多瘤病毒增强活化子3和红细胞生成素产生肝细胞受体A2在脑胶质母细胞瘤中的作用

目的探讨多瘤病毒增强活化子3(PEA3)、红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EPHA2)在脑胶质母细胞瘤中的作用。方法构建人脑星形胶质母细胞瘤U87细胞基因转染模型,将细胞系分为5组:空白组、PEA3干扰组、PEA3干扰空载组、EPHA2干扰组、EPHA2干扰空载组。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果CCK-8检测细胞增殖结果显示,PEA3干扰组和EPHA2干扰组的细胞增殖率均明显低于空白组[(59.7±1.3)%、(59.5±0.7)%比(67.8±1.3)%](P<0.01或P<0.001),PEA3干扰空载组和EPHA2干扰空载组的细胞增殖率与空白组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。细胞划痕实验结果显示,PEA3干扰组和EPHA2干扰组的划痕愈合率低于空白组[(31.7±1.1)%、(23.0±2.6)%比(42.8±8.8)%],差异均有统计学意义(均P<0.05),PEA3干扰空载组和EPHA2干扰空载组划痕愈合率与空白组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。Transwell检测细胞侵袭能力结果显示,PEA3干扰组和EPHA2干扰组的侵袭细胞数明显少于空白组[(643±20)、(542±165)个比(1225±70)个](均P<0.001),而空白组与PEA3干扰空载组和EPHA2干扰空载组侵袭细胞数比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论干扰PEA3基因和EPHA2基因能明显降低脑胶质母细胞瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力。

促红细胞生成素产生肝细胞受体-配体系统在胚胎着床和发育中的作用

促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular receptor,Eph受体)是受体酪氨酸激酶家族成员之一,通过与配体Ephrin结合发挥生物功能。Eph-Ephrin系统有16个受体成员和8个配体成员,均为膜蛋白结构,受体配体结合后发生细胞双向信号传递,调节胚胎对子宫内膜的粘附和侵入,引导胚胎血管重塑,促进胚胎多个系统发育。本文综述了Eph-Ephrin系统在胚胎着床和发育中的作用。

促红细胞生成素产生肝细胞受体在肝纤维化、肝癌发病机制中的作用

促红细胞生成素产生肝细胞(Eph)受体是受体酪氨酸激酶家族中最大的亚族,参与机体胚胎发育、血管生成、轴突导向等生理过程。近来有研究显示,Eph受体过量表达于肝纤维化及肝癌组织中,并在肝癌的生长、侵袭、转移中发挥重要作用。探讨了Eph受体在肝纤维化及肝细胞癌中的作用机制,提示Eph受体可能是肝纤维化、肝癌发生发展过程中的重要分子。

促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)SAM结构域对激酶结构域的脂质体结合能力与激酶活性的调控研究

促红细胞生成素产生肝细胞受体(Eph receptor)是受体酪氨酸激酶(RTK)家族中最大的亚家族,其介导的双向信号传导对细胞的形态、黏附、运动、增殖、生存及分化都有重要的调控作用。EphA2是Eph受体家族中一个被广泛研究的重要亚型,在白内障和乳腺癌等病理发生过程中发挥了重要作用。既往研究发现:EphA2受体的激酶结构域可结合细胞膜,其激酶活性受磷脂膜的调控,但是相邻的SAM结构域对激酶结构域与脂膜的相互作用以及激酶活性的影响尚不清楚。在此项研究中,通过与磷酸酶PTP1B1-301活性片段共表达的方式,表达、纯化了EphA2受体的胞内段激酶-SAM串联结构域,通过比较胞内段激酶-SAM串联结构域与单独激酶结构域的脂质体结合能力,以及测定对应的激酶活性,发现:EphA2受体胞内段的SAM结构域使其激酶结构域与脂质体(4 mg/mL)的结合能力增强约6倍(P<0.001);磷酸化后的EphA2胞内段激酶-SAM串联结构域结合脂质体(4 mg/mL)的能力比非磷酸化的胞内段激酶-SAM串联结构域提高2.5倍(P<0.05);而结合脂质体后,激酶结构域的激酶活性也被进一步提高,从而形成正反馈。综上所述,本研究的发现提示:EphA2胞内段的酪氨酸激酶结构域与相邻的SAM结构域可形成一个完整的结构功能单位,其激酶活性和脂质体结合能力与单独的激酶结构域相比都形成了明显的差异,我们的这一发现对进一步理解Eph受体家族其他亚型的激酶结构域的活性调控提供了参考与思路。

