兔激素性股骨头坏死与肝细胞色素P4503A酶活性的相关性研究

目的:探讨兔激素性股骨头坏死与肝细胞色素P4503A酶活性的相关性。方法:将18只SPF级健康新西兰家兔随机分成3组,即空白对照组、诱导剂组、抑制剂组,每组6只。空白对照组以生理盐水灌胃,诱导剂组肌肉注射苯巴比妥注射液,抑制剂组以伊曲康唑混悬液灌胃。连续用药3周后,测定血清肝细胞色素P4503A酶活性,并采用肌注甲泼尼龙琥珀酸钠方法造模。继续用药3周后处死动物,制作并观察病理组织标本,计算股骨头坏死面积和坏死率。结果:①肝细胞色素P4503A酶活性。空白对照组用药前后肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异无统计学意义(t=1.859,P=0.122);诱导剂组用药后肝细胞色素P4503A酶活性升高(t=7.482,P=0.002);抑制剂组用药后肝细胞色素P4503A酶活性降低(t=5.060,P=0.004)。用药前3组肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异无统计学意义(F=1.428,P=0.259);用药后3组肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异有统计学意义(F=8.577,P=0.001);两两比较,诱导剂组高于空白对照组和抑制剂组(P=0.018,P=0.003),抑制剂组低于空白对照组(P=0.045)。②股骨头坏死面积。3组家兔股骨头坏死面积比较,差异有统计学意义(F=5.289,P=0.005)。组间两两比较,诱导剂组坏死面积小于空白对照组和抑制剂组(P=0.024,P=0.008),抑制剂组大于空白对照组(P=0.039)。③股骨头坏死率。3组家兔股骨头坏死率比较,差异有统计学意义(F=4.831,P=0.007)。组间两两比较,诱导剂组坏死率小于空白对照组和抑制剂组(P=0.045,P=0.015),抑制剂组大于空白对照组(P=0.031)。④肝细胞色素P4503A酶活性与股骨头坏死面积及坏死率的相关性。肝细胞色素P4503A酶活性与股骨头坏死面积和坏死率均呈负相关(r=-0.740,P=0.001;r=-0.753,P=0.001)。结论:肝细胞色素P4503A酶在兔激素性股骨头坏死中起重要作用,其活性与兔激素性股骨头坏死的发生呈显著负相关。

细胞色素P450-RhFRED人工融合酶的研究进展与应用

来自于红球菌Rhodococcus sp.NCIMB 9784的P450RhF是一个自给自足型的细胞色素P450酶,它的血红素结构域主要负责控制酶的底物特异性,P450还原酶伴侣蛋白RhFRED与细胞色素P450血红素结构域天然融合在一起,电子主要从蛋白分子内转移到P450血红素结构域。依据融合型P450RhF自给自足的特性,有学者利用P450RhF的还原伴侣蛋白RhFRED,与其它P450构建人工融合酶P450-RhFRED,来实现多种细胞色素P450基因的功能表达。基于此建立的P450-Rh-FRED融合文库对未知功能P450的催化功能探索有很大意义,P450-RhFRED融合酶技术也可用于开发已知细胞色素P450酶的工业应用。

人类白细胞抗原-DQA1、细胞色素P4503A5*3基因多态性与特发性膜性肾病遗传易感性关联性研究

目的:探讨分析人类白细胞抗原(HLA)-DQA1、细胞色素P450(CYP)3A5*3基因多态性与特发性膜性肾病(IMN)遗传易感性的关联性。方法:将IMN患者62例作为研究组,另将健康者62例作为对照组。采用聚合酶链反应(PCR)技术和基因测序技术检测入组患者的HLA-DQA1(rs2187668)、CYP3A5*3(rs776746)基因型,判断各基因型与IMN患者的关系。结果:研究组中HLA-DQA1 rs2187668基因型AA占比高于对照组(P<0.05),基因型GG、AG占比低于对照组(均P<0.05);研究组等位基因A占比高于对照组(P<0.05)。研究组与对照组CYP3A5*3 rs776746不同基因型占比及等位基因占比比较无统计学差异(均P>0.05)。HLA-DQA1 rs2187668AA基因型IMN患者24 h尿蛋白量和血肌酐水平显著高于AG和GG型,肾小球滤过率显著低于AG和GG型(均P<0.05)。结论:HLA-DQA1 rs2187668位点的基因多态性与IMN的发生有关,AA基因型和等位基因A可增加IMN易感性。

