雷公藤红素对裸鼠肝癌皮下移植瘤抑制作用的研究

目的研究天然活性化合物雷公藤红素(celastrol)对裸鼠移植肿瘤的抑制作用。方法建立人源肝癌HepG2细胞的裸鼠皮下移植肿瘤模型。20只裸鼠随机分为4组,即空白对照组和雷公藤红素高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组分别按4.0 mg/kg、2.0 mg/kg、1.0 mg/kg雷公藤红素腹腔给药,每日一次,每周5 d,共给药30 d,实验中每5 d测量一次肿瘤体积的变化。结果雷公藤红素高剂量组、中剂量组和低剂量组的体积抑瘤率分别是89.52%、65.60%和12.21%,与空白对照组相比,高剂量组、中剂量组的差异具有统计学意义(P<0.05)。高剂量雷公藤红素给药后对裸鼠肝脏和肾脏等产生严重的毒性反应。结论雷公藤红素对裸鼠肝癌皮下移植瘤具有良好的体内抗肿瘤效果,应进一步开展药物新剂型及分子结构优化方面的研究,减少其毒副反应。

超声介导载miR-16-5p微泡联合树突状细胞疫苗对小鼠肝癌皮下移植瘤生长的影响

目的研究采用超声介导载miR-16-5p微泡联合树突状细胞(DC)疫苗处理对小鼠肝癌皮下移植瘤生长的影响。方法制备载miR-16-5p的高分子微泡和DC疫苗。在30只小鼠用HepG2细胞建立肝癌皮下移植瘤模型,再随机分为对照组、空微泡、miR-16-5p微泡、DC疫苗和miR-16-5p微泡联合DC疫苗处理组,每组6只。观察各组小鼠肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率,采用实时荧光定量RT-PCR法检测肿瘤组织miR-16-5p水平。采用ELISA法检测血清免疫球蛋白G(IgG)、IFN-γ、TGF-β、IL-2和IL-10水平。结果制备的高分子微泡呈球形,平均粒径为1.31μm;对照组、空微泡、miR-16-5p微泡、DC疫苗和联合处理组小鼠肿瘤体积分别为(5973.2±257.4)mm^(3)、(5912.3±248.3)mm^(3)、(4873.7±281.5)mm^(3)、(4954.9±276.3)mm^(3)和(2225.8±201.4)mm^(3),瘤体质量分别为(4.4±0.4)g、(4.2±0.3)g、(2.8±0.2)g、(2.7±0.2)g和(0.9±0.2)g,差异显著(P<0.05);各组小鼠肿瘤组织miR-16-5p水平分别为(1.02±0.06)、(1.05±0.03)、(7.81±0.97)、(1.08±0.07)和(8.08±1.06),提示微泡组和联合组显著高于其他各组(P<0.05);与对照组或空微泡处理组比,其他三组血清IgG、IFN-γ和IL-2水平均显著升高,其中联合组水平最高,而其他三组血清TGF-β和IL-10水平均显著降低,其中联合组水平最低(均P<0.05)。结论采用超声介导载miR-16-5p微泡联合DC疫苗处理对小鼠肝癌皮下移植瘤生长具有协同的抑制作用,可能与增强了小鼠对肿瘤的免疫效应有关。

β-咔啉类衍生物对BALB／c裸小鼠肝癌皮下移植瘤生长的影响

目的观察β-咔啉类衍生物（HMD）对人肝癌裸小鼠皮下移植瘤生长的影响。方法雄性BALB／c裸小鼠每只以2×10^7个活细胞／ml（0．2m1）建立人肝癌的裸小鼠模型，随机分为HMD低剂量组（0．22mg／kg）；HMD中剂量组（0．44mg／kg）；HMD高剂量组（0．87mg／kg）；5-氟尿嘧啶注射液组（5-Fu）和生理盐水对照组。各组连续给药15d。观察HMD对裸小鼠人肝癌移植瘤生长的影响及对裸小鼠主要脏器的毒性。结果HMD低、中、高剂量组及阳性组对裸小鼠人肝癌移植瘤体重的影响与阴性对照组比较均有极显著性差异（P〈0．01）。HMD中、高剂量组及阳性组对裸小鼠体质量增加影响与阴性对照组比较有极显著性差异（P〈0．01）。对肝脏重量及肝脏系数的影响，HMD低、中、高剂量组及阳性组与阴性对照组比较有显著性差异（P〈0．05），肾脏及肾脏系数各组间差异不显著（P〉0．05）。结论HMD对人肝癌HepG2裸小鼠皮下移植瘤生长有明显的抑制作用，未见有异常毒性症状出现。

阿帕替尼对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长及生物钟基因表达的影响

目的探讨阿帕替尼对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长及生物钟基因表达的影响。方法选择BALB/c裸鼠16只,将人肝癌HepG2细胞接种于右腋皮下建立皮下移植瘤模型。接种1周,随机将裸鼠分为阿帕替尼组和对照组,每组8只。阿帕替尼组给予阿帕替尼50 mg/kg灌胃,对照组给予DMSO 100μL/20 g灌胃,每天1次,连续2周。两组分别于灌胃前,灌胃第3、6、9、12天及灌胃结束24 h,测量肿瘤最大径和最小径,计算肿瘤体积。末次灌胃结束24 h,颈椎脱臼法处死,剥离肿瘤,采用Real-time PCR法检测生物钟基因Per(Per1、Per2、Per3)、CLOCK、Cry(Cry1、Cry2)、BMAL1和CKIε mRNA表达。结果阿帕替尼组从灌胃第3天开始皮下移植瘤体积明显小于对照组(P均<0.05)。阿帕替尼组Per3、CLOCK、Cry2、CKIε mRNA相对表达量均明显低于对照组(P均<0.05),而Per1、Per2、BMAL1和Cry1 mRNA相对表达量与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论阿帕替尼能抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长,其机制可能与下调肿瘤细胞生物钟基因Per3、CLOCK、Cry2、CKIε mRNA表达有关。

八月札乙醇提取物通过PI3K/Akt通路抑制H22细胞增殖并诱导其凋亡

目的研究八月札乙醇提取物体内对H22肝癌细胞增殖、促进凋亡及对PI3K/Akt信号通路的影响。方法构建小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型,随机分为模型组、5-氟脲嘧啶(5-Fu)组、八月札乙醇提取物高、中、低剂量组,每组12只,模型组灌胃给予等体积的生理盐水,八月札乙醇提取物高、中、低剂量组分别灌胃给予40、20、10生药g/kg,5-Fu组腹腔注射5-Fu 0.02 g/kg,1次/d,连续给药10 d。每天观察并记录荷瘤小鼠基本情况;末次给药后分离瘤块,测量瘤体体积、称瘤体质量及计算抑瘤率;分别采用免疫组织化学法和Western blot法检测八月札乙醇提取物对瘤组织中PI3K、Akt、Bcl-xL和Bad及Caspase-9蛋白表达的影响。结果八月札乙醇提取物各给药组小鼠的基本情况均优于模型组;与模型组比,5-Fu组和八月札乙醇提取物高、中、低剂量组瘤体体积和体质量均明显减少(P<0.05或P<0.01);八月札乙醇提取物高、中、低剂量组对H22小鼠肝癌皮下移植瘤模型具有明显的抑瘤作用,抑瘤率分别为62.3%、58.5%和55.7%;并能显著下调肿瘤组织中PI3K和Bcl-xL蛋白表达,显著上调Bad和Caspase-9的蛋白表达(P<0.01),Akt在各组瘤组织中表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论八月札乙醇提取物具有体内抑制H22细胞增殖、促进H22细胞凋亡的作用,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。