非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏肝细胞核因子-4α的表达

目的:探讨高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)肝细胞核因子4α(HNF-4α)mRNA的表达及在NAFLD发病机制中的作用。方法:24只Wistar大鼠随机分为模型组和对照组(各12只),通过高脂饮食建立NAFLD大鼠模型,并在造模第8、12周末分批处死大鼠,同期设正常饮食组作为对照组。检测大鼠血清甘油三酯(TG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙氨酸转氨酶(ALT)及内毒素(ET)等指标,测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素抵抗指数(IRI);采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肝脏HNF-4αmRNA的表达;取肝标本做HE染色,观察其病理变化。结果:模型组大鼠肝脏HNF-4αmRNA表达量于第8周时开始降低,与同期对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);同时血清TNF-α、IRI及ET与同期对照组相比明显升高(P<0.05),HNF-4α与TNF-α、IRI、ALT、TG及ET均呈负相关(P<0.05)。结论:胰岛素抵抗(IR)可能是NAFLD发生、发展的基础,NAFLD大鼠肝脏HNF-4α可能通过一定机制参与了IR及炎症反应,进而影响了NAFLD的发生、发展。

肝细胞核因子-4α启动子基因多态性与江苏地区非肥胖2型糖尿病患者胰岛素分泌相关

目的:研究肝细胞核因子-4α(hepatocyte nuclear factor-4α,HNF-4α)基因的P2启动子区域的2个单核苷酸多态性(SNP)位点rs1884614和rs2144908与2型糖尿病的相关性。方法:收集2型糖尿病患者328例和非糖尿病患者196例,应用Taq Man SNP Genotyping系统进行rs1884614和rs2144908的基因型多态性分析。并分析它们与患者有关临床代谢指标的关系。结果:两组的基因型分布及等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05);但在非肥胖(BMI<25 kg/m^2)患者的OGTT检测中,rs1884614 T/T基因型与较小的血浆胰岛素曲线下面积存在相关性(P<0.05)。结论:HNF-4α基因的P2启动子区的SNP rs1884614可能影响江苏地区非肥胖型2型糖尿病患者的胰岛素分泌。

丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子-4α表达的影响

目的研究丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子(HNF)-4α表达的影响。方法雄性SD大鼠48只随机分为:正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和丝胶预防组,每组12只大鼠。链脲佐菌素连续腹腔注射制作2型糖尿病大鼠模型,待模型成功建立后,模型组大鼠不做任何处理,丝胶治疗组大鼠给予2.4 g·kg-1·d-1的丝胶连续灌胃35 d;丝胶预防组大鼠在链脲佐菌素连续腹腔注射前,给予丝胶(2.4 g·kg-1·d-1)灌胃,时间与丝胶治疗组相同。分别采用Western印迹法和RT-PCR法检测大鼠肝脏HNF-4α蛋白和mRNA的表达。结果与正常对照组大鼠比较,糖尿病模型组大鼠肝脏HNF-4α蛋白和mRNA的表达明显升高(P<0.01);与糖尿病模型组大鼠比较,丝胶治疗组、丝胶预防组大鼠肝脏HNF-4α蛋白和mRNA的表达明显降低(P<0.01)。结论丝胶改善糖代谢的作用可能与其调节肝脏HNF-4α的表达有关。

2型糖尿病与肝细胞核因子-4alpha相关基因的研究

目的:探讨中国河南汉族２型糖尿病(ＤＭ２)家系患者与 ＨＮＦ—４α基因ｅｘｏｎ ４、ｅｘｏｎ ７是否关联。方法:选择１２个ＤＭ２家系(５１份标本);１１１例 ＤＭ２患者;１０２例健康献血者作对照,进行ＰＣＲ—ＳＳＣＰ分析。结果:５１例ＤＭ２家系成员中４例 ＨＮＦ—４ａ基因ｅｘｏｎ ４出现异常条带,其中１例ＯＧＴＴ正常,而ＨＮＦ—４ａ基图ｅｘｏｎ ７ ｋ见异常条带。给论:ＨＮＦ—４α基因ｅｘｏｎ ４可能是中国河南汉族ＤＭ２家系—ＭＯＤＹ１的主要致病基因片段,ｅｘｏｎ ７片段与 ＭＯＤＹ可能无关联。

