硫酸锰对肝细胞酶活性的影响

小鼠尾静脉注入10％硫酸锰0.2ml 24小时后,观察肝脏形态和超微酶活性变化,研究了Na^+-K^+-ATPase、AIPase、ACPase、G6Pase和CCOase的活性变化规律。

3种垫料物质对大鼠血液生化指标和肝细胞色素P_(450)酶系的影响

目的 观察松木、玉米秸、麦秸 3种垫料物质对大鼠血液生化指标和肝脏细胞色素P4 50 (CytP4 50 )酶系的影响。方法 将SD大鼠随机分为松木组、玉米秸组、麦秸组和对照组 ,于饲养 1、2、3、4周时测定血液中的丙氨酸转氨酶 (GPT)、白蛋白 (ALB)和总蛋白 (TP) ,测定肝脏细胞色素P4 50 酶 (CytP4 50 )、细胞色素b5酶 (Cytb5)和NADPH_细胞色素C还原酶。结果 3个实验组与对照组的GPT、ALB和TP值相比无统计学差异 (P >0 0 5 ) ,且均在正常范围之内。松木在 2～ 4周对CytP4 50 有显著诱导作用 (P <0 0 5 ) ,第 3周差异极显著 (P <0 0 1) ;在 1～ 4周对NADPH_细胞色素C还原酶有诱导作用 (P <0 0 5 ) ,其中 2～ 4周差异极显著 (P <0 0 1) ;在 2、3周对Cytb5有诱导作用 (P <0 0 5 )。麦秸在第 2、3周可以诱导CytP4 50 和Cytb5的活性增加 (P <0 0 5 ) ,在 3、4周可以诱导NADPH_细胞色素C还原酶的活性增加 (P <0 0 5 ) ;玉米秸在 2、3周时对CytP4 50 和NADPH_细胞色素C还原酶均有诱导作用 (P <0 0 5 ) ,而仅在第 3周表现对Cytb5的诱导 (P <0 0 5 )。将玉米秸组和麦秸组的酶诱导作用与松木组进行比较 ,2～ 4周 ,玉米秸组CytP4 50 的值低于松木组的值 (P <0 0 5 ) ;2、3周麦秸组CytP4 50

浙江不同产地浙贝配伍乌头对大鼠肝细胞色素P450重要同工酶含量的影响

研究浙江不同产地浙贝配伍乌头对大鼠肝细胞色素P450重要同工酶活性的影响。方法:应用HPLC-UV测定CYP450三种同工酶的特异性探针底物咖啡因(CYP1A2)、氨苯砜(CYP3A4)和氯唑沙宗(CYP2E1)的代谢速率,评价各实验组对大鼠肝细胞色素P450重要同工酶的诱导或抑制作用。结果:①与乌头组比较,磐安浙贝及缙云浙贝配伍乌头后,都显著性诱导了CYP1A2,但鄞州浙贝配伍乌头后对CYP1A2活性的诱导作用不明显。浙江不同产地浙贝单用组对CYP1A2的影响两两间比较无统计学差异;浙江不同产地浙贝配伍乌头组两两间比较发现,鄞州浙贝配伍乌头组的CYP1A2活性显著性弱于其它两个产地浙贝配伍乌头组。②与乌头组比较,浙江不同产地浙贝配伍乌头组都明显抑制了CYP3A4,并且两两间比较无统计学差异。鄞州浙贝单用组CYP3A4的活性较缙云浙贝单用组弱,有统计学差异。③与乌头组比较,浙江不同产地浙贝配伍乌头组对CYP2E1都具有明显诱导作用,但是两两间比较无统计学差异。三种产地浙贝单用组对CYP2E1活性的影响两两间无统计学差异。结论:浙江不同产地的浙贝配伍乌头对CYP1A2和CYP2E1的活性有明显的诱导作用,而对于CYP3A4有明显的抑制作用。

