血清可溶性CD40L与肝细胞生长因子联合检测在急性肺栓塞患者诊断中的应用价值

目的探讨血清可溶性CD40L(sCD40L)、肝细胞生长因子(HGF)联合检测在急性肺栓塞患者诊断中的应用价值。方法选取2021年1月至2022年12月延安市人民医院收治的96例急性肺栓塞患者为肺栓塞组,根据《肺血栓栓塞症的诊断与治疗指南(草案)》相关标准分为大面积肺栓塞组(50例)及非大面积肺栓塞组(46例)。另选取同期于延安市人民医院就诊的90例非急性肺栓塞患者为对照组;收集两组临床资料及空腹血液,采用酶联免疫吸附法检测两组血清中sCD40L、HGF水平;采用Pearson法分析血清sCD40L与HGF水平的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清sCD40L、HGF水平对急性肺栓塞的诊断价值。结果肺栓塞组血清sCD40L、HGF水平明显高于对照组(P<0.05);大面积肺栓塞组血清sCD40L、HGF水平明显高于非大面积肺栓塞组(P<0.05)。肺栓塞组患者血清sCD40L与HGF水平呈正相关(r=0.613,P<0.05)。ROC曲线显示,血清sCD40L、HGF诊断急性肺栓塞的曲线下面积(AUC)分别为0.820、0.848,特异度分别为82.2%、82.2%,敏感度分别为72.9%、72.9%,最佳截断值分别为113.48、492.81 ng/L;sCD40L和HGF联合诊断急性肺栓塞的AUC为0.875,特异度为91.1%,敏感度为74.1%。结论急性肺栓塞患者血清sCD40L、HGF水平升高,且二者呈正相关,sCD40L与HGF联合检测可有效提高急性肺栓塞患者的诊断效能。

3-甲基腺嘌呤对转化生长因子-β诱导大鼠肝脏星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响观察

目的观察3-甲基腺嘌呤(3-MA)对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响。方法取对数生长期的HSC-T6细胞分为空白组、TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组。TGF-β+3-MA组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入3-MA(0.5 mg/mL)处理24 h,TGF-β+PBS组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入等量PBS处理24 h,空白组加入等量PBS处理,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-β蛋白和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5蛋白。结果TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。结论3-MA可抑制TGF-β诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬。

过表达肝细胞生长因子的内皮祖细胞移植促进坐骨神经挤压伤修复的研究

目的探讨过表达肝细胞生长因子(HGF)慢病毒转染的内皮祖细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法体外实验方面,提取大鼠骨髓的内皮祖细胞(EPC)并利用DiI-acLDL和FITC-UEA-1双染法进行鉴定。EPC转染慢病毒后采用qRT-PCR实验检测HGF基因表达水平。采用CCK-8实验、Transwell实验以及血管形成实验对转基因EPC的体外功能进行评估。体内实验方面,随机将25只SD大鼠平均分为5组,即对照组(Con组)、正常EPC组(N-EPC组)、空载病毒转染EPC组(LV-NC组)、过表达HGF病毒转染EPC组(LV-HGF组)和假手术组(Sham组)。各组大鼠暴露出右侧坐骨神经后,在坐骨神经分叉处上方10 mm处使用止血钳形成2 mm宽的坐骨神经挤压伤,假手术组在暴露神经后不做处理;分别将转染空载慢病毒EPC、转染过表达HGF慢病毒EPC或正常EPC与基质胶按1∶1体积比混合后注入伤处神经外膜下,而对照组不注入EPC。术后4周,运用Catwalk检测大鼠运动功能的恢复情况,电生理实验检测神经传导功能的恢复情况,透射电镜观察髓鞘厚度,甲苯胺蓝染色观察神经纤维密度,腓肠肌湿重称重检测肌肉萎缩程度,马松染色检测各组手术侧的腓肠肌肌纤维面积。结果体外实验结果显示,与正常EPC组相比,LV-HGF组EPC在CCK8实验中细胞增殖速度更快(P<0.05),Transwell实验中细胞迁移速率更高(P<0.01),在血管形成实验中形成更多血管状结构(P<0.01)。动物实验结果显示,LV-HGF组的坐骨神经功能指数值显著高于其他3组(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.01;LV-NC组,P<0.01);复合肌肉动作电位波幅更高(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.05;LV-NC组,P<0.05);再生坐骨神经的髓鞘较厚(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.01;LV-NC组,P<0.01);有髓神经纤维密度更高(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.05;LV-NC组,P<0.05);腓肠肌湿重比值更高(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.01;LV-NC组,P<0.01);肌纤维平均面积较大(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.05;LV-NC组,P<0.05);LV-HGF组以上实验结果与Sham组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论过表达HGF基因可以增强EPC的增殖、迁移及分化功能。在坐骨神经挤压伤后,HGF基因转染的EPC相较于正常EPC,能更明显地促进了受损周围神经结构和功能的恢复,其机制与促进受损周围神经的轴突再生及髓鞘形成有关。

