黄芩苷对小鼠肝细胞色素P450的选择性诱导

目的 观察黄芩苷对小鼠肝细胞色素P45 0及其亚家族的影响。方法 用紫外分光光度法分别测定小鼠肝微粒体细胞色素P45 0与b5含量及氨基比林N 脱甲基酶 (ADM )、7 乙氧基香豆素O 脱乙基酶 (ECD)、苯并芘羟化酶 (AHH)活性。用蛋白印迹杂交技术鉴定细胞色素P45 0同功酶。结果 黄芩苷可使小鼠肝微粒体细胞色素P45 0含量显著增加 ,并使ADM ,ECD及AHH 3种酶活力显著增强。对 6种P45 0同功酶的鉴定结果显示 ,黄芩苷可选择性诱导 1A1,2B1及 2C113种同功酶 ,对细胞色素b5含量及 3A2 ,2D1和 2E13种同功酶无诱导作用。结论 黄芩苷对小鼠肝细胞色素P45 0有选择性诱导作用。

浙江不同产地浙贝配伍乌头对大鼠肝细胞色素P450重要同工酶含量的影响

研究浙江不同产地浙贝配伍乌头对大鼠肝细胞色素P450重要同工酶活性的影响。方法:应用HPLC-UV测定CYP450三种同工酶的特异性探针底物咖啡因(CYP1A2)、氨苯砜(CYP3A4)和氯唑沙宗(CYP2E1)的代谢速率,评价各实验组对大鼠肝细胞色素P450重要同工酶的诱导或抑制作用。结果:①与乌头组比较,磐安浙贝及缙云浙贝配伍乌头后,都显著性诱导了CYP1A2,但鄞州浙贝配伍乌头后对CYP1A2活性的诱导作用不明显。浙江不同产地浙贝单用组对CYP1A2的影响两两间比较无统计学差异;浙江不同产地浙贝配伍乌头组两两间比较发现,鄞州浙贝配伍乌头组的CYP1A2活性显著性弱于其它两个产地浙贝配伍乌头组。②与乌头组比较,浙江不同产地浙贝配伍乌头组都明显抑制了CYP3A4,并且两两间比较无统计学差异。鄞州浙贝单用组CYP3A4的活性较缙云浙贝单用组弱,有统计学差异。③与乌头组比较,浙江不同产地浙贝配伍乌头组对CYP2E1都具有明显诱导作用,但是两两间比较无统计学差异。三种产地浙贝单用组对CYP2E1活性的影响两两间无统计学差异。结论:浙江不同产地的浙贝配伍乌头对CYP1A2和CYP2E1的活性有明显的诱导作用,而对于CYP3A4有明显的抑制作用。

探针药物评价藤黄酸对肝细胞色素P450酶亚型的影响

目的用Cocktail探针药物法,研究藤黄酸对大鼠肝细胞色素P450(CYP450)的影响。方法将SD大鼠随机分组,藤黄酸组给予藤黄酸0.5%CMC-Na溶液(2mg·mL-1),以0.5%CMC-Na为空白对照,在一定的时间点采集血样,通过HPLC检测探针药物在大鼠体内的代谢情况,以评价藤黄酸对肝细胞色素P450酶的影响。结果藤黄酸组中咖啡因和氨苯砜的代谢情况与空白组没有显著性差异,但氯唑沙宗的代谢加快,t1/2缩短。结论藤黄酸对代谢酶CYP1A2及CYP3A4的影响不明显,但对代谢酶CYP2E1具有诱导作用。

电针对非酒精性脂肪肝肝细胞色素P450 2E1表达及氧化抗氧化的影响

目的:研究电针对非酒精性脂肪肝(NAFLD)肝细胞色素P450 2E1(CYP2E1)表达及氧化抗氧化的影响.方法:用高脂饲料诱导大鼠脂肪肝模型,同时给予电针治疗,观察肝组织病理形态的变化和肝CYP2E1表达.测定肝内丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)以及谷胱甘肽(GSH)含量的变化.结果:与脂肪肝模型组比较,电针组的肝组织脂肪变性和炎性损伤得以改善.免疫组化证明电针治疗能抑制脂肪肝肝细胞色素CYP 2E1的表达,同时肝内MDA,TG,TC显著降低(P<0.01),SOD,GSH活性升高(P<0.01).结论:电针通过抑制脂肪肝细胞色素CYP 2E1的表达,从而减轻脂质过氧化反应,增强抗氧化能力,使肝组织的脂肪变性和炎性损伤得以改善.

