阿帕替尼对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响研究

目的研究阿帕替尼对人肝癌Hep G2细胞增殖和迁移能力的影响。方法将人肝癌Hep G2细胞对数生长期的细胞分成对照组和实验组。对照组不予任何处理,实验组分别给予0.01,0.05,0.1,0.5,1.0,5.0,10.0,20.0μmol·L^(^(-1))的阿帕替尼处理,并测定细胞生长抑制率、移行愈合率,测定细胞内P53、caspase-3和caspase-8的表达情况。结果实验组细胞生长抑制率分别为(17.11±0.83)%,(27.54±1.02)%,(33.84±0.92)%,(37.43±1.13)%,(41.29±1.87)%,(46.68±1.36)%,(53.42±2.03)%,(70.44±2.58)%,随着药物浓度增加而增强。0.05,0.1μmol·L^(-1)的阿帕替尼移行愈合率分别为(45.50±4.30)%和(37.50±3.43)%,与对照组的(84.60±6.88)%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。2.1μmol·L^(-1)阿帕替尼组P53为(112.31±6.53)%,caspase-3为(137.93±10.01)%,caspase-8为(104.63±3.89)%,4.2μmol·L^(-1)阿帕替尼组P53为(147.69±9.67)%,caspase-3为(306.89±20.15)%,caspase-8(139.09±8.82)%(P<0.01)。结论阿帕替尼可以抑制人Hep G2肝癌细胞后肿瘤细胞的生长和迁移愈合,其机制可能是上调了P53、caspase-3和caspase-8的表达。

嘌呤霉素抗性基因捕获载体的构建及在细胞中的功能验证

目的构建具有嘌呤霉素抗性基因捕获载体，扩大基因捕获载体的应用范围。方法用经改造的捕获载体（gene trapping vector）稳定转染HepG2．2．15肝癌细胞系，经嘌呤霉素筛选，制作单克隆细胞株。用PCR方法验证该载体的在细胞染色体中的整合，ELISA方法证明捕获载体捕获基因后的细胞的功能改变。结果嘌呤霉素抗性基因捕获载体整合在HepG2．2．15肝癌细胞的染色体上，并能影响细胞HBsAg和HBeAg的分泌。结论新构建的嘌呤霉素抗性基因捕获载体能在具有G418抗性的细胞中捕获有意义的目的基因。