大麻二酚对转化生长因子β1诱导肝星状细胞活化和肝纤维化的作用

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路的影响,研究其抗肝纤维化的可能机制。方法:(1)体外实验:选取大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分6组培养:对照组常规培养24 h,单纯药物组加入大麻二酚培养24 h,造模组加入转化生长因子β1培养24 h,造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组均加入转化生长因子β1培养24 h后分别加入1,5μmol/L大麻二酚或水飞蓟素培养24 h。培养结束后,检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路蛋白表达。(2)动物体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分为5组,每组8只:假手术组不造模,造模组、造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组通过胆管结扎法建立肝纤维化模型,造模3周后分别腹腔注射4,8 mg/kg大麻二酚或水飞蓟素,1次/d,连续给药7 d。给药结束后,检测各组小鼠肝功能、肝脏病理形态及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路相关蛋白表达。结果与结论:(1)体外实验:与对照组比较,造模组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平以及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1、p-Smad2/3蛋白表达均升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05);两种剂量大麻二酚处理可改善转化生长因子β1诱导的HSC-T6细胞上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组改善作用更明显;(2)体内实验:与假手术组比较,模型组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性升高(P<0.05),肝组织中炎性细胞浸润及胶原含量增加(P<0.05),转化生长因子β1/Smad信号转导通路被激活,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05);两种剂量大麻二酚干预可减轻造模小鼠上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组效果更明显;(3)结果表明,大麻二酚通过抑制肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号传导通路的激活抑制肝纤维化。

乙醇脱氢酶1A和血管内皮生长因子-A在肝细胞癌中的表达

目的探讨乙醇脱氢酶1A(ADH1A)和血管内皮生长因子-A(VEGFA)在肝细胞癌(HCC)中的表达和临床意义。方法通过基因表达谱交互(GEPIA)分析ADH1A和VEGFA在HCC以及癌旁正常组织中的表达情况及相关性;肿瘤基因组图谱(TCGA)和基因富集分析(GSEA)探讨ADH1A在HCC中的相关通路;收集84例HCC患者的样本及临床病理资料,并选取54例癌旁正常组织样本做对照,分析ADH1A和VEGFA与HCC中临床病理参数的相关性;采用免疫组化法检测并分析病例组和对照组ADH1A和VEGFA的蛋白表达情况,结合临床病理参数并通过Kaplan-Meier法分析ADH1A和VEGFA的表达与HCC患者的临床进展和预后的关系。结果生物信息学分析发现ADH1A在HCC中低表达而VEGFA在HCC中高表达,并且两者呈负相关关系(P<0.001);免疫组化检测结果显示ADH1A在HCC组织中的表达率低于癌旁正常组织(P<0.01),而VEGFA在HCC组织中表达率高于癌旁正常组织(P<0.01);HCC组织中ADH1A高表达组的脉管癌栓及HCC患者的复发比例更低(P<0.05);HCC组织中VEGFA高表达组的肿瘤直径>5 cm、高TNM分期、有微卫星以及G2-G3分化程度比例更高(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,ADH1A高表达同时VEGFA低表达患者的五年生存率较高。结论HCC患者肿瘤组织中ADH1A的低表达以及VEGFA的高表达与肿瘤的进展有关,可作为HCC患者预后评估指标之一。

