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六安地区手足口病患儿肠道病毒分离鉴定与临床表现 被引量:9
1
作者 常宏伟 汤仁树 +4 位作者 陈伟 俞海洋 范玉珍 李朝阳 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期154-158,共5页
目的对六安地区手足口病流行区患儿标本进行病毒分离与鉴定,为进一步预防和控制该病流行奠定基础。方法采集手足口病患者咽拭子和疱疹液标本,进行病毒分离、中和实验和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)特异性扩增进行鉴定,同时对肠道病毒71... 目的对六安地区手足口病流行区患儿标本进行病毒分离与鉴定,为进一步预防和控制该病流行奠定基础。方法采集手足口病患者咽拭子和疱疹液标本,进行病毒分离、中和实验和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)特异性扩增进行鉴定,同时对肠道病毒71型(EV71)抗原决定簇部位VP1区进行核苷酸序列测定与分析。结果14份咽拭子和8份疱疹液标本中分离得到6株病毒,经中和实验、RT-PCR及VP1片段检测与测序证实为EV71型,与BrCr-ts株、台湾分离株、深圳分离株一致性分别为98%、84%和83%。结论该流行区2008年爆发的手足口病病原体为EV71型。 展开更多
关键词 手足口病/病毒 肠道病毒/分离和提纯
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乙肝病毒前S1抗原检测在乙型肝炎向肝癌演变中的临床意义
2
作者 陈海蔚 伍勇 陈道瑾 《实用肿瘤杂志》 CAS 2006年第6期508-511,共4页
目的探讨前S1抗原与原发性肝癌(PHC)的关系。方法采用EL ISA法检测302例PHC患者的血清学乙肝病毒标志物(HBVM)及前S1抗原。结果302例PHC患者,HBVM检出率为99.0%(299/302)。其中单项阳性率HB sA g 94.0%(284/302)、A n tiHB s 5.6%(17/3... 目的探讨前S1抗原与原发性肝癌(PHC)的关系。方法采用EL ISA法检测302例PHC患者的血清学乙肝病毒标志物(HBVM)及前S1抗原。结果302例PHC患者,HBVM检出率为99.0%(299/302)。其中单项阳性率HB sA g 94.0%(284/302)、A n tiHB s 5.6%(17/302)、HB eA g 20.2%(61/302)、A n tiHB e 72.8%(220/302)、A n tiHB c 97.4%(294/302)。61例HB eA g阳性样本中前S1抗原阳性46例(75.4%);而196例HB eA g阴性A n tiHB e阳性标本中前S1抗原阳性98例(50.0%);而35例HB eA g和A n tiHB e均阴性标本中前S1抗原阳性10例(26.3%)。前S1抗原在血清学表达上与HB eA g的阳性符合率高达75.4%。结论血清前S1抗原是乙型肝炎病毒(HBV)在体内复制的可靠标志,通过检测血清前S1抗原有助于提高认识PHC发生的可能性。 展开更多
关键词 肝细胞/诊断 肝炎 乙型/血液 肝炎病毒 乙型/分离和提纯 抗原 病毒/分析 酶联免疫吸附测定
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慢性乙型肝炎患者血清病毒量与肝脏病毒检测相关性分析
3
作者 韩莹 李鹏 +1 位作者 范丽娟 刘燕敏 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第25期6112-6113,共2页
关键词 肝炎 乙型 慢性/理学/血液 肝炎病毒 乙型/分离和提纯 人类
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胶体金试纸法检测乙型肝炎病毒表面抗原假阴性和假阳性结果分析 被引量:1
4
作者 高会广 曲丽英 +1 位作者 宋媛媛 王飞 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第6期1353-1353,共1页
关键词 肝炎表面抗原 乙型/分析 肝炎病毒 乙型/分离和提纯 胶体金/诊断应用 酶联免疫吸附测定 指示剂和试剂 假阴性反应 假阳性反应
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我国戊型肝炎研究 被引量:113
5
作者 庄辉 毕胜利 +4 位作者 王佑春 李凡 朱万孚 朱永红 李奎 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期434-439,共6页
