肝素裂合酶在胃癌中的表达及其生物学研究

目的本研究通过检测肝素裂合酶在胃癌组织中的表达含量,探讨肝素裂合酶表达与胃癌发展、浸润和转移的关系,为胃癌治疗提供理论依据。方法应用免疫组织化学法(IHC)检测了86例胃癌组织、23例癌旁组织和14例正常组织中肝素裂合酶蛋白的表达。应用流式细胞术(flow cytometry,FCM)的方法定量检测50例胃癌组织、25例癌旁组织和10例切缘正常组织中肝素裂合酶的含量。运用统计软件SPSS 11.0对数据进行统计分析。结果应用IHC法检测86例胃癌组织、23例癌旁组织和14例切缘正常组织中肝素裂合酶阳性表达率分别为79.1%,65.2%和42.9%,三者之间差别有统计学意义(P<0.05)。应用FCM法对50例胃癌组织,25例癌旁组织和10例切缘正常组织标本中的肝素裂合酶的含量进行检测,其荧光指数(fluorescence index,FI)分别为1.86±0.44,1.22±0.45,1.00±0.21。从胃癌→癌旁→正常组织,FI值明显下降,并且三者之间差别有统计学意义(P<0.01)。结论肝素裂合酶在胃癌组织的表达明显高于癌旁组织和正常胃组织,提示肝素裂合酶可能与胃癌的发展有关;肝素裂合酶表达与浸润程度、TNM分期、淋巴结转移相关,提示肝素裂合酶高表达与胃癌的分期、浸润和转移有关。

肝素酶、碱性成纤维细胞生长因子在非小细胞肺癌中的表达及与预后的关系

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中肝素酶、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况,分析其与肺癌转移和预后的关系。方法选取2012年6月—2014年6月河南省人民医院收治的48例NSCLC患者作为研究对象,所有患者均行手术治疗,术中取肺癌组织样本作为观察组,取癌旁组织样本作为对照组。观察肝素酶、b FGF在两组样本中的表达情况,分析肝素酶、b FGF表达与临床病理因素的关系。采用Logistic回归方程进行计算,探究NSCLC患者肝素酶、b FGF表达与转移和生存的关系。结果观察组中肝素酶阳性例数38例(79.17%),b FGF阳性例数37例(77.08%)。对照组中肝素酶、b FGF均为阴性表达,观察组肝素酶、b FGF阳性表达率与对照组比较差异有统计学意义(P <0.05)。肝素酶表达与NSCLC患者病理分期、血管浸润以及淋巴结转移有关;而b FGF表达则与NSCLC患者病理分期、分化程度、血管浸润及淋巴结转移有关。随访NSCLC患者3年,生存患者26例,生存率54.17%。死亡患者22例,病死率45.83%。NSCLC生存和死亡患者在分化程度、血管浸润、淋巴结转移及b FGF表达上差异有统计学意义(P <0.05)。将上述有差异因素带入Logistic回归方程分析发现,分化程度、血管浸润、淋巴结转移及b FGF表达均是NSCLC患者预后的影响因素。结论肝素酶、bFGF与NSCLC的转移、血管浸润等密切相关,与NSCLC的预后也有明显关系。

肝素酶 碱性成纤维细胞生长因子与大肠癌转移和预后的关系

目的探讨肝素酶(heparinase)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大肠癌组织中表达的临床意义及大肠转移和预后的关系。方法采用免疫组织化学、原位杂交方法,检测115例大肠癌石蜡切片和45例正常大肠黏膜中肝素酶和bFGF的表达情况。采用χ2检验、t检验、生存曲线和Cox比例风险回归等方法分析肝素酶和bFGF分别表达及共表达的意义。结果免疫组织化学染色证实肝素酶(91/115)和bFGF(89/115)主要表达在肿瘤细胞细胞质和(或)细胞膜中,在正常大肠黏膜上皮则呈阴性表达。肝素酶在大肠癌肿瘤细胞中表达明显增高(P=0.0001),统计结果显示肝素酶和bFGF的表达具有明显的一致性(P=0.0001),两者单独表达和共表达均与大肠癌的分期、血管浸润、淋巴结转移、微血管密度和预后有关。其中,两者共表达时与分期和微血管密度的相关性更显著;另外,bFGF还与大肠癌的分化程度有关。多因素分析结果显示大肠癌的分化程度、血管浸润、淋巴结转移和bFGF表达可以作为判断大肠癌预后的危险因素,但肝素酶不是影响预后的独立因素。结论肝素酶和bFGF均与大肠癌的转移、血管生成和预后密切相关。

