肝癌局部注射丝裂霉素与中药“肝复康”的临床及实验对照分析

肝癌局部注射丝裂霉素与中药“肝复康”的临床及实验对照分析冯晓灵，蒋亚生，李柏中国人民解放军第九七医院（徐州２２１００４）原发性肝癌病程进展快，手术切除率低，故研究非手术疗法很重要。本院在动物实验的基础上，采用Ｂ超引导下局部注射丝裂霉素及中药：“肝复康...

肝复康胶囊对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用

目的 :探讨中药肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用。方法 :采用四氯化碳致大鼠肝纤维化模型 ,观察肝复康对肝功能及肝细胞损伤超微结构的影响。结果 :肝复康明显改善肝细胞变性及炎细胞浸润等情况 ,同时明显降低血清转氨酶活性、升高血清白蛋白 ,降低白球蛋白比例 ;电镜观察表明肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线粒体等细胞器的损伤有保护作用。结论 :肝复康能明显减轻四氯化碳所致的肝细胞损伤 ,保护肝细胞 ,改善肝功能。

肝复康对肝纤维化大鼠肝组织NF-κB、MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的研究中药肝复康对肝纤维化大鼠肝脏NF-κB、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP-2)基因表达的影响。方法随机将SD大鼠分为正常对照组、模型组、小剂量、中剂量和大剂量治疗组,制备CCl4肝纤维化模型,自第9周起,给予中药肝复康治疗至第20周。采用Western-Blot法检测NF-κB表达;采用RT-PCR法观察NF-κB、MMP-2和TIMP-2 mRNA水平。结果模型组大鼠肝组织NF-κB、MMP-2和TIMP-2表达增加,肝复康可明显抑制上述因子的表达(P<0.01),且三者mRNA水平在各组间呈显著正相关。结论肝复康治疗肝纤维化可能与其抑制NF-κB、MMP-2和TIMP-2的表达有关。

肝复康滴丸剂制剂的工艺学研究

目的:确定肝复康滴丸的最佳工艺条件。方法:采用正交试验设计,从提取物与基质配比、滴温、滴速、滴距等方面进行考察,以丸重变异系数、溶散时限、外观综合质量3个指标对实验结果进行方差分析,优选制剂工艺的最佳条件。结果与结论:根据试验确定最佳工艺为提取物:聚乙二醇(1∶1.5)、PEG4 000∶PEG6 000(1∶1)、滴温85℃、滴速12滴/m in、滴距5 cm,所制备滴丸的各项指标符合药典规定。

肝复康对HSC-T6细胞Wnt信号转导通路调节作用的观察

目的观察中药肝复康含药血清对肝星状细胞T6(HSC-T6)细胞株经典Wnt信号转导通路中的关键调节因子Wnt1、糖原合成激酶3β(GSK-3β)、β-链蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)以及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)基因表达的影响,探讨其抗纤维化的作用及分子机制。方法制备肝复康含药血清,用乙醛及肝复康含药血清干预HSC-T6细胞株,采用RT-PCR和Western-Blot法分析Wnt1、Gsk-3β、β-catenin、cyclinD1和α-SMA表达的变化。结果肝复康含药血清处理可上调HSC-T6细胞株Gsk-3βmRNA的表达,下调Wnt1、β-cateninc、yclinD1和α-SMA的表达。结论肝复康对肝纤维化具有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过调节经典的Wnt信号通路中的关键因子的表达,从而抑制α-SMA mRNA的转录,以减少细胞外基质的形成。