促红细胞生成素产生肝细胞受体A2基因沉默对人卵巢癌细胞生物学性状的影响

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)基因沉默对人卵巢癌HeyA8-MDR细胞生长、迁移和侵袭的影响。方法利用质粒和脂质体介导转染法,经稳定筛选后,采用Western blot检测细胞EphA2蛋白表达情况,应用CCK-8和Transwell小室侵袭实验,观察EphA2基因沉默对卵巢癌HeyA8-MDR细胞生物学性状的影响。采用SPSS21.0软件进行统计分析。结果与HeyA8-MDR(阴性对照组)、HeyA8-MDR+空白对照组进行比较,HeyA8-MDR+实验组EphA2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),细胞增殖能力、迁移和侵袭能力均受到抑制(P<0.05)。结论EphA2基因沉默可抑制卵巢癌HeyA8-MDR细胞生长、迁移和侵袭,为卵巢癌的治疗提供了新思路。

促红细胞生成素诱导肝细胞受体A2在胃癌作用机制和治疗中的研究进展

目的对促红细胞生成素诱导肝细胞受体A2(EphA2)在胃癌疾病进程、治疗中的作用进行总结,为胃癌的治疗提供新的思路.方法以"促红细胞生成素诱导肝细胞受体A2、胃癌、血管内皮生长因子受体"为中文关键词,以"erythro-poietin-producing hepatocyte receptor A2(EphA2)、gastric cancer、epidermal growth factor receptor(VEGF)"为英文关键词,检索中国知网以及PubMed数据库2000-02-2023-08相关文献共132篇.纳入标准:(1)EphA2的基本结构、致瘤作用及调节机制;(2)EphA2在胃癌中的研究进展.排除标准:(1)内容不相关的文章;(2)相似或重复的内容.最终共纳入文献66篇.结果肿瘤中的EphA2信号转导通路复杂,大致可分为典型信号通路和非典型信号通路,EphA2在胃癌高表达,EphA2参与胃癌细胞增殖、胃癌的上皮-间质转化和胃癌血管生成过程,EphA2在促进血管生成方面与血管内皮生长因子受体具有协同作用,通常可以通过降低EphA2的表达、促进EphA2的降解,以及阻断EphA2的激活等途径来抑制EphA2的促肿瘤作用.结论EphA2在胃癌中的作用复杂,随着研究的深入,EphA2和血管内皮生长因子受体的双靶点阻断,在胃癌的治疗中可能有更大的作用.

促红细胞生成素产生肝细胞受体A2在儿童脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2（EphA2）在儿童脑胶质瘤中的表达水平及其意义。方法收集2009年1月至2013年3月在郑州大学第五附属医院住院的具有明确病理分级的儿童胶质瘤标本78例为胶质瘤组，其中低级别组36例（Ⅰ-Ⅱ级）、高级别组42例（Ⅲ～Ⅳ级），另收集脑外伤行内减压去除的儿童脑组织标本33例为对照组。分别采用反转录（RT）-PCR、Westernblot和免疫组织化学法测定胶质瘤组和对照组中EphA2mRNA及蛋白表达水平。结果1．RT—PCR和Westernblot显示，EphA2mRNA在对照组脑组织中不表达，而在胶质瘤组中均呈高表达，差异有统计学意义（F=36．271，P〈0．05）；EphA2蛋白在高级别儿童胶质瘤组表达水平显著高于低级别儿童胶质瘤组，差异有统计学意义（F=42．839，P〈0．05）。2．免疫组织化学法显示，EphA2在对照组脑组织中呈阴性表达，在低级别胶质瘤组中的阳性表达为88．57％，在高级别胶质瘤组中的阳性表达为100．00％，且胶质瘤的级别越高，EphA2的阳性表达分布越强，差异有统计学意义（Z=4．962，P〈0．05）。结论EphA2在儿童脑胶质瘤中呈高表达，且与胶质瘤的病理分级相关，可能参与儿童脑胶质瘤的发生和进展。