子宫内膜癌中乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-2的表达及意义

目的:探讨乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-2蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化S-P法检测43例子宫内膜癌组织、31例子宫内膜增生症组织及20例正常子宫内膜组织中乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-2蛋白的表达,并结合各临床病理学参数进行分析。结果:乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-2在正常子宫内膜组织、增生症组织及子宫内膜癌中的表达呈上升趋势,其表达有显著性差异。子宫内膜癌中,乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-2的表达随手术-病理分期的升高、组织学病理分级下降和肌层浸润程度增加而逐渐升高,二者呈正相关。结论:乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-2可能与子宫内膜癌的发生发展有关,有望作为判断子宫内膜癌生物学行为和预后的参考指标。

肝素酶和CD44v6在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨CD44v6和肝素酶在非小细胞肺癌(NSCLC)及癌旁正常肺组织中的表达情况,并研究其与NSCLC侵袭、转移中的关系。方法采用免疫组织化学染色检测117例NSCLC组织及其中62例患者癌旁正常肺组织中CD44v6及肝素酶的表达情况,并研究二者之间的相关性。结果 CD44v6在NSCLC中的阳性表达率为54.7%(64/117),显著高于癌旁正常组织中的阳性表达率[4.8%(3/62)];肝素酶在NSCLC中的表达率为86.3%(101/117),显著高于正常癌旁组织的阳性表达率[17.7%(11/62)];CD44v6在NSCLC中的表达与肝素酶的表达具有相关性。结论 CD44v6和肝素酶与NSCLC的侵袭转移相关,联合检测二者的表达,可能对判断NSCLC的预后具有一定的参考价值。

siRNA沉默膀胱癌肝素酶基因对T24细胞增殖及MMP-2表达的影响

目的研究siRNA干扰沉默膀胱癌肝素酶基因对T24细胞增殖及MMP-2表达的影响方法体外化学合成肝素酶特异性小干扰RNA(siRNA),用脂质体2000转染至T24膀胱移行细胞癌细胞内,常规分为正常对照组、空白对照组、阴性对照组和转染实验组进行实验,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,反转录聚合酶链法(RT-PCR)检测肝素酶基因的表达,免疫细胞化学方法检测MMP-2的表达。结果RNA干扰沉默T24膀胱移行细胞癌细胞肝素酶基因后,T24细胞增殖活力下降,三个不同干扰组细胞活力分别下降了(28.55±3.66)%(、27.20±3.25)%和(37.29±4.82)%。肝素酶mRNA表达下降,膀胱移行细胞癌细胞中MMP-2(明胶酶A)的表达亦明显下降(P均<0.05)。结论RNA干扰肝素酶基因后,细胞活力及肝素酶mRNA表达水平下降并且明显抑制膀胱癌细胞中MMP-2的表达。

乙酰肝素酶和血管内皮生长因子C mRNA的表达与肺癌侵袭和转移的分子生物学

目的研究乙酰肝素酶(HPSE)和血管内皮生长因子(VEGF)-C mRNA的表达是否与肺癌的侵袭性生长和淋巴结转移有关。方法应用RT-PCR技术检测HPSE和VEGF-C mRNA在65例肺癌组织中的表达,并与癌旁组织和正常肺组织对比,同时结合肺癌的临床病理学特征及预后进行分析。结果肺癌组织中HPSE和VEGF-C mRNA的阳性表达率明显高于正常肺组织和癌旁组织(P<0.05);不同病理类型肺癌组织中HPSE和VEGF-C蛋白阳性表达率均无显著性差异(P>0.05);不同分化程度肺癌组织中HPSE和VEGF-C蛋白阳性表达率均无显著性差异(P>0.05);Ⅲ期和Ⅳ期肺癌组织中HPSE和VEGF-C蛋白阳性表达率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05);生存3年以下的肺癌组织中HPSE和VEGF-C蛋白阳性表达率明显高于生存3年以上者(P<0.05)。结论肺癌的发生、发展可能与HPSE促血管生成和VEGF-C促淋巴管生成的协同作用有关;HPSE和VEGF-C基因表达可作为判断肺癌生物学行为和患者预后的一个参考指标。

