赤丹肝纤颗粒的质量标准

目的：建立赤丹肝纤颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱法对处方中赤芍及虎杖、丹参、三白草、大黄5味中药进行定性鉴别,采用HPLC法测定赤芍中芍药苷的含量。以Apollo C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈-水（12.5∶87.5）,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为230 nm,柱温30℃。结果：各TLC色谱中,供试品与各自对照品及对照药材色谱相同的位置上显相同颜色的斑点,且阴性对照无干扰。HPLC法测定芍药苷在0.120-1.436μg范围内线性关系良好（r=0.999 4）,平均加样回收率为99.8%,RSD=1.80%（n=6）。结论：本方法简便、准确、重复性好,适用于赤丹肝纤颗粒的质量控制。

甲芪肝纤颗粒辨治慢性乙型肝炎肝纤维化微观药证学研究

甲芪肝纤颗粒具有疏肝活血以化瘀、健脾益气以祛湿及解毒抗纤的作用。治疗慢性乙型肝炎肝郁血瘀、脾虚湿滞证 ,显效率及有效率优于对照药和络舒肝胶囊。其作用机制与解毒化瘀 ,增强自身免疫 ,抑制纤维细胞增殖及胶原生成率等有关。

正交试验设计优选肝纤颗粒水提工艺

目的优选肝纤颗粒的水提工艺。方法采用单因素法考察先煎药材的粉碎粒度和提取时间,以固形物质量为评价指标优选先煎工艺;采用正交试验考察加水倍数、提取时间、提取次数等影响因素,以丹酚酸B含量和总固形物质量为评价指标,综合加权评分法优选水提工艺。结果优选工艺为醋鳖甲粉碎成最粗粉,加10倍量水,先煎30 min;加入其余药材,加10倍量水,提取2次,每次1 h。按优选工艺进行验证试验的综合评分平均值为95.20%,与正交试验综合评分最大值结果接近。结论优选的工艺科学合理,简便可行,稳定性好。

甲芪肝纤颗粒治疗乙型肝炎肝纤维化的临床研究

目的观察甲芪肝纤颗粒抗肝纤维化的临床疗效。方法对 40 7例慢性乙型肝炎肝纤维化患者 ,采用多中心、随机对照方法 ,观察治疗前后血清肝纤维化指标透明质酸 (HA)、层粘蛋白 (LN)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原 (IV)、临床症状及肝功能改变。结果甲芪肝纤颗粒可降低血清肝纤维化指标 ,改善临床症状及肝功能。

赤丹肝纤颗粒的醇提工艺研究

目的:优选赤丹肝纤颗粒的醇提最佳工艺。方法:以虎杖苷含量为考察指标,先优选出最佳乙醇浓度,再采用L9(34)正交试验法,考察提取次数、提取时间及乙醇用量对提取效果的影响。结果:最佳醇提工艺条件为以70%乙醇为溶媒回流提取2次,每次2 h,每次溶媒量为药材量的5倍。结论:优选的工艺合理可行、重复性良好、提取效率高,适合于工业化生产。

正交试验法优选甲芪肝纤颗粒中防己醇提工艺的研究

目的 以粉防己碱为含量指标,研究甲芪肝纤颗粒中防己的醇提工艺。方法 采用正交试验设计进行优选,分光光度法测定粉防己碱含量。结果 乙醇浓度对粉防己碱提取有显著性影响(P<0.05)。结论 最佳提取工艺为:90％乙醇回流提取2次,每次1h。

肝纤颗粒抗实验性肝纤维化药效学研究

目的观察肝纤颗粒对肝纤维化动物血清相关指标(ALT、AST、ALP、TBiLi、LN、HA、Ⅳ-C)、肝脏羟脯氨酸(Hyp)和肝脏病理组织的影响。方法以四氯化碳皮下注射复制大鼠化学性肝纤维化模型,与秋水仙碱作比较。结果肝纤颗粒能显著降低肝纤维化大鼠血清ALT、AST和ALP活性,降低血清HA、LN及肝组织Hyp含量,病理组织观察亦显示给药组肝纤维化程度较模型组轻。结论肝纤颗粒具有较好的抗肝纤维化作用。