兔激素性股骨头坏死与肝细胞色素P4503A酶活性的相关性研究

目的:探讨兔激素性股骨头坏死与肝细胞色素P4503A酶活性的相关性。方法:将18只SPF级健康新西兰家兔随机分成3组,即空白对照组、诱导剂组、抑制剂组,每组6只。空白对照组以生理盐水灌胃,诱导剂组肌肉注射苯巴比妥注射液,抑制剂组以伊曲康唑混悬液灌胃。连续用药3周后,测定血清肝细胞色素P4503A酶活性,并采用肌注甲泼尼龙琥珀酸钠方法造模。继续用药3周后处死动物,制作并观察病理组织标本,计算股骨头坏死面积和坏死率。结果:①肝细胞色素P4503A酶活性。空白对照组用药前后肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异无统计学意义(t=1.859,P=0.122);诱导剂组用药后肝细胞色素P4503A酶活性升高(t=7.482,P=0.002);抑制剂组用药后肝细胞色素P4503A酶活性降低(t=5.060,P=0.004)。用药前3组肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异无统计学意义(F=1.428,P=0.259);用药后3组肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异有统计学意义(F=8.577,P=0.001);两两比较,诱导剂组高于空白对照组和抑制剂组(P=0.018,P=0.003),抑制剂组低于空白对照组(P=0.045)。②股骨头坏死面积。3组家兔股骨头坏死面积比较,差异有统计学意义(F=5.289,P=0.005)。组间两两比较,诱导剂组坏死面积小于空白对照组和抑制剂组(P=0.024,P=0.008),抑制剂组大于空白对照组(P=0.039)。③股骨头坏死率。3组家兔股骨头坏死率比较,差异有统计学意义(F=4.831,P=0.007)。组间两两比较,诱导剂组坏死率小于空白对照组和抑制剂组(P=0.045,P=0.015),抑制剂组大于空白对照组(P=0.031)。④肝细胞色素P4503A酶活性与股骨头坏死面积及坏死率的相关性。肝细胞色素P4503A酶活性与股骨头坏死面积和坏死率均呈负相关(r=-0.740,P=0.001;r=-0.753,P=0.001)。结论:肝细胞色素P4503A酶在兔激素性股骨头坏死中起重要作用,其活性与兔激素性股骨头坏死的发生呈显著负相关。

老年人脂蛋白脂酶及肝内皮细胞脂酶活性变化与HDL亚组分的关系

目的研究老年人脂蛋白脂酶(LPL)和肝内皮细胞脂酶(HEL)活性变化,探讨其与HDL亚组分水平的关系。方法测定40例老年人高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及其亚组分水平、肝素后LPL和HEL活性,45例非老年人作对照,并用直线相关分析LPL和HEL与HDL亚组分的关系。结果老年人高密度脂蛋白2胆固醇(HDL2-C)水平、LPL活性显著低于非老年人(均P<0.05),HEL活性明显高于非老年人(P<0.05);老年人LPL活性与HDL-C、HDL2-C水平呈正相关(r分别为0.390、0.479,P<0.05、P<0.01),HEL活性与HDL-C、HDL2-C水平呈负相关(r分别为-0.336、-0.453,P<0.05、P<0.01)。结论老年人LPL活性下降及HEL活性升高可能是动脉粥样硬化的危险因素之一。

肉雏鸡肝细胞谷胱甘肽过氧化物酶mRNA表达产物的RT-PCR检测

细胞谷胱甘肽过氧化物酶 (cGPX)是动物体内一种重要的抗氧化酶。建立了利用RT PCR并以 β 肌动蛋白 (β Actin)为内参照定量分析cGPXmRNA表达的方法。提取肉鸡肝总RNA ,经反转录和PCR扩增 ,PCR产物的电泳条带于VDS摄像系统扫描灰度。寻求PCR线性扩增范围 ,确定RT PCR的最佳循环次数和模板量。通过计算cGPXPCR产物与 β 肌动蛋白PCR产物的灰度之比 ,即可得出cGPXmRNA的相对含量。

大鼠肝内皮细胞脂酶特性的研究

碘代乙酰胺、乙酰咪唑、醋酐-醋酸钠和1,2-环已二酮的预处理对肝内皮细胞脂酶HEL)活性无显著影响,而N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和二异丙基氟磷酸(DFP)预处理分别抑制HEL活性75.2％和68.1％。Ca^(2+)能激活HEL,0.005mol/L Ca^(2+)的激活作用最大。但氯丙嗪可显著地抑制Ca^(2+)的激活作用。HEL在-20℃很稳定,但在室温及4℃都较不稳定。0.1％tritonX-100对HEL活性有显著保护作用。实验结果提示①HEL中组氨酸和丝氨酸残基可能参与HEL活性中心。②Ca^(2+)对HEL的激活作用可能通过钙调控蛋白(Calmodulin)

