肝脏常见肿瘤的免疫病理学诊断新进展

至2008年底，国内外文献中报告发生于肝脏和肝内胆管系统的各类原发性肿瘤和瘤样病变已超过90种．大多数间叶性肿瘤都可在肝脏发生。

胰腺癌并肝转移的临床病理学特点分析

对345例胰腺癌患者中68例经手术、病理及影像诊断学证明为肝转移的胰腺癌患者,进行临床病理学资料分析。40岁以下者肝转移率13.80%。同期>40岁者肝转移率21.10%,两组差异有统计学意义,P=0.037。全胰腺癌,肝转移率22.60%,与胰头、颈部、体及胰尾比较差异有统计学意义,P=0.005。高中分化癌与低分化癌两组肝转移率分别为8.65%和55.96%,两组差异有统计学意义,P=0.05。有、无肝转移的血管受侵率分别为44.10%和30.30%,两组差异有统计学意义,P=0.003。有淋巴结转移的胰腺癌组肝转移率为23.50%,无淋巴结转移的胰腺癌组肝转移率为18.10%,两组差异有统计学意义,P=0.033。胰腺癌局限在胰内者,肝转移率10.59%,胰腺癌侵及胰腺周围者,肝转移率32.00%,两组比较差异有统计学意义,P=0.005。初步研究结果提示,胰腺癌肝转移与胰周血管受侵、淋巴结转移及病理分化程度密切相关。

肝细胞肝癌组织表达IL-8对肿瘤侵袭、转移的影响

目的探讨评估肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的表达及其对HCC侵袭、转移的影响。方法随机选取100例经部分肝切除术治疗的HCC患者石蜡组织切片标本,同时收集患者的临床病理资料。利用免疫组织化学方法分别检测IL-8、VEGF、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、分化抗原群68(cluster of differentiation 68,CD68)、CD163、CD31等炎性反应指标,Ecadherin、β-catenin等上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)指标的表达。分析IL-8与临床病理指标的相关性。结果在HCC标本中,IL-8高表达(IL-8high)标本占50.0%(50/100),其炎性反应指标的阳性率高于IL-8低表达(IL-8low)标本:VEGF(52.5%vs 32.5%,P=0.026),MMP-9(50.3%vs 22.5%,P=0.030)。IL-8high标本中M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)及微血管密度高于IL-8low标本(53.62±9.24 vs32.72±10.34,P<0.001;34.00±16.57 vs 26.94±14.38,P<0.001)。IL-8high标本中E-cadherin表达减少(5.0%vs15.0%,P=0.041),β-catenin在细胞质内积聚(17.5%vs 5.0%,P=0.047)。IL-8表达与肿瘤包膜、门静脉癌栓浸润相关(P=0.031,P=0.027)。结论在HCC组织内IL-8呈高表达,与炎性相关分子和EMT分子的表达高度相关,并与HCC侵袭、转移有关。

幽门螺杆菌感染与肝癌分期、细胞分化和病理组织类型的相关性分析

目的探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与原发性肝癌分期、细胞分化和病理组织类型等的关系。方法回顾性分析初诊确诊为原发性肝癌的100例患者Hp感染和临床病理特征之间的关系。分析Hp感染14C-尿素呼吸试验(urea breath test,UBT)检测值和乙肝病毒DNA拷贝量及甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)含量间的相关性。结果原发性肝癌患者Hp阳性率在病理组织类型、分化程度、侵袭性和临床分期方面比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。Hp感染与乙肝病毒感染、AFP含量均呈正相关(r=0.152,P=0.026;r=0.806,P=0.018)。结论 Hp感染与原发性肝癌临床分期、细胞分化和病理组织类型有关。