乙酰肝素酶在稽留流产组织中的表达及临床意义

目的:研究乙酰肝素酶在稽留流产绒毛组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法与Real-timePCR检测60例稽留流产组织中乙酰肝素酶蛋白及mRNA的表达,并与正常流产组织作对比。结果:乙酰肝素酶在正常绒毛组织中的蛋白表达及mRNA水平都明显高于稽留流产患者。结论:乙酰肝素酶可能与稽留流产的发生有关,有可能作为判断稽留流产的参考指标。

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对Hep-2细胞侵袭力抑制的研究

目的探讨乙酰肝素酶(heparitinase,HPSE)反义寡核苷酸(antisense oligodexyribonucle-otides,AS-ODN)对Hep-2细胞HPSE mRNA、HPSE蛋白的表达及其侵袭力的活性抑制。方法设计合成互补于HPSE mRNA起始密码区的HPSEAS-ODN,以阳离子脂质体Lipofectin包埋后转染人喉癌Hep-2细胞进行培养,采用流式细胞分析技术和逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测Hep-2细胞HPSE蛋白及其mRNA表达的变化;以Matrigel细胞侵袭试验分别对HPSEAS-ODN对Hep-2细胞侵袭力的抑制进行检测。结果AS-ODN各组与正常对照组和脂质体组比较及AS-ODN各组间比较HPSEmRNA和HPSE蛋白的表达及细胞侵袭力均有明显抑制作用,差异有统计学意义(P<0.01);AS-ODN在终浓度为100、200、400nmol/L时对Hep-2细胞侵袭力的抑制率分别为60.1%、80.8% and 94.0%。结论HPSEASON通过下调HPSE mRNA和HPSE蛋白的表达可显著抑制Hep-2细胞的侵袭力并呈剂量依赖性。

肝素酶和碱性成纤维细胞生长因子与胃癌转移和预后的关系

目的探讨肝素酶和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在胃癌组织中表达及其与大肠癌临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学方法检测80例胃癌石蜡切片和20例癌旁正常胃黏膜中肝素酶和bFGF的表达情况,分析两者分别表达及共表达与胃癌患者年龄、性别、分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移的关系。结果免疫组织化学染色结果表明:80例胃癌中有49例(61%)呈肝素酶阳性表达,52例(65%)呈bFGF阳性表达,主要表达在癌细胞质和(或)细胞膜中,在正常胃黏膜上皮则呈阴性表达,肝素酶和bFGF在胃癌中表达明显增高(P<0.05),且两者的表达具有明显的相关性(P<0.05)。两者单独表达和共表达均与胃癌的分化程度、分期、浸润深度、淋巴结转移有关,与患者年龄、性别无关。结论肝素酶和bFGF蛋白在胃癌组织中的表达较正常胃黏膜上皮明显上调,两者单独表达和共表达与胃癌的侵袭及转移能力密切相关。

吉西他滨联合乙酰肝素酶抑制剂对胰腺癌PANC-1细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨吉西他滨(GEM)联合乙酰肝素酶抑制剂OGT2115对胰腺癌PANC-1细胞侵袭和迁移能力的影响。方法人胰腺癌PANC-1细胞于RPMI 1640培养基中培养24 h后采用随机数字表法分为4组;对照组(C组)、GEM组、OGT2115组、GEM+OGT2115组分别通过Transwell小室细胞侵袭活性实验和细胞划痕实验检测各组PANC-1细胞侵袭和迁移的能力,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组乙酰肝素酶(HPA)的活性。结果与C组比较,GEM组、OGT2115组、GEM+OGT2115组侵袭细胞数和细胞迁移率降低(P<0.05);与GEM组和OGT2115组比较,GEM+OGT2115组侵袭细胞数和细胞迁移率降低(P<0.05);与C组和GEM组比较DGT21 15组HPA活性降低(P<0.05),OGT21 15+GEM组HPA活性降低(P<0.05)。结论吉西他滨联合乙酰肝素酶抑制剂可抑制胰腺癌PANC-1细胞的侵袭和迁移,OGT2115可能通过抑制HPA的活性而增强吉西他滨抗胰腺癌PANC-1细胞侵袭和迁移的能力。

