人工肝生物材料人肝细胞系CL-1的微载体培养

目的使用微载体培养人肝细胞系ＣＬ１，并观察细胞的转化及合成功能．方法使用Ｃｙｏｔｄｅｘ３微载体进行人肝细胞系ＣＬ１的高密度培养，应用光镜及扫描电镜于培养１，３，５，７，９ｄ动态观察细胞的生长情况，并同时检测培养系统的安定转化及清蛋白合成量．结果培养７ｄＣＬ１细胞密度达到最高，为２１６×１０９／Ｌ；安定转化量最高为６１９μｇ；清蛋白合成量最高为７８μｇ．结论使用微载体培养高分化人肝细胞系可达到较高的密度，且具有较好的生物转化及合成功能。

肝脏研究与临床中的一个新领域:陷窝细胞

１９７６年，Ｗｉｓｅ在肝脏的电镜研究中发现了一种尚不认识的细胞，由于此细胞内具有颗粒，类似于葡萄内的核，在荷兰语里称之为ｐｉｔ，中文翻译为陷窝细胞（ｐｉｔｃｅｌ）．该细胞的细胞器往往位于核的一侧，而另一侧为透明的胞质，除了常见的细胞器，陷窝细胞内可见...

高效分离屠宰成年猪肝细胞用于生物人工肝方法的建立

【目的】探讨氧合dispase及胶原酶组酶消化法从屠宰成年猪肝脏高效分离肝细胞的方法及分离肝细胞的生物活性。【方法】部分肝叶逆行灌注、氧合组酶dispase及胶原酶消化、密度梯度离心法分离、纯化肝细胞 ,并对其生物活性进行检测。【结果】肝组织细胞的收获量达10× 10 6 个 / g ,细胞平均存活率可达 92 5 % ,且无泡状变性的发生 ,原代培养生物活性与原代培养鼠肝细胞一致 ,随时间的延长而减退。【结论】氧合组酶dispase及胶原酶消化、密浓度梯度离心法自屠宰成年猪分离肝细胞产量高、且保持着良好的生物活性 ,可作为生物人工肝的理想肝细胞源用于肝脏终末性疾患的治疗。

骨髓源性肝干细胞的确认及定向分化的实验研究

目的 确定骨髓源性肝干细胞的表面标记 ,体外培养诱导其分化为肝细胞。方法 采用流式细胞仪检测多种大鼠肝损伤模型骨髓中干细胞标记的细胞群体的数量变化 ,寻找可能的肝干细胞 ,免疫磁珠分离各骨髓干细胞标记的细胞群体 ,进行体外培养诱导分化 ,观察细胞形态的变化 ,免疫组化技术检测清蛋白 (白蛋白 ) ,AFP ,CK 8/ 18等肝细胞标记的表达。结果 各模型大鼠骨髓内 β2微球蛋白阴性 (β2 m- )细胞显著增高 ,体外培养经诱导后呈多角形细胞表现 ,清蛋白 ,AFP ,CK 8/ 18表达阳性。其他干细胞类型细胞数量变化小 ,体外培养未见肝细胞样变化。结论 β2 m- 细胞的数量随肝损伤而变化 ,在体外具有向肝细胞分化的能力 。

有氧运动对胰岛素抵抗大鼠肝细胞中蛋白激酶B表达的影响

目的:探讨有氧运动对胰岛素抵抗大鼠肝细胞中蛋白激酶B表达的影响,从而从基础研究上证明了运动对改善糖尿病胰岛素抵抗的作用。方法:实验选用30只清洁级Wistar雄性大鼠,将30只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和运动干预组,每组10只。高脂喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型,Western印迹法测定各大鼠肝细胞中蛋白激酶B表达水平。结果:①高脂喂养成功建立胰岛素抵抗模型,高脂喂养大鼠胰岛素敏感指数下降(P<0.01)。②模型组肝细胞中蛋白激酶B表达水平(7.34±0.19)低于对照组(8.97±0.20)(P<0.01)。运动干预组蛋白激酶B表达水平(7.63±0.18)明显高于模型组(7.34±0.19)(P<0.01)。结论:有氧运动能改善胰岛素抵抗,肝细胞中蛋白激酶B表达水平与胰岛素抵抗可能有关。

聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子对异种移植猪肝细胞凋亡的抑制作用

目的:观察聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子对猪肝细胞异种移植后移植肝细胞凋亡的抑制作用。方法:实验于2004-03/2005-03在南通大学神经再生实验室完成,选用中国实验用小型猪(n=5)及SD大鼠(n=123)。①实验分组及方法:采用原位胶原酶循环灌注法分离猪肝细胞。D-氨基半乳糖腹腔内注射制作大鼠急性肝衰竭模型,按随机数字表法分成3组(n=41),分别在单纯肝细胞移植组、胶原肝细胞移植组、纳米胶原肝细胞移植组急性肝衰竭大鼠腹腔内移植震荡培养24h的猪肝细胞悬液、Ⅰ型胶原凝胶固定培养24h的猪肝细胞、Ⅰ型胶原凝胶包埋的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子培养24h的猪肝细胞。②实验评估:观察移植肝细胞的病理变化、培养和移植肝细胞的凋亡率、坏死率及活率。结果:①各组移植肝细胞的活率及凋亡率:纳米胶原肝细胞移植组移植肝细胞的存活时间最长。肝细胞体外培养1d后,3组肝细胞均存在不同程度的凋亡,以单纯肝细胞移植组凋亡率最高,纳米胶原肝细胞移植组最低。胶原肝细胞移植组、纳米胶原肝细胞移植组的移植肝细胞凋亡率随着移植时间的延长呈缓慢上升趋势,但较单纯肝细胞移植组为低;移植后1,2d,胶原肝细胞移植组、纳米胶原肝细胞移植组的移植肝细胞活率明显高于单纯肝细胞移植组(P<0.05);移植后3,5d时,纳米胶原肝细胞移植组移植肝细胞凋亡率明显低于胶原肝细胞移植组(P<0.05),活率则明显高于胶原肝细胞移植组(P<0.05)。②各组移植肝细胞的坏死率:移植后1d,胶原肝细胞移植组移植肝细胞坏死率明显上升;移植后2d,3组肝细胞坏死率均有不同程度的上升,胶原肝细胞移植组、纳米胶原肝细胞移植组明显高于单纯肝细胞移植组(P<0.05),胶原肝细胞移植组高于纳米胶原肝细胞移植组(P<0.05)。移植后3d,单纯肝细胞移植组肝细胞坏死率大幅度上升,胶原肝细胞移植组、纳米胶原肝细胞移植组无明显变化,但显著低于单纯肝细胞移植组(P<0.05),胶原肝细胞移植组、纳米胶原肝细胞移植组之间差异无显著性意义(P>0.05)。移植后5d,胶原肝细胞移植组、纳米胶原肝细胞移植组肝细胞坏死率进一步上升,纳米胶原肝细胞移植组显著低于胶原肝细胞移植组(P<0.05)。结论:聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子有抑制培养和移植肝细胞凋亡、提高移植肝细胞活率的作用,聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子和Ⅰ型胶原结合可增强抗培养和移植肝细胞凋亡的能力,延长移植肝细胞的生存时间。

高表达过氧化物酶体增殖子激活受体γ诱导小鼠原代肝细胞发生脂肪变性

目的：研究外源过氧化物酶体增殖子激活受体（ PPAR ）γ高表达对小鼠原代肝细胞脂肪变性的影响。方法：从5～6周龄C57BL／6J小鼠分离培养原代肝细胞，分别用LacZ腺病毒（ Ad／LacZ）或PPARγ腺病毒（ Ad／PPARγ）感染细胞48 h，油红O染色检测原代肝细胞脂肪积聚情况；实时定量PCR和蛋白质印迹法分析PPARγ、成脂相关基因aP2和CideA等mRNA和蛋白表达水平。结果：原代分离培养的小鼠肝细胞透光度好，胞核圆且透亮，细胞呈圆形生长，有双核，连接成片状或岛状。用Ad／LacZ或Ad／PPARγ感染48 h后，Ad／LacZ组肝细胞几乎无脂肪积聚，而Ad／PPARγ感染肝细胞中有大量脂肪滴沉积。外源PPARγ刺激作用下，肝细胞中PPARγ、aP2、FGF21、CideA mRNA表达增加，而adiponectin mRNA表达下降（均P＜0.05）。 Ad／PPARγ感染后，PPARγ和aP2蛋白表达也增加。结论：高表达PPARγ诱导小鼠原代肝细胞脂肪变性和脂肪相关基因表达。