肝复康经JNK信号通路在肝星状细胞凋亡中的调节机制

目的探讨中药肝复康经JNK(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路在肝星状细胞凋亡中的调节机制。方法将SD大鼠随机分为5组:正常对照组(C),模型组(M),肝复康高(HT)、中(MT)、低(LT)剂量治疗组,每组给予相应的处理;HSC-T6细胞株随机分为3组:正常对照组、乙醛组及肝复康治疗组。HE染色法观察肝组织形态结构变化;RT-PCR法测定MKK4、MKK7、JNK1、JNK2、COX-2、Survivin、Caspase-3、α-SMA、collagenⅠ和collagenⅢ的基因表达水平;免疫组织化学法和免疫蛋白印记法观察COX-2在肝组织和肝星状细胞中的表达。结果正常组中COX-2几乎不表达。与正常组相比,模型组中COX-2表达显著增加(P<0.05)。与模型组相比,肝复康治疗组各组中COX-2表达均明显降低,其中,中剂量组最明显(P<0.05)。与正常组相比,模型组中MKK4、MKK7、JNK1、JNK2、COX-2、Survivin的基因表达水平均显著上调(P<0.05)。与模型组相比,肝复康治疗组各基因表达水平均明显减弱,中剂量组最明显(P<0.05),其中Caspase-3基因表达呈相反趋势。COX-2和Survivin的表达呈正相关,和Caspase-3的表达呈负相关。检测α-SMA、collagenⅠ与collagenⅢ基因表达,与模型组相比,中剂量治疗组表达水平明显下调(P<0.05)。结论肝复康可通过抑制JNK信号通路的传导诱导肝星状细胞凋亡,发挥抗纤维化作用。

中药肝复康对实验性肝硬化内毒素血症的预防及其抗肝纤维化作用的研究

目的 :观察抗肝纤维化中药肝复康对实验性肝硬化内毒素血症的预防作用。 方法 :实验分 3组 ,Ⅰ组 :正常对照组 ;Ⅱ组 :肝硬化模型组 ;Ⅲ组 :肝复康预防组。观察指标包括血清内毒素、一氧化氮、血浆内皮素含量 ,以及肝脏组织病理学变化。 结果 :Ⅱ组上述各指标水平均明显增高 ,而Ⅲ组均呈不同程度的低值 ,与Ⅱ组相比差异显著 (P <0 .0 1)。肝脏组织病理学显示 ,预防应用肝复康能显著减轻肝细胞变性、坏死及纤维组织的形成。 结论 :中药肝复康用于慢性肝病的预防 ,可将抗内毒素血症与抗肝纤维化结合起来 ,有望阻断甚至逆转慢性肝病的进程。

肝复康滴丸对大鼠利胆作用的实验研究

目的:观察肝复康滴丸对大鼠的利胆作用,为临床应用提供理论依据。方法:利用胆管引流法测定肝复康滴丸对大鼠胆汁流量及胆固醇和胆红素分泌的影响。结果:肝复康滴丸各剂量组各个时间点均能增加胆汁流量,以中剂量组药后1h差异最为显著(P<0.01);各剂量组胆汁中胆红素及胆固醇含量均不同程度的降低,以中剂量组的差异最为显著(P<0.01)。结论:肝复康滴丸能增加胆汁流量,抑制胆固醇和胆红素的分泌,提示肝复康滴丸具有利胆作用。

肝复康对PDGF介导的肝星状细胞信号转导的分子机制

目的:通过观察中药肝复康含药血清对肝星状细胞(HSC-T6)细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA基因表达的影响。探讨其抗纤维化的作用机制。方法:常规方法制备肝复康含药血清,并用不同浓度肝复康含药血清干预HSC-T6细胞株,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察分析Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达的变化。以Western blotting检测ERK蛋白在不同干预情况下的表达。结果:经肝复康含药血清处理,可下调HSC-T6细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达以及ERK蛋白表达水平,不同浓度含药血清作用强度也有所不同。结论:中药肝复康对肝纤维化具有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过非特异性干扰PDGF功能,抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA的转录,以达到抗纤维化的作用。

自制肝复康胶囊辅助治疗HCC临床观察

目的探讨自制肝复康胶囊辅助治疗原发性肝细胞肝癌(HCC)的疗效。方法将100例经临床及 影像学、血清学、活组织检查确诊为HCC的患者随机分成A、B两组各50例,其年龄、性别、病情等无显著差异(P >0.05),入院后A、B两组均行肝动脉化疗栓塞术(TACE),术后两组均予常规治疗,A组加服肝复康胶囊,观察 两组疗效。结果A组患者的的生存率、血清AFP下降率及各项免疫因子水平等均优于B组。结论 TACE术 后口服肝复康胶囊,可提高HCC患者生活质量及免疫力,延长生存时间。

