四氯化碳诱导兔肝硬化模型的动态研究

目的:探索简便、经济的兔肝硬化造模方法, 并观察造模过程中的肝脏功能和组织病理学变化．方法:兔24R,随机分为2组,实验组20只给予乙醇灌服,并SC CCl4,正常对照组4只给予正常饮水并以等量橄榄油代替CCl4 sc．每2 wk采集血样和小块肝组织,进行生化指标检测和肝脏 Masson三色胶原染色病理学观察．结果:随着四氯化碳处理时间的延长,肝纤维化程度逐渐加重．与对照组相比,实验组8 wk 后ALT值和AST值(ALT,1867．1±200．1 nkat／L vs 883．5±116．7 nkat／L,P=0．01;AST,983．5± 116．7 nkat／L vs 650．1±133．4 nkat／L,P=0．03) 均显著升高,而GGT值(100．1±33．3 nkat／L vs 366．7±50．1 nkat／L,P=0．01)显著降低;实验 8 wk末观察到肝硬化的典型病理表现,可观察到假小叶的形成．结论:联合应用CCl4和乙醇可成功诱导兔肝硬化,该方法动物死亡率低、造模快、成功率高．

CCl_4诱导大鼠肝硬化模型方法的探讨

目的:探索CCl4诱导大鼠肝硬化模型的方法。方法:取Wistar大鼠40只,随机分为对照组(10只)和模型组(30只)。模型组给予0.2 ml/100 g CCl4原液腹腔注射1次,其后给予40%CCl4豆油溶液0.3 ml/100 g腹腔注射,每周注射2次。对照组给予相同浓度的豆油溶液腹腔注射。连续注射7周后腹主动脉采血,检测SOD及MDA的含量。摘取肝脏称重,计算脏器系数,切取部分肝脏固定于10%甲醛溶液急性组织病理学观察。结果:模型组体重无明显增长,肝脏表面有结节,且脏器系数明显高于对照组(P<0.05),组织切片HE染色后可见假小叶,血中MDA含量明显升高,而SOD活性明显降低(P<0.05)。模型组动物死亡8只,造模成功率为73.33%。结论:利用CCl4诱导大鼠肝硬化的方法速度速,模型成功率高。

九味肝泰对小鼠感染乙型肝炎病毒后肝硬化模型的干预研究

目的观察九味肝泰对小鼠感染乙型肝炎病毒(hepatitis B,HBV)后肝硬化动物模型的影响及其干预机制。方法将48只BABL/c J小鼠随机均分为模型组和九味肝泰组,采用高压水注射方法将HBV质粒(50μL)通过尾静脉注入小鼠体内,然后腹腔注射50%CCI4(5 m L/kg)制备HBV肝硬化动物模型,另设12只为空白对照组;九味肝泰组用10%九味肝泰0.5 m L/(10 g.d)灌胃干预性治疗21 d,对照组和模型组灌等体积生理盐水。检测成模后和治疗21 d血清转化生长因子-βl(TGF-βl)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)和肝组织中丙二醛(MDA)水平,并比较血清肝纤维化指标和肝功能。结果干预性治疗21 d后,九味肝泰组血清肝纤维化指标中血清IV型胶原(c IV)、Ⅲ型胶原(PC-III)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)均明显降低,且TGF-βl和HBV DNA定量显著降低,肝功中谷草转氨酶(AST)、胆红素(TBIL)、谷氨酰转移酶(GGT)、谷丙转氨酶(ALT)和总胆汁酸(TBA)接近正常水平,肝组织中MDA明显降低,且静脉血GSH和SOD提高,与模型组和本组成模后比较,P<0.05。结论九味肝泰在抑制HBV DNA复制、减轻肝组织纤维化和促进肝功能恢复方面有明确的干预作用。

复合因素诱导大鼠肝硬化模型的建立

目的研究复合因素引起的肝硬化大鼠动物模型。方法以四氯化碳(CCl4)花生油加髙脂低蛋白饮食为实验一模型组,以CCl4花生油、髙脂低蛋白饮食加饮用30%的酒精为实验二模型组;造模6周后,观察大鼠的体重、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平和肝脏组织病理结构的改变。结果实验一模型组大鼠饮食量降低,体重缓慢增加,成模54只,造模成功率为90.0%;实验二组成模10只,造模成功率为16.7%。实验一模型组和实验二模型组血清ALT和AST水平显著高于对照组。肝脏大体形态和肝组织的结构发生了肝脏纤维化病变。结论 CCl4花生油加髙脂低蛋白饮食即可诱导大鼠形成典型的肝硬化病变,造模成功率高,病变稳定,操作简单。