“cocktail”探针药物法评价五种肝细胞色素P450酶活性的应用

目的：研究肝缺血预适应（IPC）和肝缺血再灌（IR）损伤对大鼠肝细胞色素P450酶（CYP）亚型CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1、CYP2D6和CYP3A体内代谢活性的影响，建立评价肝脏药物代谢功能的指标，为新药筛选、肝药物代谢研究提供参考。方法：采用“cocktail”探针药物法，使用5种特异性探针药物：咖啡因、氯唑沙宗、甲苯磺丁脲、美托洛尔和咪达唑仑，通过其药代动力学参数的变化来评价肝缺血预适应和肝缺血再灌对大鼠CYP亚型CYP1A2、

高压氧对急性力竭性运动后血乳酸清除和肝酶谱恢复的影响

为了探讨HBO对力竭性运动后机体乳酸代谢和血清肝细胞酶的影响,让20名体育系男大学生在自行车功率计上运动至力竭,然后随机分成HBO组和对照组,他们分别在HBO和自然状态下恢复约120Min。在运动前、运动后和运动后2小时(恢复期)测定血清乳酸含量和LDB,ALAT、ALP、r-GT活力以及CG的含量。实验结果:力竭性运动后,HBO组和对照组血清LA的含量、LDH、ALAT、ALP、r-GT活力均显著升高,而血清CG含量却显著下降。恢复期,HBO组的LA含量显著低于运动后即刻(P<0.001)和运动前水平(F<0.01),并显著低于对照组(P<0.05)。恢复期与运动后比较,HBO组的血清LDH和r-GT活力均显著下降,而对照组虽有下降,但无显著性差异,虽然HBO组和对照组的ALAT活力均显著下降,但无显著性差异,虽然HBO组和对照组的ALAT活力均显著下降,但HBO组下降幅度比对照组大。实验结果提示:力竭性运动可引起机体肝细胞通透性的增加或损伤,HBO可以促进机体LA的清除和血清肝细胞酶的恢复,有利于运动疲劳的恢复。

肝细胞移植技术新进展

与传统的原位肝移植相比,肝细胞移植具有简单易行、应用灵活等优点,因而引起了临床上的广泛关注。现已证明,肝细胞移植对生物(病毒)、化学(肝毒性药物)、物理(外伤)等各种原因引起的急性肝功能衰竭起着代偿和支持作用;又可以纠正由于肝代谢酶缺陷引起的遗传性代谢疾病。微载体技术的应用和肝细胞体外转化的成功,使肝细胞作为基因治疗的受体细胞成为可能。随着介入放射学的发展,可运用经导管技术进行肝细胞移植术,对介入放射学而言,这是一极富吸引力和挑战性的新领域.

高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型的建立及其在药物肝毒性评价中的应用

目的建立一种灵敏、快速的高细胞色素P450(CYPs)酶活性的大鼠原代肝细胞模型,用于评价经CYPs酶代谢后产生肝毒性的药物。方法分别采用苯巴比妥和β-萘黄酮两种CYPs酶广谱诱导剂构建大鼠原代肝细胞模型;应用"cocktail"探针底物法考察两种诱导剂对CYPs酶的影响;以基于CYPs酶代谢导致肝毒性的药物他克林(TAC)、双氯芬酸钠(DIC)和对乙酰氨基酚(PAR)为模型药物,评价所构建的高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型与普通大鼠原代肝细胞间灵敏性的差异;应用所构建的高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型评价维拉帕米(VER)的肝毒性。结果与普通大鼠原代肝细胞相比,3种模型药物在高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞中,在较低剂量时可使细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、细胞中活性氧(ROS)水平升高,线粒体膜电位(MMP)水平下降,或相同剂量下得到更严重的损伤结果,CYPs酶抑制剂1-aminobenzotriazole(ABT)和metyrapone(MET)能抑制这3种损伤的发生;100μmol/L维拉帕米在普通大鼠原代肝细胞中并未引起LDH、ROS和MMP的改变,但在高CYPs活性大鼠原代肝细胞模型中,会引起细胞损伤,ABT和MET能抑制这种损伤。结论经诱导建立的两种高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型能更灵敏的评价基于CYPs酶代谢致毒药物的肝毒性;两种诱导剂诱导得到的高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型对经不同CYPs酶亚型代谢的药物评价结果有各自优势。应用高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型证实维拉帕米的致毒机制是经CYPs酶代谢产生肝毒性。