肝癌长期生存患者临床病理特点及P53、c-myc表达研究

目的:探讨肝癌术后长期生存患者临床病理及P53、c-myc癌基因表达的特点和意义。方法:以启东肝癌高发区34例肝癌术后生存10年以上的病例(A组)作为研究对象,42例肝癌术后5年内死亡的病例(B组)为对照,进行临床病理特点观察,并用免疫组化方法检测肝癌及癌旁P53和c-myc表达。结果:肝癌组织中P53、c-myc表达阳性率分别为56.58%(43/76)和60.53%(46/76),A组中分别为47.06%(16/34)和50.00%(17/34),B组中分别为64.29%(27/42)和69.05%(29/42),两组相比无显著差异。癌旁组织中P53、c-myc表达阳性率分别为42.11%(32/76)和57.89%(44/76),A组中分别为26.47%(9/34)和41.18%(14/34),与B组中54.76%(23/42)、71.43%(30/42)相比差异有统计学意义。A组85.29%(29/34)的病人有完整包膜,显著多于B组的21.43%(9/42);5.88%(2/34)有门脉栓塞,38.24%(13/34)伴有肝硬化,显著低于B组(69.05%,78.57%)。结论:癌周组织中P53、c-myc表达与术后生存呈负相关;肝癌包膜完整、无门脉栓塞、无肝硬化的单结节病人,预后好,术后生存期明显延长。

肿瘤根治术后行肝动脉化疗栓塞术联合药物化疗的原发性肝癌患者远期生存分析

目的：分析原发性肝癌（ HCC）患者根治切除术后联合应用肝动脉化疗栓塞术（ TACE）和药物化疗的生存情况。方法：选取在宁波市第二医院随访5年以上的HCC术后患者143例，按术后治疗方法不同分为介入组（术后予以TACE ）、化疗组（术后予以FOLPOX4化疗方案）及综合组（术后予以TACE＋FOLPOX4化疗方案）。采用多因素Cox回归模型分析HCC患者术后预后的影响因素（包括性别、年龄、肝炎病史、肿瘤直径、术后肝功能、术后甲胎蛋白水平、术后Karnofsky performance status评分及术后治疗方案），并绘制各组生存曲线，计算1、2、3年累积生存率，采用Kaplan-Meier方法进行比较。结果：术后甲胎蛋白水平与患者生存时间呈负相关，为独立危险因素，回归系数为0.01，相对危险度为1.00；术后进一步治疗能提高HCC术后患者的生存时间，为保护因素，其中采取综合方案的回归系数为－2.37，相对危险度为0.07，影响生存时间的权重比高于另外两组，而介入组的权重比高于化疗组。术后1、2、3年累计生存率综合组分别为78.35％、69.16％、24.43％，介入组分别为76.87％、62.48％、24.72％，化疗组分别为62.23％、43.22％、19.54％。结论：术后甲胎蛋白水平与HCC患者术后生存质量存在负相关，术后甲胎蛋白水平监测可为手术效果及预后判断提供参考。TACE运用于HCC术后能有效降低患者病死率，联合药物化疗能有效延长HCC患者术后生存时间。

肿瘤相关巨噬细胞M2型在肝癌发生和发展中的作用

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)M2型是肿瘤微环境中的重要组成成分,在免疫抑制、细胞增殖、血管生成、上皮细胞间质转化等过程中发挥重要作用。本文从TAMs的募集分化、TAMs-M2的功能和相关信号通路的调节、免疫抑制、促进血管生成及上皮细胞间质转化等方面对TAMs-M2在肝癌的发生、发展过程中的作用进行综述,为肝癌的靶向治疗提供新思路。