裸鼠高转移性胃癌细胞亚系的筛选及其肝细胞生长因子受体表达

目的 筛选具有较高转移能力的胃癌细胞亚系并从该细胞亚系肝脏重要生长因子受体表达变化这一角度初步探讨肝转移能力与肝脏微环境之间的关系。方法 通过复制裸鼠胃移植瘤模型及对该模型所产生的肝转移灶进行原代培养 ,获取具有较高转移潜能的胃癌细胞亚系 ,并应用免疫组化方法对母系与亚系细胞中重要肝细胞生长因子受体(bFGFR ,TGFβR1,c Met)表达的情况进行检测。结果 通过两轮筛选 ,从母系SGC 790 1中筛选到高转移潜能胃癌细胞亚系SGC 790 1LM2 。该亚系中c Met表达同母系相比有显著增高。结论 高转移胃癌细胞亚系的筛选有利于胃癌肝转移的进一步研究 ,c Met表达可能有助于SGC 790 1LM2

肝细胞生长因子受体c-met在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨骨肉瘤组织中肝细胞生长因子受体c-met蛋白的表达情况,分析其临床意义及与预后的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测行手术的35例骨肉瘤及13例骨样骨瘤患者标本肝细胞生长因子受体c-met的表达,并分析其与临床因素和预后的关系。结果:骨肉瘤组织中肝细胞生长因子受体c-met的阳性表达率为80%(28/35),而在骨样骨瘤中的表达率为7.7%(1/12),两者比较显著差异(P<0.01);结合临床资料分析,其表达与患者性别、年龄、发病次数、肿瘤体积、病理分型无关(P>0.05),而与临床分期、有无转移有关(P<0.05)。结论:C-met可能在骨肉瘤细胞侵袭、转移的过程中起重要作用;肝细胞生长因子受体c-met可以作为骨肉瘤诊断和预测转移的指标。

肝细胞生长因子受体的shRNA抑制胶质瘤生长的体内外研究

目的:探讨肝细胞生长因子受体(c-metprotooncogene,c-Met)的RNA干涉(RNAi)技术在体内外对U251细胞生长抑制作用。方法:PCR法获得人U6启动子及带有c-Met反向互补靶序列的片段HU6shmet;利用腺病毒载体将其传递至U251细胞;应用MTT法、流式细胞术和Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞转导前后的生物学行为。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察腺病毒载体介导shRNA基因治疗对U251细胞生长的抑制作用。对肿瘤组织应用免疫组化的方法进行c-Met和增殖细胞核抗原(PCNA)表达比较。结果:MTT法分析显示rAdUshmet2转导组细胞生长抑制率为70%;与对照组和rAdUsicon转导组比较,细胞周期分析结果表明rAdUshmet2转导组G0～G1期细胞数没有明显变化,进入S期的细胞数较对照组减少了12.6%～12.9%,而进入G2期细胞则增加了10.6%～l1.8%。Matrigel基质生长实验显示对照组和rAdUsicon转导组细胞呈正常形态贴壁生长,而rAdUshmet2转导组细胞不能贴壁生长,呈团块状簇集生长。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示rAdUshmet2显著抑制皮下肿瘤生长,组织病理学分析显示治疗组c-Met表达下降、PCNA标记指数降低。结论:靶向c-Met的RNAi技术在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用。因此,shRNA表达腺病毒载体介导的基因治疗可以成为胶质瘤靶向性c-Met治疗的新策略。

