RNA干扰胰岛素生长因子-1受体基因对人肝癌SMMC7721增殖及凋亡蛋白的影响

目的观察RNA干扰胰岛素生长因子-1(IGF-1)受体基因后对人肝癌细胞株SMMC7721增殖和相关凋亡因子表达的影响。方法构建两个靶向IGF-1R基因的RNA干扰真核表达质粒(IGF-1R-siRNA-1和IGF-1R-siRNA-2)分别转染至SMMC7721细胞,并设立正常对照组、空白对照组、IGF-1R-siRNA-1转染组、IGF-1R-siRNA-2转染组。采用聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot检测IGF-1R基因表达变化,检测细胞增殖、侵袭、凋亡、凋亡蛋白、骨形态发生蛋白(BMPs)及相关信号通路蛋白的表达水平。结果RT-PCR结果显示,IGF-1R-siRNA-1和IGF-1R-siRNA-2表达载体转染SMMC-7721细胞后,IGF-1R基因的mRNA水平显著下调,IGF-1R-siRNA-1转染组IGF-1R基因的表达低于正常对照组,IGF-1R-siRNA-2转染组IGF-1R基因表达下调77.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,IGF-1R-siRNA-1转染组和IGF-1R-siRNA-2转染组IGF-1R蛋白在不同水平显著下调,IGF-1R蛋白表达抑制率分别为73.0%和81.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。IGF-1R-siRNA-1转染组和IGF-1R-siRNA-2转染组细胞增殖率明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ImageJ软件分析划痕面积结果显示,与正常对照组和空白对照组相比,IGF-1R-siRNA-1转染组、IGF-1R-siRNA-2转染组修复率下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验发现,与正常对照组和空白对照组相比,IGF-1R-siRNA-1转染组、IGF-1R-siRNA-2转染组为SMMC-7721细胞侵袭能力明显下降,侵袭细胞数量明显减少,差异有统计意义(P<0.05)。流式细胞检测显示,IGF-1R-siRNA-1转染组和IGF-1R-siRNA-2转染组晚期凋亡率明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,IGF-1R-siRNA-1组、IGF-1R-siRNA-2组Bcl-2表达均明显受抑制,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达量明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PI3K、AKT/p-AKT、BMP-2、BMP-7蛋白表达量明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论由IGF-1R基因沉默对肝癌SMMC7721细胞增殖与侵袭有抑制作用,对细胞凋亡有促进作用,能介导BMP2、BMP-7基因不同水平下调,IGF-1/PI3K/AKT信号通路蛋白可能参与其中。

BMP-2对人肝癌SMMC7721细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

目的:探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对肝癌SMMC7721细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达及分泌的影响。方法:分别采用半定量逆转录聚合酶链反应、Western blot及ELISA法检测BMP-2干预SMMC7721细胞后MMP-2、9mRNA、蛋白表达和浓度水平的变化。结果:BMP-2呈剂量和时间依赖性促进人肝癌SMMC7721细胞MMP-2、9mRNA、蛋白表达和分泌。结论:BMP-2可以上调MMP-2、9在肝癌SMMC7721细胞的表达水平,从而促进肝癌细胞的生长和侵袭能力。

甘氨鹅脱氧胆酸钠对肝癌SMMC7721细胞凋亡诱导的影响

目的探讨甘氨鹅脱氧胆酸（glycochenodeoxycholic cacid，OCDCA）对人肝癌细胞SMMC7721增殖以及细胞凋亡的影响。方法采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721，GCDCA分别处理细胞24，48，72h，进行MTT实验，计算肝癌细胞的生长抑制率；采用流式细胞仪检测GCDCA对SMMC7721细胞凋亡的影响。结果不同浓度的GCDCA对肝癌细胞SMMC7721均有一定程度的生长抑制作用，高浓度的GCDCA（300μmol／L）处理组对SMMC7721细胞有较强的毒性损伤。低浓度的GCDCA（200μmol／L）处理组能明显诱导细胞凋亡，凋亡率随处理时问的延长而增加。结论GCDCA对人肝癌细胞有增殖抑制作用并能诱导SMMC7721细胞凋亡。

