薛敬东教授运用“补肝体强肝用”治疗原发性血小板减少性紫癜

原发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种因血小板免疫性破坏,导致外周血中血小板减少的出血性疾病,归属于中医学“紫癜病”范畴。该篇介绍名中医薛敬东运用“补肝体强肝用”治疗原发性血小板减少性紫癜经验。薛敬东教授认为ITP为初起外来风燥邪毒,或肝火旺盛伤及血络,随着病程进展,情志失调成为病情进展变化的主要因素,后期以肝郁脾虚、肝肾阴虚为主要病机。薛敬东教授基于中医学的整体观念和从脏腑理论出发,结合肝体阴而用阳的生理特点和肝肾同源的理论基础,总结提出补肝体,强肝用的学术思想。与大多数学者认为的肝为刚脏宜清不同,薛敬东教授指出肝脏不宜一味地用清法,行气破气之品均可伤及肝脏的阳气。薛敬东教授强调用补法即补肝体强肝用治疗ITP肝火偏盛证、肝郁脾虚证、肝肾阴虚证,在临床中取得了很好的疗效。

不同硒源对肝用鹅早期生长性能及免疫功能的影响

为了研究不同硒源对肝用鹅早期生长性能及免疫功能的影响,试验选用1日龄健康、体重相近的肝用鹅96只,按单因素完全随机设计分成4个组,1组为对照组,2组添加亚硒酸钠,3组添加酵母硒,4组添加纳米硒。每组3个重复,每个重复8只,公母各半。在基础日粮一致的情况下,2、3、4组分别添加同水平(0.3mg/kg)的不同硒源。试验期为9周。结果表明:各试验组体增重、采食量和料重比与对照组比较差异不显著(P>0.05)。9周龄除亚硒酸钠组脾脏指数与对照组差异不显著外(P>0.05),其余各试验组4周龄和9周龄免疫器官指数均显著高于对照组(P<0.05),但不同硒源间差异不显著(P>0.05)。4周龄和9周龄T淋巴细胞转化率亚硒酸钠组和纳米硒组均显著高于对照组(P<0.05),酵母硒组显著高于亚硒酸钠组(P<0.05),极显著高于对照组(P<0.01)。上述结果表明,各种硒源对鹅生产性能的影响差异不显著,而对于免疫功能的影响,酵母硒优于纳米硒和亚硒酸钠。

生物型人工肝用肝非实质细胞研究进展

人工肝支持系统是治疗肝衰竭的有效手段．其作为肝移植围手术期治疗的适应证也得到了公认。近年在人工肝研究方面虽取得了较大进展．但尚无一种人工肝能完全替代肝脏的全部功能。现有的动物实验及早期临床应用清楚地表明．生物型人工肝不仅能为肝衰竭患者提供强大的解毒、生物合成功能以及稳定内环境、阻断恶性循环，而且为肝细胞再生提供了条件和时间。

生物人工肝用C3A细胞在零下非结冰时的保存

目的:探讨零下非结冰保存肝细胞的效果及其与细胞凋亡的关系.方法:UW液保存的C3A细胞悬液分为3组:-0.8℃组(零下非结冰组),0℃组(0℃非结冰组),4℃组(对照组).低温保存24、48及72h后,采用流式细胞术分别测定细胞存活率及凋亡率,同时测定LDH、乳酸释放,细胞内ATP含量、尿素合成功能及白蛋白分泌功能,同时观察细胞形态.结果:零下非结冰组较0℃非结冰组及对照组明显提高了低温保存72h的C3A细胞的存活率(86.49%±2.80%vs81.50%±2.83%,77.83%±3.40%,均P<0.05),降低了细胞凋亡率(1.26%±0.84%vs5.34%±1.20%,9.16%±1.99%,均P<0.05);明显抑制了低温保存72h乳酸以及LDH释放(乳酸:10.38μg/106cells±1.40μg/106cellsvs12.02μg/106cells±1.64μg/106cells,17.41μg/106cells±2.40μg/106cells;LDH:80.10U/L±11.10U/Lvs120.04U/L±14.32U/L,148.98U/L±15.37U/L,均P<0.05);更好地维持了低温保存72hC3A细胞内ATP含量、尿素合成功能、及白蛋白分泌功能(均P<0.05).形态上,零下非结冰组保存细胞死亡比例少,细胞接触良好,未见对照组及0℃非结冰组细胞膜周围出现"毛刺"样改变及细胞内的"空泡样"改变.结论:在零下非结冰条件下保存肝细胞,建立一个"血库样"(readytouse)肝细胞库,可以有效促进生物人工肝的发展.

