药物所致肝纤维化动物模型的研究进展

肝纤维化是细胞外基质在肝内过度沉积的病变，是发展为肝硬化的重要中间环节。目前认为，肝纤维化是可逆的，但若没有得到及时有效的治疗，则最终发展为不可逆转的肝硬化、甚至肝癌。因此，如何有效地防治肝纤维化，阻断其进展，已经成为国内外研究的热点。为了研究肝纤维化的发生机制并筛选出有效的治疗药物，需要建立良好的肝纤维化动物模型。

肝纤维化动物模型及其影像检查进展

随着研究的深入，人们对肝纤维化的发生机制有了更深的认识，明确提出肝纤维化甚至肝硬化有可能逆转的观点。如何有效早期诊断和防治肝纤维化，已成为国内外研究热点。

腹腔注射低浓度四氯化碳建立小鼠肝纤维化模型

在中国患肝炎病后,肝纤维化、硬化、肝癌高发.建立肝纤维化动物模型,有利于进行病理过程的研究.四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）导致肝微粒体脂质过氧化,肝脂肪变性、进而纤维化.常规采用高浓度CCl4建模型,对动物选择性强,同时因给药剂量高,动物死亡率高.本实验采用低浓度CCl4、反复腹腔注射,希望建立一套简便可行的小鼠肝纤维化建模方法.

在CCl_4诱导的大鼠肝脏纤维化模型中肝功、肝脏纤维化程度的监测

目的对肝纤维化实验动物模型的肝功能和肝纤维化程度等指标进行评估。方法肝纤维化大鼠模型的制备,肝纤维化指标。血清透明质酸(HA),层粘连蛋白(LN),Ⅲ型前胶原(PCⅢ),Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)。肝功能指标:①反映肝细胞蛋白合成代谢功能的指标:总蛋白TPROT(g/L),白蛋白ALB(g/L),球蛋白GLB(g/L);②肝细胞受损的指标:谷草转氨酶AST(U/L),谷丙转氨酶ALT(U/L),胆碱脂酶CHE(U/L);③反映肝脏胆排泄、分泌及解毒功能的指标:总胆红素TBILI(μmol/L),直接胆红素DBILI(μmol/L),间接胆红素IBILI(μmol/L),总胆汁酸TBA(μmol/L);④胆汁淤积指示酶:谷氨酰转肽酶GGT(U/L),碱性磷酸酶ALP(U/L)。结果纤维化肝脏的形态学和病理学结果显示的大鼠的肝纤维化处于终末期状态;对于肝纤4项,除层粘连蛋白(LN)外,正常组和肝纤维化组的大鼠有显著性差异;对于肝功15项,除了总蛋白(TPROT)和胆碱酯酶(CHE)外,正常组和肝纤维化组的大鼠有显著性差异。结论肝纤维化大鼠的肝纤维化和肝功指标对对照组相比有显著性差异,与肝纤维化的病理和形态学检测相一致。

加味鳖甲煎丸对白蛋白所致免疫性肝纤维化大鼠病理模型的影响

目的对加味鳖甲煎丸对白蛋白所致免疫性肝纤维化大鼠的病理和病变程度进行定量分析。方法采用人血清白蛋白(8 g/L)对大鼠进行皮下免疫,在大鼠产生抗体后分组[将造模大鼠随机分为6组,即加味鳖甲煎丸大(13g/kg)、中(6.5g/kg)、小(3.25g/kg)剂量组(简称为鳖甲大、中、小剂量组),模型组,阳性药秋水仙碱(1.0 mg/kg)对照组(简称秋水仙组),阳性药肝脾康(22.23 mg/kg)对照组(简称为肝脾康组)]给药,给药后40 min再由尾静脉注射人血清白蛋白,即可得到肝纤维化实验动物模型,实验结束后处死大鼠,病理切片,HE和Masson染色,对肝组织病理变化、胶原纤维含量进行分析。结果与模型组比较,鳖甲大、中、小剂量组能显著改善肝纤维化大鼠病变程度(总分降低率分别为62.50%、40.75%、8.33%);胶原纤维含量亦明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论加味鳖甲煎丸对白蛋白所致免疫性肝纤维化大鼠病变程度有明显防治作用。

