疾病状态下有机阴离子转运体表达和功能的变化及其机制研究进展

有机阴离子转运体属于溶质转运体22亚家族成员,是一类重要的摄取类转运体,其有多个亚型。有机阴离子转运体在体内介导多种小分子内源性物质的转运,起到维持机体内环境稳态的作用。此外,临床上许多药物也是有机阴离子转运体的底物。研究表明某些疾病可能导致有机阴离子转运体表达和功能的异常改变,进而影响药物的疗效或导致机体内源性物质水平紊乱。对有机阴离子转运体的分布和功能进行简要介绍,并综述了疾病状态下有机阴离子转运体表达和功能变化及其机制的研究进展。

雷公藤甲素致小鼠肝损伤对转运体Mrp2和Oatp2的影响

目的:通过多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance protein2,Mrp2)和有机阴离子转运多肽2(organic anion transporting polypeptides 2,Oatp2)初步探究雷公藤甲素诱导小鼠肝损伤的机制。方法:雄性ICR小鼠单次灌胃给予雷公藤甲素(1.0mg·kg^(-1))24 h后称重,摘眼球采血后分离血清,测定血清生化指标;取肝组织做病理切片;采用免疫印迹法检测肝脏组织中Mrp2和Oatp2的蛋白表达量。结果:与对照组相比,雷公藤甲素组肝重指数显著增加(P<0.05),部分血清生化指标显著上升(P<0.05),且肝细胞发生核碎裂和脂肪变性。雷公藤甲素组Oatp2的表达较对照组显著升高了32.79%(P<0.05),而Mrp2的表达较对照组显著下降了45.47%(P<0.01)。结论:雷公藤甲素可能通过上调肝细胞膜转运体Oatp2和下调Mrp2,扰乱肝内胆红素和胆汁酸代谢排泄平衡,可能是雷公藤甲素诱导肝损伤的机制之一。

大鼠急性溴氰菊酯中毒的形态学及肝脑酶组织化学改变

作者用大鼠建立急性溴氰菊酯中毒的动物模型。观察大鼠中毒后大体和光镜下组织形态学改变及肝和脑的酶组织化学变化。结果发现:大鼠在中毒后30分钟左右出现中毒症状。解剖未发现有特异性的病理改变。脑的 ATPase、Ache、MAO、ANAE、NAE 的酶活性与对照组相比无差异;肝脏的 ANAE 和 NAE 在中毒后12～24小时,活性升高,而 ATPase、Ache 和 MAO 与对照组相比无差异。结果表明,诊断急性溴氰菊酯中毒不能仅靠病理解剖发现,应结合案情和毒物分析结果综合考虑。溴氰菊酯对大鼠肝和脑的 ATPase、Ache 的活性无抑制作用,提示在治疗氰菊酯急性中毒患者时,不能完全采用有机磷农药中毒的治疗措施,特别是对阿托品的使用应持慎重态度。

饮用水有机提取物对正常人肝细胞中活性氧及细胞凋亡因子表达的影响

目的观察饮用水有机提取物染毒对正常人肝细胞(L02)中活性氧(reactive oxygen species,ROS)及细胞凋亡因子表达水平的影响。方法利用固相萃取法提取饮用水中有机污染物。将L02细胞分别暴露于培养液(空白对照)、0.1%DMSO(溶剂对照)和0.3125、0.6250、1.2500、2.5000、5.0000 L/ml饮用水有机提取物中72 h。采用流式细胞术检测ROS水平,分别采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法和Western blot法检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)mRNA、蛋白的表达水平,采用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)酶的活力。结果与溶剂对照组比较,2.5000、5.0000 L/ml有机提取物染毒组L02细胞内的ROS水平较高,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着有机提取物染毒剂量的升高,L02细胞内的ROS水平呈上升趋势。与溶剂对照组比较,1.2500、2.5000、5.0000 L/ml有机提取物染毒组L02细胞内的Cyt C mRNA和蛋白表达水平均较高,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着有机提取物染毒剂量的升高,L02细胞内的Cyt C mRNA和蛋白表达水平均呈上升趋势。与溶剂对照组比较,各剂量有机提取物染毒组L02细胞内的Caspase-9及Caspase-3酶活力均较高,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着有机提取物染毒剂量的升高,L02细胞内的Caspase-9及Caspase-3酶活力均呈上升趋势。结论饮用水有机提取物可引起L02细胞ROS水平增加,导致Cyt C表达水平上调,进而诱导Caspase-9和Caspase-3酶活力水平升高。氧化损伤调控肝细胞凋亡因子变化可能是饮用水有机提取物致肝细胞损伤的重要环节。

抗结核药物性肝损伤危险因素及其与SLCO1B1/ABCB1基因多态性的关联性

目的分析不同抗结核治疗方案致药物性肝损伤(DILI)情况及其与肝脏药物转运体1B1(SLCO1B1)/多药耐药性蛋白1(ABCB1)基因多态性的关联性。方法回顾性分析2018年10月-2020年4月医院收治的621例接受抗结核治疗的肺结核患者临床资料,按是否发生DILI分为DILI组78例、非DILI组543例,测定两组抗结核治疗前后肝功能[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)]变化,分析两组的临床资料并筛选DILI的危险因素,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测SLCO1B1基因rs4149014位点及ABCB1基因rs2231142位点多态性,分析SLCO1B1/ABCB1基因多态性与DILI的相关性。结果78例出现DILI,发生率为12.56%(78/621),复治肺结核、耐多药肺结核患者DILI发生率高于初治肺结核患者,耐多药肺结核患者DILI发生率高于复治肺结核患者(P<0.05);78例DILI组抗结核治疗后ALT、AST、GGT、ALP、TBIL峰值均高于抗结核治疗前及非DILI组(P<0.01),非DILI组治疗前后ALT、AST、GGT、ALP、TBIL差异无统计学意义;年龄、肝病史、饮酒史、抗结核治疗时机为发生DILI的独立危险因素(P<0.05);DILI组SLCO1B1基因rs4149014位点的基因型TT、GT、等位基因T频率高于非DILI组,DILI组ABCB1基因rs2231142位点的基因型AC、等位基因A频率高于非DILI组(P<0.05);Logistic回归分析显示,SLCO1B1基因rs4149014位点的基因型GT、等位基因T及ABCB1基因rs2231142位点的基因型AC与肺结核患者DILI具有相关性(P<0.05)。结论抗结核药物治疗肺结核导致的DILI发生率高,SLCO1B1/ABCB1基因多态性也与DILI有密切关系,可能是DILI的易感基因。