结核病人护肝用药分析

目的为临床抗结核化疗中选择、应用护肝药提供相应的药学信息。方法从抗结核药致肝损机制、各类护肝药的护肝机制、药理特点等方面进行综合分析。结果完成了护肝药的分类,对其护肝机制、药理特点作了综合分析和评价。结论药学信息的综合评价分析促进了护肝药的合理应用。

三种肝保存液低温保存生物人工肝用C3A细胞的效果比较

目的比较UW液、Celsior液和HTK液4℃常规低温保存生物人工肝用C3A细胞的效果。方法制备好的C3A细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组)。各组细胞于4℃低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术),丙氨酸氨基转移酶(ALT)及乳酸释放,尿素合成功能及清蛋白分泌功能。结果 UW液及Celsior液比HTK液显著提高了4℃低温保存72 h的C3A细胞的存活率(78.56%±4.67%vs 76.03%±3.53%,60.54%±3.18%,P<0.05);抑制了C3A细胞低温保存时ALT释放及乳酸的释放(P<0.05);更好地维持C3A细胞尿素合成功能[(0.52±0.11)mmol/L vs(0.51±0.06)mmol/L,(0.32±0.05)mmol/L,P<0.05]和清蛋白分泌功能[(1.79±0.26)g/L vs(1.75±0.21)g/L,(1.20±0.17)g/L,P<0.05]。UW液同Celsior液4℃低温保存C3A细胞的效果无差异。结论同HTK液相比,使用UW液或者Celsior液4℃保存C3A细胞可以明显的提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT释放和乳酸释放,有效的保护肝细胞尿素合成功能和清蛋白分泌功能。

零下非结冰UW液成功保存生物人工肝用L-02肝细胞

目的比较零下非结冰(-0.8℃)与常规低温(4℃)分别用于人工肝用永生化L-02细胞保存的效果,探索零下非结冰保存肝细胞与细胞凋亡的关系。方法制备好的UW液保存的L-02细胞悬液分为以下2组:-0.8℃组(零下非结冰组),4℃组(对照组)。低温保存24、48h及72h后,分别测定细胞存活率、凋亡率、坏死率(流式细胞术)及ALT释放、尿素合成功能、白蛋白分泌功能。结果 -0.8℃(零下非结冰)较4℃明显提高了长时间低温保存L-02细胞的存活率[72h:(70.17±2.82)%vs(60.05±3.17)%,P<0.01],降低了细胞凋亡率[72h:(5.73±1.68)%vs(9.20±2.35)%,P=0.02],抑制了ALT释放[72h:(6.21±0.65)U/Lvs(8.68±1.18)U/L,P<0.01],更好地维持了L-02细胞的尿素合成功能[72h:(1.01±0.14)mmol/Lvs(0.66±0.09)mmol/L,P<0.01]及白蛋白分泌功能[72h:(9.04±0.53)μg/mlvs(7.70±0.52)μg/ml,P<0.01]。2组间细胞坏死率差异无统计学意义[72h:(18.45±1.88)%vs(21.82±3.86)%,P>0.05]。结论零下非结冰可明显维持L-02细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡,有效保护肝细胞尿素合成和白蛋白分泌功能。