大鼠肝纤维化模型建立及肝纤维化的检测

肝纤维化是各种慢性肝病的共同病理基础,是肝硬化的初始阶段,其本质是细胞外基质的合成与降解失衡,导致细胞外基质在肝内过量沉积,最后导致正常肝脏组织结构及功能的改变。为了研究肝纤维化的发生机制,筛选出治疗肝纤维化的药物,研究其作用及药物作用机制,建立一个理想的肝纤维化模型尤为重要。理想的肝纤维化动物模型应具备以下条件：与人类肝纤维化的基本病变特征相似;肝纤维化的形成具有一定的发生发展及明显的分期过程,

卡托普利抗肝纤维化实验研究

目的 :建立大鼠肝纤维化模型 ,探讨卡托普利抗大鼠肝纤维化作用及机制。方法 :Wistar大鼠 4 0只随机分为正常对照组、实验对照组A、实验对照组B、卡托普利预防组、卡托普利治疗组 ,采用混合损害因素构建肝纤维化模型 ;行HE染色和VG胶原染色 ,判断炎症和肝纤维化程度。免疫组化检测各组肝组织TGF - β1、α-SMA的表达。结果 :卡托普利预防组、治疗组的大鼠肝细胞坏死、脂肪变性、炎性细胞漫润及纤维结缔组织增生等较实验对照组明显减轻 ;实验对照组A平均肝纤维化积分值为 2 .17± 0 .75、卡托普利预防组为 1.33±0 .5 2 ;实验对照组B为 2 .86± 0 .6 9、治疗组为 1.6 7± 0 .82 ,两者比较均P <0 .0 5。实验对照组A、卡托普利预防组α-SMA阳性表达细胞数分别为 72± 8.1/视野、31± 5 .5 /视野 ;实验对照组B、治疗组分别为 110± 8.6 /视野、6 7± 4 .3/视野 ,两者比较均P <0 .0 0 1。实验对照组A、卡托普利预防组TGF - β1阳性表达面积比分别为 3.15± 0 .5 3%、2 .2 4± 0 .2 6 % ,两者比较P <0 .0 5 ;实验对照组B、治疗组分别为 4 .77± 0 .4 4 %、3.5 8±0 .4 9% ,两者比较P <0 .0 0 1。各组大鼠肝组织中α -SM阳性细胞数与TGF - β1阳性表达面积比呈正相关 (r=0 .86 7,P =0 .0 0 7)。结论 :各组大鼠?

丹芍化纤胶囊对实验性肝纤维化大鼠肝脏Smad-7表达的影响

目的探讨Smad7在大鼠肝纤维化肝脏中的表达及丹芍化纤胶囊抗大鼠肝纤维化对其表达的影响。方法雄性Wistar大鼠80只分为正常组、肝纤维化模型组、自然恢复组、低剂量治疗组、高剂量治疗组,除正常组外,其余采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周,然后两治疗组分别予以低剂量(0.5g/kg)、高剂量(1.0g/kg)丹芍化纤胶囊灌胃治疗8周。实验结束后测定肝脏指数,光镜下观察肝组织纤维化程度,同时免疫组化SABC法检测肝组织中Smad7的表达。结果Smad7在肝纤维化大鼠肝脏中表达明显减少(0.98±0.20/12.80±2.32),治疗8周后,治疗组与肝纤维化模型组、自然恢复组比较,肝脏指数、肝纤维化程度显著减轻;肝脏Smad7表达显著增加(10.42±2.74/1.74±0.29)。结论丹芍化纤胶囊能显著增加肝纤维化大鼠肝组织中Smad7的表达,可能是其发挥抗纤维化作用的机制之一。