乙酰肝素酶与鼻咽癌侵袭、转移和血管生成的相关性

目的观察鼻咽癌组织中乙酰肝素酶(heparanase,HPA)的表达情况,探索其与肿瘤侵袭、转移和新生血管生成的相关性。方法运用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫组织化学染色技术检测HPAmRNA和蛋白在50例鼻咽癌和20例鼻咽正常组织中的表达情况,并结合鼻咽癌临床病理特征,分析HPA mRNA的表达与鼻咽癌侵袭、转移和微血管密度(microvessel density,MVD)之间的关系。结果鼻咽癌组织中HPA mRNA和蛋白的阳性表达率分别为60.0%(30/50)和56.0%(28/50),鼻咽正常组织中无HPA mRNA和蛋白阳性表达者。HPA mRNA阳性表达与鼻咽癌临床分期、淋巴结和远处转移等临床病理特征有关(P<0.05)。HPA mRNA阳性表达者的MVD值(43.86±4.93)显著高于阴性者(27.41±2.67,P<0.01)。结论HPA参与鼻咽癌侵袭与转移,促进鼻咽癌的新生血管生成,有望成为鼻咽癌药物治疗的靶向因子之一。

肝素酶与恶性肿瘤淋巴结转移的相关性评价

目的采用Meta分析方法系统评价肝素酶与恶性肿瘤淋巴结转移的关系。方法通过电子检索与手工检索等途径全面收集有关肝素酶与恶性肿瘤淋巴结转移关系的符合纳入标准的文献,限于中文和英文,截止日期为2009年10月。在纳入的研究中包括:以研究肝素酶与恶性肿瘤淋巴结转移的关系;术前未进行化疗和放疗,均有病理诊断作为金标准对照;提供的数据完整,能得到四格表资料。所有数据使用RevMan Manager 4.2软件进行Meta分析。结果关于肝素酶与恶性肿瘤淋巴结转移关系的文献共检出156篇,其中符合纳入标准的共38篇,英文3篇,中文35篇。38项研究经Meta分析显示,肝素酶检测对判断恶性肿瘤淋巴结转移的合并灵敏度为76.0%,合并特异度为58.8%;合并阳性预测值为67.3%;合并阴性预测值为68.7%;合并阳性似然比为+LR=1.84;合并阴性似然比为-LR=0.54;合并比值比(OR)为6.26,95%可信区间5.18～7.57。结论肝素酶对判断恶性肿瘤淋巴结转移的敏感度较高,且有较高的阴性预测值,肝素酶的表达与恶性肿瘤淋巴结转移呈正相关。

冠心病患者血清乙酰肝素酶水平及其与冠状动脉病变的相关性

乙酰肝素酶（Heparanase,HPSE）是定位于溶酶体和高尔基体的一种内切糖苷酶,能够降解硫酸乙酰肝素蛋白聚糖中的硫酸乙酰肝素（Heparan Sulfat,HS）链,后者是组织细胞外基质和基底膜的重要组成部分,HPSE通过降解HS链参与一系列生物学反应如炎症反应、胚胎发育、血管生成、肿瘤的侵袭和转移等[1]。研究证实,HPSE还可以通过促进平滑肌细胞增生而参与动脉粥样硬化的形成[2]。

肝素酶与原发性肝细胞肝癌关系的研究进展

原发性肝细胞肝癌（HCC）足最为常见的恶性肿瘤之一，早期无明显症状，临床确诊时，大部分已经处于中晚期。因此，大部分HCC患者自确诊后的平均6个月存活率小到50％，5年存活率仅5％，HCC是严重危害中国人群健康的重大疾病。