UW液、Celsior液和HTK液低温保存生物人工肝用L-02细胞的效果比较

目的比较UW液、Celsior液和HTK液4℃常规低温保存生物人工肝用L-02细胞的效果。方法制备好的L-02细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组)。各组细胞于4℃低温72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术),ALT及LDH释放,尿素合成功能及白蛋白分泌功能。结果 UW液较Celsior液和HTK液显著提高了4℃常规低温保存72 h的L-02细胞的存活率[(60.05±4.23)%vs(50.12±3.99)%、(44.20±4.67)%],均P<0.05;降低了细胞死亡率[(39.95±4.23)%vs(49.88±3.99)%、(55.80%±4.67)%],均P<0.05;抑制了ALT、LDH释放(均P<0.05);更好地维持了L-02细胞尿素合成功能[(1.03±0.23)mmol/Lvs(0.80±0.14)mmol/L、(0.48±0.05)mmol/L]和白蛋白分泌功能[(8.36±1.38)mg/Lvs(6.41±1.25)mg/L、(5.19±0.41)mg/L),均P<0.05。结论与Celsior液和HTK液相比,使用UW液4℃常规低温保存L-02肝细胞可以明显提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT、LDH释放,有效保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能,但保存时间不应超过72 h。

张氏肝病流派从“补肝体强肝用”辨治臌胀

探讨长安医学张氏肝病流派“补肝体强肝用”的学术思想。通过对临床诊治思路、临床医案的总结,探讨辨治臌胀的经验,为临床实践提供新思路。长安医学张氏肝病流派基于整体观念、脏腑学说理论,根据肝体阴用阳、肝肾同源、精血同源特点,提出“补肝体强肝用”的学术思想,用于治疗臌胀阴虚水停证、脾肾阳虚证、水湿内停证,效果较好。

生物人工肝用肝细胞源的研究进展

生物人工肝支持系统是目前公认的治疗因各种原因所致暴发型肝衰竭最有前途的方法,已在动物实验及临床应用中取得了确切疗效。肝细胞作为生物人工肝的主要生物成分,在该系统中扮演举足轻重的角色,本文就近年来作为生物人工肝用肝细胞的研究进展作了综述。

海藻糖对生物人工肝用人永生化肝细胞系C3A细胞低温的保存

背景:随着生物人工肝在临床上的应用,需要有一种方便、有效、实用的保护生物反应器装载细胞活力及功能的方法,设计有自主知识产权的生物人工肝用肝细胞的低温保护液迫在眉梢。目的:验证海藻糖作为低温保护剂在4℃低温保存肝细胞的作用。方法:采用C3A人永生化肝细胞系在不同低温保存液(DMEM培养液,乳酸钠林格氏液,加有不同浓度海藻糖的乳酸钠林格氏液,UW液)4℃保存24,48,72h。复苏后行细胞活力、细胞损伤指标、氧自由基代谢相关指标等检测,并通过荧光双染法观察细胞凋亡情况。结果与结论:不同低温保存液保存不同时间C3A细胞的活力、细胞损伤及细胞凋亡表现均有所不同,其中同时间点不同浓度海藻糖组均优于单用乳酸钠林格氏液组,但不如UW液组(P<0.01)。而保存24h的不同浓度海藻糖组及UW液组与乳酸钠林格氏液组相比差异无显著性意义(P>0.05),提示海藻糖能有效减轻低温对肝细胞凋亡及缺血再灌注损伤的程度,可成为低温保存液中有效及重要的保护剂组分。

《张聿青医案》治肝用药规律研究

目的:探讨张聿青治肝的用药规律。方法:以《张聿青医案》第八卷肝火肝阳、肝风,第九卷胸胁痛三章中病案作为研究资料,提取病案中的处方分频次录入Microsoft Excel 2010中,在程序中完成中药名的规范并按照中医传承计算平台v3.0所要求的格式进行编辑、校正,再通过中医传承计算平台中"数据分析""方剂分析"等模块进行用药规律分析。结果:张聿青治肝用药在归经上五脏相对平均,六腑偏重胆、胃;药性以寒性、平性为主;药味以甘味为主,苦味次之;功效上以补虚类为主,利水渗湿类、清热类次之。结论:张聿青治肝用药,治疗肝阳肝火注重滋养阴血;治疗肝气时兼顾脾肺;治疗肝风时,注重胆胃之降。

