肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ的研究进展

肉碱棕榈酰转移酶 (CPT Ⅰ )是脂肪酸氧化过程中的一种限速酶 ,催化脂肪酸转运至线粒体基质进行 β氧化。它位于线粒体外膜 ,通过过氧化物酶体增殖物激活受体、丙二酰辅酶A、磷酸化 脱磷酸化依赖的细胞骨架成分在转录水平、翻译及翻译后水平接受调节 ,由于它在能量代谢中起关键作用 ,CPT

束缚应激对大鼠血脂及肝脏PPARα、L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达的影响

目的观察束缚应激后大鼠血脂和肝脏过氧化酶体增殖物激活型受体(PPARα)、肝型肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(L-CPT-Ⅰ)mRNA和蛋白的变化,初步探讨应激与血脂的关系。方法健康雄性Wistar大鼠,分为正常对照组(C)、束缚1周组(R1)、束缚2周组(R2)和束缚4周组(R4),每组8只。全自动生化仪测定血脂水平,铜显色法测定血清中游离脂肪酸(FFA)水平。分别用RT-PCR和Western Blot方法检测肝脏PPARα及其靶基因L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达水平。结果束缚应激组皮质醇和去甲基肾上腺素水平均明显高于对照组(P<0.01)。R1、R2、R4组大鼠血清FFA分别为(836.33±90.32)、(795.01±62.12)、(829.56±72.64)μmol/L,均明显高于C组〔(620.83±52.21)μmol/L,P<0.01〕。同样,R1、R2、R4组大鼠血清TG和HDL-C均明显高于C组(P<0.05,P<0.01)。与C组相比,R1、R2、R4组大鼠肝脏中PPARα和L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达均增加(P<0.01)。各应激组间这些指标变化差异均无显著性(P>0.05)。结论束缚应激后大鼠血清FFA、TG和HDL-C水平升高,这可能与其肝脏PPARα及L-CPT-Ⅰ表达增加有关。

断乳后饲料构成对大鼠肝脏CPT-ⅠmRNA表达影响

目的研究断乳后饲料构成对大鼠肝脏肉碱棕榈酰转移酶-I(CPT-I)mRNA表达的影响。方法新生Wistar雄性大鼠24 d断乳,按体重随机分为A、B、C、D 4组,分别喂饲高碳水化合物、高蛋白质、高不饱和脂肪酸和高饱和脂肪酸构成饲料3周后,基础饲料喂养2周,A组按体重随机再分为A1、A2 2组。A1组喂饲基础饲料作为对照组,A2和B、C、D 4组给予高脂饲料喂养6周,A2组作为高碳水化合物组。动态检测大鼠的体重、体脂含量、血糖及肝脏肉碱棕榈酰转移酶-I mRNA水平。结果实验末期,C组大鼠体重、体脂含量和血糖均明显低于A2组(P<0.05);B组大鼠体重和体脂含量明显低于A2组(P<0.05),但血糖水平高于A2组;D组大鼠体重明显低于A2组(P<0.05),但血糖和体脂含量与A2组差异无统计学意义(P>0.05)。动态观察表明,C组大鼠CPT-I mRNA水平持续升高,且在实验末期明显高于其他组。结论断乳后进食高不饱和脂肪酸构成饲料可能通过持续增加CPT-I基因表达,抑制大鼠肥胖形成。

孕鼠补充二十二碳六烯酸对仔鼠肝脏肉碱棕榈酰转移酶-ⅠmRNA表达的影响

目的研究孕鼠补充二十二碳六稀酸(DHA)对仔鼠脂肪代谢及肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)mRNA水平的影响。方法成年SD雌鼠随机分成A、B、C三组,待其妊娠后A组给予基础饲料、B组补充低剂量的DHA(1g/kg bw),C组补充高剂量的DHA(2g/kg bw)。所有雄性仔鼠出生后均由A组母鼠哺乳,断乳后给予基础饲料喂饲至出生后第8周。每组8只,动态观察仔鼠的体重、体脂含量、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)及CPT-ⅠmRNA水平。结果三组仔鼠的出生体重差异无显著性(P>0.05);仔鼠出生后的第8周时,C组的体重显著低于A组(P<0.05),B、C组的体脂含量、TG水平显著低于A组(P<0.05),而C组HDL-C水平显著高于A组(P<0.05),但三组TC水平差异无显著性(P>0.05)。动态观察表明,肝脏CPT-ⅠmRNA水平持续性出现B、C高于A组,C组高于B组。结论孕期补充DHA可能通过持续性上调仔鼠肝脏CPT-Ⅰ基因表达来增强脂肪酸的氧化,降低血脂水平,但孕期摄入过量的DHA可能对子代产生不利影响。

