壳聚糖类肝素衍生物抗凝血性能研究

对不同反应条件下制备的不同壳聚糖类肝素衍生物的全血凝血时间、活化部分凝血活酶时间进行考察,比较了其抗凝血性能。结果发现,当衍生物的分子量与肝素相近时,其抗凝血活性最强;脱乙酰度对抗凝作用有较大影响。

肝素衍生物结构与抑制高糖引起人系膜细胞增殖的关系研究

目的考察肝素结构与抑制高糖引起人肾小球系膜细胞增殖活性之间的关系。方法采用化学修饰的方法制备2,3-O-脱硫酸肝素、6-O-脱硫酸肝素、N-脱硫酸肝素、高碘酸氧化/硼氢化钠还原肝素、羧基还原肝素和多硫酸化肝素,通过比浊法测得硫酸基团含量,核磁图谱分析肝素修饰物;MTT法比较这些肝素修饰物对高糖引起人肾小球系膜细胞增殖的抑制活性。结果多硫酸化肝素抑制活性显著增加,羧基还原肝素、高碘酸氧化/硼氢化钠还原肝素抑制活性相对肝素没有明显改变,而2,3-O-脱硫酸肝素、6-O-脱硫酸肝素和N-脱硫酸化肝素抑制活性显著降低。结论抑制活性大小的顺序和硫酸基团含量大小顺序一致,说明肝素中硫酸基团的含量是影响肝素抑制高糖引起人肾小球系膜细胞增殖的主要因素。

肝素衍生物的抗凝血活性评价

目的评估一系列化学修饰肝素衍生物的抗凝血活性。方法应用凝血仪测定肝素的部分活化凝血活酶时间(APTT)-肝素浓度的标准曲线,应用酶标仪测定肝素抗Ⅹa因子活性,制定其在405nm的吸光度-肝素浓度标准曲线,然后分别测定肝素衍生物的APTT和抗Ⅹa因子活性,根据标准曲线评价肝素衍生物的抗凝活性。结果化学修饰能够适当降低肝素衍生物的抗凝血活性,并且随着引入的有机基团的增多,肝素衍生物的抗凝血活性逐渐下降,但仍然保持一定的生物活性,且应用APTT评估肝素衍生物抗凝活性与应用抗Ⅹa因子活性评估肝素衍生物抗凝活性,测定结果基本一致。结论相比较肝素,这些化学修饰的肝素衍生物有较低的抗凝血活性,为安全应用这些肝素衍生物提供了更加广阔的前景。

抗肿瘤活性的肝素衍生物研究进展

在应用肝素及低分子量肝素(LMWH)防治肿瘤患者血栓栓塞性并发症时发现它们还具有显著的抗肿瘤活性,但其强大的抗凝活性成为抗肿瘤药物应用时的制约因素。对肝素进行化学修饰或将其与其他化合物偶联可获得抗凝活性低、抗肿瘤活性高的肝素衍生物。肝素衍生物的抗肿瘤机制有抑制类肝素酶活性、抑制P、L选择素介导的细胞间相互作用及抑制血管生长因子活性等。类肝素酶降解硫酸乙酰肝素(HS)侧链与肿瘤转移及肿瘤血管生成密切相关,P、L选择素介导的细胞间相互作用对肿瘤细胞的血源性转移过程有重要作用,血管生长因子所触发的血管生成是肿瘤生长、转移的必要条件。不同结构的肝素衍生物其抗肿瘤机制不完全相同。文章对抗肿瘤活性肝素衍生物的结构及其抗肿瘤机制作了综述。

非抗凝肝素衍生物对脓毒症小鼠高凝状态改善作用机制研究

目的研究非抗凝肝素衍生物(ROH)对脓毒症小鼠高凝状态的影响和可能的机制。方法体外实验采用生色底物法检测ROH通过抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)及肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)对凝血酶(Ⅱa)活性的抑制作用。体内实验,将小鼠随机分为4组:正常组、模型组、肝素组、ROH组,每组5只。除正常组外,其余3组小鼠均腹腔注射脂多糖(LPS)溶液(15 mg·kg^(-1))复制脓毒症模型。肝素组和ROH组分别于造模前15 min尾静脉注射400 U·kg^(-1)肝素溶液和30 mg·kg^(-1)ROH溶液。正常组和模型组则尾静脉注射等体积的生理盐水。建模5 h后,采用剪尾法测定出血时间;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中D-二聚体、组织因子途径抑制物(TFPI)、组织因子(TF)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)的含量。结果体外检测发现ROH不依赖ATⅢ抑制Ⅱa活性,但能通过激活HCⅡ发挥拮抗Ⅱa的活性。正常组、模型组、肝素组、ROH组小鼠尾出血时间分别为(6.56±2.72),(1.68±0.62),(13.93±2.39)和(13.08±2.65)min;这4组小鼠血浆中D-二聚体的含量分别为(1.16±0.19),(1.46±0.18),(1.26±0.13)和(1.23±0.19)ng·mL^(-1)。造模11 h后,这4组的TFPI含量分别为(38.97±1.49),(39.25±3.73),(42.51±2.66)和(42.83±4.75)μg·L^(-1);这4组的TF含量分别为(153.07±15.49),(172.84±3.31),(147.26±22.45)和(161.60±16.07)ng·L^(-1);这4组的sTM含量分别为(5.87±0.75),(6.58±0.39),(6.39±0.64)和(5.66±0.63)ng·mL^(-1)。与正常组比较,模型组尾部出血时间显著缩短(P<0.05),肝素组和ROH组相较于模型组小鼠的尾出血时间均显著延长,差异均有统计学意义(均P<0.05)。造模后,各组TFPI、TF及sTM较正常组均有显著升高或呈升高趋势,在11 h,ROH组sTM含量明显低于模型组(P<0.05)。结论体外非抗凝的ROH可以通过抑制凝血激活和改善生理抗凝作用,发挥改善脓毒症导致小鼠高凝状态的作用。

以铁调素为靶点的新药研发

铁是人体必不可少的微量元素之一,机体会对自身铁含量进行调节维持体内铁平衡。体内铁平衡遭到破坏使体内的铁缺失或过载便会引发多种疾病。铁调素作为一种小分子多肽类激素,对铁代谢调节起负调控作用,也已成为治疗铁代谢相关疾病一个新靶点。笔者综述铁调素的结构,其对铁代谢的调节作用与调控机制,机体对铁调素的调控机制,铁调素失衡导致的相关疾病等;同时,综述了以铁调素为靶点的新药研究类型与进展。由于对铁调素研究的不断深入,逐渐发展出针对铁调素信号转导途径中特定分子的特异性靶向治疗方法,通过铁调素的激活剂或拮抗剂,促进或抑制铁调素的表达,从而从分子水平上改善或治疗铁代谢紊乱的相关疾病。铁调素本身、以小化合物与siRNA为代表的铁调素激活剂、以肝素衍生物为代表的铁调素拮抗剂等都有望成为纠正铁稳态紊乱相关疾病的新药。