An epidemic of hepatitis in the south part of Xinjiang Uighur Autonomous Reg ion during 1986-1988, and 2 548 acute sporadic hepatitis cases from 17 cities of Ch i na were studied. The disease had following clinical an... An epidemic of hepatitis in the south part of Xinjiang Uighur Autonomous Reg ion during 1986-1988, and 2 548 acute sporadic hepatitis cases from 17 cities of Ch i na were studied. The disease had following clinical and epidemiological char acte ristics: 86.4% cases occurred in the age group of 20-59 years; with male prepon d erance and autumn-winter excess; 75% patients had a history of contact with hep a titis cases, and / or eating out or drinking unboiled water; clinical features w ere s imilar to hepatitis A, with a higher fatality rate, especially in pregnant women (up to 21%). Two strains of hepatitis E virus (HEV) isolated from Xinjiang were completely seq uenced by dideoxy chain termina tion method, with nucleotide homology of 93.5% and 94.5% with Burma strain (geno type 1), 75.7% and 75.9% with Mexico strain (genotype 2), 73.7% and 74.2 % with American strain (genotype 3), respectively. It suggests that these two st rains belong to genotype 1. The partial sequencing of open reading frame (ORF)2 region of 98 HEV isol ates from 19 cities of China revealed that 62 of them (63.3%) shared the same ge notype with Burma and Xinjiang strains, and 36 (36.7%) isolates were of genotype 4. One of the 36 strains was completely sequenced, with nucleotide identity of 75% with Burma strain, 74.5% with Mexico strain and 75.3% with American strain , respectively. Sera collected from 419 pigs, 190 cattle and 316 goats from var ious regions of China were detected for anti-HEV antibodies and HEV RNA using a n in-house enzyme immunoassay (EIA) and reverse transcriptase nested polymerase chain re action (RT-nPCR) with primers from ORF 2. The mean positivity rates of anti-HEV antibody for pigs and cattle were 78.8% and 6. 3%, respectively, but none of the goat sera was anti-HEV positive. The PCR product s (nt 6007- 6354) of 5 HEV RNA positive sera were sequenced and compared to othe r HEV sequences in the nucleotide databases. The five sequences shared 74%-79%, 73%-74%, 73%-78%, and 83%-99% identity to HEV genotypes 1,2,3 and 4, respe c tively. An enzyme immunoassay (EIA) and Western immunobloting (WB) for detection of anti-HEV and a reverse transcriptase nested polymerase chain reaction (RT- nPCR) of HEV RNA were developed. The anti-HEV EIA kit was approved by the State Drug Administration, China. An experimental model of HEV was established in rhe sus monkeys (Macaca mulatta). The animal studies on HEV cDNA vaccine and recombi nant vaccine showed that the humoral immune response to HEV was induced in mice after inoculation of the HEV RNA vaccine, and the HEV recombinant vaccine provid ed a protection from HEV infection in Rhesus monkeys. 展开更多
关键词 戊型肝炎 戊型肝炎病毒 分离 提纯 新疆维吾尔自治区 流行病学
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人胎盘滋养层细胞的分离培养及HCV体外感染试验 被引量:20
6
作者 程勇前 聂青和 +2 位作者 周永兴 杨华光 李谨革 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第17期1544-1547,共4页
目的 体外分离培养较高纯度的胎盘滋养层细胞 ,观察其生物学特性 ,探讨丙型肝炎病毒 (HCV)经胎盘母婴传播的具体途径 .方法 采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织 ,以 35 % ,4 5 %两个 Percoll密度梯度进行分离纯化 .并用免疫组化及... 目的 体外分离培养较高纯度的胎盘滋养层细胞 ,观察其生物学特性 ,探讨丙型肝炎病毒 (HCV)经胎盘母婴传播的具体途径 .方法 采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织 ,以 35 % ,4 5 %两个 Percoll密度梯度进行分离纯化 .并用免疫组化及透射电镜等技术对其生物学特性进行观察 .HCV阳性血清感染体外分离培养的胎盘滋养层细胞 ,通过逆转录聚合酶链反应及扩增敏感试验对培养上清进行定性、定量检测 ,以观察 HCV的感染及复制情况 .结果 胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性 ,血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性 ,经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者 (滋养层细胞 )占 90 %以上 ,电镜下滋养层细胞可观察到成熟型、中间型、未成熟型三种形态 .HCV感染细胞培养 16 d内培养上清中可间断检测出 HCV RNA.结论 改进后的分离方法可以得到较高纯度的滋养层细胞 ,HCV感染胎盘滋养层细胞可能是 HCV宫内母婴传播的途径之一 . 展开更多
关键词 滋养层细胞 分离 提纯 细胞培养 丙型肝炎病毒 母婴传播
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化学发光法与PCR法联合检测孕妇单纯疱疹病毒感染率分析 被引量:2
7
作者 倪雪梅 朱巧英 +1 位作者 李宁 成春岚 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第2期157-158,共2页
目的对化学发光法与聚合酶链反应(PCR)联合检测孕妇单纯疱疹病毒(HSV)的感染率进行分析,为临床诊断提供依据。方法采集该院孕期常规建卡的孕妇血清,用化学发光法检测血清HSV IgM与IgG抗体水平;对其中任一项结果阳性者取宫颈分泌物进行HS... 目的对化学发光法与聚合酶链反应(PCR)联合检测孕妇单纯疱疹病毒(HSV)的感染率进行分析,为临床诊断提供依据。方法采集该院孕期常规建卡的孕妇血清,用化学发光法检测血清HSV IgM与IgG抗体水平;对其中任一项结果阳性者取宫颈分泌物进行HSV DNA定性检测。结果HSV1DNA阳性率为0.5%(7/1 422),HSV2DNA阳性率为1.1%(16/1422)。HSV IgM和IgG同时阳性者HSV1DNA阳性率为0.4%(4/1 008),HSV2DNA阳性率为0.6%(6/1 008);仅HSV IgM阳性者HSV1DNA阳性率为0.8%(1/130),HSV2DNA阳性率为3.1%(4/130);仅HSV IgG阳性者HSV1DNA阳性率为0.7%(2/284),HSV2DNA阳性率为2.1%(6/284)。3种情况HSV抗体阳性者HSV1DNA阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),而HSV2DNA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在孕期对HSV抗体进行常规检查,对抗体阳性者进行DNA检测,能提高诊断准确率。尽量做到早期筛查、早期发现、及早对孕妇进行治疗。 展开更多