微囊化人肝细胞移植对小鼠急性肝衰竭的治疗作用

目的:评价微囊化人源性肝细胞腹腔内移植对四氯化碳诱导的小鼠急性肝功能衰竭的治疗作用,为微囊化异种肝细胞在肝细胞移植的临床应用提供实验依据。方法:实验于2005-02/2006-01在中国科学院大连化学物理研究所,生物技术部生物医学材料工程实验室完成。①采用自制静电液滴发生器制备海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠胶囊,应用四氯化碳腹腔注射建立急性肝功能衰竭动物模型,以谷草转氨酶、谷丙转氨酶高出正常值10倍以上作为判定肝功能衰竭的具体标准。②取造模成功的急性肝衰竭小鼠90只,随机分为空囊组、微囊化细胞组、游离细胞组,30只/组。各组均于注射四氯化碳24h后进行移植实验:空囊组腹腔注射含有空囊的生理盐水,微囊化细胞组腹腔注射微囊化肝细胞悬液,游离肝细胞组腹腔注射游离肝细胞悬液,均1mL/只。③每组随机取出10只用于观察8d存活率,其余小鼠分别于移植后1,2,4,8d经眼球后静脉丛采血,进行肝功能检测谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平,每组5只/次。并回收微胶囊观察其形态,对回收的微囊化细胞进行组织切片细胞活性观察。结果:成功建立急性肝衰竭模型的90只小鼠全部进入结果分析。①移植后不同时间点各组小鼠血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平的变化:移植后第1,2天,微囊化细胞组的两种转氨酶水平均显著低于游离细胞组和空囊组(P<0.05)。到移植后第8天各组间转氨酶水平基本相似(P>0.05)。②各组小鼠移植8d存活率的比较:微囊化细胞组小鼠的存活率显著高于空囊组、游离细胞组(90.0%,50.0%,60.0%,P<0.05)。③腹腔移植微胶囊的形态及囊内细胞活性观察结果:回收的微胶囊形态完整光滑,未见明显的纤维包裹,囊内细胞呈圆形,细胞膜完整光滑,胞浆饱满,仍有90%以上肝细胞存活。结论:微囊化人源性肝细胞腹腔内移植可以提高药物诱导急性肝衰竭小鼠的存活率,改善急性肝衰小鼠的肝脏功能。提示生物微胶囊可以有效阻断免疫排斥作用,保护移植的肝细胞,有利于其发挥生物功能。

TGF-β_1 siRNA对肝星状细胞Smad3、Smad7 mRNA表达的影响

【目的】观察表达转化生长因子(TGF)小干扰RNA(siRNAs)的siTGF质粒,对肝星状细胞激活信号的影响。【方法】通过构建表达TGF之siRNAs的siTGF质粒,将6μg siTGF转染HSC-T6细胞质粒后,分别在d1,d3,d5提取细胞总mRNA,并收集细胞上清液,采用RT-PCR检测其Smad3、Smad7的mRNA的表达变化,放射免疫法测上清液Ⅲ型前胶原含量变化。【结果】smad3s、mad7的mRNA在d1,d3,d5分别下调为0%、61%、70%和0%、15%、16%,上清液Ⅲ型前胶原含量为0%、(42±5)%(、55±7)%。【结论】TGF-β1siRNA下调肝星状细胞激活信号,减少胶原合成,表明TGF-β1siRNA有望成为抗肝纤维化新的手段。

兔肝细胞的脾脏移植和定位初步研究

【目的】探讨肝细胞体内移植的途径和定位分析。【方法】从新西兰白兔的肝脏中分离获得原代肝细胞，经纯化培养后经脾动脉插管或注射移植到脾脏，在不同时间注射肝细胞特异性增强剂（扎贝葡胺），观察移植后脾脏核磁信号的变化和移植肝细胞的存活，并分析细胞移植前后肝功能变化。【结果】肝细胞移植入脾脏一段时间后受损肝功能明显改善。脾脏内可见肝细胞信号，d，信号最强，以后逐渐衰退并持续14d以上。【结论】肝细胞脾内移植是可行的；应用肝细胞增强剂进行MRl分析可成为肝细胞移植无创伤检测手段。