肝复康对肝纤维化大鼠肝组织整合素α5β1/FAK信号通路的调节作用

目的研究整合素α5β1/FAK信号通路在肝纤维化中的作用以及中药肝复康对此通路的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、肝复康大剂量、中剂量和小剂量治疗组,皮下注射10%CCl4制备肝纤维化模型,自第9周起,给予肝复康灌胃治疗至第20周。采用免疫组化法检测大鼠肝组织整合素α5和整合素β1的表达情况;采用RT-PCR法检测FAK mRNA水平。结果模型组大鼠肝组织整合素α5表达水平(0.50±0.01)比正常对照组(0.23±0.13)明显增高(P<0.01),而肝复康治疗后(大、中、小剂量治疗组分别为0.35±0.03、0.33±0.01、0.38±0.02)比模型组明显降低(P<0.01);模型组大鼠肝组织整合素β1表达水平(0.44±0.02)比正常对照组(0.27±0.01)明显增高(P<0.01),肝复康治疗后(大、中、小剂量治疗组分别为0.37±0.01、0.34±0.01、0.39±0.01)表达水平较模型组明显降低(P<0.01);模型组动物FAK mRNA水平(0.73±0.01)比正常对照组(0.11±0.02)明显增高(P<0.01),而肝复康治疗后(大、中、小剂量治疗组分别为0.33±0.03、0.28±0.01、0.18±0.01)比模型组明显降低(P<0.01)。结论整合素α5β1/FAK信号通路的激活在肝纤维化中发挥重要作用,肝复康治疗肝纤维化作用的机制可能与抑制整合素α5β1/FAK通路的信号转导有关。

中药肝复康对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织PI3K/PKB信号通路和PDGFR-β表达的影响

目的探讨中药肝复康对大鼠肝纤维化组织PI3K/PKB信号通路和血小板衍生生长因子受体-β(PDGFR-β)表达的影响。方法制备大鼠四氯化碳诱导的肝纤维化模型,给予肝复康干预。采用免疫组织化学法检测肝组织PDGFR-β蛋白的表达,采用半定量RT-PCR法测定肝组织PI3K和PKB1mRNA水平的变化。结果与对照组比,模型组肝组织PDGFR-β蛋白的表达上调,而肝复康治疗组其表达被显著抑制;模型组肝组织PI3K和PKB1 mRNA水平的相对光密度值分别为2.08±0.09和2.54±0.10,较对照组均显著上升(0.86±0.04和0.36±0.03,P<0.01),但肝复康治疗组其水平均被显著抑制(分别为0.88±0.05和0.41±0.03,与模型组比,P<0.01)。结论肝复康对肝纤维化的治疗作用可能与其作用于PI3K/PKB信号转导途径和抑制PDGFR-β表达有关。

中药肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝功能及血清标志物的影响

目的 :研究肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝功能及血清标志物的影响。方法 :采用四氯化碳致大鼠肝纤维化模型 ,经肝复康干预后分别以赖氏法、溴甲酚绿比色法测定血清转氨酶及白蛋白、球蛋白活性 ,放免法测定血清透明质酸 (HA)、层粘连蛋白 (LN)、Ⅳ型胶原 (C -Ⅳ )、Ⅲ型前胶原 (PC -Ⅲ )。结果 :肝复康治疗后血清转氨酶、球蛋白活性降低 ,白蛋白活性升高 ,血清HA、LN、C -Ⅳ、PC -Ⅲ均有明显降低 ,与模型组比较有显著差异 (P <0 .0 1 )。结论 :肝复康对实验性肝纤维化有明确的治疗作用 ,降低肝纤维化程度 ,同时有效减轻肝细胞损伤 ,改善肝功能。

肝复康不同浓度含药血清对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及细胞基质的影响

背景：既往的动物实验已多次证实了肝复康对肝纤维化组织具有预防及治疗作用。目的：观察中药肝复康不同浓度含药血清对肝星状细胞T6细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白和金属蛋白酶组织抑制因子1基因表达的影响，以及探讨其抗纤维化的作用及分子机制。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005-07／2006—07在大连医科大学病理生理学教研室完成。材料：清洁级SD大鼠25只，体质量300～350g，用于制备含药血清；鼠肝星状细胞T6细胞株由上海中医药大学肝病研究所徐列明教授惠赠；中药肝复康由柴胡、当归（补血合血）、黄芪（益气）、赤芍、白芍（活血化瘀）、丹参（活血化瘀）等组成。方法：按肝复康高、中、低剂量（8．32，4．16，2．08mL／只）灌胃制备药物血清。实验分为5组，空白对照组：加含体积分数0．1正常对照血清的DMEM；模型对照组：加含体积分数0．1正常对照血清＋60ug／L血小板衍生生长因子的DMEM；肝复康低、中、高剂量组：分别加含体积分数0．1低、中、高剂量药物血清＋60ug／L血小板衍生生长因子的DMEM；各组均培养24h。主要观察指标：反转录-聚合酶链反应检测不同浓度肝复康药物血清干预后Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白和金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA的表达。结果：空白对照组肝星状细胞T6细胞各指标表达呈相对低水平，而模型对照组表达明显升高（P〈0．01）；肝复康各剂量组则均具有能明显抑制这种升高的作用（P〈0．01），其中以中剂量组干预效果最为明显。结论：中药肝复康对肝纤维化具有明显的抑制作用，其作用机制可能是通过抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白及金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA的转录，从而减少细胞外基质的形成，以达到抗纤维化的作用。