CYP27A1对肝细胞癌预后的影响及生物学作用

目的分析细胞色素P450家族27亚家族A成员1(CYP27A1)对肝细胞癌(HCC)预后的影响及生物学作用,并初步探讨其影响HCC生长的分子机制。方法基于癌症基因数据库(TCGA)分析CYP27A1在HCC中的表达情况及其与HCC患者预后的关系;基于CYP27A1表达量中位值,将样本分为CYP27A1高表达组(n=170)与CYP27A1低表达组(n=170),利用基因集富集分析(GSEA)分别对两组进行基因集富集分析;免疫荧光染色检测及数据库查找CYP27A1蛋白亚细胞定位;构建过表达CYP27A1质粒,转染HCC细胞MHCC-97H和HCCLM3,设置阴性对照组(转染空载质粒)与CYP27A1过表达组(转染过表达CYP27A1重组质粒)。采用CCK-8法、流式细胞仪、活性氧(ROS)荧光探针等检测过表达CYP27A1对HCC细胞活力、凋亡及ROS生成的影响;结合生物信息学分析CYP27A1与ROS生成相关基因及HCC增殖相关基因表达的相关性。结果与正常肝组织比较,HCC组织中CYP27A1 mRNA表达量明显降低(P<0.01)。CYP27A1表达与HCC患者性别、T分期、肿瘤分级和肿瘤分期有关(P<0.05)。CYP27A1低表达组总生存率明显低于高表达组(P<0.01)。GSEA富集分析结果显示,CYP27A1低表达组HCC“干性”亚类和“增殖”亚类基因集水平升高。在MHCC-97H和HCCLM3细胞中,CYP27A1主要定位于细胞核;在HepG2细胞中,CYP27A1主要定位于线粒体。与阴性对照组比较,过表达CYP27A1后,HCC细胞活力下降(P<0.01)、ROS水平降低(P<0.05),而细胞凋亡水平无明显改变(P>0.05)。CYP27A1与抑制ROS生成相关基因表达呈正相关(P<0.05),抑制ROS生成相关基因与HCC增殖相关基因表达呈负相关(P<0.05)。结论CYP27A1在HCC中呈低表达,下调CYP27A1可能通过促进ROS生成促进HCC恶性生长。

雷公藤甲素通过抑制细胞色素P4503A4酶增强肝损伤研究

目的研究雷公藤甲素诱导细胞色素P450 3A4(CYP3A4)表达下调在其引发肝损伤中的作用。方法将L-02细胞和C57BL/6雄性小鼠随机分为4组,分别为正常组(C)、雷公藤甲素(TP)组、雷公藤甲素(TP)+卡马西平(CBZ)组、雷公藤甲素(TP)+氨氯地平(AML)组, 24 h后收集培养基,C57BL/6雄性小鼠2周后安乐死,取血和肝脏。流式细胞仪观察用药后各组细胞的凋亡率,小鼠肝脏进行组织染色观察肝细胞损伤情况。试剂盒检测细胞上清液和小鼠血清的丙氨酸氨基转移酸(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)。通过Western blot法和RT-PCR法检测细胞和小鼠肝脏CYP3A4的mRNA和蛋白表达水平,应用高效液相色谱法检测细胞培养基中和小鼠血清中雷公藤甲素的含量。结果流式细胞仪检测的细胞凋亡结果和小鼠肝脏病例照片结果显示,TP组明显比C组严重,加入P450 3A4诱导剂的TP+CBZ组则明显减轻,而加入P450 3A4抑制剂的TP+AML组的细胞进一步加剧。体内外ALT和AST检测结果显示,TP组明显高于C组,TP+CBZ组则明显降低,TP+AML组进一步增加。Western blot法和RT-PCR结果显示,TP组CYP3A4表达量明显低于C组,TP+CBZ组的CYP3A4表达量则明显升高,TP+AML组的CYP3A4表达量更低。高效液相检测结果显示,TP+CBZ组中TP的含量低于TP组,而TP+AML组中TP的含量则相反。结论 TP通过抑制其主要代谢酶CYP3A4来减慢自身代谢,可能是其产生肝损伤的机制之一。

