自身免疫性肝炎大鼠外周血CD4^+细胞、肝细胞特异性脂蛋白抗体及Th细胞因子水平之间的相关性

目的:建立自身免疫性肝炎大鼠模型,分析其外周血CD4+细胞、肝细胞特异性脂蛋白抗体及Th细胞因子水平之间的相关性。方法:实验于2004-10/2006-10在南京军区肝病中心实验室完成。①实验动物:雄性3月龄Wistar大鼠80只,随机数字表法分为4组:正常对照组、模型对照组、褪黑素治疗组、猪促肝细胞生长素治疗组,20只/组。②实验方法:除正常对照组外,其余各组大鼠均给予弗氏完全佐剂+肝细胞特异性脂蛋白建立自身免疫性肝炎模型。褪黑素用含0.01%乙醇的生理盐水配制成1g/L的溶液,褪黑素治疗组腹腔注射2mg/kg;猪促肝细胞生长素用含0.01%乙醇的生理盐水配制成2g/L的溶液,猪促肝细胞生长素治疗组腹腔注射2mg/kg;正常对照组和模型对照组均腹腔注射含0.01%乙醇的生理盐水,1次/d,连续60d。③实验评估:检测各组大鼠外周血淋巴细胞亚群浓度、肝细胞特异性脂蛋白抗体水平及Th细胞因子的浓度,并分析三者之间的关系。结果:80只大鼠均进入结果分析。模型对照组CD4+细胞百分比、肝细胞特异性脂蛋白抗体水平、白细胞介素4,6水平均显著高于其余3组(P<0.01),白细胞介素2和干扰素γ水平均显著低于其余3组(P<0.01)。与正常对照组比较,褪黑素治疗组、猪促肝细胞生长素治疗组CD4+细胞百分比无明显变化(P>0.05),肝细胞特异性脂蛋白抗体水平显著升高(P<0.001)。与猪促肝细胞生长素治疗组比较,正常对照组、褪黑素治疗组白细胞介素2和干扰素γ水平显著升高(P<0.01),白细胞介素4,6水平均显著降低(P<0.01)。结论:①CD4+细胞百分比与肝细胞特异性脂蛋白抗体水平有关,当CD4+细胞百分比达到正常水平时肝细胞特异性脂蛋白抗体表达虽受到明显抑制却并未停止表达。②褪黑素调节Th细胞因子水平的作用强于猪促肝细胞生长素。③Th细胞因子水平变化与肝细胞特异性脂蛋白抗体水平有一定关系。

血清内皮细胞特异性分子1、视黄醇结合蛋白4及脂蛋白相关磷脂酶A2水平变化对脑梗死患者疗效有影响

目的:探究血清内皮细胞特异性分子1(ESM-1)、视黄醇结合蛋白4(RBP-4)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平与脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块稳定性、神经功能缺损的相关性,并分析各指标对疗效的预测价值。方法:收集脑梗死患者127例,入院时采用酶联免疫吸附试验测定血清ESM-1、Lp-PLA2水平,采用免疫增强比浊法检测血清RBP-4水平,入院后均给予重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗,根据溶栓后第7天美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为早期有效组、无效组与恶化组,分析各血清指标与斑块稳定性、NIHSS评分、脑梗死面积的相关性,并采用多元线性回归方程分析各指标对疗效的预测价值。结果:早期恶化组血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平高于早期无效组和有效组,且早期无效组高于早期有效组(P均<0.05);不稳定斑块患者血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平高于稳定斑块患者和无斑块患者,且稳定斑块患者高于无斑块患者(P均<0.05);神经功能重度缺损患者血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平高于神经功能中度和轻度缺损患者,且中度患者高于轻度缺损患者(P均<0.05);大面积脑梗死患者血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平高于中面积和小面积脑梗死患者,且中面积高于小面积脑梗死患者(P均<0.05);血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平与斑块稳定性呈负相关,与NIHSS评分、脑梗死面积呈正相关(P均<0.05);血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平与疗效显著相关(P均<0.05)。结论:血清ESM-1、RBP-4、Lp-PLA2水平可能成为评估脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块稳定性、神经功能缺损情况及疗效的生物学标志物。

