亲和色谱-氢化物发生原子荧光分光光度法纯化检测人血浆中的硒蛋白-P

开发了两步亲和色谱法:肝素-琼脂糖凝胶、Ni-琼脂糖凝胶色谱纯化人血浆中硒蛋白-P的方法,并采用氢化物发生-原子荧光分光光度法(HG-AFS)检测,成功搭建了硒蛋白-P的纯化检测平台。确定了亲和色谱纯化的最佳梯度洗脱条件,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)定性检测,得到了一定纯度的硒蛋白-P,其回收率达43.2%。HG-AFS方法的线性相关系数为0.999 1,检出限为0.09μg/L,日内精密度(RSD)为0.12%,日间精密度(RSD)为0.27%,加标回收率为95%～104%。该亲和色谱纯化方法简单易控、回收率高,HG-AFS检测灵敏度高,结果准确可靠。

高效液相色谱法测定婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量.

本研究建立了一种用高效液相色谱测定婴儿配方奶粉中乳铁蛋白的方法。色谱条件：色谱柱为Hi Trap Heparin肝素琼脂糖亲和柱（0.7×2.5cm,1m L）,流动相A为50mmol/L的Na2HPO4溶液（p H7.00）,流动相B为50mmol/L的Na2HPO4＋1.0mol/L的Na Cl溶液（p H7.00）,检测波长为230nm。结果表明：乳铁蛋白的检出限为3.0mg/100g,回收率在86%~99%之间,相对标准偏差（RSD）为3.4%。用此方法检测婴儿配方奶粉中乳铁蛋白,操作简单,结果准确可靠,精密度高,重现性好。

人抗凝血酶Ⅲ及其抗血清的研制

本文介绍一种用高分子硫酸葡聚糖处理血浆,经肝素—琼脂糖4B 亲合层析(浴法洗涤,柱法洗脱)、透析、浓缩的工艺,从血浆中提取高纯度浓缩的抗凝血酶Ⅲ(AT—Ⅲ)。用此方法提纯的 AT—Ⅲ经用聚丙烯酰胺电冰、醋酸纤维膜电泳及 FPLC 系统分析,显示所提取的 AT—Ⅲ为单一成份,电泳迁移率同α~2球蛋白。双向琼脂免疫扩散与法国 Stagc 抗 AT—Ⅲ血清呈特异性沉淀反应。动物试验毒性反应为阴性。使用纯化的 AT—Ⅲ免疫家兔制得效价高、特异性好的抗 AT—Ⅲ血清。

人抗凝血酶Ⅲ的分离提纯

本文介绍一种从血浆中提取高纯度浓缩的抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）的工艺：通过低温乙醇处理血浆，得到的沉淀经肝素－琼脂糖两次亲和吸附，并透析，浓缩，用此方法提纯的ATⅢ经丙烯酰胺凝胶电泳，等电聚焦电泳分析，显示所提取的ATⅢ为单一成分，等电点为5．2，从血浆开始计算的ATⅢ回收率为8．5％。