GCDCA对肝癌SMMC7721细胞诱导分化的影响

目的探讨甘氨鹅脱氧胆酸（glycodeoxycholicacid，GCDCA）对人肝癌细胞SMMC7721诱导分化的影响。方法采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721，GCDCA分别处理细胞48，72，96h，采用放射免疫法检测肝癌sMMC7721细胞的甲胎蛋白（AFP）、清蛋白（ALB）分泌量，同时利用免疫组化分析肝癌SMMC7721细胞AFP表达的影响。结果GCDCA能显著抑制肝癌细胞SMMC7721AFP的分泌，降低其表达，且能大大提高ALB的分泌。其效果GCI）-CA200umol／L处理组优于GCDCA100umol／L处理组，均有时效和量效的关系。结论GCDCA能抑制肝癌SMMC7721细胞AFP的表达和分泌，提高ALB的分泌，具有诱导肝癌细胞SMMC7721细胞良性分化的能力。

大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞增殖及肿瘤干细胞CD133表达的影响

目的探讨大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞增殖及肿瘤干细胞CD133表达的影响。方法将肝癌SMMC7721细胞分成6组:阴性对照组不加药;根据添加大豆黄酮浓度的不同,分成100μg/mL组、200μg/mL组、300μg/mL组、400μg/mL组、500μg/mL组,培养24 h、48 h、72h后MTT法检测细胞的抑制率、测定每组细胞中己糖激酶和碱性磷酸酶活性和CD133表达水平并进行比较。结果大豆黄酮浓度越高,对肝癌细胞的抑制作用越强;随着处理时间的延长,抑制作用有所下降;尤其在400μg/mL浓度组和500μg/mL浓度组,时间效应更明显。与对照组相比,经不同浓度大豆黄酮处理的肝癌细胞已糖激酶活性和碱性磷酸酶活性均显著降低(P<0.01),肿瘤干细胞CD133表达明显下降(P<0.01),并且浓度越高下降幅度越大。结论大豆黄酮能够抑制肝癌SMMC7721细胞的增殖,并降低肿瘤干细胞CD133的表达。

染料木黄酮通过抑制EGFR/ERK通路抗肝癌SMMC7721细胞增殖

目的探讨染料木黄酮对肝癌细胞SMMC7721增殖的抑制作用及其作用机制。方法以染料木黄酮干预肝癌细胞SMMC7721。MTT法及集落形成实验检测细胞增殖;蛋白质免疫印迹检测染料木黄酮对ERK及EGFR活化的影响;免疫共沉淀法检测染料木黄酮对SMMC7721细胞ERK及EGFR间相互作用的影响。结果染料木黄酮能显著抑制肝癌细胞增殖,其抗增殖活性具有浓度依赖性;染料木黄酮还可抑制ERK与EGFR的活化,并抑制ERK及EGFR间的相互作用。结论染料木黄酮可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与其抑制EGFR/ERK通路活化有关。

过表达PRRX1通过p53介导的线粒体凋亡途径诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡

目的:探讨配对相关同源框1蛋白(PRRX1)过表达对肝癌SMMC7721细胞凋亡的影响及其分子机制。方法:分别用慢病毒介导PRRX1过表达载体(pGMLV-PRRX1)、空载质粒(Vector)感染人肝癌SMMC7721细胞,用qPCR和WB实验检测慢病毒感染后细胞中PRRX1 mRNA和蛋白的表达变化,用CCK-8法、Annexin-V FITC/PI染色流式细胞术分别检测PRRX1过表达对SMMC7721细胞增殖、凋亡的影响,用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10染色法)检测细胞线粒体膜电位变化,用caspase活性检测试剂盒(分光光度法)测定细胞中caspase-8和caspase-9酶活性,用WB实验检测细胞中p53、Bcl-2、Bax、Fas、Cleaved-caspase-3以及线粒体和细胞质中细胞色素C(Cty C)蛋白的表达。结果:成功构建PRRX1过表达的SMMC7721细胞株,感染细胞中PRRX1 mRNA和蛋白的表达水平显著升高(均P<0.01)。与对照组和空载组比较,PRRX1过表达组SMMC7721细胞的增殖能力显著下降、细胞凋亡率显著增高、Cleaved-caspase-3剪切水平显著升高、线粒体膜电位显著下降、线粒体中Cty C蛋白表达下调、胞质中Cty C蛋白表达上调以及caspase-9酶活性升高(P<0.05或P<0.01),同时p53和Bax蛋白表达增加而Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05),但Fas蛋白表达及caspase-8酶活性无显著变化(均P>0.05)。结论:PRRX1过表达可诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡,其机制可能与p53介导的线粒体凋亡途径被激活有关。

