永生化EB病毒转化B细胞对肝癌细胞抗原的提呈作用

目的 建立EB病毒 (Epstein Barrvirus,EBV)转化的永生化B细胞 (命名为LEBV)并研究其对肝癌细胞抗原的提呈作用。方法 从人外周血中分离出外周血单个核细胞 (Peripheralbloodmononuclearcell,PBMC) ,用等体积的EBV上清混合培养 4周以上建立永生化EBV转化B细胞 (LEBV) ,用流式细胞计数仪 (FACS)检测其细胞表面功能相关分子CD86、CD4 0、HLA DR和HLA ABC的表达情况。LEBV与自体淋巴细胞和肝癌细胞抗原共培养 3d,结束培养前 1 2h加入 37kBq/孔3 H 标记的胸腺嘧啶 (3 H TdR) ,收获细胞 ,用液体闪烁计数仪测定cpm。结果 培养 3周以上即培养出EBV转化的永生化B细胞 ,可连续培养 1年以上。经FACS检测 ,细胞表面分子CD86、CD4 0、HLA DR和HLA ABC的表达率分别为 74 %、91 %、83%和 86 .7%。该细胞接触肝癌细胞抗原后刺激自体淋巴细胞增殖的能力增强。