HepA-H和HepA-L肝癌荷瘤小鼠CD8^+/CD28^+T细胞和肿瘤新生淋巴管的研究

目的研究不同淋巴转移潜能肝癌(H epA-H和H epA-L)荷瘤小鼠体内CD 8+/CD 28+T淋巴细胞和肿瘤新生淋巴管,探讨与肿瘤淋巴转移的关系。方法用两种来源相同,而淋巴转移能力不同的小鼠肝癌细胞亚系,H epA-H(高淋巴转移)和H epA-L(低淋巴转移),小鼠皮下接种,制备荷瘤动物模型。采用抗小鼠CD 8、CD 28荧光标记单克隆抗体,流式细胞术定量检测小鼠外周血和肿瘤组织内CD 8+/CD 28+T淋巴细胞数量;应用5’-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重组化染色法,观察肿瘤新生淋巴管。结果肿瘤皮下接种后14天,H epA-H组荷瘤小鼠外周血CD 8+/CD 28+T淋巴细胞数量明显低于正常对照组(P<0.05);H epA-H组肿瘤组织内CD 8+/CD 28+T淋巴细胞数量显著低于H epA-L组(P<0.05)。两种肿瘤细胞亚系均可诱导肿瘤新生淋巴管,但H epA-H肿瘤内和瘤周最高淋巴管密度均明显高于H epA-L组(P<0.01)。结论肿瘤淋巴转移能力的差异与体内CD 8+/CD 28+T淋巴细胞数量及肿瘤新生淋巴管有关。

抑癌基因p27与肝癌临床病理及预后的关系

目的:探讨抑癌基因p27在原发性肝癌组织中的表达与临床病理及预后的关系。方法:运用免疫组化方法检测43例行根治性肝癌切除术患者病理组织切片中p27阳染指数(p27LI),分析其与患者临床病理及术后生存率的关系。结果:p27在肝脏细胞及癌细胞皆可表达,为胞核染色。其在肝癌细胞中的表达水平p27LI与肿瘤恶性程度及TNM分期呈负相关。单因素分析显示,高p27LI组患者术后中位生存期为28个月,低p27LI组为19个月,两者差异有统计学意义,χ2=5.8000,P=0.0112。多因素分析显示,p27为保护性独立预后因素,其回归系数(β)=-1.8011,危险度(Exp)=0.7734,P=0.0050。结论:p27作为抑癌基因,能调控肿瘤细胞的生长及凋亡,对行根治性肝癌切除术的患者具有独立预后价值。

小肝癌患者微血管侵犯与肝移植后肿瘤复发及预后相关性研究

目的：分析影像学上符合Milan标准的肝癌肝移植患者术后复发相关的危险因素，评估Milan标准和微血管侵犯对肝移植术后肿瘤复发的预测价值。方法：回顾性分析浙江大学医学院附属第一医院2007—2013年期间115例影像学符合Milan标准并行肝移植治疗的肝癌患者，通过单因素及多因素Cox回归分析和生存分析探究影响肝移植术后肿瘤复发的危险因素，并分析其预测价值。结果：入组的98（98／115）例患者中，术后1、3、5年总体生存率及无瘤生存率分别为91.8％、80.6％、79.6％和87.8％、74.5％、73.5％。微血管侵犯、大血管侵犯、超出Milan标准和移植前降期治疗与小肝癌肝移植术后复发显著相关（ P＜0.05）；多因素分析提示微血管侵犯和超出Milan标准是预测肝癌肝移植术后复发的独立危险因素。肝癌不伴和伴有微血管侵犯的术后1、3、5年无瘤生存率分别为92.8％、85.5％、85.5％和75.9％、55.2％、48.3％（ P＜0.01）；而术后病理检查证实符合及超出Milan 标准肝癌患者术后1、3、5年无瘤生存率分别为91.7％、83.3％、79.8％和64.3％、42.9％、42.9％（ P＜0.01）。结论：微血管侵犯多提示肝癌肝移植受者术后肿瘤的高复发转移倾向，对指导术后早期积极的辅助治疗、密切随访及补救性治疗等都具有一定的临床意义。