中药肝复康对肝星状细胞mTOR/P70S6K信号通路的干预作用

目的观察中药肝复康含药血清对乙醛刺激的肝星状细胞mTOR/P70S6K信号通路的影响,以探讨肝复康抗纤维化的分子生物学机制。方法体外培养大鼠HSC-T6细胞,用肝复康对乙醛刺激的HSCs进行干预,采用RT-PCR法测定HSCs中Ⅰ、Ⅲ型胶原、mTOR、P70S6K的表达。结果空白对照组肝星状细胞各指标表达量呈相对较低水平,乙醛刺激组细胞Ⅰ型胶原、mTOR、P70S6K和Ⅲ型胶原表达量明显升高(P<0.05),而肝复康干预对于细胞Ⅰ型胶原、mTOR和P70S6K的升高有明显的抑制作用(P<0.01)。结论 mTOR/P70S6K信号通路在HSCs活化过程中起到重要作用,肝复康发挥抗纤维化的作用机制与阻断mTOR/P70S6K信号通路有关。

肝复康对肝纤维化大鼠肝组织JAK2和STAT3表达的影响

目的观察中药肝复康对肝纤维化大鼠肝组织Janus激酶2(JAK2)及信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响,并对其在JAK2/STAT3信号通路上治疗肝纤维化的作用机制进行初步探讨。方法采用10%四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型,于造模第9周给予肝复康治疗12周。通过测定血清中ALT、AST活性及白蛋白和总蛋白的含量来反映肝脏功能,HE染色法观察肝组织病理学变化,RT-PCR观察JAK2和STAT3 mR-NA的表达。结果经肝复康治疗后,中剂量治疗组与模型组相比较,肝脏的组织学和血清学指标均明显改善,肝组织JAK2、STAT3 mRNA的表达显著减少(P<0.01)。结论 (1)JAK2/STAT3信号通路在肝纤维化的形成过程中起重要作用;(2)肝复康对肝纤维化有疗效,其作用机制可能与降低肝组织JAK2和STAT3的表达,阻断JAK2/STAT3信号通路有关。

肝复康治疗慢性乙型肝炎25例

肝复康治疗慢性乙型肝炎２５例文睿蒋幼仙（江苏省南京市第二医院２１００００）关键词慢性乙型肝炎肝复康中医药疗法南京中医药大学研制的肝复康片剂或水剂，于１９９５年在我院试用，于治疗慢性乙型肝炎患者，取得较好的临床疗效，现将治疗的２５例报告如下。１临床资料...

肝复康对实验性大鼠肝纤维化肝组织Ⅰ、Ⅱ型胶原含量的影响

目的 :研究肝复康对实验性大鼠肝纤维化的肝组织 、 型胶原含量及其比值的影响。方法 :采用四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型 ,于造模 6 0 d后给予肝复康治疗 3个月 ,以秋水仙碱及肝脾康为对照药。检测肝组织羟脯氨酸含量 ,苦味酸天狼星红染色法偏振光显微镜显示肝组织 、 型胶原 ,并结合图像分析计算 、 型胶原面积及面积比。结果 :肝复康治疗后肝组织 、 型胶原的含量较模型对照组明显减少 , 型胶原面积明显降低(P<0 .0 1) , 型胶原面积明显降低 (P<0 .0 1) , 、 型胶原含量的比值明显降低 (P<0 .0 1)。结论 :肝复康可明显降低肝组织 、 型胶原表达 ,降低 、 型胶原含量比 ,使细胞外基质的成分趋于正常。