大黄蛰虫丸对肝纤维化大鼠肝α-SMA表达的动态观察

目的观察大黄蜇虫丸对免疫性肝纤维化大鼠肝脏α-SMA表达的动态变化,探讨大黄蜇虫丸抗肝纤维化的作用机制。方法将120只健康雄性SD大鼠随机分为6组,即正常对照组,模型组,大黄蜇虫丸低、中、高剂量组,秋水仙碱组各20只。除正常对照组外其他各组均采用注射人血清白蛋白制作免疫性肝纤维化大鼠模型,模型制作完成后,各组采用相应的药物干预,连续4周,分别于药物治疗后1,2,3,4周末随机处死5只大鼠,用免疫组化技术检测肝脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果①模型组随着周次的延长肝脏组织中α-SMA表达及胶原纤维含量同步增高,有统计学意义(P<0.01);②大黄蜇虫丸低、中、高剂量组随着周次的延长肝脏组织中α-SMA表达及胶原纤维含量同步降低,有统计学意义(P<0.01),但大黄蜇虫丸中剂量组优于其他2组(P<0.01);③大黄蜇虫丸有明显的抑制肝纤维化模型大鼠肝组织α-SMA的表达作用,且抑制作用要优于秋水仙碱(P<0.01)。结论大黄蜇虫丸可有效防治大鼠免疫性肝纤维化,其作用机制可能是通过抑制肝纤维化组织α-SMA的表达来实现的。

大黄蜇虫丸影响免疫性肝纤维化大鼠TIMP-1表达的动态观察

目的观察大黄蜇虫丸对免疫性肝纤维化大鼠TIMP-1表达影响的动态变化,探讨大黄蜇虫丸抗肝纤维化的作用机制。方法将120只健康雄性SD大鼠随机分为6组。即正常组,模型组,大黄蜇虫丸低剂量组,大黄蜇虫丸中剂量组,大黄蜇虫丸高剂量组,秋水仙碱组,各20只,除正常组外其它各组均注射人血清白蛋白制作免疫性肝纤维化大鼠模型,模型制作完成后,各组采用相应的药物连续干预4周,分别于药物治疗后1、2、3、4周末随机处死5只大鼠,用酶联免疫吸附法检测血清中基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量变化。结果①模型组随着周次的延长血清TIMP-1同步增高,差异有统计学意义(P<0.01);②大黄蜇虫丸低剂量组、大黄蜇虫丸中剂量组、大黄蜇虫丸高剂量组随着周次的延长血清TIMP-1同步降低,差异有统计学意义(P<0.01),其中大黄蜇虫丸中剂量组优于其他两组(P<0.01);③大黄蜇虫丸有明显的抑制肝纤维化模型大鼠肝组织TIMP-1表达的作用,且抑制作用要优于秋水仙碱组(P<0.01)。结论大黄蜇虫丸可有效防治大鼠免疫性肝纤维化,其作用机制可能是通过抑制肝纤维化组织TIMP-1的表达而实现。

丹芍化纤胶囊对体内外活化肝星状细胞增殖的影响

目的:研究中药复方制剂丹芍化纤胶囊对体内外活化肝星状细胞(HSCs)增殖的影响。方法:(1)体内实验:雄性 Wistar大鼠57只分为正常组、模型组、治疗组。除正常组外,其余各组采用 CCl_4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周,然后治疗组给予丹芍化纤胶囊(1g/kg体重)灌胃治疗8周。实验结束时部分大鼠用于测定肝功能及肝脏纤维化程度;部分用于分离 HSCs,流式细胞仪检测细胞周期百分比。(2)体外实验:制备丹芍化纤胶囊大鼠药物血清;分离培养大鼠 HSCs,并分为小牛血清组、正常大鼠血清组、丹芍化纤药物血清组,分别加入5%、10%、20%以上3种血清干预培养的HSCs,MTT 比色法测定原代 HSCs 增殖情况。结果:(1)体内实验:治疗组较模型组肝功能、肝脏纤维化程度及 HSCs 增殖明显减轻。(2)体外实验:丹芍化纤药物血清组较同浓度小牛血清组、正常大鼠血清组明显抑制 HSCs 增殖,且此作用呈剂量依赖性。结论:丹芍化纤胶囊能显著抑制体内外 HSCs 增殖。