调肝导浊汤对实验性动脉粥样硬化家兔肝脏脂质含量及体外培养肝细胞脂蛋白受体的影响

目的 :观察中药调肝导浊汤对家兔实验性AS模型肝脏脂代谢及体外培养肝细胞膜脂蛋白受体的影响 ,探讨中药防治AS的机制。方法 :高胆固醇饮食饲喂家兔 10W造成AS模型 ,给药 6W结束实验 ,取肝脏匀浆测定TC、TG变化。此外 ,体外培养大鼠肝细胞 ,原位杂交法计数膜LDL受体阳性表达。结果 :调肝导浊汤可有效降低肝组织脂质含量 ,中药可以显著增强肝细胞膜LDL受体mRNA表达。结论 :调肝导浊汤具有良好的保护肝脏、调整脂代谢的作用 ,从而防治AS。

腺病毒载体介导的RNAi对胶质瘤U251细胞肝细胞生长因子受体表达的影响

目的探讨腺病毒载体介导的RNA干扰技术对胶质瘤细胞肝细胞生长因子(HGF)受体(c-Met)的表达和细胞凋亡的影响。方法用PCR法获得人U6启动子及带有c-Met反向互补靶序列的片段HU6shmet;利用腺病毒载体将其传递至U251细胞;分别采用RT-PCR和Westernblot方法检测U251细胞的c-MetmRNA和蛋白的表达,Annexin-V-PI双染法流式细胞术检测细胞的凋亡状况。结果获得了带有人U6启动子及c-Met反向互补靶序列的重组腺病毒载体rAdUshmet1和rAdUshmet2。转导了rAdUshmet1和rAdUshmet2的U251细胞的c-MetmRNA和蛋白相对表达量较未转导腺病毒及转导了rAdGFP和rAdU-sicon的U251细胞均有明显下降(P<0.01),rAdUshmet1和rAdUshmet2转导的U251细胞凋亡率分别为(13.5±4.2)%和(28.2±5.6)%,明显高于未转导腺病毒的及rAdGFP和rAdUsicon转导的U251细胞凋亡率(P<0.05)。结论腺病毒载体rAdUshmet通过抑制HGF受体c-Met表达,能在一定程度上阻断HGF-c-Met信号通路,有可能成为对胶质瘤进行基因治疗的有效载体。

胃癌组织中肝细胞生长因子受体表皮生长因子受体人类表皮生长因子受体-2基因表达水平与晚期胃癌化疗效果及患者预后的关系

随着人群生活饮食习惯的改变,胃癌的发病率及病死率逐年上升,胃癌根治术是目前唯一可能治愈胃癌的手段。但是目前仍有大多数胃癌患者确诊时失去手术价值,化疗成为其主要治疗方式之一。

肝细胞生长因子受体及血管内皮生长因子在大肠癌组织中的表达与肝转移的相关性

目的研究肝细胞生长因子受体(HGFR)及血管内皮生长因子(VEGF)与大肠癌肝转移的关系,探讨临床预测大肠癌早期肝转移的客观指标。方法应用免疫组织化学法检测60例大肠癌标本中HGFR及VEGF的表达情况;随访统计患者是否发生肝转移癌。结果大肠癌组织中VEGF的表达与HGFR的表达有显著相关性(r=0.401,P<0.05);联合检测二者均阳性及阴性分别有90.0%及1.6%发生肝转移癌,差异有统计学意义(P<0 05)。结论联合检测HGFR及VEGF预测大肠癌肝转移,可显著提高预测的灵敏度及特异性,对于大肠癌早期肝转移监测具有很高的临床价值。

