用nR改良海氏法则及PALT评估药物性肝损伤研究进展

与药物、草药和其他补充或替代疗法相关的肝毒性一直是全球安全专业人员和监管机构关注的问题。在临床开发和上市后阶段及时识别肝损伤仍是一项挑战。目前,用于识别最有可能发展为肝衰竭或死亡的肝毒性病例标准已经取得最新进展,并建立了可用于评估与肝损伤相关肝细胞损失程度的新方法。本文将对这些新方法及其在相关肝毒性持续监测和评估中的应用进行回顾。

应用高内涵分析技术进行药物肝毒性风险评估的研究

目的研究尝试应用高内涵分析技术建立药物肝毒性高内涵毒性评价指数测定的标准方法。方法采用Tox Insight药物肝毒性检测试剂盒,利用对多靶点的特异性染色,结合高内涵活细胞成像分析平台考察4种药物对人源性肝癌细胞Hep G2的细胞毒性作用,包括对该细胞的细胞数、核DNA含量、细胞质内谷胱甘肽降低水平、活性氧水平、线粒体膜电位的改变等5个指标进行综合分析,拟对受试样品的肝毒性进行评估。结果氟西汀和罗格列酮的肝毒性评估结果为阴性;甲芬那酸和噻氯匹定的肝毒性评估结果为阳性,提示具有肝毒性风险,且甲芬那酸的肝毒性风险比噻氯匹定的高。结论应用高内涵分析技术评估药物肝毒性的方法基于活细胞、多参数、实时、高通量,能够实现药物多种生物活性、毒性的早期、快速检测,并且灵敏稳定,简便可行,可尝试用于对药物进行体外肝毒性的安全风险评估。

美国FDA药物肝毒性监测和管理文件简析

药物是造成肝损害的重要原因之一。目前,对药物肝毒性进行科学监测和管理是制药企业和药品监管部门面临的一项具有挑战性的任务,对新药研发、临床诊断和治疗以及药品上市后监管都有重要的意义。通过介绍美国FDA、美国药物研究与制药商协会(PhRMA)、美国肝病协会(AASLD)共同制定的关于药物肝毒性监测和管理的文件,为读者提供了关于药物肝毒性的探测、评价和管理的许多有价值的信息;通过简析这些文件,以期为我国药物肝毒性的监测和管理提供重要的借鉴作用。

ABCB1和ABCC2基因多态性与中国汉族儿童抗结核药物致肝毒性易感性的相关性研究

目的探讨ABCB1和ABCC2基因多态性与中国汉族儿童抗结核药物致肝毒性(anti-tuberculosis drug-induced hepatotoxicity,ATDH)易感性的相关性。方法在中国汉族结核病患儿中,采用病例对照研究,利用高通量的Mass ARRAY平台,对于ABCB1和ABCC2基因的16个标签单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点展开基因分型,并采用logistic回归分析以上SNP位点等位基因和基因型频率在ATDH病例组和ATDH对照组中的分布差异。结果本研究共纳入41例ATDH病例以及189例对照。ABCB1和ABCC2基因SNP位点的等位基因以及基因型在两组间频率分布差异均无统计学意义(P>0.05)。SNP位点分别按照显性遗传模型和隐性遗传模型分析,各位点基因型在两组间频率分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 ABCB1和ABCC2基因多态性可能与中国汉族儿童ATDH的发生并无相关性。

抗结核药物肝毒性的研究进展

结核病是目前全球性的公共卫生问题。我国结核病临床治疗中使用的抗结核药物均能引起不同程度的不良反应，直接影响结核病的防治。深入研究抗结核药物肝毒性的作用机制、危险因素、临床判断、

药物性肝炎68例临床分析

目的探讨药物性肝炎的临床特点,指导临床诊断和治疗。方法回顾分析2002～2006年我院临床各科室药物性肝炎的临床资料。结果68例患者发病多在用药后1～3周占79.6%;表现为不同程度的乏力、纳差、恶心、黄疸,腹胀、腹痛、皮疹;肝功能检查提示ALT、AST增高,以ALT增高为主,黄疸指数均异常;部分病例有嗜酸性细胞的增高;肝损害常见药为抗结核类药物、抗生素类药物、中草药、抗甲亢药物四大类共53例79.3%;及时停用可疑肝毒性药物,保肝治疗后,大部分病人病情好转,3例出现肝衰竭。结论临床工作中重视药物肝炎是预防药物性肝炎并改善预后的关键。

药物性肝损伤的影响因素和预后评价

药物性肝损伤(DILI)是由药物和(或)其代谢产物引起的肝脏损伤,发病率约为0.014%?0.019%[1].DILI是最常见和最严重的药物不良反应,是导致急性肝衰竭(ALF)的主要原因。随着临床新药的不断出现,以及药品滥用现象增多,近年来DILI发病率呈上升趋势。DILI预后一般较好,停用肝毒性药物后,多数患者能逐渐恢复乃至痊愈,约有5%?10%的患者可发展成慢性肝病,约10%的患者因ALF死亡或不得不接受肝移植[2]。

药物性肝损伤的致病机制及影响因素

药物性肝损伤（drug-induced liver injury,DILI）是指在治疗过程中由于药物的毒性损害或过敏反应所致的肝脏疾病,也称为药物性肝炎。肝脏是药物代谢、转化的主要脏器,也是机体代谢、免疫的重要器官,与药物关系密切。药物肝毒性的表现可从无症状、轻微、非特异性的生化改变到急性肝炎、慢性肝炎、急性肝衰、胆汁淤积,甚至肝硬化、肝脏肿瘤。目前,DILI已成为国内外常见且较严重的药源性疾病,