乳猪肝细胞的分离培养及其功能

目的探讨乳猪肝细胞分离和培养的条件及其功能．方法用门静脉插管原位灌注结合胶原酶消化法分离乳猪肝细胞，应用条件培养基对其进行体外培养，观察其形态、增殖。分化和功能等方面的变化．结果发现乳猪肝细胞的得率为（７．２±２．２）×１０９／肝，活率为９５．０％±３．０％，体外培养的乳猪肝细胞，在长达９０ｄ的培养时间内能较好地维持其形态，原代和传代培养的乳猪肝细胞其ＤＮＡ和蛋白质的合成及ＡＬＴ和Ｇ—６—ＰＤ的活性相比，虽有变化，但趋势相同，两者无统计意义（Ｐ＞０．０５）．结论体外培养的乳猪肝细胞，在一定的培养条件下，能维持其生物学特性。

生物人工肝支持系统中细胞材料的选择

学术背景:以培养肝细胞为基础的生物人工肝支持系统是治疗肝衰竭和重型肝炎的重要方法之一,装有细胞材料的生物反应器则是其重要组成部分,而理想的生物人工肝细胞材料应具备成熟肝细胞的所有功能。目的:了解近年来国内外有关生物人工肝细胞材料的研究情况和最新进展。检索策略:主要检索1994-01/2007-06美国国立图书馆网站(PUBMED)、国内全文网站康健西文生物医学期刊文献数据库和中文CHKD网站有关生物人工肝细胞材料的文献,主要为英文检索,辅以中文。关键词为人工肝(liver,artificial)和/或肝细胞(Hepatocytes),干细胞(stemcell),肝细胞系(Livercellline)和永生化肝细胞(immortalization hepatocytes)。检索到685篇文献,不采用未发表的文章。经初步筛查,排除研究目的不同及内容重复的文献,详细阅读27篇。文献评价:所选文献主要来源于Hepatology,Journal of Artificial Organs,Gastroen terology,Annals of Surgery,Tissue Engineering,Journalof Hepatology,Biomaterials等著名杂志,主要为论著。资料综合:目前国内外用于生物人工肝的细胞主要有以下几种:①成人肝实质细胞:主要体现在安全性好,细胞生物学功能相同,最大障碍是来源匮乏,活力难以长时间维持。②猪肝细胞:是生物人工肝支持装置中应用最多的细胞材料,目前已进入Ⅱ/Ⅲ期临床研究,但在使用过程中需密切注意免疫反应和内源性反转录病毒感染的问题。③肝细胞株:是重要的生物人工肝细胞材料之一,来源容易。依靠其获得方法不同,可分为肝肿瘤源性、经传代建立以及病毒转染后的细胞株。④肝干细胞:是非常有潜力的细胞材料,可分为肝源性肝干细胞和非肝源性肝干细胞。结论:目前应用于生物人工肝临床研究的肝细胞主要有猪肝细胞和肝肿瘤细胞株,各有优缺点,永生化人肝细胞、肝干细胞等能否应用于临床,仍需深入探究。

核糖体S6激酶对肝星状细胞内胶原表达的调控

目的:探讨核糖体S6激酶(p90RSK)调节肝星状细胞(HSC)Ⅰ型胶原表达的作用.方法:将设计的p90RSK特异性siRNA克隆至真核表达载体pAV-U6+27中,构建p90RSK的RNA干扰真核表达载体pAV-RSKi.将构建的pAV-RSKi通过脂质体瞬时转染HSC-T6,分别采用实时定量聚合酶链式反应和Western Blot方法检测细胞的p90RSK和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达.将p90RSK的真核表达质粒(pMT2-RSK1)和pAV-RSKi分别与Ⅰ型胶原启动子荧光素酶报告基因质粒(pGL3-COL1A1)共转染原代HSC,48h后检测细胞的荧光素酶活性.结果:构建的pAV-RSKi能够有效抑制HSC-T6中p90RSK mRNA和蛋白表达,与对照组相比较分别减少了(70.20±4.04)%和(89.10±5.26)%(P<0.01).HSC-T6中Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白的表达,与对照组相比较分别减少(61.80±3.96)%和(98.50±7.01)%(P<0.01).各组转染pMT2-RSK1,pAV-RSKi和空载质粒的HSC中,Ⅰ型胶原启动子活性之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论:p90RSK参与了HSC中胶原的表达调控,可能成为肝纤维治疗的新靶点.