肝癌胃癌组织中端粒酶活性的检测及其与癌组织病理类型关系的研究

目的:研究肝癌、胃癌组织端粒酶的表达活性及与肝癌、胃癌病理类型之间的关系。方法:收集经手术及病理证实的肝癌、胃癌标本,并将肝癌分为4种病理类型:块状型、结节型、小癌型和弥散型;将胃癌分为5种病理类型:乳头状腺癌,管状腺癌,低分化腺癌,印戒细胞癌和未分化癌,以非癌肝胃组织作对照研究。用PCR-ELISA法检测端粒酶活性。结果:各种病理类型肝癌组织端粒酶活性总阳性率为89.4%(42/47),明显高于非癌肝组织,而不同类型肝癌组织的端粒酶阳性率之间无显著性差异。各种病理类型胃癌组织端粒酶活性总阳性率为85.0%(51/60),明显高于非癌胃组织,而不同类型胃癌组织的端粒酶阳性率之间无显著性差异。结论:肝癌和胃癌组织端粒酶活性显著升高,其阳性率与肝癌和胃癌的病理组织学类型无显著相关;端粒酶可作为肝癌和胃癌辅助诊断的一种分子标记物,可用于肝癌和胃癌与其他非癌性病变的鉴别诊断,但不能用于肝癌和胃癌病理类型之区别。

原发性肝细胞癌组织FHIT和AFP表达与临床病理及预后相关性的研究

目的:探讨癌组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)、甲种胎儿球蛋白(AFP)表达与原发性肝细胞癌(HCC)临床病理因素及其预后的关系。方法:对108例HCC和76例癌旁组织FHIT表达进行免疫组化检测。结果:AFP高、中和低表达的肿瘤组织中FHIT阳性率分别为100%(36/36)、67.0%(20/30)和45.2%(19/42);肿瘤组织中FHIT的表达与AFP表达有显著正相关,P<0.01。术后生存1年的32例,FHIT阳性表达16例(16/32);108例肿瘤组织中FHIT低表达33例、中表达20例和高表达55例,对应预后平均生存时间为13.7879±7.4320、30±19.8202和40.60±21.3729,三组样本均数两两比较,差异有统计学意义,P<0.05,肿瘤组织中FHIT的表达与预后生存时间呈正相关,P<0.05。108例肿瘤组织中AFP低表达42例、中表达30例和高表达36例,对应预后平均生存时间为17.3095±14.7259、36.0333±20.3376和41.1111±21.0886,肿瘤组织AFP的表达与预后生存时间有关。结论:癌组织中FHIT与AFP可作为判断肝细胞癌恶性程度及预后的指标。联合检测癌组织中FHIT、AFP,并结合肝硬化程度和病理分级可为HCC的早期诊断、进一步治疗及判断预后提供必要的理论依据。

安罗替尼对人肝癌细胞裸鼠移植肿瘤生长及生物钟基因表达的影响

【目的】探讨安罗替尼对人肝癌细胞裸鼠移植后肿瘤生长情况及相应生物钟基因表达的影响。【方法】选取实验无胸腺裸鼠共36只,取人肝癌HepG2细胞,移植于小鼠左侧腋皮下,建立裸鼠皮下肝癌移植瘤模型。接种完成1周后,随机分为安罗替尼处理组和对照组,每组18只。安罗替尼组给予安罗替尼50 mg/(kg·d)灌胃,空白对照组给予二甲基亚砜(DMSO)1OO μL/20(g·d)灌胃,每日1次,连续2周。在灌胃开始前和灌胃结束后24 h测量肿瘤体积情况。待2周后处死小鼠并剥离肿瘤,采用实时PCR(Real-Time PCR)法检测生物钟基因Per(Per1、Per2、Per3)、CLOCK、Cry(Cry1、Cry2)、Bmall、Dec2和Timeless mRNA表达水平,同时运用western blot评估上述基因及蛋白质表达情况。【结果】与对照组相比,安罗替尼组裸鼠移植瘤较对照组生长缓慢,体积趋向于缩小。RT-PCR提示肝癌细胞中生物钟基因在安罗替尼作用下,Per1、Per2的mRNA表达量明显增加(P<0.05),同时下游蛋白质表达量增加,而Dec2的mRNA表达量及下游蛋白质表达则明显受抑制(P<0.05);Cry1的mRNA表达量不变,但相应的下游蛋白质表达受抑制。【结论】安罗替尼能显著调节肝癌细胞中多种生物钟基因表达,调控其相应表达产物生成,可抑制肝癌移植瘤的生长,其作用机制之一可能与调控生物钟基因表达密切相关。

