乙型肝炎病毒表面抗体不同检测系统检测结果分析

目的评估不同检测系统检测乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)样品的阴阳性判断一致性,分析HBsAb定量检测结果与HBsAb国家标准品理论值的偏差分布。方法选取8个样品作为检测样品(编为1^(#)、2^(#)、3^(#)、4^(#)、5^(#)、6^(#)、7^(#)、8^(#)),包括溯源至WHO的HBsAb国家标准品、全阴性样品(含1个临界值附近的阴性样品)和强阳性盲样样品。选取19个检测系统(11个检测原理为化学发光法和8个检测原理为酶联免疫吸附法)分别检测上述8个样品,根据试剂盒说明书判定检测结果的阴阳性,定性分析判定结果;并定量分析10个化学发光法检测系统的检测结果。结果19个检测系统对6个阳性样品的判读一致,均为阳性;对全阴性样品的判读一致,均为阴性;对临界值(10 mIU/ml)附近的阴性样品(浓度:6 mIU/ml)的阴阳性判读不一致,4个检测系统判读为阳性,其余15个检测系统判读为阴性。临界值为10 mIU/ml、方法学为化学发光的10个检测系统对6个HBsAb国家标准品配制样品(1^(#)、4^(#)、5^(#)、6^(#)、7^(#)、8^(#))的检测结果与HBsAb国家标准品理论值的之间的相对偏差分别为105%~188%、84%~139%、122%~249%、77%~185%、99%~183%、106%~258%。结论不同检测系统对阳性样品和全阴性样品的阴阳性判读均一致,对临界值附近的阴性样品的阴阳性判读不一致,总体阴阳性判读一致性符合率为97%。对于4^(#)、6^(#)、7^(#)样品,10个检测系统中分别有3、4、2个的检测平均值低于国家标准品理论值,有7、6、8个的检测平均值高于国家标准品理论值,其中序号为4、14、15的检测系统的检测结果与HBsAb国家标准品理论值差距较大。若需监测机体HBsAb浓度的变化趋势,应尽可能选用同一检测系统进行检测,以确保结果的一致性。

两种国产化学发光测试系统测定乙型肝炎病毒表面抗体的一致性评价

目的比较2种不同国产化学发光测试系统(测试系统1和测试系统2)测定乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)检测结果间的统计学关系和线性关系,探讨不同测试系统检测结果的一致性。方法选取6~100 mIU/ml系列浓度样本,分别使用2个国产化学发光法测试系统(测试系统1和测试系统2)和临床使用广泛的测试系统A进行检测。将测试系统1和测试系统2的结果分别与测试系统A的结果采用加权最小二乘法进行直线拟合计算相关系数;并以测试系统1和测试系统2的结果均值和信号值均值作为变量,使用配对t检验进行统计学分析;以测试系统A的结果为自变量,以测试系统1和测试系统2的结果为因变量进行线性拟合,分别计算相关系数r、绝对线性偏差和相对线性偏差。结果测试系统1和测试系统2中HBsAb定量检测结果比较,差异有统计学意义[υ=8,ABS(t)=2.535,t0.05(8)=2.306,P<0.05];测试系统1和测试系统2测试浓度间的线性相关性拟合相关系数r=0.99341。测试系统1与测试系统A的相关系数r=0.99814。测试系统2与测试系统A的相关系数r=0.98821。结论2个国产测试系统的检测结果具有良好的可比性,且与临床使用广泛的测试系统A的检测结果一致性较好,临床可根据检验室检验需求选择合适的测试系统。

乙型肝炎病毒表面抗体两种检测方法的一致性研究

目的：研究外周血乙肝病毒表面抗体定量和定性检测结果之间的一致性。方法采用微粒子酶免疫分析法定量检测，酶联免疫吸附法定性检测。结果以 CMIA 为参考实验，ELISA 法检测 anti-HBs 的 Se 、Sp 、J 、PV ＋、PV －分别为0.95、0.53、0.48、0.74、0.88，k ＝0.51；吸光度为0.4009时 Se 、Sp 、J 、PV ＋、PV －分别为0.50、0.95、0.45、0.93、0.43；对吸光度0.1043～0.4009范围外样本分析，ELISA 定性检测的 Se 、Sp 、J 、PV＋、PV－分别为0.90、0.91、0.81、0.93、0.88，k ＝0.81。结论吸光度值0.105为 ELISA 检测结果判定的 Cut-off 值具有良好的检测灵敏度（Se ＝0.95）和较好的阴性预测值（PV－＝0.88），ELISA 检测 Anti-HBs 阴性可认为 Anti-HBs 浓度小于10 mIU／mL 而不具有保护价值；当样本吸光度大于或等于0.4009时可认为 Anti-HBs 浓度大于或等于10 mIU／mL，具有保护意义；ELISA 检测 Anti-HBs 灰区范围主要是吸光度0.105～0.4009，应定量检测以判定 Anti-HBs 真实水平。