腺病毒介导的肝细胞生长因子/血管内皮生长因子165对大鼠超比例随意皮瓣成活的影响及机制研究

目的:观察术前注射腺病毒介导的肝细胞生长因子/血管内皮生长因子165(Ad-HGF/VEGF165)对大鼠超比例随意皮瓣成活的影响和其机制的初步研究。方法:大鼠背部设计超比例随意皮瓣模型,将其随机分为Ad-HGF/VEGF165组、AdVEGF165组和对照组。术前7 d,Ad-HGF/VEGF165组和Ad-VEGF165组分别于大鼠皮瓣及创缘内多点注射Ad-HGF/VEGF165及AdVEGF165,对照组注射等容量0.9%氯化钠注射液。分别于术后7 d、14 d观测皮瓣成活面积,切取皮瓣组织标本HE染色、免疫组化观察微血管密度及组织间VEGF阳性率等指标,WesternBlot检测目的蛋白表达情况。结果:术后7 d、14 d,Ad-HGF/VEGF165组、Ad-VEGF165组皮瓣存活面积、组织间微血管数目、VEGF及细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)蛋白表达情况均高于对照组(P<0.001),且Ad-HGF/VEGF165组明显高于Ad-VEGF165组(P<0.05)。结论:Ad-HGF/VEGF165具有协同作用,能显著促进VEGF和ERK1/2信号因子表达,短期内促进血管网重建,改善皮瓣血液灌注,提高大鼠超比例随意皮瓣成活面积。

血清肝细胞生长因子和富亮氨酸α2糖蛋白1水平与子痫前期及急性肾损伤的相关性分析

目的探讨血清肝细胞生长因子(HGF)、富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)水平与子痫前期及急性肾损伤(AKI)的相关性。方法选取延安大学附属医院2020年6月至2022年6月收治的110例子痫前期患者(PE组)和121例妊娠期高血压患者(GH组),另选择51例健康孕妇为对照组。记录受试者血清HGF、LRG1、血尿素氮、血肌酐水平及估算肾小球滤过率(eGFR)。根据是否发生AKI将子痫前期患者分为AKI组和非AKI组。采用Pearson相关性方法分析血清HGF、LRG1与肾功能指标的相关性,多因素Logistic回归模型分析子痫前期患者AKI的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HGF、LRG1对子痫前期患者发生AKI的预测价值。结果PE组和GH组血清LRG1、血尿素氮、血肌酐水平均高于对照组、且PE组均高于GH组,PE组和GH组血清HGF水平、eGFR均低于对照组、且PE组均低于GH组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。110例子痫前期患者中49例发生AKI(AKI组)、61例未发生AKI(非AKI组)。子痫前期患者血清HGF水平与血尿素氮、血肌酐呈负相关(r=-0.420,P<0.001;r=-0.398,P=0.001),与eGFR呈正相关(r=0.547,P<0.001);血清LRG1水平与血尿素氮、血肌酐呈正相关(r=0.416,P<0.001;r=0.502,P<0.001),与eGFR呈负相关(r=-0.685,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,重度子痫前期、LRG1是子痫前期患者发生AKI的独立危险因素(均P<0.05),HGF是独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,HGF、LRG1联合预测的曲线下面积大于二者单独预测(Z=4.339、4.942,均P<0.001)。结论子痫前期患者血清HGF水平降低、LRG1水平升高,低水平HGF和高水平LRG1与患者发生AKI有关。

非小细胞肺癌患者肝细胞生长因子受体和表皮生长因子受体及间变性淋巴癌激酶基因异常与临床病理特征的关系

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者肝细胞生长因子受体(c-Met)、表皮生长因子受体(EGFR)和间变性淋巴癌激酶(ALK)基因异常与临床病理特征的关系。方法回顾性分析2021年1—12月新钢中心医院收治的152例NSCLC患者的临床资料,取患者组织标本,采用荧光原位杂交技术检测c-Met基因扩增情况,采用聚合酶链扩增反应及直接测序法检测EGFR基因突变情况,采用实时荧光定量PCR检测ALK基因重排情况。分析c-Met基因扩增、EGFR基因突变和ALK基因重排与患者临床病理特征的关系。结果152例NSCLC患者中,c-Met基因扩增7例,阳性率为4.61%;EGFR基因突变48例,突变率为31.58%;ALK基因重排8例,重排率为5.26%。c-Met基因扩增阳性与阴性患者、ALK基因重排与无重排患者性别、年龄、临床分期、吸烟史、肿瘤位置、病理类型比较差异无统计学意义。EGFR基因突变与无突变患者性别、年龄、病理类型比较差异有统计学意义(P<0.05),其中EGFR基因突变患者以女性、年龄<70岁、腺癌占比较高。结论c-Met基因扩增及ALK基因重排与患者临床病理特征无关,而EGFR基因突变与患者性别、年龄及病理类型密切相关。