HDGF、VEGF表达与肝癌患者病灶浸润转移风险的相关性

【目的】探讨肝癌衍生生长因子(HDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)表达与肝癌患者病灶浸润转移风险的相关性。【方法】回顾性分析2019年7月至2022年7月西安市第三医院西北大学附属医院收治的82例接受手术切除治疗的肝癌患者的临床资料,收集患者的肝癌组织标本和癌旁组织。采用免疫组化染色法检测肝癌组织及癌旁组织内HDGF、VEGF表达情况,比较不同临床病理特征肝癌患者HDGF、VEGF表达水平,采用多因素logistic回归分析影响肝癌组织HDGF、VEGF表达的危险因素。【结果】肝癌组织中HDGF、VEGF阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同AJCC分期、包膜完整性和肿瘤转移的肝癌组织HDGF、VEGF表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归模型分析显示,AJCC分期、包膜完整性和肿瘤转移是肝癌组织HDGF、VEGF表达的影响因素(P<0.05)。【结论】肝癌组织中HDGF、VEGF呈高表达,且与AJCC分期、包膜完整性和肿瘤转移相关,对评估肝癌进展有一定的参考价值。

长链非编码RNA MEG3在原发性肝癌中的表达及其意义

【目的】探讨长链非编码RNA(LncRNA)MEG3在原发性肝癌(HCC)中的表达及其临床意义。【方法】本院收治的78例HCC患者均接受手术治疗,术中收集患者肝癌组织及癌旁正常组织;招募同期就诊于本科的肝血管瘤患者78例,收集术中标本。采用RT-PCR检测三种样本中LncRNA MEG3的表达水平并比较,评价LncRNA MEG3诊断HCC的价值,探讨LncRNA MEG3与HCC临床病理特征的相关性。【结果】LncRNA MEG3在肝癌组织中的表达为0.43±0.16,显著低于癌旁正常组织(1.18±0.35)及肝血管瘤组织(1.21±0.27)(均P<0.05);LncRNA MEG3诊断HCC的曲线下面积(AUC)(95%CI)为0.85(0.80~0.91),最佳诊断界值为0.91,敏感度89%,特异度76%;LncRNA MEG3与甲胎蛋白呈线性正相关(r=0.63,P=0.03);低表达LncRNA MEG3与HCC临床分期、分化程度以及远处转移有相关性(χ^(2)分别为3.93、6.59及4.43,均P<0.05)。【结论】LncRNA MEG3在HCC中呈低表达,低表达LncRNA MEG3与HCC病理特征有相关性,是潜在的HCC诊断指标及治疗靶点。