正交试验设计优选甲芪肝纤颗粒提取工艺的研究

目的以黄芪甲苷、干膏得率为含量指标 ,研究甲芪肝纤颗粒的水提工艺。方法采用正交试验设计进行优选 ,薄层色谱扫描测定黄芪甲苷含量 ,干燥失重法测定干膏得率。结果提取时间对黄芪甲苷和干膏得率的影响有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;加水量对黄芪甲苷和干膏得率的影响不具显著性 (P >0 .0 5 )。结论最佳提取工艺为水煮提 2次 ,第 1次 1 .5h ,第 2次 1h,加水量分别为药材量的 1 0倍和 8倍。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定甲芪肝纤颗粒中黄芪甲苷的含量

目的建立甲芪肝纤颗粒中黄芪甲苷的高效液相色谱-蒸发光散射检测法的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:ODS-2,流动相:乙腈-水(32∶68),流速:1mL/min,温度:40℃,载气(空气)流速:3.2bar。结果甲芪肝纤颗粒中含黄芪甲苷0.347mg/g,其他组分对它无干扰,黄芪甲苷在0.31～1.84μg范围内峰面积的对数与其进样量的对数呈良好的线性关系(r=0.9994),加样回收率99.66%,RSD为0.36%。结论该方法准确可靠,简便易行,可用于甲芪肝纤颗粒中黄芪甲苷成分的检测。

抗肝纤颗粒的质量标准

目的制定抗肝纤颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对方中的黄芪、虎杖进行鉴别试验,用高效液相色谱(HPLC)法对丹参酮ⅡA的含量进行测定,流动相:甲醇-水(20:1)、检测波长270nm。结果薄层鉴别显示供试品的色谱与对照品色谱在相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照显示无干扰;HPLC法测定结果显示丹参酮ⅡA在0.038～0.38ug范围内线性关系良好,γ=0.9998(n=5),平均回收率为99.45%结论本方法专属性强,操作简便、准确,可用于抗肝纤颗粒的质量控制。

甲芪肝纤颗粒

【处方】黄芪 560g 防己545g 茯苓292g 厚朴135g 延胡索210g 赤芍155g 牛膝242g 桃仁420g 莪术140g 鳖甲188g 土鳖虫279g 【制法】以上十一味，莪术提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣备用；挥发油用倍他环糊精约10g包合，包合物备用；防己加90％乙醇回流提取2次，每次1h，合并提取液，滤过，药渣备用；滤液回收乙醇至无醇味，浓缩至适量，备用；鳖甲加水煎煮1h，再加入上述莪术、防己药渣及其余黄芪等八味，加水煎煮2次，第一次1．5h，第二次1h，

甲芪肝纤颗粒中桃仁的定性定量方法研究

目的建立甲芪肝纤颗粒中桃仁的定性定量方法。方法采用薄层色谱法对甲芪肝纤颗粒中的桃仁进行定性研究;采用高效液相色谱法对甲芪肝纤颗粒中的苦杏仁苷进行含量测定。结果薄层鉴别斑点清晰,分离度较好,阴性无干扰。含量测定精密度、稳定性、重复性良好,平均回收率为97.91%,RSD值为1.04%。结论该方法简便,结果准确可靠,可作为其质量控制方法。

醇沉工艺对抗肝纤颗粒疗效的影响及影响因素分析

目的 探讨抗肝纤颗粒的制剂工艺 ,观察其对临床疗效的影响 ,并对影响因素进行分析。方法 将抗肝纤水煎液分别用水提醇沉法 (下简称醇沉法 )提取后制粒和不采用醇沉的喷雾干燥一步制粒法制粒 ,对 10 7例肝病患者进行疗效观察。结果 以血清Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )和血清透明质酸 (HA)结果计算 ,醇沉法所制得的颗粒总有效率为 68 4%,喷雾干燥法总有效率为 96 0 %。结论 采用醇沉法会降低抗肝纤颗粒的疗效。