疲劳与束缚应激对大鼠主动脉肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ及5-羟色氨受体的影响

目的 观察疲劳与束缚应激对大鼠主动脉血管内皮功能与肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ（CPT-Ⅰ）、过氧化物酶体增殖物激活受体δ（PPARδ）、5-羟色氨1D（5-HT1D）、5-羟色氨2A（5-HT2A）受体表达的影响.方法 健康雄性Wisar大鼠45只,随机分为对照组、疲劳组和束缚组.观察大鼠一般状况、主动脉内皮细胞形态和结构,检测血中内皮素（ET-1）和一氧化氮（NO）水平,采用实时PCR和Western印迹检测主动脉CPT-Ⅰ、PPARδ和5-HT1D、5-HT2A受体基因和蛋白表达.结果 与对照组比较,疲劳和束缚应激均可导致大鼠主动脉内皮结构损伤,血清ET-1水平升高[（124±18）ng/L比（161±18）ng/L、（154±17）ng/L]（P＜0.01,P＜0.05）,血浆NO水平降低[（63±16）μmol/L比（39±8）μmol/L、（41±7）μmol/L]（P＜0.05）;疲劳应激大鼠主动脉CPT-Ⅰ和PPAR-δmRNA表达下调,分别为[（1.23±0.21）比（0.42±0.05）]、[（1.09±0.10）比（0.25±0.07）]（均P＜0.01）,同时CPT-Ⅰ和PPAR-δm蛋白表达亦下调[（1.32±0.07）比（0.83±0.04）]、[（1.41±0.05）比（0.75±0.06）]（均P＜0.01）;疲劳、束缚应激均可导致主动脉5-HT1D受体mRNA和蛋白表达下调[（1.10±0.15）比（0.46±0.13）、（0.45±0.02）],[（1.19±0.05）比（0.71±0.06）、（0.70±0.05）]（P＜0.01）;同时5-HT2A受体mRNA和蛋白表达上调[（0.99±0.08）比（6.73±0.46）、（7.01±1.56）],[（0.64±0.03）比（0.79±0.05）、（0.82±0.03）]（均P＜0.01）.结论 过度疲劳与情绪抑郁均可损伤血管内皮结构与功能,其中肉碱代谢异常为主的能量变化和5-HT受体调节异常在其中发挥重要作用.

胰岛素、胰高血糖素对体外培养犊牛肝细胞CPT-Ⅰ和CPT-ⅡmRNA表达的影响

体外原代培养犊牛肝细胞,添加不同浓度的胰岛素(insulin,INS)(0、1、10、100、1 000nmol/L)和胰高血糖素(glucagon,GLN)(0、1、10、100、1 000nmol/L),每个处理做3个重复,分别培养1h后,提取总RNA。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,检测肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ(carnitine palmitoyl transferase,CPT-Ⅰ)和肉碱棕榈酸转移酶Ⅱ(carnitine palmitoyl transferase,CPT-Ⅱ)mRNA表达的变化。结果显示,随着培养液中INS含量的升高,肝细胞中CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量逐渐降低,呈现一定的剂量依赖性。随着培养液中GLN含量的升高,肝细胞中CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量均升高,呈现一定的剂量依赖性,且当GLN的添加浓度高于100nmol/L时,CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量显著升高(P<0.01)。结果表明,INS可在一定程度上抑制脂氧化关键酶的表达,GLN可显著促进脂氧化关键酶的表达。

孕期补充二十二碳六烯酸对母鼠脂肪代谢及CPT-Ⅰ mRNA表达的影响

目的探讨孕期补充二十二碳六烯酸(DHA)对母鼠脂肪代谢和肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)mRNA表达的影响。方法将SD雌鼠按体重随机分成A、B、C3组,孕期分别食用补充高剂量DHA膳食(A)、补充低剂量DHA膳食(B)、普通膳食(C),待母鼠分娩,实验结束。观察母鼠妊娠期间体重变化及各组子鼠出生数量、出生体重情况,检测母鼠产后肾周脂肪含量、血清甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、血清高密度脂蛋白(HDL-C)水平、瘦素(Leptin)及肝脏组织中CPT-ⅠmRNA的表达丰度。结果各组孕鼠妊娠时间、产子数量、子鼠出生体重均无明显差异,但A、B组的母鼠产后血清甘油三酯水平低于C组;A组母鼠孕期增重量、肾周脂肪含量、总胆固醇、瘦素水平均明显低于C组;A、B组母鼠产后肝脏组织的CPT-ⅠmRNA水平高于C组。结论孕期补充DHA有调节母体血脂、减少体内脂肪含量的作用,而CPT-Ⅰ基因表达的上调可能是其一潜在机制。