组织内DC-SIGN、TACC3及BMP4与原发性肝癌患者预后的相关性

[目的]探讨影响原发性肝癌(PLC)患者预后的因素.[方法]根据90例PLC患者三年预后情况分为死亡组(40例)和存活组(50例).收集并比较两组患者的基础资料和实验室指标[树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素(DC-SIGN)光密度值、骨形态发生蛋白4(BMP4)阳性率、转录相关酸性卷曲蛋白3(TACC3)水平];以受试者工作特征(ROC)曲线分析DC-SIGN光密度值、TACC3水平、BMP4阳性率预测PLC患者预后不良的价值;采用非条件Logistic逐步回归分析PLC患者预后不良的危险因素.[结果]死亡组肿瘤分布双叶、有饮酒史、有淋巴结侵犯或远处转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的例数显著多于存活组(P<0.05),其DC-SIGN光密度值、TACC3水平、BMP4阳性率均显著高于存活组(P<0.05);ROC分析显示:患者DC-SIGN光密度值≥10.925×10^(-3)/μm^(2)、T ACC3水平≥331.494 ng/g、BMP4阳性率≥79.883%是预测PLC患者预后不良的最佳截断值(均P<0.05);Logistic逐步回归分析显示:肿瘤分布双叶、有饮酒史、有淋巴结侵犯或远处转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、DC-SIGN光密度值≥10.925×10^(-3)/μm^(2)、TACC3水平≥331.494 ng/g、BMP4阳性率≥79.883%是PLC患者预后不良的危险因素(P<0.05).[结论]肿瘤分布、饮酒史、淋巴结侵犯或远处转移、TNM分期、DC-SIGN光密度值、TACC3水平、BMP4阳性率与PLC患者预后情况有密切相关.

肝癌切除病人门静脉癌栓的分布状况

目的初步探讨分析肝癌切除病人门静脉癌栓的分布状况。方法对本组917例肝癌手术其门静脉癌栓的诊断,门静脉癌栓与原发肿瘤部位及肝癌病理的关系进行系统分析。结果本组资料中合并大体癌栓者139例(15.2%),仅病理镜下发现癌栓者540例(58.9%),无癌栓病人238例(25.9%)。合并大体癌栓139例中经术前各种影像学检查发现癌栓者92例(66.2%),至术中发现者32例(23.0%),至术后病理方发现者15例(10.8%)。肝癌位于左半肝者,大体癌栓的合并率为15.9%,位于右半肝者为13.8%,全肝多发肿瘤者为17.5%。各部位肿瘤合并大体癌栓侵犯同侧门静脉分支者占83.5%,大体癌栓同时侵犯左、右门静脉分支者占12.9%,侵犯病肝对侧门静脉分支者占3.6%。发生于右半肝的肝癌其大体癌栓侵犯门静脉主干者为26.7%,发生于左半肝者为8.6%,左、右半肝多发性肿瘤者为33.3%。肿瘤直径>5cm者大体PVTT合并率显著增高(P=0.003);包膜不完整者大体PVTT的合并率显著升高(P=0.000);组织分化低于III级的肝癌,其大体PVTT的合并率显著增高(P=0.009)。结论PVTT在肝癌中合并率高,肿瘤原发位置与大体PVTT侵犯的部位有显著相关性,右半肝和多发于全肝的肿瘤比左半肝肿瘤更易侵犯门静脉主干形成癌栓;大体PVTT的发生与肿瘤大小、包膜完整与否、组织分化程度有显著相关性,

人肝癌组织糖调节蛋白94的表达及其意义

目的 :探讨人肝癌组织糖调节蛋白 94(glu cose regulatedprotein 94,GRP94)的表达及意义。方法 :采用SABC法检测人肝癌组织GRP94的表达 ,镜下观察GRP94在癌组织中的表达特点。结果 :免疫组化显示 ,40例肝癌组织中 3 8例 ( 95 0 % )存在GRP94的表达 ,不同癌组织存在胞质、胞膜和胞核表达强度及部位的差异 ;癌旁组织亦存在较弱的表达。结论 :人肝癌组织存在GRP94的表达异质性 ,呈现了胞质、胞膜和胞核的表达差异 ,GRP94在人肝癌组织的表达特点为以后肿瘤抗原肽瘤苗的提取和实验研究作了铺垫。

原发性肝癌血行转移相关基因的研究

肝细胞癌是常见的恶性肿瘤 ,早期易发生血行播散 ,而血循环中的肿瘤细胞被认为是血行或远处器官转移的指标。目前已提出AFPmRNA和白蛋白mRNA作为循环中存在肝肿瘤细胞的标志物。综述国内、外有关研究 ,探讨其在预测肝细胞癌发生血行转移中的价值以及与其他转移。