脂肪特异性蛋白27对大鼠肝星状细胞活化的影响

目的:探讨脂肪特异性蛋白27(Fsp27)对肝星状细胞(HSCs)增殖和活化的影响及其对纤维化相关蛋白的调节作用。方法:从SD大鼠肝脏提取HSCs并培养,采用实时荧光定量PCR、免疫荧光染色和Western blotting检测原代HSCs和活化HSCs中Fsp27 mRNA和蛋白的表达。构建携带Fsp27基因的慢病毒,转染活化的HSCs并继续培养72 h,通过CCK-8比色法检测Fsp27对HSCs增殖的影响;Western blotting检测HSCs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,了解HSCs的活化状态;实时荧光定量PCR检测Fsp27对HSCs中纤维化相关蛋白[包括基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)]mRNA表达的影响。结果:成功分离大鼠原代HSCs。Fsp27在原代HSCs和活化HSCs中的表达差异显著(P<0.01);活化HSCs成功转染携带Fsp27基因的慢病毒后继续培养72 h,与对照组比较,HSCs的活化与增殖被明显抑制(P<0.05);Fsp27促进MMP-2 mRNA的表达(P<0.05),降低TIMP-1和TGF-β1mRNA的表达(P<0.05)。结论:Fsp27可抑制HSCs的增殖和活化,并调节纤维化相关蛋白的表达。Fsp27的作用可能与其维持HSCs静息状态细胞表型有关。

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3在肝细胞癌中的特异性和敏感性以及表达

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC3)在高、中/低分化的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组中的表达强度、特异性和敏感性。方法挑选首都医科大学附属北京佑安医院2009年12月至2010年9月收治的肝细胞癌病例70例,经过免疫组化染色,观察GPC3在肝细胞癌内以及其周围非肝细胞癌的着色情况和GPC3在所有肝细胞癌病例中的检出率。将70个病例根据癌分化程度分为高、中/低两组。观察GPC3在两组中的着色强度与Ki67在两组中的表达强度是否有相关性。结果①所有肝细胞癌病例的GPC3染色只在肝细胞癌中,肝细胞癌周围非癌组织中均不着色;GPC3在高、中/低两组中总检出率为85%,高分化组中阳性率73.0%,中/低分化组阳性检出率90.2%。②GPC3中强着色度(++、+++)在高分化组中只有2例,占10.5%;在中/低分化组中38例,占74.8%。GPC3在高,中/低分化的肝细胞癌中的表达强度差异有统计学意义(P<0.01)。③Ki67在高分化组中(++、+++)中强度表达是0例,占0%;在中/低分化组中中强度表达是37例,占72.5%,Ki67在高、中/低分化组肝细胞癌中的表达差异有统计学意义(P<0.01)。GPC3在这两组中的着色强度和Ki67在这2组中的的表达强度具有相关性(P<0.01)。结论 GPC3在肝细胞癌中的表达具有高度特异性和敏感性,对肝细胞癌诊断有重要价值。

乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白在乙型肝炎病毒感染肝细胞癌中的表达及意义

目的:探究乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白(HBSP)在乙型肝炎病毒(HBV)感染肝细胞癌中的表达及意义。方法:选取海南医学院第一附属医院2022年5月~2023年6月收治的HBV感染疾病患者92例,其中肝细胞癌患者46例为研究组,慢性乙型病毒性肝炎患者46例作为对照组。所有患者均检测乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)、甲种胎儿蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)及甲胎蛋白异质体百分比(AFP-L3%)水平。比较两组血清各项指标水平,比较血清HBSP水平与HBV-DNA、AFP、AFP-L3、AFP-L3%相关性。结果:研究组AFP水平为(33156.26±63258.47)ng/ml、AFP-L3水平为(22.93±7.86)ng/ml、AFP-L3%水平为18.64±5.28,均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);两组血清HBSP与HBV-DNA、AFP比较,差异无统计学意义(P>0.05),与AFP-L3、AFP-L3%水平比较,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:HBV剪接特异性蛋白在HBV感染肝细胞癌中的表达升高,与肿瘤恶性程度及预后相关,可作为评估肝细胞癌患者预后的生物标志物。同时,在肝癌早期诊断及筛查中也具有重要意义。

猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白在干酪乳杆菌中的共表达及免疫小鼠特异性抗体的测定

将分别编码猪瘟病毒T细胞表位E290多肽和猪细小病毒主要保护性抗原VP2蛋白的重组基因插入干酪乳杆菌分泌型表达载体pPG中,构建了重组表达载体pPG-VP2-E290,将其电转化干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393,获得了猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白的乳酸菌共表达系统,经2%乳糖在MRS培养基中的诱导表达,对诱导表达的菌体及培养上清液进行SDS-PAGE检测表明,有约70kDa蛋白得到了表达,表达蛋白的大小与理论值相符。Western blot分析结果表明所表达的蛋白具有与天然病毒蛋白一样的抗原特异性。以诱导表达上清液作为抗原进行的间接ELISA实验也表明,重组的目的蛋白获得了分泌表达。将该重组干酪乳杆菌经口服接种途径免疫BALB/c小鼠,收集粪便样品检测小鼠产生抗PPV的特异性sIgA抗体,采集血液样本检测血清中抗PPV及抗E290的特异性IgG。结果表明分泌型的重组菌pPG-VP2-E290/L.casei 393免疫小鼠能够产生明显的抗体水平,为重组猪瘟与猪细小病毒乳酸菌口服活菌疫苗的研制奠定了重要的物质基础。

生长停滞特异性蛋白6在牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导内皮细胞黏附因子及趋化因子表达中的作用

目的:探讨维生素K依赖的生长停滞特异性蛋白6(growth-arrest-specific protein 6,Gas6,一种维生素K依赖性蛋白,参与细胞增殖、存活、黏附和迁移,也在炎症反应中起重要作用)在牙龈卟琳单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)诱导血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)表达黏附因子和趋化因子过程中的作用。方法:在血管内皮细胞中过表达和敲低Gas6基因后,用1 mg/L P.g-LPS刺激血管内皮细胞3 h和24 h,利用实时定量荧光聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和E选择素(E-selectin),以及趋化因子白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)和单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)的表达。过表达或敲低Gas6基因后,细胞划痕实验检验内皮细胞迁移的生物学功能表型的变化。结果:P.g-LPS刺激3 h后,敲低Gas6组的黏附因子及趋化因子的表达情况与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),过表达Gas6组的黏附因子及趋化因子与对照组相比显著降低(E-selectin、ICAM-1、IL-8和MCP-1分别下降81%±0%、47%±3%、76%±3%和26%±6%,P<0.01);P.g-LPS刺激24 h后,敲低组的黏附因子及趋化因子表达情况与对照组相比显著升高(E-selectin、ICAM-1、IL-8和MCP-1上调的倍数分别是2.06±0.07、1.99±0.11、3.14±0.15和1.84±0.03),过表达组的黏附因子及趋化因子与对照组相比显著降低(E-selectin、ICAM-1、IL-8和MCP-1分别下降29%±1%、62%±3%、69%±1%和41%±2%),实验组与对照组黏附分子及趋化分子表达差异具有统计学意义(P<0.01)。细胞划痕实验结果显示,敲低Gas6组细胞迁移能力与对照组相比增强,过表达组细胞迁移能力较对照组弱,与realtime PCR检测结果趋势一致。结论:下调Gas6基因后,P.g-LPS促进ICAM-1、E-selectin、IL-8和MCP-1表达作用增强,上调Gas6基因后,P.g-LPS促进ICAM-1、E-selectin、IL-8和MCP-1表达作用减弱,各细胞因子表达量与Gas6表达趋势相反,提示Gas6在内皮细胞炎症状态下的黏附过程中可能发挥抑制作用。

肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠模型的制备及鉴定

目的利用Cre-loxP基因敲除技术建立肝星状细胞特异性G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因敲除小鼠模型,为研究GRK2在肝星状细胞中的生物学功能提供动物模型基础。方法将loxP标记的Grk2基因小鼠(Grk2^(fl/fl))和Lrat-Cre工具鼠进行多次繁殖,建立肝星状细胞特异性Grk2基因敲除(Grk2^(ΔHSC))小鼠模型。观察和分析小鼠的生长繁殖情况;通过PCR反应鉴定flox和Cre基因型;免疫荧光双染检测肝星状细胞中GRK2表达;Western blot检测小鼠肝星状细胞及肺、脾、肾脏、心脏组织中GRK2蛋白表达;HE染色观察肝脏及肺、脾、心脏、肾脏组织学形态。结果成功鉴定Grk2^(ΔHSC)小鼠基因型;两组小鼠体质量、繁殖能力无明显差异;免疫荧光双染及Western blot结果表明,Grk2^(ΔHSC)小鼠的肝星状细胞中GRK2蛋白水平明显低于对照组小鼠,Grk2^(ΔHSC)小鼠肺、脾、肾脏和心脏组织中GRK2蛋白表达与对照组相比无明显变化;HE染色结果显示,Grk2^(ΔHSC)小鼠肝脏及主要组织结构与Grk2^(fl/fl)相比差异无显著性,可用于后续研究。结论本研究应用Cre-loxP技术成功构建了肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠,为进一步研究GRK2在肝脏中的作用提供了优良工具。

泛素特异性蛋白酶18在肝癌细胞中的表达及其对生物学活性的影响研究

目的检测泛素特异性蛋白酶18(USP18)在肝癌细胞中的表达及其对生物学活性(细胞增殖、细胞克隆、细胞周期、细胞凋亡)的影响。方法 2013年7月—2014年7月选取5种肝癌细胞株(Hep G2、Hep G2.2.15、Hep 3B、Huh-7、SMMC-7721),采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blotting法分别检测USP18 mRNA和USP18表达水平,选择表达活性最强的细胞株进行小干扰RNA(siRNA)转染。利用LipofectamineTM2000法将USP18siRNA转染肝癌细胞,分为正常组、阴性对照组、siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组。采用RT-PCR和Western blotting法检测干扰效率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,平板克隆形成实验检测克隆形成率,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 5种肝癌细胞株中USP18 mRNA和USP18表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中Hep 3B肝癌细胞株中USP18 mRNA和USP18表达水平高于其他4种肝癌细胞株(P<0.05),故选取Hep 3B肝癌细胞株进行后续实验。Hep 3B肝癌细胞株转染USP18 siRNA后48 h,转染效率达(91.00±5.67)%。5组干扰效率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组干扰效率高于正常组和阴性对照组(P<0.05)。转染后1、2、3 d,siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组吸光度低于正常组和阴性对照组(P<0.05)。siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组克隆形成率低于正常组和阴性对照组,细胞凋亡率高于正常组和阴性对照组(P<0.05)。5组细胞周期分布比较,差异有统计学意义(P<0.05)。正常组与阴性对照组吸光度、克隆形成率、细胞周期分布、细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 USP18在Hep 3B肝癌细胞株中的表达较高,USP18基因敲减可以抑制肝癌细胞增殖、减少细胞克隆、阻滞细胞周期进程,增加细胞凋亡。

小泛素样修饰物特异性蛋白酶3通过调节脂滴水平体外促进HepG2细胞丙型肝炎病毒复制

目的探究丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞小泛素样修饰物特异性蛋白酶3(SENP3)对脂滴水平的调节及其对HCV复制的影响。方法以感染性HCV病毒颗粒感染人HepG2细胞,采用Western blot法检测感染前后SENP3蛋白表达水平。采用脂质体法转染SENP3-siRNA至HepG2细胞,在感染HCV后采用Western blot法检测HCV核心蛋白表达量,采用qRT-PCR法检测HCV RNA水平,采用油红O染色观察细胞脂滴水平。以软脂酸处理敲低SENP3后的HepG2细胞,采用qRT-PCR法检测感染HCV后HCV RNA水平。结果在HCV感染HepG2细胞后1 d、3 d和6 d,HCV核心蛋白相对表达量分别为0.01±0.00、0.17±0.02和0.43±0.04,SENP3蛋白相对表达量分别为0.23±0.04、0.42±0.03和0.46±0.04,差异显著(P<0.05);转染SENP3-siRNA可有效降低SENP3表达并降低HCV感染后细胞HCV核心蛋白表达水平;SENP3敲低细胞HCV RNA相对水平为54.2±11.4%,较转染非特异性siRNA细胞显著降低(P<0.01);敲低SENP3蛋白表达后细胞脂滴数量显著减少;敲低SENP3的HepG2细胞感染HCV后HCV RNA相对水平为58.2±5.2%,较转染非特异性siRNA细胞显著降低(P<0.01),而以软脂酸处理敲低SENP3的HepG2细胞,在感染HCV后HCV RNA相对水平为74.6±6.4%,较未经软脂酸处理细胞显著升高(P<0.01)。结论在HCV感染肝细胞时SENP3可通过调节脂滴代谢促进HCV复制。