肝细胞微粒体的制备和细胞色素P450氧化酶活性测定

目的：为测定人肝细胞微粒体细胞色素Ｐ４５０氧化酶的活性。方法：用差速离心法制备３例人肝细胞微粒体。结果：细胞色素Ｐ４５０的含量为０．５２３±０．００５ｎｍｏｌ·ｍｇ－１；细胞色素ｂ５为０．２８５±０．０２５ｎｍｏｌ·ｍｇ－１；氨基比林Ｎ－脱甲基酶的活力为０．５±０．６ｎｍｏｌ·ｍｇ－１；乙基吗啡Ｎ－脱甲基酶活力为０．９８±０．０８ｎｍｏｌ·ｍｇ－１。结论：Ｐ４５０酶活性影响因素较多，个体差异大。临床用药时应考虑患者的个体情况。

复方丹参滴丸对大鼠肝细胞色素P450酶的影响

目的观察复方丹参滴丸及其单味药对大鼠肝细胞色素P450酶(CYP)主要亚型的影响。方法 SD大鼠分别ig给予复方丹参滴丸0.3258 g.kg-1,丹参0.27 g.kg-1,三七0.0528 g.kg-1和冰片0.003 g.kg-1,每天1次,连续28 d,取大鼠肝微粒体,与CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12,CYP2C13,CYP2D2和CYP3A1特异性底物探针共孵育,用高效液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS/MS)测定底物的代谢产物,分析CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12,CYP2C13,CYP2D2和CYP3A1酶活性,同时用PCR方法检测cyp1a2,cyp2b1/2,cyp2c11,cyp2e1和cyp3a1 mRNA表达的变化。结果与正常对照组相比,苯巴比妥(阳性对照)对CYP2D2和CYP3A1活性有明显抑制作用,对CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12和CYP2C13有明显诱导作用(P<0.05,P<0.01);复方丹参滴丸对CYP1A2和CYP2B6活性有明显抑制作用,对CYP2D2有诱导作用(P<0.05);丹参对CYP1A2和CYP2B6活性有明显抑制作用(P<0.05);三七对CYP1A2,CYP2B6,CYP2C13和CYP2D2活性有明显抑制作用(P<0.05);冰片明显抑制CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12,CYP2C13和CYP2D2活性(P<0.01),且抑制强度高于复方丹参滴丸。与正常对照组相比,苯巴比妥对cyp1a2和cyp2b1/2 mRNA水平有明显诱导作用(P<0.05);复方丹参滴丸、丹参和三七对cyp1a2,cyp2b1/2,cyp2c11,cyp2e1和cyp3a1 mRNA水平无明显影响;冰片对cyp1a2,cyp2b1/2和cyp2c11 mRNA水平有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01)。结论复方丹参滴丸中各单味药对CYP酶的影响强于全方对CYP酶的影响,其中以冰片对药物代谢酶的影响最为显著。

18α-甘草酸二铵对大鼠肝脏细胞色素P450和II相酶的影响

目的 研究 18α 甘草酸二铵 (18α GL)对肝脏药物代谢酶的影响。方法 ♂Wistar大鼠ig 18α GL 12 5和 5 0mg·kg-1,分别给药 3 ,6和 12d ,对照组给等容量的溶媒。酶学测定肝微粒体细胞色素P45 0 (CYP) ,尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶 (GT)和谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)活性。结果 18α GL抑制苯胺羟化酶 ,乙氧异唑脱乙基酶和红霉素脱甲基酶活性 ,抑制率分别可达 5 3 2 % ,47 3%和 34 3 % ;增加GT1(底物为 7 甲基 4 羟基 香豆素 ) ,GT2 (底物为 4 羟基联苯 )和GST活性 ,分别可达 2 9 9% ,70 3%和 48 3 %。结论 18α GL对大鼠肝微粒体I相酶(CYP2E1,CYP1A1和CYP3A)主要是抑制作用 ,对II相酶 (GT1,GT2 和GST)