血清脂联素、肝细胞生长因子水平对非酒精性脂肪肝的诊断价值

目的:探讨血清脂联素(ADPN)、肝细胞生长因子(HGF)水平在非酒精性脂肪肝(NAFLD)诊断、病情严重程度评估中的价值。方法:选取2021年5月至2023年5月来我院治疗的NAFLD患者作为患病组(n=100),根据病情严重程度进一步分为重度组(n=31)、中度组(n=33)和轻度组(n=36),另选取同期于本院参加健康体检的人群作为对照组(n=100)。采用ELISA法对血清ADPN、HGF水平进行检测;Logistic回归分析重度NAFLD发生的影响因素;ROC曲线分析血清ADPN、HGF水平对NAFLD及重度NAFLD的诊断价值。结果:与对照组相比,患病组血清ADPN水平显著下降,HGF水平显著升高(P<0.05);血清ADPN、HGF二者联合诊断NAFLD的曲线下面积(AUC)均高于二者单独诊断(0.859 vs 0.790、0.744,Z_(二者联合-ADPN)=2.033、Z_(二者联合-HGF)=2.384,P=0.042、0.017);随着病情严重程度增加,糖尿病占比、BMI、总胆固醇、三酰甘油、HGF水平呈升高趋势,血清ADPN水平呈下降趋势(P<0.05);ADPN是重度NAFLD发生的保护因素(P<0.05),总胆固醇、HGF是重度NAFLD发生的危险因素(P<0.05);血清ADPN、HGF二者联合诊断重度NAFLD的曲线下面积(AUC)均高于二者单独诊断(0.837 vs 0.674、0.728,Z_(二者联合-ADPN)=2.393、Z_(二者联合-HGF)=2.092,P=0.017、0.036)。结论:NAFLD患者血清ADPN水平下降,HGF水平升高,且ADPN、HGF水平与病情严重程度密切相关,二者联合对NAFLD及重度NAFLD具有更高的诊断价值。

血管性血友病因子、肾损伤分子-1、肝细胞生长因子在急性肾损伤患者中的表达及与预后相关性

目的:分析血管性血友病因子(vWF)、肾损伤分子-1(KIM-1)、肝细胞生长因子(HGF)在急性肾损伤患者中的表达及与预后相关性。方法:选取2020年01月—2022年12月我院收治的125例急性肾损伤患者为研究对象,作为研究组,另外选取70例健康无疾病的体检者作为对照组。观察各组vWF、KIM-1、HGF水平,分析与预后的相关性。结果:与对照组相比,研究组APACHEⅡ评分、SOFA评分较高(P<0.05)。与Ⅰ期患者相比,Ⅱ期、Ⅲ期患者vWF、KIM-1、HGF表达水平逐渐升高(P<0.05)。与存活患者相比,死亡患者vWF、KIM-1、HGF表达水平较高(P<0.05)。vWF、KIM-1、HGF与预后呈正相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,肺部感染、APACHEⅡ评分、SOFA评分、氧合指数、Scr、BUN、eGFR、动脉血乳酸、vWF、KIM-1、HGF为影响急性肾损伤患者预后的危险因素。结论:vWF、KIM-1、HGF在急性肾损伤患者体内表达水平较高,且随着病情严重程度的增加,KIM-1、HGF水平逐渐升高,KIM-1、HGF与不良预后呈正相关,为急性肾损伤的危险因素。