紫杉醇对肝癌SMMC7721细胞凋亡的诱导作用及对相关基因表达的影响

目的:探讨紫杉醇对肝癌SMMC7721细胞凋亡的诱导作用及对bcl-2和bax基因的影响。方法:用浓度为5μg·ml^(-1)的紫杉醇处理肝癌SMMC7721细胞后,利用DNA琼脂糖凝胶电泳,TUNEL法检测其细胞凋亡;通过原位杂交法、免疫组化法,测定紫杉醇诱导肝癌SMMC7721细胞产生凋亡时,凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因bax的mRNA和蛋白表达。结果:紫杉醇作用一定时间后,SMMC7721细胞产生凋亡、bcl-2显著下降、bax表达显著增高。结论:紫杉醇通过调节细胞凋亡抑制基因bcl-2和细胞凋亡促进基因bax的作用,从而诱导肝癌SMMC7721细胞产生凋亡。

VEGFsiRNA对肝癌SMMC7721细胞株VEGF表达和增殖的抑制作用

目的:探讨VEGFsiRNA对肝癌SMMC7721细胞株VEGF表达和增殖的抑制作用。方法:采用siRNA设计法则并用计算机辅助设计9条VEGFsiRNA序列,长度为19个核苷酸;体外构建9条VEGFsiRNA序列,通过脂质体介导转入肝癌SMMC7721细胞株,培养72h,采用CCK8试验分析VEGFsiRNA(25nmol/L)对细胞增殖的抑制效果,用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白水平,流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果:VEGFsiRNA1-VEGFsiRNA9序列对肝癌细胞的增殖有明显抑制作用,与脂质体对照组和空白对照组相比均有显著差异(P<0·05);其中,VEGFsiR-NA2、VEGFsiRNA4、VEGFsiRNA6、VEGFsiRNA7、VEGFsiRNA8、VEGFsiRNA9对细胞增殖的抑制效果均强于反义寡核苷酸组。VEGFsiRNA1-VEGFsiRNA9序列均能下调肝癌细胞VEGF蛋白的表达水平,以VEGFsiRNA7和VEGFsiR-NA2的效果最强,抑制率分别为52·65%和50·43%。VEGFsiRNA将肝癌细胞阻滞在S期,但未引起细胞凋亡现象。结论:成功地设计和合成VEGFsiRNA。后者能有效地抑制肝癌细胞的增殖,降低VEGF蛋白的表达量。

雷公藤内酯醇抗人肝癌SMMC7721细胞活性研究

目的 :评价雷公藤内酯醇抗人肝癌SMMC 772 1细胞的作用。方法 :采用体外细胞培养和SD大鼠体内肿瘤接种两种衡量方法 ,体外细胞培养检测指标包括细胞形态观察 ,台盼蓝染色 ,DAPI染色 ,DNAladder ;SD大鼠体内接种肿瘤指标检测用游标卡尺测量肿瘤体积大小。结果 :与对照组相比 ,体外培养肿瘤细胞在用药后活细胞大幅减少 ,体内接种肿瘤细胞在用药后 ,肿瘤块体积较小且增长缓慢 ,而对照组肿瘤体积却大幅增长。结论 :雷公藤内酯醇对体外和体内培养的人肝癌SMMC 772