朱砂安神丸、朱砂、硫化汞和氯化汞对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响

目的探讨硫化汞(HgS)、氯化汞(HgCl2)、朱砂及其复方朱砂安神丸对肝细胞色素P450酶的影响。方法雄性SD大鼠ig给予朱砂安神丸1.4 g.kg-1、朱砂0.15 g.kg-1、HgS 0.15 g.kg-1和HgCl20.02 g.kg-1,每天1次,连续21 d,观察大鼠日常行为变化,记录体质量,末次给药后处死大鼠,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、肝指数和肝汞蓄积量;RT-PCR法检测肝金属硫蛋白-2(MT-2),CYP1A1,CYP1A2,CYP3A2,CYP4A10,CYP2B1和结构型雄烷受体(CAR)基因的表达。结果与正常对照组相比,HgCl2组大鼠饮食、活动减少,精神较差,体质量明显降低,肝有增大趋势,肝汞蓄积量明显升高(P<0.05),MT-2,CYP1A1,CYP1A2基因表达明显升高(P<0.05),CYP4A10有增高趋势,CAR基因表达明显降低。与正常对照组相比,朱砂、朱砂安神丸和HgS组的肝指数、ALT和汞蓄积量没有明显差异,同时朱砂安神丸、朱砂和HgS组的MT-2,CYP1A1,CYP1A2,CYP3A2,CYP4A10,CAR及CYP2B1基因表达没有明显变化,但朱砂可明显上调CYP3A2基因表达。结论朱砂安神丸、朱砂和HgS短期给药肝组织汞蓄积量远小于HgCl2,未改变MT-2、CYP酶、CAR基因的表达,但朱砂可上调CYP3A2基因表达,而HgCl2可明显影响MT-2、CYP酶、CAR的基因表达。

甘草、芫花合用对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响

目的:为了阐明基于药物代谢酶的中药十八反产生相反作用的机制,选择相反药对甘草、芫花作为研究对象,研究二者合用对主要药物代谢酶CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1/2酶活性的影响.方法:采用高效液相色谱法测定CYP1A2、CYP2E1活性;采用紫外-可见分光光度法测定CYP3A1/2活性.结果:甘草、芫花合用后CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1/2的酶活性增加,与对照组比较有显著差异(P＜0.05～0.001).结论:两药合用对药物代谢酶的影响可能会使某些药物毒性成分在体内代谢特征发生改变,对药物的疗效或毒性产生影响,从而产生基于药物代谢酶的中药间相互作用.

吴茱萸次碱在人肝微粒体中对细胞色素P450酶的抑制作用

目的研究吴茱萸次碱(WZY)在人肝微粒体中对细胞色素P450酶的抑制作用。方法对照组和抑制组酶活性均用探针药测定,探针药物及其代谢产物用HPLC进行检测。用代谢产物与母药比值来表达酶的活性。结果加入50μmol·L-1吴茱萸次碱组CYP1A2,CYP2C19,CYP2E1和CYP2D6的活性显著降低,CYP3A4和CYP2C9活性无显著变化。结论吴茱萸次碱对CYP1A2,CYP2C19,CYP2E1和CYP2D6的活性有显著抑制作用,而对CYP2C9和CYP3A4的活性无显著影响。

氟喹诺酮类药物对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响

目的比较4种氟喹诺酮类药物[左氧氟沙星(LVFX)、加替沙星(GTFX)、莫西沙星(MXFX)、帕珠沙星(PZFX)]对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系的影响。方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、LVFX组(LV组)、GTFX组(GT组)、MXFX组(MX组)、PZFX组(PZ组),每组6只,给药方案为120mg/(kg.d),尾静脉注射给药,连续7d。末次给药后24h处死动物,差速离心法制备肝微粒体混悬液,Lowry法测定肝微粒体蛋白浓度,分光光度法检测肝微粒体CYP450酶系的含量及活性,并采用单因素方差分析进行统计。结果与空白对照组比较,MX组和GT组大鼠肝重明显降低(P<0.01,P<0.05),LV组、GT组和MX组大鼠肝微粒体蛋白浓度明显增加(P<0.01),LV组和GT组CYP450含量增加(P<0.05,P<0.01),GT组细胞色素b5(Cytb5)含量增加(P<0.05)。肝微粒体NADPH-CytC还原酶活性测定结果显示,给药组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。氨基吡啉-N-脱甲基酶活性测定结果显示,LV组、GT组和MX组酶活性与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。红霉素-N-脱甲基酶活性测定结果显示,与空白对照组比较,GT组酶活性降低,MX组酶活性升高,差异有统计学意义(P<0.01)。大鼠肝微粒体CYP450酶系亚家族活性检测结果显示,与空白对照组比较,LV组、MX组和PZ组7-苄基香豆素脱烃酶(BROD)活性升高(P<0.01),GT组7-甲氧基香豆素脱烃酶(MROD)活性降低(P<0.05)、7-苯基香豆素脱烃酶(PROD)活性增加,PZ组PROD活性降低(P<0.01),4种药物均可使乙氧基香豆素脱烃酶(EROD)活性增加(P<0.01)。结论 4种氟喹诺酮类药物对CYP450酶系均有肯定作用,对不同的酶其作用效果不同,从影响范围来看,GTFX、MXFX、LVFX和PZFX的作用依次减小。