血清血管内皮生长因子对肝动脉化疗栓塞单独/联合靶免治疗在中晚期肝癌临床疗效中的评估价值

背景 中晚期肝癌治疗面临挑战,寻求有效评估及改善疗法成为研究重点,其中肝动脉化疗栓塞(TACE)结合免疫疗法显示出潜力,但需进一步验证其疗效与患者预后的生物标志物。目的 探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)对TACE单独/联合靶免治疗在中晚期肝癌临床疗效中的评估价值。方法 收集2021年1月—2022年7月在河北医科大学第三医院住院的113例初治中晚期肝癌患者,按治疗方案分为TACE组(n=66)、TACE联合靶向治疗组(n=22)、TACE联合靶免治疗组(n=25),于治疗前后分别进行VEGF、甲胎蛋白(AFP)、异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)等肿瘤标志物检测。根据改良的实体瘤反应评估标准(mRECIST)于治疗3、6、12个月后进行随访以评价中晚期肝癌临床疗效,分析患者的疾病缓解率(ORR)和疾病控制率(DCR);采用Kaplan-Meier法计算中位无进展生存期(PFS)并绘制生存曲线。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清VEGF及相关联合血清肿瘤标志物对中晚期肝癌临床疗效的预测价值。结果 TACE组、TACE联合靶向治疗组及TACE联合靶免治疗组随访12个月的ORR分别为17.14%(6/35)、33.33%(4/12)、54.55%(6/11),DCR分别为28.57%(10/35)、41.67%(5/12)、72.73%(8/11),治疗12个月的TACE联合靶免治疗组的ORR和DCR高于TACE组(P<0.05)。TACE联合靶免治疗组中位PFS(15.039个月)高于TACE组(8.757个月)和TACE联合靶向治疗组(9.680个月)(P<0.05)。TACE联合靶免治疗组随访12个月行TACE次数低于TACE组和TACE联合靶向治疗组(P<0.05)。TACE联合靶向治疗组和TACE联合靶免治疗组治疗前后血清VEGF差值高于TACE组(P<0.05)。治疗前后血清VEGF差值预测中晚期肝癌临床疗效的ROC曲线下面积(AUC)为0.748(P<0.001),灵敏度和特异度分别为0.909、0.629。血清VEGF联合PIVKA-Ⅱ、VEGF联合AFP、VEGF联合AFP及PIVKA-Ⅱ预测中晚期肝癌临床疗效的AUC分别为0.781、0.869、0.872(P<0.001)。结论 TACE联合靶免治疗能提高中晚期肝癌患者的疗效,延长患者PFS。患者血清VEGF可作为临床疗效评估的生物学指标。

花旗松素对转化生长因子β1诱导肝星状细胞的激活作用及基因表达谱分析

目的探索花旗松素对肝星状细胞的激活作用,通过转录组测序表征基因表达谱,分析潜在的作用机制。方法在10μg/L转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导下,体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,分别给予62.5μmol/L、125μmol/L和250μmol/L花旗松素处理,在24 h、48 h分别加入CCK8试剂,450 nm波长测定吸光度,计算不同浓度和时间下的细胞增殖率。在24 h通过AnnexinV/7AAD染色,流式细胞检测细胞凋亡。通过荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原α1链(Collagen1A1)及Ⅲ型胶原α1链(Collagen3A1)基因mRNA相对表达量。通过Western blot检测α-SMA、Collagen1A1蛋白表达量。通过转录组测序,表征细胞基因表达谱并对差异基因进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)功能注释及功能富集分析。结果花旗松素可显著抑制肝星状细胞增殖,处理24 h,125μmol/L组和250μmol/L组细胞增殖率分别为(66.7±8.6)%和(45.6±3.0)%。处理48 h,125μmol/L组和250μmol/L组的细胞增殖率分别为(60.5±2.9)%和(43.9±1.9)%,均显著低于模型组(P均<0.05)。花旗松素可促进细胞凋亡,处理24 h,花旗松素62.5μmol/L组、125μmol/L组、250μmol/L组细胞凋亡率分别为(8.537±0.445)%、(8.85±0.169)%及(14.453±0.577)%,均显著高于模型组(P均<0.05)。处理24 h,花旗松素125μmol/L组、250μmol/L组可抑制α-SMA、Collagen1A1、Collagen3A1基因和α-SMA、Collagen1A1蛋白表达(P均<0.05)。差异基因表达表现为促肝纤维化发生相关基因下调,如氧化型低密度脂蛋白受体1(oxidized low-density lipoprotein receptor 1,Olr1)、人从状蛋白(Plexin A4,Plxna4)、反应蛋白1(Spondin 1,Spon1)、聚集蛋白(Agrn)等,以及细胞抗氧化及死亡相关的基因上调,如血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,Hmox1)等。结论花旗松素对肝星状细胞具有抑制增殖、促进凋亡、抑制激活的作用,推测其可能通过调控多项基因表达,主要调控因子之间相互作用信号通路、卟啉与叶绿素代谢信号通路、Hedgehog信号通路和PPARγ信号通路发挥作用。