零下非结冰抑制线粒体途径相关的细胞凋亡成功保存生物人工肝用L02细胞

目的比较常规低温(4℃及0℃)及零下非结冰温度(-0.8℃)保存L-02肝细胞时Bcl-2/Bax基因和蛋白表达的差异及与低温保存引起细胞凋亡的关系。方法 L-02细胞分为3组:-0.8℃组(零下非结冰组),0℃组(0℃非结冰组),4℃组(对照组)。低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及凋亡率(流式细胞术),检测LDH、ALT释放及凋亡基因Bcl-2与Bax的mRNA及蛋白定量表达并计算Bcl-2/Bax比值。结果零下非结冰组较0℃组及4℃组显著提高了低温保存72 h的L-02细胞存活率〔(70.95%±3.33%)vs(65.9%±3.22%)、(61.02%±3.37%),均P<0.05〕;降低了细胞凋亡率〔(5.82%±1.68%)vs(8.53%±1.67%)、(9.40%±2.57%),均P<0.05〕;抑制了LDH〔(101.50±6.58)U/L vs(127.67±12.09)U/L、(150.13±11.38)U/L,均P<0.05〕与ALT释放〔(6.07±0.63)U/L vs(7.00±0.60)U/L、(8.63±1.25)U/L,P<0.05〕;提高了L-02细胞Bcl-2基因mRNA及蛋白表达(均P<0.05),降低了Bax基因mRNA及蛋白表达(均P<0.05),Bcl-2/Bax指数上升(均P<0.05)。结论同常规低温保存相比,零下非结冰可显著提高肝细胞低温保存后细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡。零下非结冰降低了低温源性细胞凋亡的机制可能同Bcl-2基因表达增加、Bax基因表达降低即Bcl-2/Bax比值上升有关。

生物人工肝用肝细胞低温保存的现状与进展

大量功能好的肝细胞是生物人工肝支持系统(bio-artificial liver support system,BLASS)的核心,是制约BLASS临床广泛应用的瓶颈.探索出一种实用的肝细胞低温保存方法,建立一个随时可用(ready to use)的肝细胞库是BALSS普遍推广的基础.目前肝细胞低温保存分为4℃或零下非结冰保存和-80℃或-196℃深低温冻存两大类,两大类保存方法各有优缺点.影响肝细胞低温保存的因素很多,如保存(冻存)液、(冻存)保护剂等.有关肝细胞在低温保存过程中死亡的机制尚未完全阐明,但大量研究发现细胞凋亡是除了坏死之外低温保存肝细胞死亡的另一个重要的途径.

UW液、Celsior液和HTK液零下非结冰保存生物人工肝用L-02细胞的效果比较

目的:比较零下非结冰(-0.8℃)UW液、Cel-sior液和HTK液保存生物人工肝用L-02细胞的效果.方法:将制备好的L-02细胞悬液分成以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组).各组细胞于-0.8℃低温保存72h后,分别使用流式细胞术测定细胞存活率及死亡率,谷丙转氨酶(ALT)及乳酸脱氢酶(LDH)释放,尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果:UW液较Celsior液和HTK液显著提高了零下非结冰保存72h的L-02细胞的存活率(71.10%±4.09%vs65.22%±4.45%,50.48%±5.13%,均P<0.05);降低了细胞死亡率(29.90%±4.09%vs34.78%±4.45%,49.52%±5.13%,均P<0.05);抑制了ALT(6.18U/L±1.36U/L vs8.15U/L±1.14U/L,9.75U/L±2.45U/L,均P<0.05)和LDH(93.82U/L±5.68U/Lvs115.67U/L±8.77U/L,164.92U/L±15.95U/L,均P<0.05)释放;更好地维持了L-02细胞尿素合成功能(1.08mmol/L±0.22mmol/Lvs0.92mmol/L±0.17mmol/L,0.68mmol/L±0.08m m o l/L,均P<0.05)和白蛋白分泌功能(9.33mg/L±1.36mg/L vs7.54mg/L±1.22mmol/L,7.18mg/L±0.93mg/L,均P<0.05).结论:同Celsior液和HTK液相比,使用UW液零下非结冰(-0.8℃)保存肝细胞可以明显提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT、LDH释放,有效保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能.