兔四氯化碳实验性肝硬化模型的建立

目的应用四氯化碳造成兔肝硬化模型。方法雄性新西兰大白兔给予皮下注射四氯化碳,每周2次,12周后检测肝脏病理改变及肝组织羟脯氨酸含量。结果四氯化碳注射12周后,兔肝组织出现典型的假小叶,肝组织羟脯氨酸含量较正常组升高3.5倍。结论此方法成功地建立了一种兔肝硬化动物模型。

六种肝纤维化-肝硬化模型的复制及应用

研究肝纤维化-肝硬化的病理生理及其防治必须建立合适的模型,这里介绍6种制作方法供选用。1.牛血清白蛋白 (BSA)复制肝纤维化模型Wistar大白鼠,雌性,体重120g左右。将BSA用生理盐水稀释成18mg/ml BSA溶液,以等量弗氏不完全佐剂乳化。以9mg/ml BSA弗氏不完全佐剂混悬液0.5ml/次/只,小剂量多部位皮下注射以致敏动物,共5次。第1、2次间隔2周,其余各次间隔1周。末次致敏注射后1周,球后静脉丛采血。

活血消癥益气方对肝硬化模型大鼠肝功能与血管内皮功能及炎性因子的影响

目的:观察活血消癥益气方对肝硬化模型大鼠肝功能与血管内皮功能及炎性因子的影响,探讨活血消癥益气方治疗肝硬化的作用机制。方法:采用四氯化碳复合法诱导构建肝硬化大鼠模型,建立模型后,药物干预治疗8周。干预结束后取大鼠肝脏组织采用HE及Masson染色观察肝组织纤维化情况,取静脉血采用试剂盒检测大鼠血清AST、ALT、TP、ALB、TBil、NO、ET-1、VEGF、TNF-α、IL-1β、IL-6水平。结果:模型组大鼠体质量升高到第4周开始逐渐下降,空白组、吡非尼酮组、鳖甲煎丸组、活血消癥益气方组体质量持续上升;活血消癥益气方能显著改善肝组织的纤维化,显著改善血清AST、ALT、TP、ALB、TBil等肝功能指标,下调NO、ET-1、VEGF、TNF-α、IL-1β、IL-6等血管内皮及炎性因子指标。结论:活血消癥益气方对肝硬化大鼠肝功能损伤、肝纤维化和炎性反应皆具有一定的逆转作用,机制可能与调控血清NO、ET-1、VEGF、TNF-α、IL-1β、IL-6水平有关。

DMN诱发大鼠肝硬化模型MMP-2活性的动态变化

目的:探讨二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine,DMN)诱发大鼠肝硬化过程中Ⅳ型胶原、Ⅳ型胶原酶(MMP-2)活性及基质金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)表达的动态变化.方法:采用DMN诱发大鼠肝硬化模型,设2d,1,2,3,4,5,6,8,12,24wk共10个观察点,分别用生化方法测定其肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量、血清丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)活性和白蛋白(albumin,ALB)含量,Envision两步法(免疫组化)测定肝组织Ⅳ型胶原和TIMP-2表达,酶图法测定肝组织MMP-2活性.结果:模型大鼠肝组织Hyp、Ⅳ型胶原含量,血清ALT活性显著高于正常组,ALB含量显著低于正常组.2d时MMP-2活性显著高于正常组,然后在正常范围内波动.正常组和8wk以前各组模型大鼠TIMP-2表达微弱,12wk表达明确,24wk表达增强.结论:DMN诱发Wistar大鼠肝硬化模型形成前后MMP-2功能主要通过蛋白分泌量和活化量调节而实现,此期肝窦基底膜Ⅳ型胶原含量主要通过MMP-2活性调节,和蛋白分泌及TIMP-2表达关系不大.在肝硬化恢复期TIMP-2调节的重要性逐渐上升,故TIMP-2表达量是肝硬化时肝窦毛细血管化能否恢复的关键因素之一.