灵芪合剂影响肝细胞生长因子/上皮间质转化因子通路抑制结直肠癌

目的:探索灵芪合剂对结直肠癌发展的作用机制,并且明确灵芪合剂是否可通过肝细胞生长因子(HGF)/上皮间质转化因子(c-Met)信号通路抑制结直肠癌发展。方法:将直肠癌大鼠分为灵芪合剂高中低剂量组,同时进行中西药对比的治疗效果,通过蛋白质印迹法(Western Blotting)检测、免疫荧光检测和凋亡的检测等技术手段的检测与分析,观察肿瘤的生长、细胞凋亡情况和HGF/c-Met通路蛋白的表达情况。结果:Western Blotting检测肿瘤组织中HGF蛋白表达增强,c-Met蛋白表达减少;在灵芪合剂治疗后,HGF的表达减少,c-Met的表达增强,这与免疫荧光表现结果一致,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:灵芪合剂通过抑制HGF的表达,上调c-Met的表达,抑制HGF/c-Met信号通路从而抑制结直肠癌细胞的侵袭和转移,实现对结直肠癌的预防和治疗。

血清血管内皮生长因子在甲胎蛋白低表达的早期原发性肝癌患者中的意义

目的:通过观察血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)在肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)、肝内胆管癌(Intrahepatic Cholangiocarcinoma,ICC)中的表达,探讨VEGF在甲胎蛋白(Alpha-Fetoprotein,AFP)中低表达的肝细胞癌、肝内胆管癌诊断及鉴别中的临床意义。方法:回顾性分析江苏省肿瘤医院介入治疗科行肝穿刺活检并且AFP<400 ng/mL的早期原发性肝癌患者98例,据术后病理将其分为HCC组62例和ICC组36例为观察组,选取40例门诊健康体检者作为对照组。采用酶联吸附法检测血清中VEGF,测定62例肝细胞癌、36例肝内胆管细胞癌及30例健康体检患者的血清VEGF水平,比较其VEGF水平的差异。结果:肝细胞癌组VEGF水平明显低于肝内胆管细胞癌组,差异有统计学意义(P<0.05)。肝细胞癌组与肝内胆管细胞癌组与健康对照组比较VEGF水平差异均有统计学意义(P<0.01)。HCC组血清VEGF阳性率为37.9%,ICC组血清VEGF阳性率为50.0%,水平均高于健康对照组(P<0.01)。转移组、复发组患者血清VEGF水平高于未转移组、未复发组(P<0.05)。HCC组的灵敏度为31/62=50%,ICC组的灵敏度为13/36=36.11%,HCC组的特异度为31/62=50%,ICC组的特异度为23/36=63.89%。结论:血清VEGF水平的测量可以提高HCC和ICC的阳性诊断准确率。特别是在肝内出现占位病变的患者中,尤其是当甲胎蛋白浓度低于400 ng/mL时,出现明显异常的血清VEGF水平,可能更大程度上是ICC的病理类型。因此,在肝癌类型的诊断和鉴别诊断中,血清VEGF水平的检测具有重要的意义。

基于代谢组学分析碱性成纤维细胞生长因子对糖尿病小鼠肝损伤的作用

目的:基于1H NMR的代谢组学方法探究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在糖尿病肝损伤中的代谢调控作用。方法:将C57BL/6J小鼠设为wt组,db/db小鼠分为糖尿病肝损伤组(db/db组)和bFGF给药组(b FGF组)。给药10周后处死,收集肝脏组织,一部分做HE染色观察肝组织形态,另一部分采集1H NMR谱,采用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)比较3组小鼠肝脏的代谢模式变化以及差异代谢物水平。结果:HE染色结果表明,wt组小鼠肝小叶和肝窦结构清晰,db/db组小鼠肝细胞脂肪变性明显,bFGF干预后,bFGF组脂滴和炎性细胞明显减少,细胞坏死损伤减轻。PLS-DA结果表明,3组小鼠肝脏的代谢模式存在明显差异。代谢物定量分析结果显示,db/db组小鼠肝脏中亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、乳酸、琥珀酸、肌酐、甘氨酸、三磷酸鸟苷和苯丙氨酸的代谢水平较wt组显著降低,但给予bFGF治疗后其代谢水平显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:b FGF可以改善糖尿病肝损伤肝脏组织的代谢紊乱,主要涉及到能量代谢、氨基酸代谢和核苷酸代谢。