人羊膜上皮细胞原代培养及肝细胞特异性蛋白的表达

目的完善人羊膜上皮细胞（AECs）的原代培养技术，检测肝细胞特异性蛋白在AECs中的表达。方法采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化法分离获取AECs并进行愿代培养。分别向培养液中添加10、20、40ng／mL表皮生长因子（EGF）和10ng／mL的碱性成纤维细胞生长因子（bFGF），倒置显微镜观察细胞生长和增殖情况，从中选择最适宜AECs原代培养的细胞培养液。以培养液中未添加生长因子的原代培养细胞作为对照。将羊膜组织石蜡切片和AECs细胞爬片进行免疫组化染色，

泛素特异性蛋白酶44在肝细胞癌中的表达及预后价值

【目的】探讨泛素特异性蛋白酶44(USP44)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床病理学意义。【方法】运用免疫组化方法,检测USP44蛋白在161例肝细胞癌中的表达水平,统计分析其与临床病理参数之间的相关性及其预后价值。【结果】在161例HCC患者中,98例(60.9%)高表达USP44蛋白,Pearson's卡方检验结果显示USP44在HCC中的表达水平与临床分期(χ^(2)=14.44,P<0.001)、肿瘤单灶及多灶性(χ2=8.04,P=0.005)显著相关;Kaplan-Mei⁃er分析结果显示,低表达组患者平均生存时间59.6个月,显著低于高表达组患者的平均生存时间185.0个月(Log-rankχ^(2)=20.77,P<0.001);多因素Cox比例风险模型揭示USP44是HCC患者的独立预后危险因素。【结论】USP44蛋白高表达的HCC患者具有良好的生存期,检测其蛋白表达可作为筛选预后良好的肝细胞癌患者的一种手段。

去泛素化特异性蛋白酶18依赖其去泛素化作用预防肝脂肪变性和胰岛素抵抗

【据《Hepatology》7月报道】题：去泛素化特异性蛋白酶18依赖其去泛素化作用预防肝脂肪变性和胰岛素抵抗（作者An S等）非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的特点是脂肪变性、胰岛素敏感性降低和慢性低水平炎症。但是NAFLD的致病机制还不清楚,对探索有效的治疗方法形成阻碍。来自中国协和医科大学阜外医院的An等首次报道了去泛素化特异性蛋白酶18（USP18）,

组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶KDM1家族在肝细胞癌中的作用

肝细胞癌(HCC)作为临床最常见的消化系统恶性肿瘤,占所有肝脏恶性肿瘤患者的85%~90%[1]。HCC患者的5年生存率为17%~20%,位居癌症相关死亡原因第4位,目前全球每年约有84万新增HCC病例,且这一趋势仍在进行性上升[2,3]。该病发病隐匿,早期缺乏典型临床症状和特异性检测指标,被发现时通常已处于晚期阶段,并且由于目前治疗手段有限,费用高昂,俨然成为了影响公众健康的社会难题。目前分子靶向免疫治疗在HCC治疗中取得了突破性进展,是肝病领域的研究热点之一,不断深入挖掘HCC进展过程中的调控分子,为新型抗癌药物的研发提供潜在治疗靶点,是今后肝病学科攻坚的重点方向。