生物人工肝用C3A与L-02肝细胞零下非结冰保存后的生物学特性比较

目的:比较UW液零下非结冰(-0.8℃)保存后C3A与L-02细胞的生物学特性,探索其对生物人工肝的应用价值.方法:贴壁培养C3A与L-02细胞,0.25%胰酶消化,制备成细胞悬液,细胞浓度调至2×109/L,分装至2mL冻存管,UW液-0.8℃保存0、24、48及72h后,分别测定细胞存活率与凋亡率、AST与LDH释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果:随着低温保存时间的延长,细胞存活率逐渐下降,但72hC3A细胞存活率明显高于L-02细胞(86.49%±2.80%vs70.17%±2.82%,P<0.001);细胞凋亡率亦逐渐上升,但72hC3A细胞凋亡率低于L-02细胞(1.26%±0.84%vs5.73%±1.68%,P<0.001);AST及LDH的释放量逐渐增加,但72hC3A细胞低于L-02细胞(4.61U/L±0.43U/Lvs6.22U/L±0.65U/L,P<0.001;86.10U/L±11.10U/Lvs113.88U/L±5.64U/L,P<0.001).尿素合成功能呈下降的趋势,但72hL-02细胞明显优于C3A细胞(1.01mmol/L±0.14mmol/Lvs0.60mmol/L±0.06mmol/L,P<0.001).白蛋白分泌功能逐渐降低,但72hC3A细胞明显优于L-02细胞(2.060g/L±0.220g/Lvs9.04mg/L±0.53mg/L,P<0.001).结论:UW液-0.8℃保存C3A与L-02细胞72h仍然可以满足生物人工肝支持系统的需要.以L-02细胞为材料的人工肝可能更适用于肝衰竭合并肝性脑病,以C3A细胞为材料的人工肝可能更适用于肝衰竭合并低白蛋白血症.

零下非结冰UW液保存人工肝用C3A细胞

目的探索零下非结冰(-0.8℃)保存C3A肝细胞的效果以及同细胞凋亡的关系。方法UW液(University of Wisconsin Solution)保存的C3A细胞分为以下2组:-0.8℃组,4℃组。低温保存24h、48h及72h后分别测定细胞存活率及凋亡率、AST释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能。结果零下非结冰(-0.8℃)72hC3A细胞存活率(86.49±2.80)%高于4℃(77.83±3.40)%,P<0.001;细胞凋亡率(1.26±0.84)%低于4℃(9.16±1.99%,P<0.001;AST释放(5.30±0.42)U/L低于4℃(8.18±1.05)U/L;细胞尿素合成功能(0.68±0.06)mmol/L优于4℃(0.40±0.07)mmol/L,P<0.001;白蛋白分泌功能(2.06±0.22)mg/ml优于4℃(1.68±0.18)mg/ml(P=0.002)。结论0.8℃的UW液可明显提高低温保存C3A细胞存活率,有效地保护细胞尿素合成和白蛋白分泌功能。

临证治肝用药浅谈

肝脏以血为体,以气为用,体阴而阳.肝脏其性刚烈,发病常以情志为主线,或因情志不舒而生郁,或因言语不投则生嗔,或因谋虑过度则自竭,罢极之本,从中变大,攻冲激烈.临证针对肝脏的病理变化,采用不同的肝病治法,常能收到显著疗效.

肝用型灰鹅(朗德鹅)种鹅饲养技术

肝用型灰鹅是我国从法国克里木公司引进的所谓朗德鹅。朗德鹅原产于法国西南部的朗德省,是由大型图卢兹鹅和体型较小的玛瑟布鹅杂交后,经长期连续选育而成。朗德鹅现已多次引入我国繁育,主要用于肥肝生产。上海、浙江、河北、吉林、四川等地都有较大的种群和饲养规模。

谁动了我们的肝——由傅彪病逝看肝移植和肝用药

一个有良好社会影响的公众人物的健康问题自始至终会牵动大众的心,著名演员傅彪从去年诊断出肝癌、首次肝移植,到今年二次手术、及至8月30日在武警总医院病逝,媒体和公众一直都在跟踪和关注。虽然傅彪离我们而去了,但肝移植和肝用药又成为人们关注的焦点。