miR-200b、miR-200c靶向肝细胞生长因子抑制结直肠癌细胞

目的研究miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖的机制。方法采用生物信息学软件预测和验证miR-200b、miR-200c靶基因,分析miR-200b、miR-200c过表达抑制HGF表达,并分析miR-200b、miR-200c在体外影响结直肠癌细胞增殖活性的情况。结果培养1d、2d、3d,阴性对照模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b模拟物、miR-200c模拟物、miR-200b/c模拟物(P<0.05),阴性对照抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂、miR-200b/c抑制剂(P<0.05),miR-200b模拟物、miR-200c模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b/c模拟物(P<0.05),miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b/c抑制剂(P<0.05)。结论miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖,可以作为潜在治疗靶点。

独立生长因子1负调控GREM1基因抑制肝星状细胞增殖与活化实验研究

目的:探讨独立生长因子1(GFI1)负调控GREM1基因对肝星状细胞(HSC)增殖与活化的影响。方法:选择HSC细胞株LX-2培养并进行相关实验。采用CCK-8法检测GREM1基因和GFI1对LX-2细胞增殖的影响。采用Western blot分析GREM1基因和GFI1对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达的影响。利用生物信息学方法分析GREM1基因的转录因子并通过染色质免疫共沉淀(CHIP)实验验证GREM1基因是否可与GFI1结合。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测GFI1对GREM1 mRNA的影响。通过抑制GFI1并下调GREM1表达分析GFI1是否通过负调控GREM1抑制LX-2细胞增殖和α-SMA表达。结果:过表达GREM1可促进LX-2细胞增殖及上调α-SMA蛋白表达水平(均P<0.05)。GFI1可能是GREM1的上游转录因子,CHIP实验证实GFI1可与GREM1直接结合。下调GFI1表达可促进GREM1 mRNA表达和LX-2细胞增殖,并上调α-SMA蛋白表达水平(均P<0.05)。下调GREM1表达可以减弱GFI1表达(P<0.05)。结论:GREM1可促进HSC活化,而GFI1可通过负调控GREM1基因抑制HSC增殖与活化。

孕妇血清成纤维细胞生长因子4和成纤维细胞生长因子受体4水平与妊娠期糖尿病发生风险的相关性研究

目的探讨血清成纤维细胞生长因子4(FGF4)、成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)水平与妊娠期糖尿病发生风险的相关性。方法选取2019年1月至2021年1月宁德师范学院附属宁德市医院收治的妊娠期糖尿病病人94例为研究组,另外选取同期在该院定期进行产检的健康孕妇94例为对照组。收集病人的一般临床资料,酶联免疫吸附测定检测血清FGF4和FGFR4水平,血糖分析仪检测糖代谢指标水平。采用Pearson法分析血清FGF4与FGFR4的相关性及二者与糖代谢指标的相关性,多因素logistic回归分析妊娠期糖尿病发生的影响因素;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清FGF4和FGFR4对妊娠期糖尿病发生的预测价值。结果研究组血清FGF4(186.45±34.87)ng/L高于对照组(149.83±29.90)ng/L(P<0.05);研究组血清FGFR4(194.28±41.59)ng/L高于对照组(168.92±37.55)ng/L(P<0.05)。研究组病人空腹血糖、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析发现,妊娠期糖尿病病人血清FGF4与FGFR4水平呈正相关(P<0.05),血清FGF4、FGFR4与空腹血糖、2 hPG、HbA1c、FINS及HOMA-IR均呈正相关(P<0.05)。logistic回归分析结果显示,FGF4、FGFR4、空腹血糖和HOMA-IR是妊娠期糖尿病发生的独立危险因素(P<0.05)。血清FGF4、FGFR4单独及联合预测妊娠期糖尿病发生的AUC分别为0.80、0.75和0.88,灵敏度分别为85.11%、61.70%和82.98%,特异度分别为60.64%、77.66%和80.85%;二者联合的预测效能显著优于FGF4、FGFR4各自单独预测(Z_(FGF4-联合)=3.33、Z_(FGFR4-联合)=4.37,P<0.05)。结论妊娠期糖尿病病人血清FGF4和FGFR4水平高表达,与糖代谢指标均呈正相关,对妊娠期糖尿病病人具有一定的预测价值,临床应用价值较大。

牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液冲管治疗在慢性创面修复中的应用价值

目的:研究牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液冲管治疗在慢性创面修复的应用价值。方法:选取台州市中医院2021年8月~2022年8月收治的慢性创面患者66例,随机数字表法分为对照组和研究组,各33例。对照组采用负压封闭引流(VSD)疗法,研究组采用VSD治疗的基础上,加施重组牛碱性成纤维细胞成长因子(rb-bFGF)外用溶液进行冲管治疗。对比两组患者创面愈合时间、治疗情况(引流管更换次数、换药次数、创面愈合时间、住院时间),治疗期间肉芽成熟度,治疗前后收集患者的组织渗出液,采用血气分析仪法检测患者的氧分压,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其白细胞介素-2(IL-2)水平,ELISA检测患者乳酸脱氢酶(LDH)及琥珀酸脱氢酶(SDH)水平,统计治疗后两组的治疗有效率及并发症发生情况。结果:研究组患者创伤愈合时间、引流管更换次数、换药次数、住院时间均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗15 d后,研究组肉芽成熟率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后氧分压、IL-2、SDH均比治疗前高,且研究组氧分压、IL-2、SDH均比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);LDH治疗后比治疗前低,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗总有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。对照组并发症发生率高于研究组,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:使用rB-bFGF外用溶液对慢性创面进行冲管治疗可有效提高疗效,缩短疗程,减少患者住院时间,有较高的临床应用价值。

从脑肠轴探讨黄芪建中汤对胃溃疡大鼠肝细胞生长因子及ERK1/2和TFF3蛋白表达的影响

目的观察黄芪建中汤对脾胃虚寒型胃溃疡大鼠胃组织中肝细胞生长因子(HGF)及下丘脑和海马区中磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及肠三叶因子3(TFF3)蛋白表达的影响,探究黄芪建中汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡的作用及可能机制。方法用随机数字表法将60只大鼠分为正常组、模型组、奥美拉唑组和黄芪建中汤组,每组15只。正常组隔日蒸馏水灌胃,每日不限饮食;其余组大鼠先以小承气汤结合饥饱失常法复制脾胃虚寒证模型,实验第11天采用冰醋酸法建立胃溃疡模型。之后模型组继续隔日上午给予小承气汤并当日禁食,次日恢复饮食,共持续20 d;奥美拉唑组和黄芪建中汤组大鼠除同模型组的每日处理外,每日下午分别给予4.2 mg/(kg·d)奥美拉唑和6.8 g/(kg·d)黄芪建中汤灌胃;正常组隔日上午及每日下午给予蒸馏水灌胃。实验结束后摘取各组大鼠胃,记录溃疡大小并计算胃溃疡指数,HE染色观察胃组织病理形态,免疫组化染色检测胃组织中HGF及下丘脑和海马区中p-ERK1/2、TFF3蛋白阳性表达情况。结果正常组大鼠胃黏膜正常,未见溃疡点及糜烂斑等;模型组大鼠胃黏膜皱襞存在中断,有点状溃疡、糜烂及大量炎性细胞浸润;黄芪建中汤组与奥美拉唑组胃黏膜损伤较模型组轻,有少量炎性细胞浸润,未见明显溃疡。奥美拉唑组和黄芪建中汤组大鼠的胃溃疡指数均明显低于模型组(P均<0.05),胃组织中HGF及下丘脑和海马区中p-ERK1/2、TFF3蛋白表达平均光密度均明显高于模型组(P均<0.05)。结论黄芪建中汤能促进脾胃虚寒型胃溃疡大鼠溃疡愈合,上调HGF、ERK1/2及TFF3的表达可能是其基于脑肠轴治疗脾胃虚寒型胃溃疡的作用机制之一。