塔斯品碱衍生物对人肝癌SMMC7721细胞生长的抑制作用研究

目的:分析探讨塔斯品碱衍生物对人肝癌SMMC7721细胞的生长抑制作用,研究其作用机制。方法:采用MTT法测定5种塔斯品碱衍生物对肝癌SMMC7721细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测Tas-D1对肝癌SMMC7721细胞周期的影响,ELISA法测定Tas-D1对肝癌SMMC7721细胞EGF和VEGF蛋白的影响,PCR法测定Tas-D1对EGF和VEGF的mRNA水平的影响。结果:塔斯品碱衍生物Tas-D1对SMMC7721细胞生长具有明显的抑制作用,使细胞阻滞在S期,呈现出良好的剂量依赖性。ELISA法和RT-PCR法结果表明Tas-D1对SMMC7721细胞的EGF和VEGF蛋白质的表达和mRNA的表达有一定的抑制作用(P<0.05)。结论:塔斯品碱衍生物Tas-D1能抑制人肝癌SMMC7721细胞的生长,转换细胞周期,初步作用机制主要为Tas-D1抑制SMMC7721细胞EGF和VEGF的表达。

siRNA沉默MAPK p42对肝癌SMMC7721增殖和凋亡的影响

目的应用siRNA沉默SMMC7721细胞MAPK p42,并观察其对增殖和凋亡的影响。方法应用SilencerTMsiRNA构建试剂盒合成2条MAPK p42siRNAs和一条随机对照siRNAs,用脂质体LipofectaminTM 2000将其转染入肝癌SMMC-7721细胞株。应用Western blot检测MAPK p42表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期及其细胞凋亡。结果与对照相比,MAPK p42siRNA明显抑制MAPK p42表达。MAPK p42siRNA抑制了SMMC-7721细胞的生长,将细胞阻滞于细胞周期S期,进而诱导了细胞凋亡的发生。结论 MAPK p42靶向siRNA可能为肝癌基因治疗的重要手段。

紫杉醇对人肝癌SMMC7721细胞NDRG1表达及增值的影响

旨在探索紫杉醇对人肝癌SMMC7721细胞NDRG1表达的影响,及紫杉醇对肝癌SMMC7721细胞系增殖的抑制作用。分别提取紫杉醇处理前后SMMC7721细胞的RNA,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),判断紫杉醇处理前后肝癌细胞中NDRG1表达的情况;采用蛋白印迹技术(Western blotting)分析紫杉醇处理前后肝癌细胞中NDRG1蛋白表达的情况;应用不同浓度紫杉醇处理肝癌细胞,以MTT法检测处理前后肝癌细胞的抑制率,流式细胞术(FCM)观察细胞周期变化的况。结果表明紫杉醇处理后的肝癌SMMC7721细胞中NDRG1表达下降,紫杉醇浓度越高,NDRG1表达水平越低,具有浓度依赖性。以MTT法观察紫杉醇对肝癌细胞的抑制作用,试验结果表明不同浓度的紫杉醇处理肝癌SMMC7721细胞后,癌细胞被明显抑制;以流式细胞术观察紫杉醇作用后肝癌SMMC7721细胞周期的变化,结果显示G2-M期细胞比例升高的程度随浓度增高而升高,细胞越来越多地被阻滞在G2-M期,不能继续分裂增殖。分化相关基因NDRG1的表达可能是肝癌的发病机制之一,紫杉醇可抑制肝癌SMMC 7721细胞中NDRG1的表达;同时紫杉醇能使肝癌SMMC7721细胞的生长阻滞在G2-M期,从而显著抑制SMMC7721细胞的增殖,并且具有剂量、时间依赖效应。

白英提取物诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡过程中bax和bcl-2基因表达

目的探讨中药白英提取物对肝癌SMMC7721细胞中细胞凋亡相关基因的影响。方法用不同浓度的白英提取物处理肝癌SMMC7721细胞,利用TUNEL法检测其细胞凋亡;通过原位杂交法、免疫组化法,研究白英提取物诱导肝癌SMMC7721细胞产生凋亡时,凋亡促进基因bax和凋亡抑制基因bcl-2的mRNA和蛋白表达。结果 IPP图像分析表明,bax表达显著增高,bcl-2显著下降。结论白英提取物通过调节细胞凋亡促进基因和抑制基因,从而诱导肝癌SMMC7721细胞产生凋亡。