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3／9活性改变及其与凋亡的关系

目的探讨脓毒症时CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3／9（caspase-3／9）活性变化及其与激活诱导细胞凋亡的关系。方法体外培养免疫磁珠法分选大鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Treg，随机分为对照组、抗CD3／CD28组、抗CD3／CD28＋脂多糖（LPS）组，培养3d后采用流式细胞术检测Treg凋亡率，荧光比色法检测caspase-3／9活性。同时采用盲肠结穿孔术（CLP）复制大鼠脓毒症模型，将动物随机分为正常对照组、假手术组、CLP组，于第3日分离Treg后检测Treg凋亡率和caspase-3／9活性。结果体外实验显示，抗CD3／CD28组和抗CD3／CD28＋LPS组CD4^＋CD25^＋Treg凋亡率均显著高于对照组（P均〈0．01），而抗CD3／CD28＋LPS组Treg凋亡率明显低于抗CD3／CD28组（P〈0．05）。抗CD3／CD28组caspase-3／9活性均显著高于对照组（P均〈0．01）；抗CD3／CD28＋LPS组caspase-3／9活性则明显低于抗CD3／CD28组（P均〈0．01）。体内实验显示，CLP组CD4^＋CD25^＋Treg凋亡率和caspase-3活性均显著低于正常对照组和假手术组（P均〈0．01），但caspase-9活性改变不明显（P均〉0．05）。结论脓毒症病理过程中CD4^＋CD25^＋Treg凋亡率明显下降，caspase-3激活是诱发Treg凋亡的重要途径之一。

血清内皮细胞特异性分子-1和血管内皮生长因子与HCV感染相关肝细胞癌相关性研究

目的评估血清内皮细胞特异性分子-1(Endocan)和血管内皮生长因子(VEGF)预测丙型肝炎病毒(HCV)感染相关肝细胞癌(HCC)患者死亡的临床价值。方法选择2017年3月至2018年3月我院收治的102例HCV感染相关HCC患者(HCC组)、88例HCV肝硬化患者(LC组)和60名健康体检者(HC组)。通过ELISA评估血清Endocan和VEGF水平。结果HCC组、LC组、HC组Endocan分别为4244(3121~5875)pg/ml、2099(1323~2809)pg/ml、502(136~879)pg/ml。HCC组、LC组、HC组VEGF水平分别为208(62~513)ng/ml、66(20~137)ng/ml、25(18~31)ng/ml。三组Endocan和VEGF比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HCC组Endocan与WBC、PLT、ALT、ALP、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、AFP、Child-Pugh分级、肿瘤大小、肿瘤数量、血管癌栓、TNM分期有关(P<0.05)。Endocan诊断HCC价值最高。AFP、Endocan、肿瘤大小是HCC死亡相关风险因素。结论Endocan可能是HCC的诊断标志物,也是HCC患者死亡的良好预测指标。

乙型肝炎和丙型肝炎患者血清抗肝特异性抗体测定

目的:分析乙型肝炎病毒(hepantitis B virus,HBV)和丙型肝炎病毒(hepantitis C virus,HCV)感染患者血清中肝特异性抗体水平,探讨其与肝细胞损伤的关系。方法:收集2011年1月至2011年10月川北医学院附属医院HBV和HCV感染患者和健康体检者血清,检测患者丙氨酸氨基转移酶(alannine aminotransferase,ALT)和总胆红素水平;通过酶联免疫吸附法检测抗肝细胞膜特异性脂蛋白(liver specific lipoprotein,LSP)和抗去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotin receptor,ASGPR)的血清水平;以ALT>40分为肝功能异常组与正常组。使用SPSS13.0统计软件分析结果,P<0.05认为有统计学意义。结果:HBV(H)与健康对照组比较anti-LSP、anti-ASGPR具有统计学差异,HBV组患者anti-ASGPR水平与ALT具有相关性。HCV(H)与健康对照组比较anti-LSP具有统计学差异,HCV组患者anti-LSP与anti-ASGPR具有相关性。HBV患者anti-LSP、anti-ASGPR表达水平较HCV患者高。结论:HBV、HCV感染后,anti-LSP和anti-ASGPR表达高于健康对照组,ALT水平升高时抗肝特异性抗体表达明显增高,表明其可能作为监测肝细胞损伤的特异性免疫学指标。