Cx43基因修饰对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移能力的影响

目的探讨Cx43基因对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、细胞周期及细胞迁移等方面的作用。方法采用LipofectamineTM2000转染的方法将重组表达质粒p Bud CE4.1-Cx43转染人肝癌SMMC-7721细胞(实验组),对照组细胞仅转染空载质粒p Bud CE4.1,空白组为未转染的SMMC-7721细胞。通过RT-PCR、Western blot检测转染后Cx43的mRNA和蛋白的表达情况,划痕荷载染料传输实验检测细胞间通讯功能,流式细胞仪检测细胞周期并通过CCK-8增殖实验、细胞划痕损伤实验、小室侵袭实验评价转染Cx43基因对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。结果实验组Cx43 mRNA和蛋白表达高于对照组和空白组,差异有统计学意义(均P<0.05)。实验组细胞传递的荧光强度高于对照组和空白组(P<0.05),实验组细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少(P<0.05)。实验组与对照组和空白组比较,SMMC-7721细胞的增殖受到抑制(P<0.05),尤以72小时为著。实验组迁移能力下降,细胞侵袭能力下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论转染Cx43基因能够抑制人肝癌SMMC-7721细胞迁移的能力,并可以抑制肿瘤细胞增殖。

肝细胞核仁组成区嗜银蛋白死后不同时间形态改变的图像分析

用图像分析方法观察分析豚鼠死后不同时间肝细胞核仁组成区嗜银蛋白（ＡＧＮＯＲ）形态的变化，探讨它与死后经过时间的关系。经图像分析的灰度测量结果表明：ＡｇＮＯＲ的死后变化与死亡时间有密切的关系。随着死后经过时间的延长，ＡｇＮＯＲ颗粒形态越来越不清楚。灰度变化的量化指标提示。图像分析ＡｇＮＯＲ的形态改变，可以作为推断死亡时间的一个有价值的指标。

骨髓干细胞向肝系细胞分化的研究进展

骨髓干细胞主要有两大类,一类是造血干细胞,另一类是骨髓间充质干细胞。近年研究表明,这两类干细胞在一定条件下可分化为多种组织细胞,包括肝系细胞。分化为肝系细胞的研究为肝脏疾病的治疗提供了新的细胞来源。

肝细胞移植免疫排斥反应的研究与应用

学术背景:肝细胞移植有望成为治疗急慢性肝衰竭及肝脏相关遗传性疾病的一种新方法。近年来肝细胞移植研究取得了重大进展,但免疫排斥反应仍是制约该技术进一步发展的主要原因之一。目的:综合分析肝细胞移植后免疫排斥反应的研究进展。检索策略:由两位作者应用计算机检索中国知网(www.cnki.net)及Medline(www.pumed.com)1998-01/2007-06有关肝细胞移植免疫排斥反应的文献,中文检索词"肝细胞,移植,排斥";英文检索词"hepatocyte,transplan tation,rejection"。初检得到281篇文献,包括中文109篇,英文172篇。排除研究目的与肝细胞移植免疫排斥反应无关者72篇,内容重复性的文献41篇,保留168篇中英文文献进一步分析。其中动物实验和细胞学实验103篇,综述类文献28篇,临床研究37篇。按纳入标准筛选,共37篇文献满足全部纳入标准。凡同种或异种肝细胞培养、移植及生物人工肝研究中与免疫排斥反应相关的文献均纳入文献综述范围,与此无关者均排除。不采用未发表的文献。文献评价:所有文献均为随机对照试验。资料综合:肝细胞移植免疫排斥反应是影响肝细胞移植效果的重要因素。随着细胞生物学、移植免疫学的发展,肝细胞移植免疫排斥反应的机制将会进一步得到阐明。各种抑制免疫排斥的手段,尤其基因工程技术、纳米材料的应用有可能在肝细胞移植后抗原的识别、活化和发生效应的环节中以及抑制移植细胞的凋亡方面起到一定的作用。结论:肝细胞移植目前面临的主要问题是移植后的免疫排斥反应,其具体机制仍有待于进一步阐明。现阶段采取的抑制肝细胞移植后免疫排斥的方法均有一定的局限性,更有效的方法有待于继续探索。