普萘洛尔在人肝细胞色素P450转基因细胞中的立体选择性测定

目的 :建立一种手性色谱法 ,用于普萘洛尔经人肝细胞色素 P4 5 0转基因细胞 S9代谢的立体选择性研究。方法 :以 S- (+) -普罗帕酮为内标 ,用柱前 GITC手性衍生化反相高效液相色谱法测定普萘洛尔对映体在 S9孵育液中的浓度。结果 :S- (- ) -普萘洛尔、内标及 R- (+) -普萘洛尔获基线分离。在 5～ 5 0 0 μmol/ L范围内线性良好。定量限 5 μmol/ L(n=5 ,RSD<10 % )。S- (- ) -和 R- (+) -普萘洛尔的平均回收率分别为 98.7%和 98.1%。日内、日间精密度均小于 10 %。经时孵育试验表明 ,普萘洛尔经 CYP2 C18有 S- (- ) -体优先代谢的立体选择性 ,而经CYP2 C9有 R- (+) -体优先代谢的立体选择性。结论 :该法简便、准确、重现性好、专属性强 ,可以用于普萘洛尔体外代谢的立体选择性研究。

蹄叶橐吾乙醇提取物对肝细胞色素P450的影响

目的研究蹄叶橐吾乙醇提取物对大鼠和小鼠肝细胞色素P450(CYP450)的影响。方法蹄叶橐吾乙醇提取物口服给药后,观察其对小鼠戊巴比妥钠催眠作用的影响、对大鼠肝微粒体CYP450含量、肝脏指数的影响,采用HPLC测定探针药的代谢率观察其对大鼠肝CYP450的7种亚型酶活性的影响。结果蹄叶橐吾乙醇提取物对戊巴比妥钠诱导小鼠的睡眠时间无影响,大鼠肝CYP450含量及肝脏指数无显著变化,对大鼠肝CYP450的7种亚型探针药的代谢率亦无影响。结论蹄叶橐吾乙醇提取物对肝药酶无诱导作用。

3种垫料物质对大鼠血液生化指标和肝细胞色素P_(450)酶系的影响

目的 观察松木、玉米秸、麦秸 3种垫料物质对大鼠血液生化指标和肝脏细胞色素P4 50 (CytP4 50 )酶系的影响。方法 将SD大鼠随机分为松木组、玉米秸组、麦秸组和对照组 ,于饲养 1、2、3、4周时测定血液中的丙氨酸转氨酶 (GPT)、白蛋白 (ALB)和总蛋白 (TP) ,测定肝脏细胞色素P4 50 酶 (CytP4 50 )、细胞色素b5酶 (Cytb5)和NADPH_细胞色素C还原酶。结果 3个实验组与对照组的GPT、ALB和TP值相比无统计学差异 (P >0 0 5 ) ,且均在正常范围之内。松木在 2～ 4周对CytP4 50 有显著诱导作用 (P <0 0 5 ) ,第 3周差异极显著 (P <0 0 1) ;在 1～ 4周对NADPH_细胞色素C还原酶有诱导作用 (P <0 0 5 ) ,其中 2～ 4周差异极显著 (P <0 0 1) ;在 2、3周对Cytb5有诱导作用 (P <0 0 5 )。麦秸在第 2、3周可以诱导CytP4 50 和Cytb5的活性增加 (P <0 0 5 ) ,在 3、4周可以诱导NADPH_细胞色素C还原酶的活性增加 (P <0 0 5 ) ;玉米秸在 2、3周时对CytP4 50 和NADPH_细胞色素C还原酶均有诱导作用 (P <0 0 5 ) ,而仅在第 3周表现对Cytb5的诱导 (P <0 0 5 )。将玉米秸组和麦秸组的酶诱导作用与松木组进行比较 ,2～ 4周 ,玉米秸组CytP4 50 的值低于松木组的值 (P <0 0 5 ) ;2、3周麦秸组CytP4 50