基于miR-135a/FOXO1/PINK1通路探讨柔肝化纤颗粒调控线粒体自噬抑制肝星状细胞活化的机制

目的基于miR-135a/FOXO1/PINK1通路探讨柔肝化纤颗粒通过调控线粒体自噬来抑制肝星状细胞活化与增殖的影响及其机制。方法HSC-T6分为空白组、H_(2)O_(2)组、miR-135a-NC组、miR-135a-mimic组、miR-135a-in-hibitor-NC+H 2 O2组、miR-135a-inhibitor+H_(2)O_(2)组、柔肝化纤颗粒含药血清对照组、H_(2)O_(2)+含药血清对照组、H_(2)O_(2)+含药血清组、H_(2)O_(2)+含药血清+miR-135a-NC组及H_(2)O_(2)+含药血清+miR-135a-mimic组。分别采用Real-time PCR、Western Blot、ELISA及流式细胞术检测miR-135a、FOXO1、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ、Smad2、p-Smad2、转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、NF-κB p65、p-NF-κB p65、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TNF-α表达及线粒体膜电位、活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成。结果给予H_(2)O_(2)及过表达miR-135a可显著上调HSC-T6 miR-135a、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、p-Smad2、TGF-β1、p-NF-κB p65、TNF-α表达及ROS生成(P<0.01);下调FOXO1、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ表达与线粒体膜电位(P<0.01)。给予柔肝化纤颗粒及抑制miR-135a表达可显著下调HSC-T6 miR-135a、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、p-Smad2、TGF-β1、p-NF-κB p65、TNF-α表达及ROS生成(P<0.01);上调FOXO1、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ表达与线粒体膜电位(P<0.01)。给予柔肝化纤颗粒同时过表达miR-135a可抑制柔肝化纤颗粒对HSC-T6的影响(P<0.01)。结论线粒体自噬可抑制HSC-T6活化,其机制与线粒体自噬抑制ROS生成,进而抑制TGF-β1/Smad2通路及炎症反应有关;柔肝化纤颗粒亦可抑制HSC-T6活化,其机制与柔肝化纤颗粒抑制miR-135a表达,活化FOXO1/PINK1通路,从而促进线粒体自噬有关。

肝纤宁颗粒对肝纤维化模型大鼠肝细胞的影响

目的 :观察肝纤宁对肝细胞生存的影响。方法 :用CCl4 肝纤维化模型大鼠肝细胞 ,观察肝纤宁培养对其生长的作用。结果 :肝纤宁能提高肝细胞存活率 ,降低肝细胞培养上清液转氨酶(ALT) ,升高糖原 (PAS)及酸性磷酸酶 (ACP)含量 ,电镜观察肝纤宁组线粒体肿胀少而轻 ,滑面内质网增生 ,扩张不明显 ,损伤性细胞结构少。结论 :肝纤宁能提高肝细胞存活率 ,促使肝细胞修复再生 ,从而发挥抗肝纤维化作用。

肝纤溶颗粒与复方鳖甲软肝片对大鼠肝纤维化模型细胞凋亡及内质网应激相关因子表达影响研究

目的探究肝纤溶颗粒与复方鳖甲软肝片对大鼠肝纤维化模型细胞凋亡及内质网应激相关因子表达影响。方法 48只雄性清洁级SD大鼠随机分为:正常对照组、模型对照组、复方鳖甲软肝片组及肝纤溶颗粒组,每组各12只。除正常对照组外各组复制肝纤维化模型。于复制模型后的3周各组大鼠同时给药,正常对照组与模型对照组大鼠给予生理盐水1.5 ml/kg灌胃,1次/d;复方鳖甲软肝片组给予33.3%复方鳖甲软肝片溶液1.5 ml/kg重灌胃,1次/d;肝纤溶颗粒组给予33.3%肝纤溶颗粒溶液1.5 ml/kg灌胃,1次/d。各组连续用药6周。实验开始后第3、6和9周对各组大鼠肝脏病理学、细胞凋亡数量、肝纤维化指标水平以及内质网应激相关指标进行检测。结果与其他各组相比,肝纤溶颗粒组纤维增生程度评分下降(P<0.05),肝凋亡数下降(P<0.05);透明质酸、层黏连蛋白、血清Ⅲ型前胶原、血清Ⅳ型胶原水平下降(P<0.05);CHOP、ATF6蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论肝纤溶颗粒组肝纤维化大鼠细胞凋亡数量和肝纤维化水平较复方鳖甲软肝片组下降,差异有统计学意义(P<0.05),肝纤溶颗粒能够改善肝脏病理变化,调节内质网应激相关指标,对临床有指导意义。