2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子-4α表达的变化

目的:探讨2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子-4α(HNF-4α)表达的变化和意义。方法:24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组,每组12只大鼠。链脲佐菌素连续腹腔注射法制作2型糖尿病大鼠模型。采用SP免疫组织化学染色、Western Blotting法、RT-PCR法检测大鼠肝脏HNF-4α的表达情况。结果:与正常对照组大鼠比较,糖尿病模型组大鼠肝脏HNF-4α蛋白和m RNA的表达均明显升高(P<0.01)。结论:肝脏HNF-4α表达的升高可能参与了2型糖尿病时肝脏损伤的发生发展。

2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子(HNF)-4α、HNF-1α基因表达研究

以RTPCR方法检测胰岛素抵抗(IR)大鼠及2型糖尿病(DM)大鼠肝脏肝细胞核因子(HNF)4α及HNF1αmRNA表达水平。结果显示肝脏HNF4α及HNF1αmRNA表达量在IR大鼠显著低于正常对照大鼠,在DM大鼠则进一步降低。两基因表达改变可能与IR及2型DM有关。

猪HNF-4α基因多态性与肌纤维组织学特性及生长性状的相关性分析

肝细胞核因子-4α(HNF-4α)是肝细胞核因子(hepatocyte nuclearfactor,HNF)家族成员之一,可在肝脏内高表达,该家族基因对肝细胞的分化调控起关键作用,同时参与肝脏糖、脂代谢相关基因特异性表达的调控。HNF-4α基因参与调节生命代谢活动的诸多方面,并且对动物生长发育过程起着重要作用。此研究采用PCR-SSCP的方法分析HNF-4α基因单核苷酸多态性与生长性状的相关性。结果发现SH1多态位点的BB基因型对法系长白猪个体的出生体长的效应值最大。SH2多态位点的AB基因型对法系长白猪个体的初生重的效应值最大。同时,该位点与大民猪肌纤维组织学特性也存在显著相关。AB型个体的肌纤维直径和肌纤维横截面积显著低于AA和BB型(P<0.05)。

糖尿病家系与HNF-4α基因变异及瘦素水平的相关分析

目的 探讨中国河南汉族糖尿病家系患者与HNF 4α基因外显子 4、7是否关联以及与瘦素水平的关系。方法 在中国河南汉族人群中选择 12个糖尿病家系 ,共收集到外周静脉血标本 5 1例 (诊断为糖尿病者有 34例 ,发病年龄小于 2 5岁的 15例 ,17例口服葡萄糖耐量检测正常 ) ;111例 2型糖尿病患者 ;10 2例健康献血者作对照。抽取外周静脉血用经典的酚 氯仿法提取基因组DNA ,PCR扩增含HNF 4α基因外显子 4、7的片段 (分别为 15 3bp、2 0 0bp) ,将扩增产物进行单链构像多态性分析。用放射免疫分析技术测定血清瘦素、C肽。对糖化血红蛋白、谷氨酸脱羧酸抗体、口服葡萄糖耐量、体重指数等临床指标进行检测。结果 ① 5 1例糖尿病家系成员有 4例HNF 4α基因外显子 4 (突变率 7 8% )出现异常条带 ,其中 1例为口服葡萄糖耐量正常 ,而HNF 4α基因外显子 7未见异常条带。②糖尿病家系与正常人群的瘦素比较无显著性差异 (P >0 0 5 )。③ 111例 2型糖尿病男性及女性患者分别与 10 2例正常人人群男性及女性瘦素水平比较均有显著差异 (P <0 0 5 )。④ 2型糖尿病人群中瘦素水平分别与餐后 2小时血糖水平、体重指数呈正相关。结论 ①HNF 4α基因外显子 4可能是中国河南汉族糖尿病家系的主要致病基因片段 ,与外显子