血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞蛋白激酶Cε、Cα表达的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞蛋白激酶Cε(PKCε)、Cα(PKCα)表达的影响。方法采用不同浓度的血管紧张素Ⅱ处理HSC-T6细胞株,四唑盐(MTT)法检测HSC-T6细胞增殖,分析羟脯氨酸含量变化,免疫荧光染色检测PKCe和PKCα的表达,RT-PCR分析PKCε和PKCαmRNA的水平。结果不同浓度血管紧张素Ⅱ促进HSC-T6细胞增殖(F=25.321,P<0.001),上调羟脯氨酸水平(F=13. 283,P <0. 001),并呈现明显的剂量效应;伴随血管紧张素Ⅱ浓度的增加,PKCε表达明显增加(F=21.387,P<0.01),并发生转位于细胞膜;PKCα表达明显增加,尤以转位膜、胞浆比较明显(F=19.431,P <0. 01),并呈现明显的剂量效应;同时PKCε和PKCαmRNA水平增加(F=13. 279、15. 174,P<0.05)。结论血管紧张素Ⅱ能够剂量依赖性地上调肝星状细胞胶原表达,提高蛋白激酶Cε、Cα表达水平,促进肝星状细胞的增殖。

老人服中药应少量多次

老人服药和年轻人应有所区别随着年龄增长,人体的器官功能逐渐衰退,与药物吸收和代谢有关的胃肠、肝、肾都是如此。老年人胃酸分泌量逐渐减少,胃肠道黏膜细胞也萎缩减少,这些都会影响某些药物的溶解、解离和吸收。此外,老年人肝脏体积和血流量减少,人到65岁,肝血流量仅是20岁的40%~50%,肝细胞酶活性下降,导致肝脏的代谢能力下降。老年人肾血流量减少,肾小球滤过率、肾小管重吸收能力减退,导致部分代谢产生的毒素无法排出体外而产生蓄积。

HELLP综合征并发脑出血一例报道

HELLP综合征（HELLP syndrome）即重度妊高征并发溶血（hemolysis）、肝细胞酶升高（elevated liver enzymes）和血小板减少（low platelet count）。HELLP综合征的发病率占所有妊娠的0.20%-0.85%,HELLP综合征合并脑出血临床较少见,约占所有HELLP综合征的1.5%,但其致死率竟高达50%。

UPLC-MS/MS结合多探针底物方法研究刺五加叶中黄酮苷类成分对CYP450活性的影响%

利用超高效液相色谱-串联质谱联用(UPLC-MS/MS)的多反应监测(MRM)技术结合多探针底物方法,研究了刺五加叶中的主要黄酮苷类化合物槲皮苷、金丝桃苷及芦丁对肝细胞色素P450酶(CYP450)亚型CYP1A2,CYP2C,CYP2E1,CYP2D和CYP3A活性的影响.结果表明,3种化合物对各CYP亚型酶均有抑制作用,其中金丝桃苷和槲皮苷对CYP1A2催化的非那西丁的O-脱乙基反应抑制的IC50值分别为46.53和49.75μmol/L,金丝桃苷和芦丁对CYP2E1催化的氯唑沙宗的6-羟基化反应抑制的IC50值分别为99.87和86.36μmol/L.机理性抑制实验结果表明,3种化合物对2种亚型酶的抑制作用是随着预孵时间延长而增强的机理性抑制.

糖尿病和非糖尿病人群的CYP2C9基因多态性分析

目的:探索糖尿病患者和非糖尿病人群肝药酶细胞色素P450(CYP2C9)基因多态性。方法:对入选的研究对象使用CYP2C9基因分型实时荧光PCR试剂盒进行CYP2C9基因多态性检测。结果:本研究糖尿病患者380例,CYP2C9﹡1/﹡3基因型频率为4.21%;非糖尿病人群208例,CYP2C9﹡1/﹡3基因型频率为5.77%。糖尿病患者与非糖尿病人群比较,CYP2C9基因多态性分布差异无统计学意义。结论:糖尿病患者与非糖尿病人群均存在CYP2C9基因多态性,检测患者CYP2C9基因分型可提供用药参考。