肝素酶与危重症相关肺动脉高压患者预后及病情严重程度的关系

目的 探讨肝素酶与危重症相关肺动脉高压(CIR-PH)患者预后及病情严重程度的关系。方法 回顾性选取2021年4月-2022年6月兰州大学第一医院重症医学科收治的108例CIR-PH患者为研究对象,根据预后情况将其分为死亡组(n=28)和生存组(n=80)。比较两组一般资料[包括年龄、性别、BMI、肺动脉高压(PH)临床分类、肝素酶、NT-proBNP及急性生理学和慢性健康状况评价系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分]、右心导管检查结果[包括平均肺动脉压(mPAP)、肺毛细血管楔压(PCWP)、肺血管阻力(PVR)、平均右心房压(mRAP)和心排血量(CO)]及超声心动图检查结果[包括右心室直径(RVD)、右心房直径(RAD)、肺动脉宽度(PAW)、肺动脉流速(PAV)、肺动脉压(PAP)、三尖瓣反流速度(TRV)]。CIR-PH患者预后的影响因素分析采用单因素、多因素Cox比例风险回归分析,采用ROC曲线分析肝素酶、NT-proBNP对CIR-PH患者死亡的预测价值,肝素酶与CIR-PH病情相关指标(NT-proBNP、APACHEⅡ评分、mPAP、PCWP、PVR、CO)的相关性分析采用Pearson相关分析。结果死亡组年龄、RVD、RAD大于生存组,肝素酶、NT-proBNP、APACHEⅡ评分、mPAP、PCWP、PVR、mRAP、PAP高于生存组,CO低于生存组,TRV快于生存组(P<0.05)。单因素Cox比例风险回归分析结果显示,年龄、肝素酶、NT-proBNP、APACHEⅡ评分、mPAP、PCWP、PVR、mRAP、CO、RVD、RAD、PAP、TRV可能是CIR-PH患者死亡的影响因素(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归分析结果显示,肝素酶、NT-proBNP、mPAP、mRAP是CIR-PH患者死亡的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,肝素酶预测CIR-PH患者死亡的AUC为0.784[95%CI(0.688~0.879)],最佳截断值为10.4μg/L,灵敏度为0.500,特异度为0.875;NT-proBNP预测CIR-PH患者死亡的AUC为0.761[95%CI(0.662~0.860)],最佳截断值为3775ng/L,灵敏度为0.357,特异度为0.950。Pearson相关分析结果显示,肝素酶与CIR-PH患者NT-proBNP(r=0.639)、APACHEⅡ评分(r=0.763)、mPAP(r=0.876)、PCWP(r=0.858)、PVR(r=0.846)呈正相关,与CO(r=-0.702)呈负相关(P<0.001)。结论 肝素酶是CIR-PH患者死亡的独立影响因素,其对CIR-PH患者死亡有一定预测价值,且其与CIR-PH患者病情严重程度密切相关。

肝素酶基因修饰的树突状细胞疫苗对胃癌细胞的免疫效应研究

目的研究肝素酶基因修饰的树突状细胞(DC)疫苗对胃癌细胞的免疫效应,探讨肝素酶疫苗在胃癌主动免疫治疗中的可行性。方法将含有肝素酶全长cDNA的重组肝素酶腺病毒感染人类白细胞抗原A2(HLA-A2)阳性健康志愿者外周血单个核细胞来源的DC,制备肝素酶基因修饰的DC疫苗,刺激同一来源的淋巴细胞,使其活化为肝素酶特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),采用标准51Cr释放试验验证其对KATO-Ⅲ和SGC-7901胃癌细胞的体外免疫效应,肝素酶特异性的CTL与不同靶细胞共孵育后干扰素(IFN)-γ的释放采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法。结果经肝素酶重组腺病毒感染后该DC中肝素酶蛋白质的表达明显升高。肝素酶特异性的CTL在各效/靶比时对HLA-A2及肝素酶均阳性的KATO-Ⅲ胃癌细胞都有明显的免疫杀伤活性;相反,对肝素酶阳性但HLA-A2阴性的SGC-7901胃癌细胞不具有杀伤效应,即使在最高效/靶比时,其杀伤活性亦仅为11·1%±4·6%;进一步研究发现肝素酶特异性CTL对自体淋巴细胞亦不具有免疫杀伤作用,在最高效/靶比时,其杀伤活性为11·4%±7·9%。同时研究还发现,肝素酶修饰的DC刺激的效应细胞与KATO-Ⅲ共孵育后,其IFN-γ的表达明显高于空病毒修饰组以及IL-2刺激组(280pg/ml±24pg/mlvs121pg/ml±19pg/ml和60pg/ml±11pg/ml,P<0·05);而经肝素酶修饰的DC刺激的特异性效应细胞与SGC-7901或自体淋巴细胞孵育后所检测的IFN-γ在各组间差异无统计学意义(均P>0·05)。结论肝素酶基因修饰的DC疫苗可以诱发特异性CTL,对HLA相匹配且肝素酶阳性的胃癌细胞具有良好的免疫杀伤活性,而对自体淋巴细胞不具有免疫杀伤作用,是一种安全有效的肿瘤免疫基因治疗的靶位。