兔激素性股骨头坏死与肝细胞色素P4503A酶活性的相关性研究

目的:探讨兔激素性股骨头坏死与肝细胞色素P4503A酶活性的相关性。方法:将18只SPF级健康新西兰家兔随机分成3组,即空白对照组、诱导剂组、抑制剂组,每组6只。空白对照组以生理盐水灌胃,诱导剂组肌肉注射苯巴比妥注射液,抑制剂组以伊曲康唑混悬液灌胃。连续用药3周后,测定血清肝细胞色素P4503A酶活性,并采用肌注甲泼尼龙琥珀酸钠方法造模。继续用药3周后处死动物,制作并观察病理组织标本,计算股骨头坏死面积和坏死率。结果:①肝细胞色素P4503A酶活性。空白对照组用药前后肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异无统计学意义(t=1.859,P=0.122);诱导剂组用药后肝细胞色素P4503A酶活性升高(t=7.482,P=0.002);抑制剂组用药后肝细胞色素P4503A酶活性降低(t=5.060,P=0.004)。用药前3组肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异无统计学意义(F=1.428,P=0.259);用药后3组肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异有统计学意义(F=8.577,P=0.001);两两比较,诱导剂组高于空白对照组和抑制剂组(P=0.018,P=0.003),抑制剂组低于空白对照组(P=0.045)。②股骨头坏死面积。3组家兔股骨头坏死面积比较,差异有统计学意义(F=5.289,P=0.005)。组间两两比较,诱导剂组坏死面积小于空白对照组和抑制剂组(P=0.024,P=0.008),抑制剂组大于空白对照组(P=0.039)。③股骨头坏死率。3组家兔股骨头坏死率比较,差异有统计学意义(F=4.831,P=0.007)。组间两两比较,诱导剂组坏死率小于空白对照组和抑制剂组(P=0.045,P=0.015),抑制剂组大于空白对照组(P=0.031)。④肝细胞色素P4503A酶活性与股骨头坏死面积及坏死率的相关性。肝细胞色素P4503A酶活性与股骨头坏死面积和坏死率均呈负相关(r=-0.740,P=0.001;r=-0.753,P=0.001)。结论:肝细胞色素P4503A酶在兔激素性股骨头坏死中起重要作用,其活性与兔激素性股骨头坏死的发生呈显著负相关。

维生素E、硒对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P4501A1及脂质过氧化的干预作用

目的:研究维生素E、硒对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P4501A1及脂质过氧化的干预作用.方法:♂SD大鼠,随机均分为5组:对照组(普通饲料)、模型组(高脂饲料)、VE干预组、Se干预组、VE+Se干预组,建模5wk处死全部大鼠.生化方法检测血清及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝细胞色素P4501A1mRNA表达的变化,免疫组化方法测定肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)表达的变化.结果:与对照组比较,模型组血清及肝组织中SOD显著降低(312.72±49.51kU/Lvs583.23±63.37kU/L;8.13±0.63U/mgprot.vs13.99±2.33U/mgprot.,P<0.01),MDA增高(13.40±4.24mmol/Lvs6.43±1.76mmol/L;9.79±0.94nmol/mgprot.vs6.80±0.97nmol/mgprot.P<0.01),细胞色素P4501A1mRNA表达水平,肝组织TNF-α、NF-κB蛋白表达明显增强(0.628±0.116vs0,0.230±0.013vs0.03±0.006,0.069±0.01vs0.003±0.001;P<0.05).与模型组比较VE组、Se组的血清及肝组织中SOD增高,MDA降低,细胞色素P4501A1mRNA表达水平略下降;肝组织TNF-α、NF-κB蛋白表达下降(P<0.05).VE+Se组与模型组比较,血清SOD明显增高,其值接近对照组水平;细胞色素P4501A1mRNA表达水平显著下降(0.324±0.070vs0.628±0.116,P<0.05).结论:非酒精性脂肪肝的脂质过氧化损伤及相关因子的表达可能与肝细胞色素P4501A1表达上调有关.VitE和硒能提高机体的抗氧化能力,对非酒精性脂肪肝有保护作用,二者联合作用更明显.