关键词 化学发光测定法 聚合酶链反应 单纯疱疹病毒/分离和提纯 孕妇
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一种简单、快速提取乙肝病毒DNA的方法 被引量:2
8
作者 罗心静 徐克前 《医学临床研究》 CAS 2004年第8期938-939,共2页
关键词 DNA 病毒/分离和提纯 肝炎病毒 乙型
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人原代呼吸道上皮细胞体系分离人冠状病毒HKU1的方法及其复制特点 被引量:8
9
作者 朱娜 牛培华 +8 位作者 赵彦杰 王文 宋敬东 王延群 陆柔剑 苏崇玉 王翀昊 刘志东 谭文杰 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2015年第1期80-82,共3页
目的 建立分化良好的人原代呼吸道上皮细胞(HAE)培养方法,从北京地区重症肺炎患儿呼吸道样本中分离人冠状病毒HKU1(HCoV-HKU1)并对其复制特点进行初步分析.方法 采用气-液两相的方法诱导原代HAE细胞体外分化成假复层纤毛柱状上皮结... 目的 建立分化良好的人原代呼吸道上皮细胞(HAE)培养方法,从北京地区重症肺炎患儿呼吸道样本中分离人冠状病毒HKU1(HCoV-HKU1)并对其复制特点进行初步分析.方法 采用气-液两相的方法诱导原代HAE细胞体外分化成假复层纤毛柱状上皮结构,接种经PCR方法鉴定HCoV-HKU1单阳性的北京儿童医院住院患儿鼻咽拭子样本,进行病毒的分离培养.通过荧光定量PCR与序列分析检测病毒复制动力与遗传稳定性.结果 HCoV-HKU1可在HAE中复制,产生有活性的子代病毒,细胞上清中的子代病毒在接种后96 h达到高峰.子代病毒在HAE传代过程中基因相对保守.结论 在国内首次采用人原代呼吸道上皮细胞从重症肺炎患儿呼吸道样本中分离到人冠状病毒HKU1毒株并确定其复制特性. 展开更多
关键词 冠状病毒 人呼吸道黏膜 病毒/分离和提纯
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HCMV AD169株感染复数(MOI)的确定 被引量:2
10
作者 韩俊 王明丽 +3 位作者 姜永忠 詹以森 李艳秋 余莉 《安徽医科大学学报》 CAS 2001年第4期257-259,共3页
目的 通过蚀斑形成试验测定人巨细胞病毒(HCMV)AD16 9株的蚀斑 (PFU)确定其感染复数 (MOI)并纯化病毒。方法 HCMVAD16 9株接种 7~ 8代HF细胞单层 ,37℃吸附 ,0 0 0 7琼脂糖覆盖层 ,1周后加第 2层覆盖 ,2周后用 0 0 0 0 5结晶紫染色... 目的 通过蚀斑形成试验测定人巨细胞病毒(HCMV)AD16 9株的蚀斑 (PFU)确定其感染复数 (MOI)并纯化病毒。方法 HCMVAD16 9株接种 7~ 8代HF细胞单层 ,37℃吸附 ,0 0 0 7琼脂糖覆盖层 ,1周后加第 2层覆盖 ,2周后用 0 0 0 0 5结晶紫染色 5min ,记数 ,计算PFU及MOI;染色前 ,镜下挑取蚀斑保藏并鉴定。结果 蚀斑经 0 0 0 0 5结晶紫染色在HF细胞单层上呈紫色 ,很易识别 ,散在均匀分布 ,着色深 ,与周围区域界限明显 ,MOI =3 41× 10 4 。结论 探索出HCMVAD16 9株感染复数 (MOI) 展开更多
关键词 巨细胞病毒 分离 提纯 蚀斑 感染复数 HCMV MOI
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慢性丙型肝炎患者血清和肝组织中庚型肝炎病毒RNA检测 被引量:12
11
作者 于建国 侯宪荣 +2 位作者 潘伟 张光曙 周秀梅 《华人消化杂志》 1998年第7期580-581,共2页
目的了解慢性丙型肝炎(CHC)患者血清和肝组织中庚型肝炎病毒(HGV)感染的状况.方法用RTPCR方法对49例CHC患者血清和其中14例肝组织进行HGVRNA检测.结果在49例CHC患者的血清和其中14例肝组织中H... 目的了解慢性丙型肝炎(CHC)患者血清和肝组织中庚型肝炎病毒(HGV)感染的状况.方法用RTPCR方法对49例CHC患者血清和其中14例肝组织进行HGVRNA检测.结果在49例CHC患者的血清和其中14例肝组织中HGVRNA阳性检出率分别为122%和214%,证实HGV和HCV感染在CHC患者血清和肝组织中同时存在,而肝组织中HGVRNA阳性检出率更高,其原因同受血或其直接经血液暴露密切相关.结论CHC患者血清和肝组织中存在HGV感染,而且感染率较高,故应加强对献血员进行HGVRNA和ALT筛查。 展开更多
