

目的 建立神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)肝移植模型,并与肾上腺原位移植模型进行比较,探索模型的特征。方法 采用微量注射针将含有5×10^(5)(SK-N-SH)细胞溶液沿肝叶长轴种植于小鼠肝左叶,造模结束后检测肿瘤的生长、转移情况、相关基因表达及肿瘤组织病理学变化。结果 小鼠接种肿瘤细胞21 d后成瘤率达100%,肿瘤的生长、转移、相关基因表达及病理特征明显。结论 本文通过更为简单的手术造模方法,成功构建了一种神经母细胞瘤肝移植模型,为NB研究者今后科学实验提供了更多理想的模型选择。

人肝癌裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型的建立

目的 :建立人肝癌裸鼠皮下 -肝原位移植瘤模型。方法 :先用组织学完整的新鲜人肝癌组织接种于裸鼠皮下 ,形成皮下移植瘤 ,然后用此移植瘤组织再接种于裸鼠肝内 ,建立肝原位移植瘤模型 (间接肝原位移植瘤模型 ) ,并将其与直接肝原位移植瘤模型、皮下移植瘤模型和腹腔内移植瘤模型作比较。 结果 :建立的间接肝原位移植瘤模型能稳定传代 ,移植瘤存活率达 10 0 % ,自发转移率达 5 7.8%。与直接肝原位移植瘤模型比较 ,该模型移植瘤存活率明显高于后者 (35 .6 % ,P<0 .0 1) ;与皮下移植瘤模型和腹腔内移植瘤模型比较 ,该模型局部侵袭率 (10 0 % )和自发远处转移率 (5 7.8% )明显高于皮下移植瘤模型 (14.5 % ,P<0 .0 1;37.1% ,P<0 .0 5 )和腹腔内移植瘤模型 (18.0 % ,P<0 .0 1;39.3% ,P<0 .0 5 )。 结论 :人肝癌裸鼠皮下 -肝原位移植瘤模型具有高存活率、高侵袭率和高转移率的优点 。

人肝癌裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型的建立

目的:使用α-氰基丙烯酸烷基酯建立人肝癌-裸鼠皮下肝原位移植瘤模型。方法:培养对数生长期的BEL-7402人肝癌细胞,接种于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤后再移植于裸鼠肝内,利用α-氰基丙烯酸烷基酯建立肝原位移植瘤模型(间接肝原位移植瘤模型)。结果:成功的利用α-氰基丙烯酸烷基酯建立了间接肝原位移植瘤模型。移植瘤成功率达93.3%。结论:与传统的肝原位移植瘤模型制作方法比较,利用α-氰基丙烯酸烷基酯建立间接肝原位移植瘤模型方法简便,成功率高,便于推广使用。

人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型的建立

目的建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型。方法使用对数生长期的人结肠癌细胞(lovo)在8只裸鼠结肠浆膜至黏膜逐层注射,以完成原位移植瘤模型的制备,同时皮下种植8只裸鼠作为对照组。分别于第4、6、8、12周各组分别处死裸鼠2只,观察原位种植肿瘤的成瘤率、生长情况、转移率和腹水出现率。结果16只裸鼠实验期间无1只死亡,成瘤率为100%,原位种植成瘤率为100%(8/8),区域淋巴结转移率100%(8/8),肝转移率为100%(8/8),肺脏转移率为75.0%(6/8),腹膜转移率为75.0%(6/8),腹水出现率为27.5%(3/8)。皮下种植组未见转移。结论本实验成功建立了人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,该模型的生物学行为与临床病程非常相似,为研究人结肠癌转移机制和干预措施提供了较为理想的动物模型。

人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立

目的应用不同数量U87-MG细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×10^(10)·L^(-1)、4.0×10^(10)·L^(-1)、5.0×10^(10)·L^(-1)浓度的人脑胶质瘤细胞U87-MG单细胞悬液,接种于18只♂裸鼠的右侧尾状核区,每只接种体积为5μL,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。观察不同接种量实验鼠的生存状态、成瘤情况及脏器转移灶、带瘤生存期,测量肿瘤的最大径,计算肿瘤体积,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染色和免疫组化检查。结果各接种量的实验组成瘤率均为100%,未见颅外转移病灶,3组裸鼠的平均生存时间分别为(46.50±3.27)d、(38.50±3.28)d、(30.67±3.51)d;病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型;免疫组化GFAP和S-100蛋白呈阳性表达。结论立体定向脑内定量注射U87-MG细胞制备的人脑胶质瘤裸鼠原位移植模型成瘤率高、颅内生长稳定、颅外远隔部位转移率低,与人脑胶质瘤病理学及形态学特征相似,能为研究胶质瘤的发生、发病机制、生物学特性以及探寻有效的治疗措施提供可靠的动物模型。