姜黄对肝细胞色素P4501A2的影响

目的 研究姜黄对肝细胞色素P4501A2的影响。方法 以咖啡因为工具药,HPLC法检测其药代动力学变化。结果 咖啡因因体内代谢减慢,半衰期延长。结论 姜黄可以抑制肝药酶,减慢咖啡因的代谢。

非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P450 1A1基因及表达变化的意义

目的研究非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P4501A1基因和表达变化及其意义。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为两组,正常对照组8只,高脂饮食组2、4、8、12各8只,紫外分光光度计法检测P4501A1活性(7乙氧异恶唑0脱乙基酶,EROD);免疫组织化学和Westernblot方法测定肝细胞色素P4501A1表达变化,逆转录聚合酶链反应测定肝细胞色素P4501A1mRNA表达变化。结果脂肪肝2、4、8和12周EROD活性分别为325.07±59.68、345.25±49.28、468.95±55.28和548.68±43.25nmol·mg-1·min-1,与正常对照组260.42±35.32nmol·mg-1·min-1比较明显增高(P<0.01),肝细胞色素P4501A1基因及蛋白表达随着脂肪肝程度的加重明显增强。结论非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P4501A1基因和表达变化与脂肪肝引起的肝脏损害程度密切相关。

中药骨康诱导兔肝细胞色素CYP3A表达及抗激素性股骨头坏死实验研究

目的:探讨中药骨康通过对CYP3A活性调控预防股骨头坏死的作用。方法:将SPF级大白兔40只随机分成对照组(CT组)、诱导剂组(ID组)、抑制剂组(IH组)、骨康组(GK组),每组10只。CT组生理盐水灌胃,ID组苯巴比妥肌肉注射,IH组伊曲康唑口服,GK组中药骨康灌胃。连续用药3周后测定肝脏CYP3A活性,肌注甲泼尼龙琥珀酸钠造模,继续3周后处死动物,测量股骨头坏死率和股骨头空骨陷凹率。结果:给药后GK组CYP3A活性显著升高(P<0.05),CYP3A活性明显高于CT组及IH组(P<0.05);GK组股骨头坏死发生率明显低于CT组和IH组(P<0.05);GK组股骨头空骨陷凹率明显小于CT组和IH组(P<0.05);CYP3A活性与兔股骨头坏死发生率及空骨陷凹率均呈负相关(P<0.05)。结论:肝细胞色素CYP3A水平在兔激素性股骨头坏死中起重要作用,中药骨康能显著诱导CYP3A高表达,对激素性股骨头坏死有预防作用。

电针对非酒精性脂肪肝胰岛素抵抗及肝细胞色素P450 2E1表达的影响

目的:研究电针对非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)胰岛素抵抗及肝细胞色素P450 2E1(cyto-chrome P450 2E1,CYP 2E1)表达的影响。方法:SD大鼠33只随机分组,正常对照组(11只)、造模组(22只)。后者高脂饲料喂养8周后处死3只(正常对照组1只,造模组2只),验证造模成功后将造模组分为NAFLD模型组(10只)和电针治疗组(10只),后者施以电针"治疗"。12周末处死所有动物,检测血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)、血清游离脂肪酸(FFA),测定肝内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)以及谷胱甘肽(GSH)含量,观察肝组织病理形态的变化和肝CYP 2E1表达。结果:与NAFLD模型组比较,电针组的肝组织脂肪变性和炎性损伤得以改善。免疫组化证明电针治疗能抑制脂肪肝肝细胞色素CYP 2E1的表达,电针组大鼠的血糖、血清胰岛素、血清游离脂肪酸指标均显著低于模型组(均P<0.05),肝内MDA、TG、TC显著降低(P<0.01),SOD、GSH活性升高(P<0.01)。结论:电针通过改善胰岛素抵抗状态和抑制肝CYP 2E1表达,从而减轻脂质过氧化反应,增强抗氧化能力,使肝组织的脂肪变性和炎性损伤得以改善。