不同检测系统间乙型肝炎病毒表面抗体结果一致性及影响因素分析

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)单独阳性及乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)与HBsAb同时阳性这两种不同乙肝标志物结果模式下,两种不同化学发光法检测系统HBsAb检测结果的一致性及可能影响一致性的原因。方法①选取在A系统行乙型肝炎病毒感染标志物检测样本64例,其中HBsAb单独阳性35例为模式一样本;HBsAg与HBsAb同时阳性29例为模式二样本,所有样本同时在B系统行HBsAb检测并比较A/B系统结果。②模式二样本经聚乙二醇6000(PEG6000)处理后,分别经A/B系统再次检测HBsAb,并比较其结果。结果(1)模式一样本,A/B系统HBsAb阳性符合率为91.4%(32/35)(≥10IU/L),其中10~100IU/L浓度范围符合率为90.9%(20/22);大于100IU/L浓度范围符合率为92.3%(12/13)。A/B系统HBsAb定量检测结果差异有统计学意义[68.01(26.15,270.60)vs 50.65(28.86,246.79),P<0.05]。(2)模式二样本,A/B系统HBsAb阳性符合率为37.9%(11/29)(≥10IU/L),其中10~100IU/L浓度范围符合率为40%(10/25),大于100IU/L浓度范围符合率为25%(1/4)。A/B系统间HBsAb定量检测结果差异有统计学意义[25.45(15.98,66.01)vs 5.81(2.82,22.70),P<0.001]。经PEG处理后,A系统HBsAb检测结果较处理前差异有统计学意义[17.88(8.75,49.61)vs 25.45(15.98,66.01),P<0.001];而B系统两者间差异无统计学意义[8.09(1.93,32.52)vs 5.81(2.82,22.70),P>0.05]。A/B系统结果比较,小于10IU/L浓度范围内符合率为72.7%(8/11),10~100IU/L浓度范围内符合率为43.7%(7/16),大于100IU/L浓度范围内的符合率为50%(1/2)。A/B系统HBsAb定量检测结果差异仍有统计学意义[17.88(8.75,49.61)vs 8.09(1.93,32.52),P<0.001]。结论(1)溯源性不同的A/B检测系统对于单独HBsAb阳性样本结果阳性符合率较高,但定量结果存在一定差异;(2)HBsAg-HBsAb免疫复合物的存在可能是影响A/B系统HBsAb检测结果一致性的重要因素。(3)对于HBsAg和HBsAb同时阳性患者,B系统检测结果可能更能反映个体的真实免疫状态。

乙型肝炎病毒表面抗体定性与定量检测分析

我国是乙型肝炎的高流行区,乙型肝炎病毒（HBV）的感染率较高,接种乙肝疫苗是预防的主要手段。乙型肝炎表面抗体（HBsAb）是判断机体对HBV免疫状态及乙肝疫苗免疫效果的评价指标。2011年9～12月,我们采用时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）两种方法对乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阴性的标本进行HBsAb测定,

ELISA法检测乙型肝炎病毒表面抗体具有保护效果的临界值探讨

目的：探讨ELISA法检测乙型肝炎病毒表面抗体（ HBsAb）具有保护作用的临界值。方法对ELISA法检测HBsAb 吸光度值（OD值）0．105～0．525的224份血清标本按OD值分为A组（OD值0．105～0．210）58份、B组（OD值0．211～0．315）58份、C组（OD值0．316～0．420）51份、D组（OD值0．421～0．525）57份。同时用化学发光法（CLIA）定量检测各组HBsAb水平。结果224份标本中136份（60．7％）CLIA HBsAb 定量检测结果＞10 mIU/mL，抗体有保护作用。以上述136份标本ELISA的结果为Y轴、CLIA结果为X轴进行直线回归，得回归方程Y＝0．0086X＋0．1726。将WHO标准样本CLIA结果＞12 mIU/mL为抗体阳性代入回归方程得ELISA检测HB-sAb具有保护作用临界OD值为0．2758。结论 ELISA检测乙型肝炎病毒表面抗体具有保护作用临界OD值为0．2758。