大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系检测方法学研究

目的 :建立大鼠肝微粒体蛋白含量以及肝微粒体细胞色素P4 5 0酶系含量与活性测定的紫外和荧光分光光度方法。方法 :应用差速离心法提取大鼠肝微粒体 ,Lowery法测定肝微粒体蛋白浓度 ,应用紫外和荧光分光光度法测定肝微粒体细胞色素P4 5 0酶系含量及活性。结果 :牛血清白蛋白标准曲线的线性范围为 2 5～ 2 5 0mg·L-1,最低检测限为2 5mg·L-1,相关系数r为 0 .9975 ;紫外分光光度法测定细胞色素P4 5 0和细胞色素b5含量及NADPH CytC还原酶活性的结果显示方法灵敏 ;测定氨基比林N 脱甲基酶、红霉素N 脱甲基酶活性的甲醛标准曲线 ,线性范围为 0 .0 5～ 0 .5mmol·L-1,最低检测限为 0 .0 5mmol·L-1,相关系数r为 0 .9988;测定 7 乙氧基香豆素脱烃酶活性的resorufin标准曲线线性范围为 1～ 8μmol·L-1,最低检测限为 1μmol·L-1,相关系数r为 0 .9998。结论 :紫外和荧光分光光度方法测定大鼠肝微粒体细胞色素P4 5 0酶系中 6种酶的含量及活性的灵敏可靠 ,重复性较好。

酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4、1A2活性的作用

目的观察酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4、1A2活性的作用,为临床上安全有效地联合用药提供实验依据。方法采用健康成人肝细胞微粒体,分为对照组和处理组。酮康唑处理组分别加入不同浓度的酮康唑1 ml,对照组仅加入培养液,孵育15 min后再加入CYP450同工酶3A4和1A2的相应底物(分别为睾酮和非那西丁)再孵育20 min。反应终止后用高效液相色谱仪测量代谢产物(分别为6β-羟基睾酮与对乙酰氨基酚)的生成量,分别代表3A4和1A2的活性。结果细胞色素P450同工酶3A4的相对活性百分比减小到对照组50%时(IC50)酮康唑的质量浓度为0.16 mg/L。而同工酶3A4的相对活性百分比随质量浓度酮康唑增加逐渐减小,各处理组与对照组比较差异均有显著性意义(P<0.05)。低剂量细胞色素P450同工酶1A2的相对活性百分比处理组与对照组比较明显降低(P<0.05),高剂量细胞色素P450同工酶1A2的相对活性百分比处理组与对照组比较则明显升高(P<0.05)。结论酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4的活性有抑制作用,然而对细胞色素P450同工酶1A2的活性则是低剂量有抑制作用,而高剂量有诱导作用。

菟丝子水煎液对大鼠肝微粒体细胞色素P450亚型酶活性的影响

目的观察菟丝子对大鼠肝细胞色素P450酶系统中CYP1A2,2D6以及3A4 3种亚型活性的影响。方法对照组和实验组大鼠分别经口给予生理盐水和菟丝子水煎液2周,差速离心分离肝微粒体,HPLC法分别测定大鼠肝微粒体中CYP1A2,2D6以及3A4探针药物的代谢率;通过Western blot测定大鼠肝微粒体中CYP1A2,2D6以及3A4蛋白的相对含量。结果①实验组探针药物非那西丁代谢率高于对照组(P<0.05),Western blot分析显示实验组CYP1A2蛋白表达略高于对照组;②实验组探针药物右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0.05),CYP2D6蛋白表达亦明显高于对照组;③两组间探针药物咪哒唑仑代谢率及CYP3A4蛋白表达无明显差异。结论中药菟丝子水煎液可诱导大鼠肝微粒体中的CYP2D6和CYP1A2,而对CYP3A4无影响。