骨髓间充质干细胞对小鼠肝硬化模型的作用研究

目的探索小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的培养和其肝硬化模型的制备,以及两者之间的相互作用。方法首先,提取小鼠骨髓,移至培养瓶中,根据全骨髓贴壁法的原理培养干细胞;然后,采用CCl4为主的方法对小鼠进行肝硬化模型的制备;最后,把培养成功的骨髓干细胞通过肝动脉和尾静脉途径移植治疗造模成功的肝硬化小鼠,观察疗效。结果根据多种单克隆抗体的表达,使用流式细胞仪进行鉴定,成功培养小鼠骨髓间充质干细胞;对造模小鼠肝脏组织进行病理切片,病理报告图示典型的肝硬化,证明造模成功;通过肝动脉和尾静脉途径移植治疗肝硬化模型小鼠,最后报告干细胞治疗的病理结果,肝硬化程度减轻,说明骨髓间充质干细胞具有一定的疗效。结论自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化是有效的,但仍需要基础研究和大样本的临床数据。

猪胆汁性肝硬化模型的造模及评价与分析

目的探讨手术结扎总胆管制备胆汁性肝硬化模型的成功率,寻求评估肝储备功能、肝硬化程度的方法。方法选择普通猪10头,剖腹、游离结扎胆总管,定期取材采样进行相关检测、测量门静脉压。结果4头猪分别于第3、45、周死亡,肝硬化模型死亡率为40%,肝硬化形成率100%,用药早期,ALT、AST呈逐渐上升趋势,后期ALT、AST趋于平稳,并有下降的趋势,总胆红素持续上升;白蛋白持续下降。结论肝硬化模型成功率较高,造模时间短,但死亡率较高,病理活检仍是目前确诊肝纤维化的金标准,ALT、AST变化对于评价肝硬化的发展无意义;白蛋白、总胆红素水平在肝硬化形成不同阶段具有统计学差异,对于评价肝硬化进程具有一定的价值,但灵敏性较低,积极寻求对肝硬化进展程度评估价值较高指标是今后努力的目标。

肝硬化模型犬食管静脉丛栓塞方法对肝功能及门静脉的影响

目的探讨栓塞食管静脉丛治疗肝硬化门脉高压症的最佳方法。方法将18只犬肝硬化门脉高压模型随机分为钢圈组、无水乙醇组和鱼肝油酸钠组(各6只)。均行食管静脉丛栓塞术(PTVE),栓塞物分别为钢圈、无水乙醇2 ml及鱼肝油酸钠2 ml。分别于术前及术后第1周、第2周检测肝功能指标ALT及TBIL变化;术后第2周光镜下观察门静脉损伤情况。结果 ALT值术后1周各组均明显高于术前,术后2周钢圈组恢复至术前水平;无水乙醇组和鱼肝油酸钠组术后第2周均明显高于钢圈组(P均<0.01);TBIL值各组之间以及术前与术后比较均无显著差异。门静脉损伤程度鱼肝油酸钠组略轻于无水乙醇组,但无统计学意义;无水乙醇组及鱼肝油酸钠组的静脉损伤组损伤程度均明显重于钢圈组(P均<0.01)。结论 PTVE是治疗门脉高压所致胃底食管静脉曲张破裂大出血的有效方法;钢圈栓塞对肝功及门静脉的影响较小;应用液态栓塞剂时需注意防治门静脉损伤。

强肝胶囊对大鼠肝硬化模型的影响

目的:探讨强肝胶囊在治疗大鼠肝硬化模型时的疗效。方法:80只雄性Wistar大鼠,正常组(D组)20只,模型组60只造模后随机分为A、B、C 3组。A组大鼠给予强肝胶囊0.53 g/kg·d^(-1),B组大鼠给予鳖甲软肝片0.8 g/kg·d^(-1),C组大鼠阴性对照组,给予等体积的生理盐水,每天灌胃1次。在治疗后4周和8周分别处死大鼠10只,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA),HE染色进行组织学观察,Knodell评分,天狼星红染色观察肝组织胶原情况,并检测肝组织羟脯氨酸含量。结果:治疗4周,与C组相比,A组和B组大鼠ALT下降,组织学改变好转,A组织羟脯氨酸含量下降,A组改变较B组明显(P<0.05),HA、LN较阴性对照组相比也下降,但无统计学差异(P>0.05)。治疗8周,A组和B组大鼠ALT、HA、LN继续下降,组织学改变明显好转,A组改变较B组明显(P<0.05)。结论:强肝胶囊治疗大鼠肝硬化模型后,能够改善肝功能,降低肝纤维化指标,肝脏组织学改变也明显好转。

骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植于大鼠肝硬化模型的动物实验研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞应用于肝硬化模型的的实验疗效,为临床试验提供数据。方法:制作大鼠肝硬化模型,将肝硬化大鼠随机分为两组,实验组和对照组,每组25只。将骨髓间充质干细胞通过门静脉注射入实验组大鼠肝脏,术后两组大鼠仍然以0.5mL/100g的维持剂量腹腔注射40%CCl4植物油溶液,3周后处死所有实验动物,取其静脉血检测ALT、TBIL、ALB、AFP,并取大鼠肝脏做组织切片观察。结果:实验大鼠肝脏可观察到诱导分化的肝细胞。实验组大鼠死亡3只,对照组死亡2只。对照组与实验组肝功能指标ALT、ALB、TBIL、AFP有显著差异,P<0.05,具有统计学意义,AST差异无统计学意义,P>0.05。结论:BMSCs注入肝硬化大鼠模型中能有效改善肝脏的生理功能,对临床试验有很好的指导作用。

肝硬化门静脉高压动物模型的实验对比研究

目的对四氯化碳(CCl_(4))化学损伤性以及胆管结扎(BDL)机械梗阻性大鼠门静脉高压模型进行比较,对两种动物模型在门静脉高压形成过程中的特点进行探讨。方法CCl_(4)模型分为模型组和对照组,BDL模型分为模型组和假手术组。分别于造模后4周、8周、12周测量门静脉压力、取肝脾组织标本。从大鼠一般情况、门静脉压力数值、大体标本变化、病理形态学、体质量、肝脏湿重、脾脏湿重这几方面对两种动物模型进行比较分析。正态分布的资料以均数±标准差表示,两组比较采用t检验。结果CCl_(4)组肝脏大体变化以肝叶变形、粘连为主,病理表现为纤维间隔分割肝实质,假小叶形成。而BDL组肝叶形态尚存,肝脏呈深褐色,病理表现为大量胆管增生。就门脉高压形成过程而言,CCl_(4)组门静脉压力呈逐渐升高趋势,与对照组相比,造模8周、12周有统计学差异(P<0.05)。BDL组门静脉压力呈现短期迅速升高趋势,造模4周、8周及12周较假手术组均明显升高且有统计学差异(P<0.05)。在体质量、肝脏湿重、脾脏湿重这几个指标中,脾脏湿重与门脉压力升高趋势一致。在CCl_(4)组,脾脏质量亦是逐渐增加的。而在BDL组,造模4周脾脏质量较假手术组明显增加,造模8周、12周时较假手术组有统计学差异(P<0.05)。结论两种动物模型门静脉高压形成过程及压力变化趋势不同,本文为深入认识不同原因肝硬化门静脉高压提供了实验依据。

家犬肝硬化动物模型肝细胞移植观察护理

肝细胞移植为临床治疗肝硬化患者开辟了一条新的途径。经动物实验证明,正常家犬肝硬化动物模型建立后,行肝细胞移植已取得成功,现用于临床治疗肝硬化患者也取得了良好效果。家犬行肝细胞移植实验需在外科无菌条件下进行,并和犬肝硬化动物模型的复制过程一样,都要进行细致观察和护理,我们在这方面的工作过程中取得了护理观察方面的经验,在此做一介绍。

白术对肝硬化大鼠胃动力和氮能神经分布的影响及意义

目的:观察中药白术对肝硬化大鼠胃动力及胃肌间神经丛氮能神经的影响.方法:Wister大鼠24只随机分为肝硬化模型组,白术治疗组和对照组,采用葡聚糖蓝-2000为胃肠内标记物观察大鼠胃动力变化,NADPH-d组织化学染色及肌间神经丛全层铺片技术,观察肝硬化大鼠胃底、胃体及胃窦肌间神经丛氮能神经的变化,并对其分布进行定量分析.结果:与对照组比较,肝硬化组大鼠胃动力明显减弱(160.23±45.13vs100±17.78,P<0.01),胃体、胃窦肌间神经丛氮能阳性神经排列紊乱,染色增强,密度增加,明显高于对照组(7.35±0.95vs5.52±0.92,P<0.01或6.26±0.79vs5.28±0.78,P<0.05),胃底肌间神经丛氮能阳性神经元数量及分布无明显变化;中药治疗组肝硬化大鼠胃动力明显改善(100±17.78vs96.12±16.25),胃窦肌间神经丛氮能阳性神经明显恢复(5.39±0.84vs5.28±0.78),与对照组比较均无明显变化(P>0.05).结论:中药白术对肝硬化大鼠胃动力减退有治疗作用,其机制与改善胃窦肌间神经丛氮能神经分布有关.