小干扰RNA抑制胃癌细胞肝素酶表达及侵袭的实验研究

目的利用 RNA 干扰(RNAi)技术封闭胃癌细胞系 SGC7901肝素酶表达,观察其对肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法体外转录合成小于扰 RNA(siRNA),经脂质体转染胃癌细胞系;结合逆转录(RT)-PCR,Western 印迹检测类肝素酶 mRNA 及蛋白质表达;通过体外侵袭实验评价肝素酶RNAi 后胃癌细胞系的侵袭能力变化。结果肝素酶 siRNA 分子可以特异性地抑制 SGC7901细胞肝素酶 mRNA,抑制率达(70±6)%;肝素酶 RNAi 后 SGC7901细胞的侵袭抑制率达(61±36)%。结论靶向肝素酶基因的 siRNA 分子能特异性抑制其蛋白表达水平,降低肿瘤细胞的侵袭能力。肝素酶是促进胃癌细胞侵袭转移的关键分子,并可为抑制胃癌侵袭转移提供新策略。

CD138和乙酰化肝素酶在肝细胞癌中表达的组织芯片研究

目的探讨人肝细胞癌中CD138和乙酰化肝素酶的表达水平及其与肝细胞癌发生、发展、转移和复发的关系。方法运用组织芯片技术,通过免疫组织化学EnVision法研究197例肝细胞癌、癌旁肝组织及其中66例转移病灶中CD138和乙酰化肝素酶的表达水平。48例获得4～72个月随访。结果(1)CD138的表达率在肝细胞癌和癌旁肝组织中分别为48.7%(96/197)和65.0%(128/197,P<0.05),在早期和中晚期肝细胞癌中分别为61.7%(29/47)和44.7%(67/150,P<0.05),在有和无转移的中晚期肝细胞癌组中分别为33.3%(22/66)和53.6%(45/84,P<0.05),在1年之内和1年之上复发组中分别为23.3%(7/30)和61.1%(11/18,P<0.05);(2)乙酰化肝素酶的阳性表达率在肝细胞癌和癌旁肝组织中分别为35.5%(70/197)和12.7%(25/197,P<0.05),在早期和中晚期肝细胞癌中分别为29.8%(14/47)和37.3%(56/150,P>0.05),在伴随和不伴转移的肝细胞癌组织中48.5%(32/66)和28.6%(24/84,P<0.05),在1年之内和1年之上复发组中分别为50.0%(15/30)和44.4%(8/18,P>0.05);(3)66例伴随转移的肝细胞癌组织中,CD138在乙酰化肝素酶阴性组中的高表达率高于阳性组(P<0.05)。结论(1)CD138在肝细胞癌组织中的低表达与其发生、发展、转移和复发密切相关,与分级、HBV感染及血清甲胎球蛋白值无关;(2)CD138蛋白低表达与乙酰化肝素酶高表达参与肝细胞癌的转移过程。

RNA干扰抑制乙酰肝素酶对肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和凋亡的影响

目的探讨抑制乙酰肝素酶表达对人肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和凋亡的影响。方法构建靶向人乙酰肝素酶基因短发夹状双链RNA（shRNA）真核表达质粒（pshRNA-Hpa），用脂质体将其转入A549细胞，建立稳定转染细胞株系，经逆转录-PCR和Western blot法检测转染效率后，分别用四甲基偶氮唑蓝（MTT）、Transwell侵袭实验和流式细胞术（AnnexinV—FITC／PI双染法）检测其对A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。采用Western blot法检测转染后磷酸化蛋白激酶B（PKB／Akt—Ser473）的表达。结果转染pshRNA-Hpa的A549细胞乙酰肝素酶mRNA及蛋白表达明显低于未处理A549细胞，抑制率分别为54．09％和48．26％，细胞增殖速度减缓，侵袭能力降低，流式细胞术显示早期细胞凋亡率达（12．53±0．34）％，较空白对照组、空载体转染细胞组和阴性对照组明显增加（P〈0．01）。同阴性对照质粒相比，转染pshRNA—Hpa的A549细胞Akt-Ser473的磷酸化水平降低52．15％。结论靶向乙酰肝素酶重组shRNA质粒pshRNA—Hpa能有效抑制A549细胞乙酰肝素酶的表达，并可能通过下调磷酸化蛋白激酶B途径抑制细胞的增殖侵袭、促进细胞的凋亡。