肝细胞生长因子及受体、XIAP在卵巢癌组织中的表达及相关关系的探讨

目的探讨肝细胞生长因子及受体(HGF、c-Met)、XIAP基因在卵巢癌中的表达及相关关系。方法采用EnVision免疫组织化学法检测在30例卵巢癌组织中HGF、c-Met及XIAP的表达情况。结果HGF、c-Met、XIAP的表达与临床分期有关(P=0.000、P=0.001、P=0.008),HGF、c-Met、XIAP的表达与年龄、病理分型、淋巴转移均无明显相关性;HGF与XIAP呈正相关(r=0.853,P=0.000)。结论HGF、c-Met与XIAP在卵巢癌组织中呈高表达,HGF与XIAP呈正相关,可作为卵巢癌早期临床诊断的参考指标。

胃腺癌中肝细胞生长因子、肝细胞生长因子受体、血管内皮生长因子-C和-D表达的关系

淋巴结转移是肿瘤进展的重要因素,近来相关研究已证实了血管内皮生长因子(VEGF)-C、是促进淋巴管生成的因子〔1〕。肝细胞生长因子(HGF)是一种多功能的细胞因子,其生物学活性由肝细胞生长因子受体(C-met)介导,二者协同参与肿瘤细胞的增殖和运动〔2〕。目前研究显示HGF/C-met是促进肿瘤血管生成的因子之一〔3〕,而二者对VEGF-C、-D介导的淋巴管生成作用尚不明确。本文关注胃腺癌中HGF和C-met蛋白的表达,关注二者与VEGF-C、-D的关系。

风湿性心脏病慢性心房颤动患者右心耳肝细胞生长因子及其受体的表达

目的观察风湿性心脏病慢性心房颤动(简称房颤)患者右心耳肝细胞生长因子(HGF)及受体(c-Met)表达的变化。方法将术中获取右心耳的27例风湿性瓣膜病患者分为2组,其中窦性心律(简称窦律)组8例,慢性房颤组19例,另选先天性心脏病患者8例(均为窦律)作为对照组,以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照基因,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RealtimePCR)技术测定心房组织中HGF、c-MetmRNA的含量,用免疫组织化学方法评价HGF及c-Met的蛋白表达情况。结果与对照组和窦律组比较,慢性房颤组HGF表达显著下降(P<0.01)。而风心窦律组与对照组无差异。c-MetmRNA的表达三组无差异。结论慢性房颤患者心房组织HGF的表达显著降低,而其受体c-Met在房颤患者心房组织中未见明显变化。

腹股沟疝与降钙素基因相关肽受体及肝细胞生长因子受体关系分析

腹股沟疝是一种常见的先天性畸形，其发病机制尚未阐明清楚，而患儿鞘状突未闭是目前较为公认的发病原因之一。临床治疗腹股沟疝的主要方法是手术治疗，但是越来越多的数据显示手术给患儿带来较多的并发症，如阴囊血肿、输精管损伤、睾丸萎缩等，且术后约4％左右的患儿会出现疝复发。所以寻找新的非手术治疗方法是临床治疗腹股沟疝的新方向。

人肝细胞生长因子受体启动子荧光素酶表达载体的构建及活性测定

目的构建含人肝细胞生长因子受体(C-MET)启动子-223^+60区域的荧光素酶报告基因质粒,并测定其在卵巢癌细胞株中的活性。方法应用PCR法扩增获得含有人C-MET基因启动子-223^+60区域的DNA片段,将其连接至荧光素酶质粒pGL3-Basic中,得到pGL3-C-MET-Promoter重组质粒;经限制性内切酶酶切及测序得以鉴定;将该质粒转染4株卵巢癌细胞,检测细胞中荧光素酶的活性。结果双酶切及测序结果证实pGL3-C-MET-Promoter重组质粒插入片段序列正确,克隆的C-MET基因片段具有启动子活性,在卵巢癌细胞株OVCAR3细胞中的活性最高。结论成功构建了pGL3-C-MET-Promoter报告基因重组质粒,为进一步研究C-MET对卵巢癌生物学行为的影响奠定了基础。