LJH-OS人骨肉瘤裸鼠原位移植模型的建立及其生物学特性

用人成骨肉瘤细胞系LJH- OS的传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。结果发现胫骨原位移植的潜伏期较短,生长快。皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整的纤维包膜,未见肺转移,观察7 周无明显消瘦;而胫骨原位移植瘤浸润基层,无纤维包膜,且发生肺转移,7 周时有明显消瘦。原位移植的裸鼠血清ALP水平高于皮下移植者。说明裸鼠胫骨微环境较皮下组织更适于人骨肉瘤的浸润及转移表达,裸鼠胫骨原位移植模型的恶性生物学行为更接近临床骨肉瘤患者的实际情况,该原位移植模型的建立为骨肉瘤的研究提供了良好的实验模型。

人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立

目的建立成瘤率高、可靠稳定的人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型,为研究人脑胶质瘤的发病机制和治疗方法提供操作平台。方法采用立体定向技术,分别将2.5×105个/5μL体外培养的人脑胶质瘤细胞U87-MG单细胞悬液,接种于15只雄性裸鼠的右侧尾壳核区,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。分别于接种后7,14,21,28 d行活体动物体内荧光成像和核磁共振扫描动态观察肿瘤大小,之后采用心脏灌注技术固定裸鼠脑组织,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染色和免疫组化检查。结果接种U87-MG的裸鼠均于造模后14 d开始脑内出现肿瘤,成瘤率100%,直至28 d肿瘤持续增长,35 d内该造模裸鼠全部死亡,平均生存时间(30.67±2.03)d;病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型;接种后14 d左右是利用该模型进行实验的最佳时机。结论立体定向脑内定量注射U87-MG细胞制作的人脑胶质瘤裸鼠原位移植模型,简便易行、经济实用、成瘤率高、重复性好、颅外远隔部位转移率低、与人脑胶质瘤病理学及形态学特征相似,能为研究胶质瘤的发生、发病机制、生物学特性以及探寻有效的治疗措施提供可靠的动物模型。

人肝原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立及生物学特性的研究

目的为探讨肝原发性恶性淋巴瘤发病机制和为实验治疗提供动物模型.方法采用人肝原发性恶性淋巴瘤术中新鲜组织块植入裸小鼠肝实质内,观察原位移植成瘤率和移植瘤的侵袭、转移,并进行形态学(光镜、电镜、免疫组织化学)、血清学(AFP、乙型肝炎HBsAg、LDH)、染色体核型和流式细胞仪分析.结果在裸小鼠体内建成了一株人肝原发性恶性淋巴瘤原位移植模型(命名为HLBL-0102).移植瘤的病理组织学为肝原发性(非霍奇金B细胞性)恶性淋巴瘤,免疫组织化学显示,CD19、CD20、CD45RO、CD79a阳性,CD3、CD7阴性,血清学AFP阴性,HBsAg、HBsAb、HBeAb及 HBcAb均为阳性,LDH 1 267.5U/L.染色体众数范围55～59条;移植瘤细胞DI值1.57～1.61,均为异倍体.目前该瘤株在裸鼠体内生长3年,已经传至37代,共移植裸鼠283只;肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100%.人肝原发性恶性淋巴瘤在裸鼠肝内自主侵袭性生长,瘤细胞侵入并破坏临近肝组织和门脉区内胆管及静脉,无其他组织、器官侵犯及远处淋巴结累及.原位移植瘤组织经病理学和超微结构观察,流式细胞仪DNA含量测定及染色体核型的分析,结果表明与来源人肝原发性恶性淋巴瘤细胞相一致.结论 HLBL-0102是首次建立成功的人肝原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型,完整地模拟了人肝原发性恶性淋巴瘤患者的临床过程,为研究肝原发性恶性淋巴瘤生物学和实验治疗提供了理想的动物模型.

人脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植动物模型的建立

目的探讨人脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植动物模型建立的技术方法。方法借助动物立体定向仪的引导,采用微注射方法将体外培养人脑胶质瘤细胞U87MG(悬浮于无血清RPMI 1640培养液中,细胞数为108/ml)接种于裸鼠(BALB/c)额叶白质区。接种后观察不同种实验鼠的生存状态,分别于接种后1 h至63 d的不同时间进行裸鼠脑肿瘤组织病理学检查和免疫组织化学分析。结果裸鼠脑内注射体外培养的人脑胶质瘤细胞U87MG的合适速率为0.05μl/min =1μl/20 min,细胞悬液体积1μl,细胞数105,注射时间20 min。按此方案注射U87MG细胞无沿针道返流,恰好在尾状核区形成近圆球形肿瘤体,成瘤率高(100%),肿瘤颅内生长稳定,组织病理学检查符合人脑胶质瘤形态特征,未见脑外转移。结论本研究的人脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植动物模型建立方法精确可靠,重复性好。肿瘤符合人脑胶质瘤的生物学特性,该动物模型可作为研究人脑胶质瘤发生、生物学特性以及各种治疗评价的可靠动物模型。

人肝恶性淋巴瘤裸小鼠原位和皮下移植模型的建立及生物学特性的研究

目的 探讨肝恶性淋巴瘤发病机制，为实验治疗提供工具。方法 采用人肝恶性淋巴瘤术中新鲜组织块分别植入裸小鼠肝实质内和肩胛间皮下，观察原位移植和皮下移植成瘤率，移植瘤的侵袭、转移；并进行形态学（光镜、电镜、免疫组织化学）、血清学[甲胎蛋白（AFP）、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乳酸脱氢酶（LDH）]榆测，染色体核型和流式细胞分析。结果在裸小鼠体内建成了同一人体瘤源人肝原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型（HLBL-0102）和皮下移植模型（HLBL-0103）。移植瘤的病理组织学为肝非霍奇金B细胞性恶性淋巴瘤。免疫组织化学显示：CD19、CD20、CD45RO、CD79a阳性，CD3、CD7阴性。血清学AFP阴性，HBsAg阳性，LDH 1267．5U／L。染色体众数范围55～59条。移植瘤细胞DI值1．57～1．61，均为异倍体。HLBL-0102和HLBL-0103分别传至37代和31代，共移植裸鼠383只。肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100％。HLBL-0102移植瘤在裸鼠肝内自主侵袭性生长，瘤细胞侵入并破坏临近肝组织和门脉区内胆管及静脉，无其他组织、器官侵犯及远处淋巴结被累及。HLBL-0103在裸鼠皮下呈结节状局部生长。结论 HLBL-0102和HLBL-0103是首次建立成功的人肝恶性淋巴瘤裸鼠移植模型，完整地模拟了人肝恶性淋巴瘤患者的临床过程，为研究肝恶性淋巴瘤发病机制和实验治疗提供了理想的动物模型。

裸鼠原位肝癌移植模型的建立及其生物学观察

目的探讨采用Hep G2细胞株建立裸鼠人肝癌原位模型的方法,评价其生物学特性。方法取人肝癌细胞株Hep G2制备皮下移植瘤,然后将瘤块植入裸鼠肝左叶,建立原位移植模型,观察荷瘤鼠生存状态。裸鼠全身衰竭时处死、取瘤,HE染色及免疫组化法观察瘤组织的病理特点、血管生长及肿瘤细胞凋亡情况。结果种瘤成功率90%,荷瘤鼠中位生存期76.7d,肿瘤直径(16.8±2.2)mm,体积(965.3±333.3)mm^3,重量(1.1±0.4)g。瘤组织早期具有旺盛的增殖能力,晚期癌组织中Caspase3、TUNEL呈强阳性表达。结论由原位移植法建立的裸鼠人肝癌模型,造模时间短、成瘤率高,生物学行为与临床肝癌相似,是基因药物筛选研究的理想模型。

人CHG-5胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立及其生物学特性分析

目的 建立人脑胶质瘤裸鼠脑内原位移植动物模型并探讨其生物学特性。方法 采用瘤细胞悬液接种法 ,将人脑CHG 5胶质瘤细胞接种于裸鼠大脑实质内。分别于接种后 8、14、19、2 4和 3 0d处死动物并行病理检查、胶质纤维酸性蛋白免疫组化、染色体核型分析及透射电镜检查。结果 肿瘤移植成瘤率为 10 0 % ,肿瘤生长稳定 ,肿瘤病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型。结论 本移植瘤模型能作为研究胶质瘤发生、生物学特性以及治疗研究的可靠动物模型。接种后

裸鼠皮下人肝癌移植瘤模型的建立

目的 :建立裸鼠皮下人肝癌移植模型 .方法 :人肝癌细胞株SMMC - 772 1制成 0 2mL 含 5× 10 6个细胞悬液接种于 4～ 6周龄裸小鼠颈背部皮下 ,按时观察肿瘤生长情况 ,36d处死 .瘤组织作病理及电镜检查 ,周围血作与肿瘤相关的甲胎蛋白 (AFP)检测 .结果 :该模型具有类似原发性肝癌的形态学特征 .结论 :成功建立了人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型 .