26例急性重症药物性肝损伤临床分析

重症药物性肝损伤可导致死亡率极高的急性肝衰竭,由于临床表现和实验室检查无明显特异性,容易发生漏诊和误诊,是药物肝毒性临床监测中最应重视的问题。笔者对浙江省4个地区、5家三乙以上医院2000～2006年收治的急性重症药物性肝损伤病例进行回顾性调查,分析其临床特点,以期为临床诊治提供依据。

基于斑马鱼幼鱼模型药物肝毒性快速评价方法的优化及评价标准初探

目的 以对乙酰氨基酚(APAP)为例,通过优化其对斑马鱼幼鱼肝毒性评价的影响因素和参数,确立基于斑马鱼幼鱼模型的肝毒性快速评价方法及药物肝损伤分级方法。方法 利用不同浓度APAP处理斑马鱼幼鱼,在实验终点(药物暴露后48 h/24 h)统计不同处理组斑马鱼的死亡率,并绘制“死亡率—浓度”效应曲线,计算最大耐受浓度(LC0)和半数致死浓度(LC_(50));考察并优化斑马鱼幼鱼在APAP毒性研究中的相关影响因素,包括斑马鱼鱼龄[3 dpf、4 dpf(受精后天数:dpf)]、给药暴露时间(48 h、24 h)和孔板(6孔板、12孔板;6 mL、4 mL),并从以上3个水平设计正交实验,建立斑马鱼肝毒性模型的最佳实验条件参数。另择3 dpf斑马鱼幼鱼[3 dpf-48 hpe-12孔板(暴露后小时:hpe)]与选定条件(4 dpf-24 hpe-12孔板)进行比较,以表型评价、组织病理学评价、体内凋亡评价、生化指标及肝脏区域面积作为系统生物学评价指标,确认斑马鱼整体肝毒性评价的方法和损伤参照标准。结果 以实验所得各组LC_(50)为指标,通过正交实验优化得到建立毒性模型的最佳实验条件参数为:选择4 dpf的斑马鱼幼鱼置于12孔板中给药暴露24 h;与对照组相比,各暴露组斑马鱼幼鱼肝脏透明度下降、颜色变暗且卵黄囊吸收延迟;肝脏组织结构松散、肝细胞空泡化严重;吖啶橙染色可见黄绿色荧光,提示存在肝细胞凋亡;谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平均呈显著性升高;肝脏面积表现出剂量依赖性的减小,以此确认方法的合理性。相关性分析结果证明以斑马鱼幼鱼肝面积的变化值(δ)评价斑马鱼肝损伤的可靠性,并以该指标初步建立了斑马鱼幼鱼的肝损伤评级。结论 考察并优化得到最佳斑马鱼幼鱼急性毒性评价参数,确认斑马鱼幼鱼肝毒性评价方法并建立斑马鱼幼鱼的肝损伤评级,为基于斑马鱼幼鱼模型快速评估药物肝毒性提供了参考。

体外肝细胞三明治培养动态变化及其在药源性肝损伤中的应用

目的:本文采用三明治构型培养原代大鼠肝细胞,综合观测其体外极性的动态形成过程,为体外药物肝毒性研究建立合适的评价模型。方法:三明治构型培养Wistar大鼠肝细胞,选取不同培养时间细胞检测肝细胞分泌功能,同时采用PCR、免疫荧光及跨上皮细胞电阻实验观测肝细胞极性结构基础紧密连接的动态变化过程。结果:肝细胞在"三明治夹层"中培养72 h后具有胆小管分泌功能,同时紧密连接处分子ZO-1与Occludin结构为促使极性形成,其mRNA表达与通透性均产生一个先升高后降低的变化趋势;ZO-1免疫荧光定位发现不同培养时间随着极性形成其结构分布也有所不同。结论:肝细胞三维培养极性形成是一个动态变化的过程,了解这一动态变化过程对药物肝毒性检测及其毒性机制探讨具有重要的指导意义。

抗结核药物肝毒性危险因素研究进展

目前结核病死灰复燃且有上升的趋势,每年有150万人因结核病死亡[1]。由于抗结核治疗时间长并且多种药物同时使用,副作用成为一个严重的临床问题。肝损伤被认为是抗结核药物最严重的副作用,因为抗结核治疗期间,肝损伤发生率和死亡率都较其他副作用显著增高[2]。

体外肝脏3D模型在药物肝毒性评价中的优势

建立及评价体外肝脏3D模型在药物肝毒性评价中的优势。本研究利用悬滴技术构建Hepa RG3D多细胞聚球体模型,并检测其肝功能水平,最后用该模型评价2个肝毒性阳性药重复给药毒性,并与2D模型下单次给药毒性进行比较。Hepa RG细胞聚集生长形成微组织体,该模型的细胞白蛋白表达水平、尿素分泌水平和CYP3A4活性诱导水平均显著高于2D模型。盐酸胺碘酮在2D和3D培养模型下IC_(50)分别为50和100μmol·L^(-1);异烟肼在2D模型下IC_(50)>1 mmol·L^(-1),3D模型下IC_(50)为700μmol·L^(-1)。两个药物在3D模型下LDH活性均呈现明显的时间/给药次数依赖性和剂量正相关性。结果提示成功建立体外肝脏3D悬滴培养模型,与2D模型比较,该模型可用于准确评价肝毒性阳性药,并为将来体外准确、高通量和多次长期给药评价药物肝脏毒性提供可能。