蛋白质组学在肝细胞和细胞器水平及肝组织工程方面的研究进展

目的:利用蛋白质组学对肝脏进行研究发展迅速,本文分别就肝细胞整体水平、细胞器水平上的蛋白组学分析、肝蛋白组表达的差异性以及存在的相关问题进行综述。资料来源:应用计算机检索PUBMED1991-01/2006-01期间的相关文章,检索词为“liver,proteomics,proteome,tissueengineering”,并限定文章语言种类为English。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与肝细胞与蛋白组学研究相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到222篇相关文献,36篇文献符合纳入标准,排除的186篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的36篇文献中,18篇涉及肝细胞整体水平,6篇涉及细胞器水平上的蛋白组学分析,12篇涉及肝蛋白组表达的差异性。资料综合:蛋白质组指在特定时间和条件下,某细胞、组织或者器官内的全部的蛋白质表达,利用蛋白质组学的观点对肝进行研究进展迅速。本文综述了近年来蛋白质组学在肝的蛋白质水平研究方面的最新进展,利用二维凝胶电泳技术和质谱技术,并结合细胞培养、细胞器分离等的最新实验技术,分别在细胞水平、细胞器水平上对相关的蛋白进行了分析和确认,并对某些蛋白进行了跟踪研究,明确蛋白种类及生理作用;同时,对肝脏不同的病理生理状态下以及多种药物应用前后的不同的蛋白表达进行了研究,寻找并确定差异表达蛋白,对病因、疾病进程以及药物筛选等方面提供了帮助。同样起步于上世纪九十年代初的肝组织工程研究也进展迅速,由于肝代谢功能复杂,目前如:肝种子细胞、支持材料、细胞的培养、植入后血管长入及肝细胞代谢产物的排泄、胆道形成等问题许多亟待解决。结论:与疾病相关的差异表达的蛋白质,可作为新药物的靶点,也可能成为疾病出现的标志物。肝是毒性物质代谢的主要部位,高分辨率二维电泳和质谱的应用,为观察用药后差异蛋白质的表达提供有效手段。组织工程的发展依靠了生命科学相关学科以及基础医学、临床医学研究的最新成果,理论上更加合乎道德伦理观的要求。

肝脏枯否细胞膜信使传递功能的增龄性改变及其防治

目的肝脏枯否细胞（ＫＣ）老化时功能吞噬和分泌功能有明显异常，细胞膜对外部信号的准确传递是细胞功能正常的基础．方法以内毒素（ＬＰＳ）和血小板激活因子（ＰＡＦ）刺激后枯否细胞膜磷酸肌醇转化、细胞内钙离子（［Ｃａ＋＋］ｉ）反应及前列腺素Ｅ２（ＰＣＥ２）分泌能力为指标探讨了老化对ＫＣ膜磷脂功能的影响及维生素Ｅ（ＶＥ）的防治作用．结果①ＫＣ总磷酸肌醇含量随月龄增加逐渐降低，１８和２４月龄组明显低于６月龄组（３９５±４３，３０８±４４ｖｓ４８５±４３ＣＰＭ×１０００，Ｐ分别＜００５和００１）．与对照组比较，ＶＥ治疗组（ＶＥＧ）１８和２４月龄组总磷酸肌醇含量均有明显改善．②ＫＣ基础［Ｃａ］ｉ随月龄增加而增加，并以２４月龄组为最显著分别为（１６４３±２０８ｖｓ１０５７±１６１ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜００１）．（ＰＡＦ）作用后各组ＫＣ［Ｃａ］ｉ无明显差异，但１８和２４月龄组的净增值明显降低，ＶＥ对此具有明显的改善作用．③２４月龄组ＫＣＰＣＥ２的基础分泌能力较６月龄组明显降低（３１５９４±２６５４ｖｓ９２１７８±１０２４６ｐｇ／ｍｌ，Ｐ＜００５），对ＬＰＳ刺激的反应性及耐受性均明显降低，ＶＥ治?