浙江不同产地浙贝配伍乌头对大鼠肝细胞色素P450重要同工酶含量的影响

研究浙江不同产地浙贝配伍乌头对大鼠肝细胞色素P450重要同工酶活性的影响。方法:应用HPLC-UV测定CYP450三种同工酶的特异性探针底物咖啡因(CYP1A2)、氨苯砜(CYP3A4)和氯唑沙宗(CYP2E1)的代谢速率,评价各实验组对大鼠肝细胞色素P450重要同工酶的诱导或抑制作用。结果:①与乌头组比较,磐安浙贝及缙云浙贝配伍乌头后,都显著性诱导了CYP1A2,但鄞州浙贝配伍乌头后对CYP1A2活性的诱导作用不明显。浙江不同产地浙贝单用组对CYP1A2的影响两两间比较无统计学差异;浙江不同产地浙贝配伍乌头组两两间比较发现,鄞州浙贝配伍乌头组的CYP1A2活性显著性弱于其它两个产地浙贝配伍乌头组。②与乌头组比较,浙江不同产地浙贝配伍乌头组都明显抑制了CYP3A4,并且两两间比较无统计学差异。鄞州浙贝单用组CYP3A4的活性较缙云浙贝单用组弱,有统计学差异。③与乌头组比较,浙江不同产地浙贝配伍乌头组对CYP2E1都具有明显诱导作用,但是两两间比较无统计学差异。三种产地浙贝单用组对CYP2E1活性的影响两两间无统计学差异。结论:浙江不同产地的浙贝配伍乌头对CYP1A2和CYP2E1的活性有明显的诱导作用,而对于CYP3A4有明显的抑制作用。

细胞色素P450酶基因多态性及其介导的药物性肝损伤研究进展

药物性肝损伤是指因药物本身或患者特殊体质从而在药物使用过程中引起的肝脏损伤。代谢特异质是药物性肝损伤的主要发生机制之一,由于难以预测,代谢特异质肝损伤带来的危害相对于传统肝损伤来说更为严重,其主要与代谢酶的基因多态性有关。细胞色素P450(CYP)是生物体内主要的Ⅰ相药物代谢酶。CYP具有遗传多态性,可能介导了部分药物所致的肝损伤。但目前国内尚缺乏系统归纳分析CYP因多态性与药物性肝损伤发生相关性的文献报道。本文综述了CYP酶系中几个主要代谢酶包括CYP3A4,CYP2D6,CYP2C9,CYP1A2和CYP2C19的基因多态性,及CYP基因多态性介导的药物性肝损伤。

氯胺酮多次给药对大鼠肝微粒体内细胞色素P450_2B酶的诱导作用

目的考察氯胺酮对大鼠肝微粒体内细胞色素P450_2B酶活性的影响。方法以10mg.kg-1.d-1氯胺酮灌胃给予大鼠,连续给药10d。在第11d处死大鼠,以钙离子沉淀法制备肝微粒体。采用Omura和Sato方法测定细胞色素P450含量,采用7-戊氧基试卤灵-O-去烷基反应测定细胞色素P450_2B酶的活性。结果给药组和对照组细胞色素P450的总含量分别是(0.679±0.216)nmol·mg-1和(0.398±0.109)nmol·mg-1,细胞色素P450_2B酶的活性分别是(13.40±3.15)pmol·min-1.mg-1和(7.04±2.09)pmol·min-1.mg-1。结论氯胺酮能够增加大鼠肝微粒中细胞色素P450含量,并能显著诱导细胞色素P450_2B酶的活性。

葛根素对人肝微粒体中细胞色素P450酶活性的影响

目的:研究葛根素对人肝微粒体中细胞色素P450 1A2(CYP1A2)、CYP3A4、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1酶活性的影响。方法:分别以咖啡因、咪达唑仑、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、美托洛尔、美芬妥因为探针药,利用HPLC方法测定探针药与相应代谢产物的浓度,研究葛根素在人肝微粒体孵化体系中对CYP1A2、CYP3A4、CYP2C9、CYP2E1、CYP2D6、CYP2C19酶活性的影响。结果:在人肝微粒体反应体系中,0.1,0.2,0.4,0.8 mmol·L^(-1)葛根素使咖啡因的代谢产物的生成分别降低了(31±15)%(P<0.01),(43±8)%(P<0.05),(48±6)%(P<0.05),(49±4)%(P<0.05),0.05,0.1,0.2,0.4,0.8 mmol·L^(-1)葛根素使关托洛尔的代谢产物生成分别降低了(25±7)%(P<0.01),(33±4)%(P<0.05),(40±9)%(P<0.01),(46±5)%(P<0.01),(72±9)%(P<0.01);而对甲苯磺丁脲、美芬妥因、咪达唑仑和氯唑沙宗的代谢产物没有明显影响。结论:在人肝微粒体反应体系中,葛根素(0.1 mmol·L^(-1))对CYP1A2和CYP2D6酶活性有较明显的抑制作用;且随着葛根素浓度的增高,对这两种酶活性的抑制作用也随之增强,而对CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4和CYP2E1酶活性没有影响。