rh-EGF对恒河猴肝细胞色素P450s的影响

目的 :研究重组人表皮生长因子 (recombinanthumanepidermalgrowthfactor,rh EGF)对恒河猴肝细胞色素P4 5 0s同工酶活性的影响。方法 :恒河猴口服rh EGF 16 ,32 ,16 0 μg·kg-1·d-1,qd ,连续给药 2 6周 ,于停药时及停药 8周后 ,各解剖一半动物 ,制备肝微粒体 ,进行肝细胞色素P4 5 0s总量、肝微粒体蛋白含量测定 ,用荧光分光光度法和HPLC法进行肝细胞色素P4 5 0s同工酶中 7 乙氧基试卤灵脱乙基酶 (CYP1A1)、香豆素 7 羟化酶(CYP2A6 )、甲苯磺丁脲羟化酶 (CYP2C8/ 9)、S (+) 美芬妥英羟化酶 (CYP2C19)、丁呋洛尔 1 羟化酶 (CYP2D6 )、氯唑沙宗羟化酶 (CYP2E1)比活性测定。结果 :给药 2 6周和停药 8周后 ,rh EGF对恒河猴肝细胞色素P4 5 0s总量、微粒体蛋白含量无明显影响 ,肝细胞色素P4 5 0s同工酶 (CYP1A1,CYP2A6 ,CYP2C8/ 9,CYP2C19,CYP2D6 ,CYP2E1)活性无显著变化。结论 :本试验建立的恒河猴肝细胞色素P4 5 0s测定方法快速、简便 ,可广泛用于药物开发早期以及预测药物间相互作用和药物毒性的研究等。rh EGF对恒河猴肝P4 5

肝细胞色素P450 3A在衰老加速鼠中的作用

为探讨衰老与细胞色素P4503A（CYP3A）的活性是否有关，本文用红霉素N-脱甲基酶活性测定法分别检测了SAM-R1、SAM-P1和SAM-P8三组衰老加速鼠（SAM）中肝微粒体细胞色素P4503A的活性，每组动物分为7、13、36周龄组。结果发现SAM－P1和SAM－P8组中随年龄增长，CYP3A的活性均降低。13周时，SAM－P1组CYP3A活性下降39．5％（t＝2．525，P＜0．05）；SAM－P8组CYP3A活性下降约43．7％（t＝2．24，P＜0．05），36周与13周组相比，SAM－P1组CYP3A活性下降约71．3％（t＝2．84，P＜0．02），SAM－P8组中降低约62．9％（t＝3．21，P＜0．01），SAM－R1组中7－13周时降低约13．6％，13周至36周降低约38．2％，t＝2．37．P＜0．05。提示细胞色素P4503A对衰老有重要影响作用。

中草药对肝细胞色素P450的作用

细胞色素P450（CYP450）是肝微粒体混合功能氧化酶中最重要的一族，据文献报道它可被许多化合物诱导或抑制，但有关中草药对CYP450影响作用的研究尚不多见报导。本课题的目的是要筛选几种有潜力的、临床上经常应用的、毒副作用小的中药，采用体内实验和体外实验两种手段来评价中药对细胞色素P450的影响。

“cocktail”探针药物法评价五种肝细胞色素P450酶活性的应用

目的：研究肝缺血预适应（IPC）和肝缺血再灌（IR）损伤对大鼠肝细胞色素P450酶（CYP）亚型CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1、CYP2D6和CYP3A体内代谢活性的影响，建立评价肝脏药物代谢功能的指标，为新药筛选、肝药物代谢研究提供参考。方法：采用“cocktail”探针药物法，使用5种特异性探针药物：咖啡因、氯唑沙宗、甲苯磺丁脲、美托洛尔和咪达唑仑，通过其药代动力学参数的变化来评价肝缺血预适应和肝缺血再灌对大鼠CYP亚型CYP1A2、

环磷酰胺对小鼠肝细胞色素P450含量的影响

目的 了解环磷酰胺 (CP)对小鼠肝细胞色素P4 5 0含量的影响。方法 小鼠腹腔注射CP 2 0mg·kg-1·d-1和CP 4 0mg·kg-1·d-1,连续 4天。以聚乙二醇法制备微粒体 ,测定肝微粒体中P4 5 0的含量。结果 CP 2 0mg·kg-1和CP 4 0mg·kg-1两组动物肝微粒体P4 5 0含量与对照组相比明显下降 (P <0 .0 5 )。结论 CP具有抑制P4 5