肝纤溶颗粒抗实验性肝纤维化治疗中血清HA、LN、PCⅢ的动态变化

目的观察肝纤溶颗粒对肝纤维化大鼠血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)含量的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法采用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,同时以肝纤溶颗粒、复方鳖甲软肝片进行干预,并分别在给药后第2、4、8周,用常规方法检测肝功能及肝纤维化程度的变化,用放射免疫法检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、PCⅢ含量的变化。结果各实验组大鼠血清中HA、LN、PCⅢ均明显高于正常对照组,模型组自造模第2周起各项指标开始升高,且随着实验的进行,肝功能损害不断加重,血清纤维化各项指标的含量不断增加;肝纤溶颗粒治疗组肝功能损害减轻,血清HA、LN、PCⅢ含量明显降低。结论肝纤溶颗粒可以通过降低血清HA、LN、PCⅢ含量而具有抗肝纤维化的作用。对细胞外基质代谢的调节是其抗肝纤维化的作用机制之一。

肝纤溶颗粒对肝纤维化大鼠血清TNFα-、IL-6水平的影响

目的探讨肝纤溶颗粒对肝纤维化大鼠血清TNF-α、IL-6水平的影响。方法:方法应用40%CC l4色拉油溶液复制肝纤维化动物模型,以三种不同剂量的肝纤溶颗粒治疗,对各组的血清TNF-α、IL-6水平变化情况进行比较。血清TNF-α、IL-6水平采用R IA法检测。结果肝纤溶颗粒对肝纤维化动物模型的TNF-α、IL-6水平有良好的改善作用,随着药物的剂量的增加其疗效更为明显。结论肝纤溶颗粒可以降低肝纤维化时细胞因子TNF-α、IL-6水平,是一种在阻断并逆转肝纤维化方面极具研究价值及应用前景的中药制剂。

肝纤溶颗粒对急性肝损伤大鼠肝纤维化的影响及作用机制

目的探讨肝纤溶颗粒对急性肝损伤大鼠肝纤维化的影响及作用机制。方法将40只SD大鼠随机均分为对照组、模型组、鳖甲软肝片组、肝纤溶颗粒组,后三组给予皮下注射CCl4色拉油溶液6周制备急性肝损伤肝纤维化模型。模型制备第3周时,鳖甲软肝片组给予33.3%复方鳖甲软肝片溶液灌胃,肝纤溶颗粒组给予33.3%肝纤溶颗粒溶液灌胃,均连续给药6周。采用HE染色观察各组肝纤维化程度;TUNEL试剂盒观察各组细胞凋亡情况,计算凋亡指数;放射免疫法检测各组血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CIV);Western blotting法检测肝组织内质网应激相关蛋白(CHOP)、活化转录因子6-p50(ATF6-p50)、活化转录因子6-p90(ATF6-p90)表达。结果与模型组比较,鳖甲软肝片组和肝纤溶颗粒组肝损伤减轻,肝纤维化程度明显降低。与对照组比较,其他三组凋亡指数及血清HA、LN、PCⅢ、CIV水平均升高(P均<0.01);与模型组比较,鳖甲软肝片组和肝纤溶颗粒组凋亡指数及血清HA、LN、PCⅢ、CIV水平均降低(P均<0.01)。与对照组比较,其他三组肝组织CHOP、ATF6-p50表达均升高,ATF6-p90表达均降低;与模型组比较,鳖甲软肝片组和肝纤溶颗粒组肝组织CHOP、ATF6-p50表达均降低,ATF6-p90表达均升高;组间比较P均<0.01。鳖甲软肝片组和肝纤溶颗粒组上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论肝纤溶颗粒可降低急性肝损伤大鼠肝纤维化程度;其作用机制可能是抑制肝组织ATF6-p50、CHOP表达,增加ATF6-p90表达,进而抑制内质网应激引起的肝细胞凋亡。

拉米夫定、阿德福韦酯联合肝纤溶颗粒对慢性乙型肝炎肝纤维化临床研究

目的:研究拉米夫定、阿德福韦酯合用并联合肝纤溶颗粒对慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效。方法:将80例慢性乙型肝炎患者随机分为2组,对照组给予拉米夫定、阿德福韦酯合用,治疗组在对照组基础上,给予肝纤溶颗粒口服,治疗3个月观察并比较2组患者的HBV-DNA及肝纤维化指标。结果:与对照组比较,治疗组肝纤维化水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组总有效率95.0%,对照组总有效率72.5%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:拉米夫定、阿德福韦酯合用联合肝纤溶颗粒对慢性乙型肝炎肝纤维化临床疗效显著,可明显改善患者肝纤维化水平。