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毛状分裂增强子1诱导肝干细胞向胆管细胞的分化
1
作者
张竞文
于兵
+2 位作者
徐方
李亚宁
胡以平
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期505-510,共6页
目的探讨毛状分裂增强子1(hairy enhancer of split 1,Hes1)调控肝干细胞(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)向胆管细胞分化的作用。方法将pTRE2hyg-Hes1和pTRE2hyg-EGFP-Hes1转染LEPCs,不同浓度强力霉素(doxycycline,DOX)诱导H...
目的探讨毛状分裂增强子1(hairy enhancer of split 1,Hes1)调控肝干细胞(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)向胆管细胞分化的作用。方法将pTRE2hyg-Hes1和pTRE2hyg-EGFP-Hes1转染LEPCs,不同浓度强力霉素(doxycycline,DOX)诱导Hes1的表达。通过Western blotting、PCR、RT-PCR、Real-time PCR、免疫细胞化学和免疫荧光技术检测相关分子表达。以谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,Gss)作为肝细胞分化的标记,以角蛋白19(keratin 19,Krt19)和肝核因子1β(hepatic nuclear factor 1β,HNF1β)为胆管细胞分化标记。结果RT-PCR和Real-time PCR检测结果显示,随着DOX浓度的增加,Hes1在LEPCs细胞中的表达逐渐增高,当DOX浓度为10μg/mL时,Hes1表达是未加DOX时的11.21倍,第5天Hes1的表达处于高峰,持续到第7天;Western blotting检测结果显示HES1蛋白表达也随着DOX浓度的增高而有所增加,HES1表达明显高于未经处理的LEPCs(P<0.05);免疫细胞化学染色显示,转染了pTRE2hyg-Hes1的细胞98%以上呈阳性染色,见于细胞核和细胞质。当Hes1在LEPCs细胞中表达上调后,Gss表达有所下降,Krt19和HNF1β表达增加。结论在pTet-on和pTRE2hyg-Hes1双转染的LEPCs中,Hes1上调可诱导LEPCs分化为胆管细胞。
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关键词
毛状分裂增强子
1
肝
干细胞
分化
胆管细胞
角蛋白
1
9
谷胱甘肽合成酶
肝核因子1β
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题名
毛状分裂增强子1诱导肝干细胞向胆管细胞的分化
1
作者
张竞文
于兵
徐方
李亚宁
胡以平
机构
宁夏医科大学基础医学院
海军军医大学细胞生物学教研室
出处
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期505-510,共6页
基金
宁夏回族自治区重点研发一般项目(No.2019BEG03006)
宁夏回族自治区自然科学基金项目(No.2022AAC03192)。
文摘
目的探讨毛状分裂增强子1(hairy enhancer of split 1,Hes1)调控肝干细胞(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)向胆管细胞分化的作用。方法将pTRE2hyg-Hes1和pTRE2hyg-EGFP-Hes1转染LEPCs,不同浓度强力霉素(doxycycline,DOX)诱导Hes1的表达。通过Western blotting、PCR、RT-PCR、Real-time PCR、免疫细胞化学和免疫荧光技术检测相关分子表达。以谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,Gss)作为肝细胞分化的标记,以角蛋白19(keratin 19,Krt19)和肝核因子1β(hepatic nuclear factor 1β,HNF1β)为胆管细胞分化标记。结果RT-PCR和Real-time PCR检测结果显示,随着DOX浓度的增加,Hes1在LEPCs细胞中的表达逐渐增高,当DOX浓度为10μg/mL时,Hes1表达是未加DOX时的11.21倍,第5天Hes1的表达处于高峰,持续到第7天;Western blotting检测结果显示HES1蛋白表达也随着DOX浓度的增高而有所增加,HES1表达明显高于未经处理的LEPCs(P<0.05);免疫细胞化学染色显示,转染了pTRE2hyg-Hes1的细胞98%以上呈阳性染色,见于细胞核和细胞质。当Hes1在LEPCs细胞中表达上调后,Gss表达有所下降,Krt19和HNF1β表达增加。结论在pTet-on和pTRE2hyg-Hes1双转染的LEPCs中,Hes1上调可诱导LEPCs分化为胆管细胞。
关键词
毛状分裂增强子
1
肝
干细胞
分化
胆管细胞
角蛋白
1
9
谷胱甘肽合成酶
肝核因子1β
Keywords
hairy enhancer of split
1
liver epithelial progenitor cell
differentiation
cholangiocyte
keratin
1
9
glutathione synthetase
hepatic nuclear factor
1β
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
发文年
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1
毛状分裂增强子1诱导肝干细胞向胆管细胞的分化
张竞文
于兵
徐方
李亚宁
胡以平
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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