人肝受体同系物1（hLRH-1）不同变异体在人胚胎组织的表达谱

目的分析人肝受体同系物1（hLRH-1）不同变异体在人胚胎组织的表达谱。方法通过设计特异引物，并经常规RT—PCR方法检测hLRH-lvl和hLRH-1在三例引产胎儿各组织中的表达情况；同时以实时荧光定量RT—PCR法分析总hLRH-1的mRNA的相对表达丰度。结果hLRH—lvl在人类各不同发育阶段的胎儿组织广泛表达，而hLRH-1则仅局限于肝、胃、小肠和胰腺组织。结论hLRH—lvl和hLRH-1在人胎儿组织表达谱的差异提示它们在早期胚胎发育中可能起不同的作用。

肝细胞癌中载脂蛋白M,肝受体同系物1和肝细胞核因子1α表达的相关性分析

目的:探讨肝细胞癌(HCC)组织和癌旁组织中载脂蛋白M(apoM)、肝受体同系物1(LRH-1)和肝细胞核因子1α(HNF-1α)的表达并分析3者之间的相关性。方法:采用RT-PCR和免疫组化分别检测17例原发性肝细胞癌和相应癌旁组织中apoM、LRH-1、HNF-1αmRNA的表达及apoM和HNF-1α蛋白的表达。结果:apoM、LRH-1和HNF-1αmRNA及apoM和HNF-1α蛋白在癌组织中的表达均明显高于癌旁组织(P均<0.01)。LRH-1、HNF-1αmRNA和apoMmRNA表达均呈正相关关系(依次为r=0.463,P<0.01;r=0.356,P<0.05)。结论:肝细胞癌中apoM的表达和LRH-1及HNF-1α表达密切相关,LRH-1和HNF-1α可能是apoM表达的重要调节因子。

肝受体同系物1对大鼠急性胰腺炎细胞模型中腺泡细胞损伤修复的影响及其机制

目的探讨肝受体同系物1(NR5A2)对大鼠急性胰腺炎(AP)细胞模型中腺泡细胞损伤修复的影响及其机制。方法将大鼠胰腺腺泡细胞系AR42J细胞分为模型组和正常对照组,模型组予100 nmol/L雨蛙素刺激24 h构建体外AP模型,正常对照组予相同体积的磷酸盐缓冲液培养24 h。取对数生长期的AR42J细胞分为对照组、沉默NR5A2组(KD组)和对照慢病毒感染组(LV-control组)。KD组用慢病毒感染AR42J细胞,对照组不处理,LV-control组感染相同体积的对照慢病毒载体。慢病毒感染96 h后,对照组、KD组和LV-control组均予2%胎牛血清饥饿12 h,100 nmol/L雨蛙素刺激细胞24 h,分别设为正常模型组(CAE组)、沉默NR5A2+雨蛙素组(KC组)和对照慢病毒+雨蛙素组(LV-control+CAE组)。定量逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的m RNA表达量,比色法检测细胞淀粉酶的活性,蛋白质印迹法检测NR5A2和核因子κB P65的表达,细胞增殖实验检测细胞的增殖情况。结果模型组IL-1β、IL-6、TNF-αm RNA及淀粉酶表达量均高于正常对照组(均P <0.001),体外AP模型构建成功。模型组NR5A2 m RNA及蛋白表达量均低于正常对照组,核因子κB P65表达量高于正常对照组(均P <0.05)。慢病毒感染96 h后,KD组NR5A2 m RNA及蛋白表达量均低于对照组和LV-control组[(0.47±0.07)比(1.00±0.07)、(1.00±0.08),(0.39±0.10)比(1.01±0.08)、(1.04±0.20)](均P <0.05)。雨蛙素刺激24 h后,KC组IL-1β、IL-6、TNF-αm RNA及淀粉酶表达量均高于CAE组及LV-control+CAE组(均P <0.05)。KC组Ed U阳性百分比低于对照组、CAE组及LV-control+CAE组[(7.97±0.29)%比(71.70±1.64)%、(51.63±0.90)%、(45.37±1.31)%](P <0.001)。KC组核因子κB P65表达量高于CAE组和LV-control+CAE组(P <0.001)。结论在体外AP细胞模型中,NR5A2的表达降低可以加重腺泡细胞的炎症反应,抑制腺泡细胞的增殖和再生,影响腺泡细胞的损伤修复,其机制可能与上调核因子κB的表达有关。

自然流产胚胎绒毛组织中lrh-1基因表达的研究

采用实时荧光定量PCR(Q-RT-PCR)技术,对30例自然流产和30例正常妊娠者的胚胎绒毛组织进行肝受体同系物-1(lrh-1)mRNA检测,同时测定2组人员血清孕酮质量浓度.结果显示:自然流产胚胎绒毛组织中lrh-1mRNA的表达水平为(0.001 385±0.000 335),与正常妊娠胚胎绒毛组织中lrh-1 mRNA表达(0.001 497±0.000 447)无明显差异(P>0.05);自然流产者平均血清孕酮质量浓度((7.17±2.02)ng.mL-1)明显低于正常妊娠者((27.75±1.67)ng.mL-1),二者具有显著性差异(P<0.05);两组lrh-1与孕酮质量浓度相关系数分别为0.37和0.34.推论lrh-1与人类血清孕酮合成无明显相关性,在自然流产中可能不是影响人类胚胎发育的主要因素.

livin、LRH1、Ki-67在骨肉瘤中的表达及与预后的关系

目的探讨凋亡抑制蛋白生存蛋白(livin)、肝受体同系物1(LRH1)、Ki-67在骨肉瘤中的表达及与预后的关系。方法回顾性分析50例骨肉瘤患者的临床资料,收集手术切除后骨肉瘤患者的骨肉瘤组织标本50例及相应的癌旁正常组织标本50例,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组化法检测骨肉瘤组织和癌旁正常组织中livin、LRH1、Ki-67的表达情况,并根据预后情况将组织标本分为死亡组(n=15)和生存组(n=35)。分析骨肉瘤组织中livin、LRH1、Ki-67的表达与患者预后的关系。结果骨肉瘤组织中livin、LRH1、Ki-67的阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。死亡组骨肉瘤组织中livin、LRH1、Ki-67的阳性表达率均高于生存组骨肉瘤组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。单因素分析结果显示:livin、LRH1、Ki-67的表达与骨肉瘤患者的死亡有关(P﹤0.01);多因素分析结果显示:livin、LRH1、Ki-67的表达是影响骨肉瘤患者死亡的独立影响因素。结论 livin、LRH1、Ki-67在骨肉瘤组织中的阳性率表达均较高,三者共同参与骨肉瘤的发生和发展。

ATP结合盒转运子A1调控载脂蛋白M表达的通路

目的研究人肝癌细胞株HepG2中ATP结合盒转运子A1(ABCA1)是否通过肝受体同系物(LRH1)调节载脂蛋白M(apoM)的表达。方法分别用肝X受体激动剂GW3965或ABCA1阻滞剂DIDS作用于HepG2,应用RT-PCR法检测ABCA1、LRH1、apoM及apoAI的mRNA水平。结果与DMSO组比较,GW3965能显著增加ABCA1mRNA的表达(P<0.01),且呈剂量依赖性下调LRH1(P<0.01),但apoM和apoAI mRNA水平无明显变化(P>0.05);与GW3965单独作用组比较,GW3965与DIDS联合用药组apoM与apoAI的基因表达均明显下调(P<0.05),但ABCA1和LRH1水平均无明显变化(P>0.05)。结论 ABCA1不通过LRH1调节apoM的表达。