腺病毒介导PSMA3基因过表达对肝癌SMMC7721细胞增殖、周期、凋亡及其荷瘤生长的影响

目的:构建蛋白酶体亚基α3(proteasome subunit alpha type 3,PSMA3)基因腺病毒重组载体,并观测腺病毒介导PSMA3基因过表达对肝癌SMMC7721细胞增殖、周期、凋亡及其荷瘤生长的影响。方法:RT-PCR法扩增PSMA3基因全长CDs序列后,克隆入pTG19-T载体,再亚克隆入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭载体中,构建重组pAdTrack/PSMA3腺病毒载体,随后与骨架质粒pAdEasy-1同源重组形成p Ad/PSMA3重组腺病毒,经包装及滴度测定,获高感染力的pAd/PSMA3病毒。用pAd/PSMA3病毒感染人肝癌SMMC7721细胞,荧光显微镜观测被感染的SMMC7721细胞的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的变化情况。Cell counting kit-8(CCK-8)法检测pAd/PSMA3病毒对SMMC7721细胞增殖的影响。Real-time PCR和Western blot分别检测被感染的SMMC7721细胞的PSMA3基因、增殖细胞核抗原基因(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Caspase-3促凋亡基因及其编码蛋白的表达情况。流式细胞仪(FCM)检测被感染的SMMC7721的周期、凋亡变化。将经pAd/PSMA3病毒感染的SMMC7721细胞移植裸鼠皮下以生成荷瘤,逐日观察荷瘤的生长情况。所有实验以空病毒感染及未感染的细胞做对照。结果:克隆到768 bp的PSMA3基因,并构建了其具高感染力的pAd/PSMA3重组病毒。CCK-8法结果表明,过表达PSMA3基因的SMMC7721细胞,其增殖明显减慢(P<0.05)。Real-time PCR、Western blot检测显示,pAd/PSMA3重组病毒可介导SMMC7721细胞过表达PSMA3基因,上调其Caspase-3基因及其编码蛋白的表达,并下调其PCNA基因及其蛋白的表达(P<0.05)。FCM检测证实,过表达PSMA3基因的细胞可被阻滞于G1期(细胞周期),并可促使其凋亡,其凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。动物实验证实,p Ad/PSMA3病毒可明显抑制裸鼠荷瘤的生长(P<0.01)。结论:重组病毒pAd/PSMA3可将SMMC7721细胞阻滞于G1期(细胞周期),抑制其增殖,促使其凋亡,并可抑制其裸鼠荷瘤的生长,这些可能和下调其增殖相关PCNA蛋白,上调其凋亡相关caspase-3蛋白的表达密切相关。

当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射增敏作用

目的:探讨当归、红芪提取物对直线加速器(X射线)辐射后人肝癌细胞SMMC-7721的增敏作用。方法:96孔板培养人肝癌细胞SMMC-7721,设9个组,对照组(N)即正常对照组,纯辐射组(F)给以源皮距100cm 4Gy的X射线,另设3个纯药物组(DH),设高(H:8mg/mL)、中(M:6mg/mL)、低(L:4mg/mL)三个药物浓度梯度,3个辐射加药组(F+DH)和1个空白组(只有培养液无细胞)。每组设6个复孔。采用MTT法计算当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射前后增殖活性的影响。流式细胞术检测不同组细胞的周期情况,透射电镜及倒置显微镜分别观察各组细胞结构变化,用蛋白印记法检测不同组细胞中p21蛋白表达情况。结果:MTT法证明当归、红芪提取物具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖作用,对于辐射后的肝癌细胞具有很好的周期抑制作用。不同剂量当归、红芪提取物作用于细胞24h后,抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖呈剂量依赖关系,药物浓度越高,抑制作用越显著。SMMC-7721细胞经辐射后,细胞的抑制率为37.58%,辐射后加不同浓度当归、红芪提取物(4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL),联合作用对细胞的抑制率升高,分别为45.27%、51.86%、59.34%,且呈药物浓度依赖关系,差异具有统计学意义(P<0.01)。辐射组肝癌细胞较正常组细胞G0/G1期细胞数明显增多,由44.70%升至71.60%(P<0.01),S期细胞减少,高浓度药物也可以使G0/G1期细胞比例有所升高(P<0.01)。辐射加药组细胞G0/G1期阻滞最为明显,并呈药物浓度梯度关系。高浓度药物组、辐射组细胞p21蛋白表达较正常组升高,辐射组+高浓度药物组细胞p21蛋白表达较辐射组明显升高。结论:当归、红芪提取物对于人肝癌SMMC-7721细胞具有很好的抑制作用,对经X线辐射后的细胞具有很好的增敏作用。