关键词 丙型肝炎 病毒 肝炎病毒 遗传学 分离 提纯
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夹心斑点杂交放大技术的建立和初步应用 被引量:2
12
作者 周元平 姚集鲁 +1 位作者 彭文伟 黄仰苏 《中山医科大学学报》 CSCD 1997年第1期77-78,共2页
夹心斑点杂交放大技术的建立和初步应用①周元平②姚集鲁彭文伟黄仰苏(中山医科大学传染病学教研室;广州,510630)主题词肝炎病毒,乙型/分离和提纯;克隆,分子/方法中图号R512.63采用分子生物学方法,在核酸分子杂... 夹心斑点杂交放大技术的建立和初步应用①周元平②姚集鲁彭文伟黄仰苏(中山医科大学传染病学教研室;广州,510630)主题词肝炎病毒,乙型/分离和提纯;克隆,分子/方法中图号R512.63采用分子生物学方法,在核酸分子杂交中构建了重组单链一级探针和二级标... 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 分离 提纯 克隆 夹心斑点杂交
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2002~2006年郑州市无偿献血者血液复检报废原因分析 被引量:2
13
作者 赵君 杨丙辛 刘玉振 《中国误诊学杂志》 CAS 2007年第7期1503-1504,共2页
关键词 供血者 肝炎表面抗原 乙型/分析 肝炎病毒/分离和提纯 酶联免疫吸附测定 指示剂和试剂
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荧光定量PCR技术及其临床应用 被引量:11
14
作者 罗德生 《中国误诊学杂志》 CAS 2004年第3期365-367,共3页
关键词 肝炎病毒 乙型 分离和提纯 聚合酶链反应
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无偿献血者血液复检不合格模式调查 被引量:2
15
作者 张淑琴 刘玉振 方建华 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第14期3523-3524,共2页
关键词 供血者 肝炎表面抗原 乙型/分析 肝炎病毒/分离和提纯 丙氨酸转氨酶/血液 酶联免疫吸附测定 HIV抗体/分析 梅毒/血液
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丙型肝炎病毒检测结果与临床诊疗过程中的错觉和假象 被引量:2
16
作者 石龙 宋林 《中国误诊学杂志》 CAS 2011年第4期870-870,共1页
过去10 a间,丙型肝炎的诊断是建立在对丙型肝炎病毒(HCV)血清学抗体的大量筛查检测基础上的。这种诊断方法大大降低了由输血引起HCV感染的风险。近年来,随着生物学领域的发展,运用遗传学和分子生物学的原理,通过荧光标记的核酸探针与... 过去10 a间,丙型肝炎的诊断是建立在对丙型肝炎病毒(HCV)血清学抗体的大量筛查检测基础上的。这种诊断方法大大降低了由输血引起HCV感染的风险。近年来,随着生物学领域的发展,运用遗传学和分子生物学的原理,通过荧光标记的核酸探针与细胞内的核酸序列杂交,借助聚合酶链反应(PCR),以获得细胞内多种基因状态信息, 展开更多
关键词 肝炎病毒属/分离和提纯 肝炎 丙型/诊断/治疗 人类
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自动化酶免分析系统检测HBsAg、抗-HCV的评价 被引量:1
17
作者 刘国英 温涛 《中国误诊学杂志》 CAS 2004年第3期420-421,共2页
关键词 肝炎病毒 分离和提纯 肝炎表面抗原 乙型 分析 酶联免疫吸附测定
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不同洗板次数对检测抗-HCV的影响 被引量:1
18
作者 方建华 刘玉振 +1 位作者 温涛 吕永磊 《中国误诊学杂志》 CAS 2003年第6期861-862,共2页
关键词 肝炎病毒/分离和提纯
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加样后室温停留时间对自动化检测抗-HCV的影响
19
作者 方建华 刘玉振 +1 位作者 温涛 吕永磊 《中国误诊学杂志》 CAS 2003年第2期253-254,共2页
关键词 温度 自动化 时间 肝炎病毒 分离 提纯
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包头地区献血员血液5项指标检测结果分析
20
作者 彭成 马波 +1 位作者 高春芳 赵志青 《中国误诊学杂志》 CAS 2006年第21期4167-4168,共2页
关键词 供血者 肝炎表面抗原 乙型/血液 肝炎病毒/分离和提纯 HIV/分离和提纯 丙氨酸转氨酶/血液
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