重组人抗乙型肝炎病毒表面抗体的筛选及序列分析

目的克隆、筛选人抗乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs),并对其基因序列进行分析。方法从抗-HBs抗体阳性血液中分离淋巴细胞,提取总RNA,合成cDNA,以此为模板,PCR扩增轻链和重链抗体可变区基因;应用已构建的抗体支架载体,构建重组表达载体,转化毕赤酵母X33,建立相应的酵母表达文库;甲醇诱导表达,Westernblot及ELISA筛选抗-HBs抗体阳性菌株;PCR扩增DNA片段,进行测序及Blastn比对,并与已发表的抗-HBs抗体序列进行同源性分析。结果重链及轻链抗体重组表达载体经双酶切鉴定,证明构建正确;经Westernblot及ELISA筛选,获得了具有HBsAg结合活性的完整轻重链抗体;轻链可变区与已发表序列核苷酸同源性为93%,而氨基酸同源性仅为88%,尤其CDR3变异较大;重链可变区与已发表序列同源性较低,CDR3区基因长度及序列均有较大差别。结论应用毕赤酵母表达体系筛选,获得了新的抗-HBs抗体。

乙型肝炎病毒表面抗体定性与定量检测结果的相关性分析及临床应用

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）定性与定量检测结果的相关性及临床应用。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）和微粒子酶免法（MEIA）分别检测乙型肝炎病毒表面抗体。结果 234例采用ELISA检测阳性的标本TRFIA检测全部阳性,277例TRFIA检测阳性的标本ELISA检测有43例检测为阴性,抗-HBs的浓度显示在10~44mIU/mL。这43例标本用MEIA再次复查,结果与TRFIA法一致。结论低浓度标本的检测上,TRFIA优于ELISA;ELISA法适用于一般人群进行抗-HBs监测。

5785例儿童乙型肝炎病毒表面抗体定量检测结果分析

目的：了解儿童人群对HBV抵抗能力的特点和现状。方法：对2013年1月1日-2014年12月31日本院门诊和住院部的0-14岁儿童定量检测乙型肝炎病毒表面抗体的结果进行分析。结果：各年龄组乙型肝炎病毒表面抗体定量结果分布不服从正态分布。乙型肝炎病毒表面抗体定量检测结果各年龄组均值比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;不同年龄组乙型肝炎病毒表面抗体不同浓度的人次分布比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;2.01-3岁组及12.01-13岁组不同性别间乙型肝炎病毒表面抗体定量检测均值比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;其余各组不同性别间乙型肝炎病毒表面抗体定量检测均值比较,差别无统计学意义（P〉0.05）。结论：（1）各年龄组乙型肝炎病毒表面抗体定量值不服从正态分布,年龄越小,离散程度越大。（2）0-3岁儿童由母体得到的乙型肝炎病毒表面抗体由较高水平达到最低值;同时自身生成的抗体在增长。3-5岁维持在低水平,之后免疫能力逐渐增强,应重视9-10岁儿童乙型肝炎病毒表面抗体浓度的监测并加强HBV疫苗注射,提高免疫能力。（3）2.01-3岁组和12.01-13岁组男女比较存在的差别契合男女儿童身体发育的特点。

两种方法检测低浓度乙型肝炎病毒表面抗体的探讨

目的探讨对低浓度乙型肝炎(下称乙肝)病毒表面抗体(抗-HBs)定性与定量检测方法的差异。方法采用酶免疫测定(EIA)一步法、时间分辨荧光法(TRF)、Axsym雅培试剂来测试抗-HBs。结果采用EIA一步法对低浓度抗-HBs标本进行测定显示,阴性37例,阳性21例;再用TRF法进行复查,阴性标本37例中有3例呈弱阳性,阳性标本21例中有2例呈阴性;以上5例结果不一致标本,采用美国Abboutt公司生产的Axsym雅培试剂检测显示,与TRF法一致。结论标志物提倡使用EIA二步法酶联试剂及定量方法,改善定性和定量检测结果差异性问题,最小限度避免结果上的差异,减少医患之间矛盾。