miR-3682-3p通过调控PI3K/AKT信号通路影响SMMC-7721人肝癌细胞的增殖、侵袭和凋亡

目的分析miR-3682-3p与PI3K/AKT信号通路在肝细胞癌发展中的关系,以期为肝细胞癌的治疗提供新的思路。方法通过qRT-PCR分析MIHA人正常肝细胞和SMMC-7721人肝癌细胞中miR-3682-3p与PI3K/AKT的表达水平。通过转染不同质粒将SMMC-7721人肝癌细胞分为miR-3682-3p mimic组、miR-3682-3p mimic NC组、miR-3682-3p inhibitor组和miR-3682-3p inhibitor NC组,采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-3682-3p与PI3K的相互作用关系。采用蛋白免疫印迹、qRT-PCR、流式细胞术、细胞划痕和Transwell实验分析不同实验组细胞的增殖、侵袭和凋亡情况。结果miR-3682-3p能够靶向调控PI3K/AKT信号通路,miR-3682-3p表达能够激活PI3K/AKT信号通路,肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强,凋亡减少。而抑制miR-3682-3p表达后,PI3K/AKT通路受到抑制,肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力减弱,凋亡增加。结论PI3K是miR-3682-3p的直接靶点,miR-3682-3p通过激活PI3K/AKT通路促进SMMC-7721人肝癌细胞的体外转移活性。

白藜芦醇通过下调PRMT5表达抑制肝胆管癌SMMC-7721细胞的增殖、侵袭和细胞周期

目的:探究白藜芦醇(Res)通过调控PRMT5表达对肝胆管癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭、细胞周期的影响及其机制。方法:常规培养正常肝细胞LO2和SMMC-7721细胞,用0、20、40、80μmol/L的Res进行处理,用qPCR法、MTT法、Transwell实验、流式细胞术和WB法分别检测Res处理后PRMT5 mRNA在LO2和SMMC-7721细胞中的表达,Res对SMMC-7721细胞增殖能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡,以及PRMT5、cyclin D1和cyclin E1蛋白表达的影响。结果:PRMT5在SMMC-7721细胞中呈高表达(P<0.01);20、40、80μmol/L Res均能明显抑制PRMT5 mRNA和蛋白在SMMC-7721细胞中的表达(均P<0.01),抑制SMMC-7721细胞的增殖能力(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05),阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期并促进其凋亡(P<0.01),明显抑制SMMC-7721细胞中周期蛋白cyclin D1、cyclin E1蛋白的表达(P<0.01)。结论:PRMT5在SMMC7721细胞中呈高表达,Res可有效抑制SMMC-7721细胞的增殖和侵袭能力并诱导其凋亡,其机制可能与抑制PRMT5表达相关。

大黄素对人肝癌SMMC7721细胞增殖的抑制作用

目的:研究大黄素对人肝癌SMMC7721细胞增殖的抑制作用。方法:以0(阴性对照)、25、37.5、50、62.5、75、87.5、100μmol/L大黄素溶液和100μmol/L 5-氟尿嘧啶(5-FU)培养SMMC7721细胞24、48、72 h,检测细胞光密度,计算增殖抑制率。以0(阴性对照)、25、50、75μmol/L大黄素溶液和100μmol/L 5-FU培养SMMC7721细胞48 h,检测细胞凋亡率、周期分布和细胞Bax、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)基因表达。结果:与阴性对照比较,25、37.5、50、62.5、75、87.5、100μmol/L大黄素溶液和100μmol/L 5-FU作用后细胞增殖抑制率升高,且与大黄素的浓度和作用时间呈正相关。与阴性对照比较,25、50、75μmol/L大黄素和100μmol/L 5-FU作用后细胞凋亡率升高、Bax基因表达增强、Bcl-2基因表达减弱,其中50、75μmol/L大黄素溶液和100μmol/L 5-FU能明显滞留细胞于G0/G1期(P<0.05或P<0.01)。结论:大黄素能抑制SMMC7721细胞增殖,促进其凋亡,阻止其生长。