SUMO特异性蛋白酶在原发性肝癌中的表达及意义

目的研究SUMO特异性蛋白酶(SENPs)在原发性肝癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学染色法检测SENPs在40例原发性肝细胞癌组织芯片及30例正常对照肝组织中的表达,做统计学比较;并分析SENPs在肝细胞癌组织中表达情况与肝细胞癌临床病理特征间的关系。结果肝细胞癌中SENP1、SENP2和SENP3的表达率显著低于正常肝组织。SENP6、SENP7蛋白阳性表达与肝细胞癌的埃德蒙森分级(低级别或高级别)有关(P<0.05),随着级别升高,两者表达率显著升高。SENP1、2、3、5在肝细胞癌中表达率与患者性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级并无显著相关性(P>0.05)。结论SENP1、SENP2和SENP3可能是肝细胞癌变过程中的关键因子;SENP6、SENP7可能在肝细胞癌演进过程发挥重要作用;提示SENP1、SENP2、SENP3、SENP6、SENP7可能成为研究肝细胞癌靶向治疗的潜在靶点。

胃癌相关蛋白GCRG213在胃癌细胞中特异性表达

目的:观察来源于胃癌高表达基因GCRG213抗体在两种不同细胞的表达情况,评价GCRG213抗体的肿瘤特异性. 方法:应用免疫印迹方法对GCRG213抗体在胃癌细胞SGC-7901和胃上皮细胞HFE-145的表达进行比较分析. 结果:GCRG213抗体与胃癌SGC-7901细胞蛋白免疫结合后在相应大小位置有一清晰的特异性条带,而与胃上皮HFE-145细胞蛋白免疫结合后则无特异性条带出现, GCRG213抗体与两种细胞蛋白的结合存在明显差异. 结论:GCRG213抗体具有很强的肿瘤特异性.

细胞角蛋白19片段和神经元特异性烯醇化酶联合肿瘤相关自身抗体检测对肺癌的诊断价值

目的探讨细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)联合肿瘤相关自身抗体检测对肺癌的诊断价值。方法对160例研究对象临床资料进行分析,依据疾病不同分为肺癌组(80例)、肺部良性疾病组(40例)和健康对照组(40例)。比较三组血清CYFRA21-1、NSE、肿瘤相关自身抗体[肿瘤相关基因(CAGE)、G抗原7(GAGE7)、RNA解螺旋酶自身抗体4-5(GBU4-5)、黑色素瘤抗原家族A1(MAGE A1)、蛋白基因产物(PGP9.5)、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、肿瘤抑制基因53(p53)]水平以及其阳性率情况。结果肺癌组CYFRA21-1(7.45±2.62)ng/ml、NSE(20.15±5.12)ng/ml、CAGE(3.97±0.36)U/ml、GAGE7(4.05±0.47)U/ml、GBU4-5(3.68±0.24)U/ml、MAGE A1(1.94±0.20)U/ml、PGP9.5(2.46±0.21)U/ml、SOX2(10.08±0.84)U/ml、p53(3.14±0.75)U/ml,均高于肺部良性疾病组的(3.05±1.51)ng/ml、(15.18±1.35)ng/ml、(1.04±0.27)U/ml、(0.76±0.23)U/ml、(0.68±0.17)U/ml、(0.64±0.18)U/ml、(0.28±0.06)U/ml、(0.64±0.25)U/ml、(0.96±0.31)U/ml与健康对照组的(1.11±0.82)ng/ml、(2.28±1.66)ng/ml、(0.64±0.09)U/ml、(0.39±0.08)U/ml、(0.38±0.09)U/ml、(0.37±0.06)U/ml、(0.10±0.04)U/ml、(0.45±0.10)U/ml、(0.52±0.11)U/ml,且肺部良性疾病组高于健康对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。肺癌组CYFRA21-1、NSE、CAGE、GAGE7、GBU4-5、MAGE A1、PGP9.5、SOX2、p53阳性率分别为72.50%、65.00%、32.50%、35.00%、32.50%、26.25%、38.75%、45.00%、37.50%,均高于肺部良性疾病组的15.00%、15.00%、15.00%、12.50%、15.00%、10.00%、15.00%、15.00%、15.00%以及健康对照组的2.50%、2.50%、2.50%、0、2.50%、0、2.50%、2.50%、2.50%,且肺部良性疾病组高于健康对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论CYFRA21-1、NSE、CAGE、GAGE7、GBU4-5、MAGE A1、PGP9.5、SOX2、p53对肺癌诊断具有重要价值,为指导临床治疗提供理论依据。