乙型肝炎病毒表面抗体中和验证方法的建立与初步应用

目的建立一种乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)中和验证方法并初步应用。方法采用双抗原夹心时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)原理建立了抗-HBs中和验证方法,固相包被乙型肝炎病毒表面抗原[HBsAg(ad/ay)]作为捕获抗原,N1-(P-异硫氰基苄基)-二乙三胺四乙酸铕钠标记HBsAg(ad/ay)作为检测抗原,采用HBsAg阳性混合样本作为中和HBsAg。自建的抗-HBs中和验证方法采用检测国家参考品、国家标准品和血清盘样本进行性能评估。丰华公司抗-HBs TRFIA试剂与Abbott公司抗-HBs化学发光微粒子免疫法(CMIA)试剂平行对比检测了171例临床样本,对2种试剂抗-HBs不符合样本以及同时阳性样本,采用自建抗-HBs中和验证方法进行中和实验。结果自建抗-HBs中和验证方法的固相包被HBsAg(ad/ay)的工作浓度为5.0μg/mL,标记物母液工作稀释比例为1∶1500,中和HBsAg的工作稀释比例为1∶1000。自建中和验证方法检测20份国家阴性参考品均为无反应性;检测国家精密度参考品的CV为4.10%(n=10);最低检出量不高于10.00 IU/L;检测国家标准品9.40~160.00 IU/L,实测值与理论值的相对偏倚在-4.08%~4.36%内,线性相关系数能达0.99以上。检测20份血清盘阴性样本均为无反应性;检测20份血清盘阳性样本均有反应性;检测血清盘灵敏度样本L1~L5,L1为有反应性;检测血清盘精密度样本的CV为5.56%(n=10)。抗-HBs TRFIA试剂与CMIA试剂对比检测了171例临床样本,其中9份样本CMIA试剂阴性而TRFIA试剂阳性的样本,有5份CMIA试剂抗-HBs在8.00~10.00 IU/L间,中和验证实验为有反应性;3份CMIA试剂阳性而TRFIA试剂阴性的样本中,中和验证实验为有反应性。69份TRFIA试剂与CMIA试剂抗-HBs同时阳性样本,中和验证实验均为有反应性。结论自建抗-HBs中和验证方法性能良好。建议各临床实验室尽量不要采用不同的检测系统同时进行抗-HBs定量检测并进行直接比较。

夏县3789名中小学生乙型肝炎病毒表面抗体检测结果分析

为了解夏县中小学生接种乙型肝炎疫苗后乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）阳性情况。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测中小学生3 789份血清样本HBsAb,现报告如下。

1226例入托幼儿血清乙型肝炎病毒表面抗体检测分析

目的调查了解入托前幼儿血清乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）水平。方法对1 226例入托幼儿采集空腹静脉血,采用化学发光法定量检测血清HBsAb水平,并进行分析。结果 1 226例幼儿中有25.04%血清HBsAb阴性（〈10IU/L）;47.88%的幼儿血清HBsAb水平为10～〈100IU/L,27.08%的幼儿血清HBsAb水平大于或等于100IU/L,血清HBsAb阳性率为74.96%。结论该地区幼儿在入托时大部分抗体不具有保护性,需要接种或加强注射疫苗,以有效提高幼儿血清HBsAb水平,降低乙型肝炎在幼儿群体中的发病率。

7～19岁青少年乙型肝炎病毒表面抗体监测及免疫后效果评价

乙型肝炎是危害我国人民健康的一大传染病,要解决这一疾病最根本的办法是对新生儿和乙型肝炎免疫缺乏的人群进行疫苗的有效接种。本研究对4491名中小学生进行免疫前的乙型肝炎病毒表面抗体测定,并对测定为阴性者进行重组乙型肝炎疫苗5μg免疫接种。1年后再对该人群复查乙型肝炎病毒表面抗体,结果发现7～19岁中小学生未接种前HBsAb率仅为42.3%,且随着年龄的增长而逐渐下降,高中生仅为38.7%。经过免疫接种后测定,HBsAb阳性率升至84.6%。说明对7～19岁中小学生进行强化乙型肝炎疫苗的普遍接种已刻不容缓,接种后的效果较为肯定。

晋中市榆次区2108名儿童乙型肝炎病毒表面抗体监测调查

乙型肝炎病毒感染是世界性的公共卫生问题，中国是乙型肝炎高发的国家，感染人数高达数亿人，其中长期携带乙型肝炎病毒约达1．2亿人。乙型肝炎对人群的危害性极大，会引起肝硬化、肝癌等严重的后遗症，乙型肝炎疫苗的接种能有效地增加人体的乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）水平。