消痰散结方对裸鼠胃癌原位移植瘤模型E-cad基因甲基化的影响

目的:研究消痰散结方对胃癌裸鼠原位移植瘤模型基因甲基化的影响,探讨消痰散结方抗癌作用机制。方法:培养胃癌细胞系MKN-45,制备胃癌裸鼠原位移植瘤模型,造模后分为模型对照组和中药组,分别给予生理盐水和消痰散结方水煎剂。称重法测定抑瘤率,RT-PCR法测定E-cad基因表达,Methylight法测定E-cad基因甲基化水平。结果:消痰散结方能抑制肿瘤生长以及转移,抑瘤率达45.17%。消痰散结方能逆转E-cad基因甲基化,增加E-cad mRNA表达,与模型对照组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:消痰散结方可以有效抑制胃癌细胞生长和转移,逆转E-cad基因甲基化可能是其作用机制之一。

苦参碱联合顺铂对人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤模型瘤体生长及caspase-3和Survivin表达的影响

目的分析苦参碱联合顺铂对人肝癌细胞株Hep G2裸鼠移植瘤模型瘤体生长及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和存活素(Survivin)表达的影响。方法于BALB/c裸鼠腋部皮下注入人肝癌细胞株Hep G2以此构建移植瘤模型。在成瘤后,将28只裸鼠随机分为对照组(等量生理盐水)、顺铂组(顺铂2 mg/kg)、苦参碱组(苦参碱100 mg/kg)、联用组(苦参碱100 mg/kg+顺铂2 mg/kg)各7只,各组均通过腹腔注射给药。观察各组瘤体生长状况,对各组抑瘤率进行计算。通过免疫组化法对各组瘤组织中caspase-3、Survivin表达水平进行检测,计算和比较各组阳性细胞率。结果联用组裸鼠抑瘤率为80. 00%,较顺铂组(64. 00%)、苦参碱组(36. 00%)明显升高(P <0. 05)。联用组裸鼠caspase-3阳性细胞率为(77. 89±7. 35)%,较对照组(19. 89±4. 14)%、顺铂组(64. 86±9. 34)%、苦参碱组(36. 97±9. 35)%均显著上升(P <0. 05)。联用组裸鼠Survivin阳性细胞率为(20. 04±4. 37)%,较对照组(84. 85±14. 75)%、顺铂组(39. 05±7. 69)%、苦参碱组(64. 06±9. 14)%均显著降低(P <0. 05)。结论单用顺铂或苦参碱对人肝癌细胞株Hep G2裸鼠移植瘤均具有一定的抑瘤作用,但二者联用的抑瘤作用更为明显。其作用机制可能与苦参碱联合顺铂处理可对caspase-3、Survivin表达水平造成影响,进而促使肿瘤细胞凋亡存在密切关系。

采用组织块移植法快速建立裸鼠原位骨肉瘤模型

背景:骨肉瘤细胞起源于间叶组织这一特点使得骨肉瘤动物模型的构建存在较多困难,进展缓慢的问题。目的:采用组织块移植法建立裸鼠原位骨肉瘤模型,并观察和评价其生物学特性。方法:选用SPF级6周龄裸鼠15只,将制备好的MG-63骨肉瘤细胞悬液注射到裸鼠右前肢腋下,成瘤后连续传3代,待肿瘤生长稳定后将瘤块组织移植到裸鼠下肢胫骨髓腔内,评价其生物学特性,采用X射线观察裸鼠成瘤率和成瘤特点。并以正常裸鼠5只做对照。结果与结论:15只裸鼠造模过程顺利,造模后通过观察1只成瘤失败,成瘤率为93%;造模后观察发现采用组织块移植法三四周可见裸鼠下肢局部肿瘤状组织形成,四五周后X射线观察可见裸鼠胫骨中上段出现不明显的溶骨以及瘤样骨形成;骨肉瘤模型组碱性磷酸酶的表达水平明显高于正常对照组(P<0.01)。数据表明采用组织块移植法进行裸鼠原位骨肉瘤造模,其造模方法简单,成瘤率高,瘤体生长速度快,对骨皮质及周围软组织的破坏力较强,接近临床骨肉瘤患者的实际情况。

两株新的人结直肠癌裸鼠原位移植肝转移模型的建立及超微结构的研究

两株新的人结直肠癌裸鼠原位移植肝转移模型的建立及超微结构的研究脱朝伟①刘秋珍张艳华为探讨治疗结直肠癌肝转移及预防结直肠癌根治术后肝转移的有效方法，作者在建立了人肝癌、胰腺癌裸鼠原位移植模型的基础上［１－３］又将组织学完整的结直肠癌组织块成功地原位移植...