小鼠胚胎干细胞不同分化阶段UGT1a1、UGT1a6和mGST1的表达特征

背景:目前对于小鼠胚胎干细胞不同分化阶段的尿普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a1、尿普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a6和微粒体谷肤甘肤S-转移酶1表达特征缺乏研究,报道较少。目的:观察小鼠胚胎干细胞不同分化阶段普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a1、尿普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a6和微粒体谷肤甘肤S-转移酶1的表达特征。方法:分离培养Wistar大鼠胚胎成纤维细胞,制备饲养层细胞。将胚胎干细胞接种于饲养层细胞上,诱导胚胎干细胞分化为肝细胞,采用Western blot检测尿普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a1、尿普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a6和微粒体谷肤甘肤S-转移酶1表达特征,色谱法测定计算微粒体谷肤甘肤S-转移酶1催化活性。结果与结论:在胚胎干细胞在分化为肝细胞过程中,尿普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a1呈现上升趋势;尿普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a6在分化起初并未发现其表达,而在分化第18天后表达相对较高;微粒体谷肤甘肤S-转移酶1在胚胎干细胞分化为干细胞整个过程中均具有较高的表达,但表达丰度均低于成年小鼠干细胞。干细胞分化第18天,肝组织微粒存在微粒体谷肤甘肤S-转移酶1催化活性为7.65μmol/(min·g)。结果表明,胚胎干细胞分化为肝细胞过程中,尿普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a1相对比较稳定,尿普二磷酸葡萄糖醛酞转移酶1a6在分化不同过程中呈现出上升趋势,而微粒体谷肤甘肤S-转移酶1在胚胎干细胞分化为肝细胞过程中表达甚微。