1,25-二羟维生素D3对实验糖尿病大鼠模型肝脏中甘油三酯含量的影响及其机制探讨

目的 活性维生素D与2型糖尿病、高脂血症的发生发展密切相关,通过观察1,25-二羟维生素D3[1,25（OH）2D3]对实验糖尿病大鼠模型肝脏中过氧化物酶增殖物激活受体-α（PPAR-α）、肝细胞核因子-4α（HNF-4α）、胆固醇调节元件结合蛋白-1C（SREBP-1C）、载脂蛋白A5（apoA5）表达及甘油三酯含量的影响,探讨1,25（OH）2D3调控肝脏甘油三酯的机制.方法 取80只健康雄性Wistar大鼠,分成糖尿病组20只、1,25（OH）2D3干预组（VitD干预组）20只、PPAR-α抑制组20只和正常对照组20只.以随机数字表法,取各组大鼠各15只,心内取血检测生化指标,采用实时荧光定量PCR、Western印迹法分别对大鼠的肝脏组织中PPAR-α、HNF-4α、SREBP-1C、apoA5基因及蛋白表达水平进行检测,并用酶法检测肝脏组织中甘油三酯含量.结果 （1）糖尿病组肝脏中PPAR-α、HNF-4α、apoA5基因、蛋白表达较正常对照组显著降低（P＜0.05）,而SREBP-1C基因、蛋白表达及甘油三酯含量较正常对照组显著增加（P＜0.05）.（2）VitD干预组肝脏中PPAR-α、HNF-4α、apoA5基因及蛋白表达较糖尿病组明显增加（P＜0.05）,而SREBP-1C基因及蛋白、甘油三酯含量较糖尿病组明显减少（P＜0.05）.（3）VitD干预组肝脏中PPAR-α、HNF-4α、SREBP-1C、apoA5基因、蛋白表达、甘油三酯含量较正常对照组无显著性差异（P＞0.05）.（4）PPAR-α抑制组PPAR-α、HNF-4α、apoA5基因、蛋白表达较正常对照组显著降低（P＜0.05）,而SREBP-1C基因、蛋白表达、甘油三酯含量较正常对照组明显增加（P＜0.05）.（5） PPAR-α抑制组PPAR-α基因、蛋白表达较糖尿病组显著降低（P＜0.05）,而HNF-4α、apoA5、SREBP-1C基因、蛋白表达及甘油三酯含量与糖尿病组无显著性差异（P＜0.05）.（6） PPAR-α抑制组PPAR-α、HNF-4α、apoA5基因、蛋白表达较VitD干预组显著降低（P＜0.05）,而SREBP-1C基因、蛋白表达及甘油三酯含量较VitD干预组显著增加（P＜0.05）.结论 1,25（OH）2D3可能通过上调肝脏中PPAR-α、HNF-4α、apoA5表达,抑制SREBP-1C的表达,从而降低甘油三酯水平.

中国人早发及多发糖尿病家系中HNF4A基因突变的筛查

目的探讨中国上海及周边地区早发及(或)多发糖尿病家系肝细胞核因子-4α基因(hepato-cytenuclearfactor-4α,HNF4A)的突变及变异发生情况。方法用PCR-单链构象多态及序列分析的方法对154例早发及(或)多发糖尿病家系先证者进行HNF4A基因扫查。对发现的突变或变异采用PCR-限制性片段长度多态性方法在家系其他成员及93名正常对照者中进一步检测。结果在2例糖尿病家系先证者中发现2个同义突变,即N153N和A158A。其中N153N在1个早发性糖尿病家系中见到,且与糖尿病共分离。上述同义突变在正常者中未查到。此外,还发现3个变异位点:即IVS1+308(A→G)(rs2071197),IVS1+357(A→T)(rs2071198),IVS1-5(C→T)(rs745975)。3个位点基因型和等位基因频率在糖尿病先证者和正常对照者中无显著差别。结论HNF4A基因突变在中国人早发及(或)多发糖尿病家系中可能罕见。