学龄前儿童乙型肝炎病毒表面抗体检测分析

调查幼儿园2-7岁儿童乙型肝炎表面抗体阳性率情况。对2012年4401名刚入托（新生）及已在园（旧生）儿童行体格检查，抽取静脉血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法进行乙型肝炎表面抗体检测。按基础程序接种乙型肝炎疫苗的儿童乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）阳性率会随接种年数的增长而下降，入托儿童HBsAb阳性率偏低，应加强宣传，采取积极干预措施，重视HBsAb的检测，并及时给予乙型肝炎疫苗补种和加强。

玉林市学龄前儿童乙型肝炎病毒表面抗体检测999例分析

目的探讨玉林市学龄前儿童乙型肝炎病毒表面抗体检测状况,为预防乙型肝炎病毒感染提供依据.方法：对林市学龄前儿童乙型肝炎病毒表面抗体检测 999 例按年龄别性别统计分析.结果：1 岁-3 岁学龄前儿童乙型肝炎病毒表面抗体阳性率 78.46%高于 4岁-6岁学龄前儿童阳性率58.30%（445/674）,差异有统计学意义（P〈0.05）;男性学龄前儿童乙型肝炎病毒表面抗体阳性率78.46%（255/325）高于女性学龄前儿童阳性率 58.30%（335/485）,差异无统计学意义（P〈0.05）.结论：玉林市学龄前儿童乙型肝炎病毒表面抗体检测阳性率随年龄增长呈下降发展,定期检查乙型肝炎病毒表面抗体,为及时再接种接种乙型肝炎病毒疫苗提供有效依据.

乙型肝炎病毒表面抗原和抗体双阳性样本的产生机制研究

目的 研究乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和抗体（HBsAb）双阳性样本的产生机制.方法 运用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测技术在血清HBsAg阳性样本中收集HBsAb同时阳性的样本作为研究组,利用HBsAg和HBsAb体外血清学中和反应为同时阳性的样本寻找配对的样本作为配对组,对筛选出的每一对样本进行乙型肝炎病毒（HBV）分型、HBV-DNA病毒载量测定、HBsAg亚型分析、HBV-S基因测序,记录结果.同时,收集HBsAg阳性并且HBsAb阴性的样本血清作为对照组,同步分析,记录结果.结果 20例研究组的血清学标志物中,乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）均为阳性,基因型均为B型,HBV-DNA病毒载量均大于105 copies/ml,HBsAg亚型均为adw,有7例样本HBV-S基因有突变;20例配对组的HBcAb均为阳性,基因型均为C型,HBV-DNA病毒载量均大于105 copies/ml,HBsAg亚型均为adr,有6例样本HBV-S基因有突变.25例对照组样本的HBcAb均为阳性,HBV-DNA均大于105 copies/ml,其中12例样本基因型为B型,11例样本基因型为C型,2例样本基因型为B＋C型;HBsAg亚型16例为adr,7例为adw,2例为ayw;有8例样本HBV-S基因有突变.结论 HBsAg和HBsAb双阳性样本的产生机制可能由于机体在一定时期内感染了两种基因型和HBsAg亚型均不同的HBV而引起.

乙型肝炎病毒表面抗体衰减儿童加强免疫效果研究

目的探索乙型肝炎(乙肝)病毒表面抗体(抗-HBs)衰减儿童加强免疫的效果。方法按照0、1、6个月免疫程序,使用重组乙肝疫苗(Hepatitis B Vaccine,HepB)(汉逊酵母)对673名抗-HBs衰减儿童进行加强免疫,剂量分别为10μg和20μg。加强免疫1剂和3剂后采集研究对象的血液标本,检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、抗-HBs和乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)。对加强免疫1剂后抗-HBs<10毫国际单位/毫升(mIU/ml)的研究对象,进一步检测细胞因子干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4和乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)含量,同时按照1:1配对原则,从抗-HBs>100mIU/ml的儿童中选择性别相同、年龄±1岁的个体作为阳性对照,检测IFN-γ和IL-4。结果两剂量组重组HepB(汉逊酵母)加强免疫后均能刺激机体恢复高浓度的抗-HBs,组间差异无显著的统计学意义(P>0.05)。加强免疫1剂后,研究对象的抗-HBs阳性率>90%,53名抗-HBs<10mIU/ml研究对象的细胞免疫状态(IFN-γ阳性细胞百分比、IL-4阳性细胞百分比和IFN-γ/IL-4比值)也达到阳性对照组水平(P>0.05);加强免疫3剂后,研究对象抗-HBs阳性率达到100%,且几何平均浓度(GMC)显著高于加强免疫1剂后的效果(P<0.001)。结论抗-HBs衰减儿童加强免疫1剂10μg重组HepB(汉逊酵母)能产生良好的免疫应答。